本发明属于酶工程技术领域,涉及一种青霉素G酰化酶突变体及其应用。所述的青霉素G酰化酶突变体在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中突变多个氨基酸位点。利用本发明的青霉素G酰化酶突变体,催化水解7-苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸(G-7-ADCA)制备7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA),与突变之前的酶相比,具有更高比活力,更高的转化效率,更低的底物残留和更好的有机溶剂耐受性,更适用于工业规模化生产应用。

本发明涉及药物合成及酶工程技术领域,尤其是一种重组枯草芽孢杆菌及制备的转氨酶和应用,其中,将如SEQ ID NO：1所示的生物酶基因连接到pHT43质粒的BamHI和ZraI位点,然后转化到Bacillus subtilisATCC6633中进行表达,即得重组枯草芽孢杆菌。采用该重组枯草芽孢杆菌制得的转氨酶用于合成西他列汀,由化合物II作为起始原料,在缓冲液、助溶剂、辅酶PLP、氨基供体的存在下,经转氨酶催化转化为西他列汀,其反应路线为,

本发明公开一种提高海蟹共生烟曲霉发酵生产CHA产量的方法,通过在发酵过程中外援添加金属离子,尤其是钙离子。本发明的方法操作简单,培养基成分简单,成本低廉,不需特殊设备,使用该金属离子添加工艺优化发酵海蟹共生曲霉的发酵过程来审查抗癌活性生物碱CHA,产量显著提高。

本发明公开了一种尼日利亚菌素衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用,属于天然产物领域。本发明从海洋链霉菌Streptomyces sp.HNM0561中分离到的式(I)的尼日利亚菌素29位甲基化衍生物29-O-methylnigericin,可用于制备抗前列腺肿瘤药物,本发明为开发新的抗前列腺肿瘤药物提供了良好的化合物,对开发中国海洋微生物药物资源具有重要的意义。

本申请公开了一种西他列汀中间体的制备方法,以及经由该制备方法制得的西他列汀中间体,所述制备方法包括：在一个标准大气压下沸点不高于110℃的有机溶剂存在的前提下,将转氨酶与底物西他列汀前体酮(2Z)-4-氧代-4-[3-(三氟甲基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-(8H)-基]-1-(2,4,5-三氟苯基)丁-2-酮转氨接触而发生酶催化反应,从而制得西他列汀中间体(3R)-3-氨基-1-[3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-7-基]-4-(2,4,5-三氟苯基)丁-1-酮,其中,通过将低沸点有机溶剂与底物相混合获得的混合液以流加补料的方式加入至包含所述转氨酶的预混体系中,以及在预混体系中添加特定比例的酮还原酶和辅酶再生系统,提高底物转化率,底物转化率可达99％。

本发明涉及生物制药技术领域,尤其是一种双菌生物催化剂及在合成西他列汀中的应用,该双菌生物催化剂由枯草芽孢杆菌全细胞催化剂和巨大芽孢杆菌全细胞催化剂组成,二者的质量比为1:0.1～1,所述枯草芽孢杆菌全细胞催化剂由含有如SEQ ID NO：1所示外源基因的重组枯草芽孢杆菌的工程菌制得。用于合成西他列汀时,由化合物II作为起始原料,在缓冲液、助溶剂、辅酶PLP、氨基供体的存在下,经双菌生物催化剂催化转化为西他列汀,其反应路线为,

本发明公开了聚酮类化合物及其制备方法和应用。本发明所述的聚酮类化合物是从变灰青霉真菌Penicillium canescens CGMCC 3.7958的发酵培养物中分离制备得到。经试验证明,化合物对肝癌细胞(SMMC-7721)、人早幼粒白血病细胞(HL-60)和人结肠癌细胞(SW480)具有较强的抑制活性,可以用于制备抗肝癌、抗急性早幼粒白血病或抗结肠癌药物。

曲酸及其曲酸衍生物、制备方法及其应用。本发明提出了一种曲酸衍生物曲酮A,化合物的结构式为抗炎活性测试中,曲酮A和前体化合物曲酸抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7的半数抑制浓度分别为15.5±1.2μM和40.8±3.1μM,曲酮A和曲酸可以抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS的表达,曲酸可以治疗葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎,效果与阳性药美沙拉嗪相当,曲酮A和曲酸可以在制备抗炎药物前体中应用,为下一步抗炎药物的化妆品和医药研究应用奠定了物质基础。

本发明公开了一株产血红素的基因工程菌及其构建方法和应用,属于分子生物学以及微生物发酵技术领域。本发明通过构建多顺反子表达载体,表达血红素途径基因gltX、hemA、hemL、hemB、hemC、hemD、hemE、hemF、hemG和hemH基因,并利用CRISPR-Cas9技术对主要副产物合成途径的关键基因进行敲除,提高了解淀粉芽孢杆菌血红素的合成能力,使该菌株利用低廉生物质资源—菊芋粗提液作为发酵原料生产血红素,大幅降低生产成本。

本发明提供了一种产石杉碱乙的克吕沃尔氏菌属QNX-S26菌株,该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心,地址：中国,武汉,武汉大学；邮编430072,保藏日期为2021年6月7日,保藏编号为：CCTCC NO:M2021692；该菌株的16S rDNA序列如SEQ IDNO.1所示。上述克吕沃尔氏菌属QNX-S26菌株能够用于发酵制备石杉碱乙,本发明提供的菌株可以在短期内进行大规模发酵培养,且发酵成本较低,又不受时域、季节等条件限制,因此能够通过微生物发酵的途径解决石杉碱乙成本较高、市场需求缺口大的现状。