本发明公开了一种两性离子聚合物基一氧化氮(NO)驱动纳米马达的制备方法和应用,该纳米马达主要以L-精氨酸两性离子衍生物为单体,以具有活性氧(ROS)响应型的二硒化合物为交联剂,通过引发剂引发自由基聚合反应形成。本发明的纳米马达可响应ROS浓度梯度而产生趋化行为,并在肿瘤细胞环境下与其中的ROS反应产生NO驱动其运动并逐渐降解。本发明的两性离子聚合物基NO驱动纳米马达制备方法简单高效,具有优异的生物相容性、在ROS微环境具有主动运动能力,在生物医药领域具有广阔的应用前景。