本发明提供了一种裂解酶在制备低聚原花青素中的应用以及蒸汽爆破联合裂解酶制备低聚原花青素的方法,涉及生物转化技术领域。所述裂解酶的氨基酸序列为SEQIDNO.1～5中的一种。蒸汽爆破联合裂解酶制备低聚原花青素的方法,包括以下步骤：葡萄籽用水浸泡后进行爆破处理,得到爆破样品；对所得爆破样品进行脱脂,得脱脂样品；将所得脱脂样品和提取液混合进行提取,得到高聚原花青素粗提物；将所得高聚原花青素粗提物和裂解酶混合,无氧条件下反应,得低聚原花青素。本申请所述制备低聚原花青素的方法具有高聚原花青素降解工艺简单、反应条件温和、环境污染小以及低聚原花青素得率高等优点。

本发明涉及一种可以在毕赤酵母高效分泌的单加氧酶突变体及应用,该单加氧酶突变体是将如SEQ ID No.1所示氨基酸序列自N端第1位至X位氨基酸残基替换为SEQ ID No.2所示氨基酸序列第1位至X位氨基酸残基所形成的蛋白质,其中X为125-135的整数；并在所形成如SEQ ID No.3的氨基酸序列的基础上,对一个或多个氨基酸残基发生突变得到多个性能更佳的单加氧酶突变体。本发明的单加氧酶突变体能在毕赤酵母中高效分泌表达,可直接使用发酵上清液作为酶促反应的催化剂,与大肠杆菌胞内重组表达的单加氧酶相比,本发明的单加氧酶获取简单,蛋白纯度高,避免了常规制备胞内酶的细胞破碎过程,并简化了下游分离提取过程,具有良好的工业应用前景。

本发明公开了一种通过过表达基因psrA提高粘质沙雷氏菌合成灵菌红素的方法,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在粘质沙雷氏菌中过表达LysR家族转录调控因子PsrA编码基因BVG90-12635(psrA),显著提高了粘质沙雷氏菌合成灵菌红素能力；将利用本发明的方法制备得到的重组粘质沙雷氏菌在发酵培养基中发酵72h产灵菌红素发现,重组菌株发酵产灵菌红素能力较野生型菌株JNB5-1相比,提高了33.58％。

本发明公开了一种通过过表达基因psrB提高粘质沙雷氏菌合成灵菌红素的方法,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在粘质沙雷氏菌中过表达DeoR家族转录调控因子PsrB(BVG90-04085)编码基因BVG90-04085(psrB),显著提高了粘质沙雷氏菌合成灵菌红素能力；将利用本发明的方法制备得到的重组粘质沙雷氏菌在发酵培养基中发酵72h产灵菌红素发现,重组菌株JNB5-1-PsrB发酵产灵菌红素能力较野生型菌株JNB5-1相比,提高了28.33％,产量达6.84g/L。

本发明涉及医药微生物化学技术领域,具体公开了从一株雪峰虫草(Ophiocordyceps xuefengensis)菌株的液体发酵产物中分离获得的呋喃环类衍生物及其在制备免疫抑制药物中的用途,更具体的描述是在制备对T细胞增殖有显著抑制活性的药物中的应用。本发明的呋喃环类衍生物的免疫抑制作用比临床广泛使用的免疫抑制剂环孢菌素A效果更佳,是一种高效的免疫抑制剂,可用于制备针对器官移植和自身免疫性疾病的免疫抑制药物。

本发明公开了一种制备手性四氢β-咔啉的酶及其制备方法和应用,涉及酶工程技术领域,该酶的蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；编码其蛋白的DNA分子核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；该酶的制备方法,包括以下步骤：构建DNA片段StnP2的宿主细胞,酶的表达纯化,蛋白的生化分析；该酶作为手性催化剂应用于拆分具有不同构型的四氢β-咔啉。本发明提供了一种高活性和高立体选择性的酶,使其应用于C-1位具有不同构型的四氢β-咔啉拆分,用于合成手性四氢-β-咔啉,本发明提供了制备手性四氢β-咔啉的酶,合成手性四氢β-咔啉产率高,催化条件温和,专一性强,使用广泛。

本发明公开了一种启动子及重组载体和用途。具有启动子功能的基因,其特征在于,所述序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8所示。所述启动子具有启动子功能,同时该启动子所示DNA序列构建的重组载体导入链霉菌,添加纤维二糖后可提高链霉菌产生天然蓝色素。

本发明公开一类萘并γ-吡喃酮类化合物在制备抗幽门螺杆菌药物或预防保健品中的应用。本发明提供一种海洋真菌,名称为Aspergillus sp.DM94,保藏编号：CCTCC NO：M 20191003。本发明利用萘并γ-吡喃酮的极性差异从海洋真菌的发酵培养物中提取、分离获得一类萘并γ-吡喃酮化合物,该方法操作简便、提取得率高、产物纯度高,适合规模化生产。通过体外抗菌实验,表明萘并γ-吡喃酮类化合物具有较好的体外抗菌活性,针对幽门螺杆菌标准株G27以及左氧氟沙星和克拉霉素及甲硝唑多重耐药菌株HP159,其MIC值为4～64μg/mL,可用于制备抗菌药物及预防保健食品,具有良好的开发前景。

本发明提供一种苯丙酮单加氧酶,其氨基酸序列由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列通过突变获得,并公开基于该苯丙酮单加氧酶的不对称生物催化合成亚砜类药物的技术方法。本发明通过基因挖掘筛选获得来源于Limnobacter sp.的苯丙酮单加氧酶基因,采用基因工程技术构建重组大肠杆菌表达菌株,通过分子改造技术实现酶活力和立体选择性的提高。同时构建了单加氧酶突变体与不同脱氢酶的共表达菌株。以奥美拉唑硫醚为原料,采用全细胞或酶蛋白催化的方法,不对称催化合成光学纯埃索美拉唑。本发明可以在温和的条件下通过一步反应获得目标产物,没有副产物奥美拉唑砜,同时环境友好,是一种绿色生物催化合成途径。

本发明公开了一种具有肝损伤保护作用的微生态制剂的制备和应用,由葡萄籽原花青素粉、发酵培养基以及复合菌液发酵制备制成；所述复合菌液由酿酒酵母H2和发酵乳杆菌O混合制成,且酿酒酵母H2和发酵乳杆菌O的添加比例为2:3；所述发酵培养基由以下组分构成：葡萄糖26-27重量份、蛋白胨10-11重量份、酵母浸粉4-5重量份、磷酸氢二钾1-2重量份、柠檬酸铵1-2重量份、硫酸镁0.1-0.3重量份,水950-1000重量份。该具有肝损伤保护作用的微生态制剂的制备和应用,通过选用成本低的粗提商品化葡萄籽原花青素粉末,其杂质及聚合度均偏高,通过联合发酵可将原花青素的平均聚合度降低并稳定地溶解于复合菌液中,使制剂成分能够被机体吸收与利用从而防治肝损伤。