降解检材分型的人类常染色体与性染色体上64个基因座的复合扩增检测试剂盒及其应用。所述的64个基因座包括常染色体上59个DIP和2个miniSTR基因座、Y染色体2个DIP基因座及1个性别鉴别基因。常染色体59个DIP基因座适用于东亚地区多种群体的鉴定；Y染色体上2个DIP基因座,能够对性别进行更准确的鉴定；2个miniSTR基因座多态性高,在提高整个体系的鉴别效能的同时,也有助于降解检材分型检测。本发明应用六色荧光标记技术一次性实现了对64个基因座的高效、特异、灵敏及均衡扩增,系统鉴别效能高。扩增子长度在200bp以内,适用于法医降解检材的检测。该检测体系在法医学个体识别、亲子鉴定,尤其是降解检材检测方面具有很高的应用价值。

本发明为一种哺乳动物胚胎的性别鉴定方法。一种哺乳动物胚胎的性别鉴定方法,包括以下步骤：(1)获取胚胎；(2)获取胚胎细胞基因组DNA；(3)引物及探针的设计与合成；(4)QPCR反应：PCR扩增时,在加入一对引物的同时,加入一个特异性的荧光探针；(5)扩增曲线并分析后,鉴定胚胎性别。本发明所述的一种哺乳动物胚胎的性别鉴定方法,为实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)探针法,设计简单,仅需要一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,有效地解决了传统方法只能终点检测的局限,具有取样少、灵敏度高、特异性更强、快速简便、有效解决PCR污染问题、通用性好、自动化程度高等优点。

本发明为一种哺乳动物胚胎的性别鉴定方法。一种哺乳动物胚胎的性别鉴定方法,包括以下步骤：(1)获取胚胎；(2)获取胚胎细胞基因组DNA；(3)设计与合成引物；(4)QPCR反应：在PCR反应体系中,加入荧光染料；(5)扩增曲线并分析后,鉴定胚胎性别。本发明所述的一种哺乳动物胚胎的性别鉴定方法,为运用实时荧光定量PCR方法,设计简单,仅需要一对引物,能够通过熔点曲线分析检验扩增反应的特异性,灵敏度高,耗时短,低的初始成本,通用性好,并且具有自动化程度高等优点。

本发明公开了一种SNP分型遗传标记组合,该遗传标记组合包括有56个SNP位点。本发明还公开了用于检测该遗传标记组合的探针组、试剂盒及其用途,以及利用该遗传标记组合对高通量测序样本进行样本配对和样本污染分析的方法。本发明通过SNP位点筛选,选出56个均匀分布于各个染色体的SNP位点,构成SNP分型遗传标记组合,利用该遗传标记组合可以有效鉴别高通量测序样本的身份和污染情况,其操作简便,成本低,并具有非常高的适用性。

本发明涉及牛早期胚胎性别鉴定的方法,包括如下步骤：使卵母细胞和精子进行体外受精得到桑椹胚；将桑椹胚在分割液滴内用分割刀割取包含10～12个细胞的胚胎组织作为性别鉴定的样品；环介导等温扩增法性别鉴定试剂盒制作样品并配制Master Mix；待样品混合后使反应管置环介导等温扩增实时浊度检测系统中反应,根据结果确定样品为雄性、雌性、不确定需要重做三类情形之一。本发明方法呈现如说明书所述优异技术效果。

本发明涉及动物遗传育种技术领域,具体涉及与鸡种快慢羽性状相关的分子标记、其鉴定引物及应用。本发明提供的与鸡种快慢羽性状相关的分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的用于鉴别鸡种快羽和慢羽的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.2-3所示。利用该分子标记和引物对,经过简单的PCR扩增,即可将快慢羽性状进行区分鉴别,具有快速、高效、操作简便、成本低、准确度高、特异性高且易重复、易于自动化技术筛选的优点,为鸡种的快慢羽性状鉴别、雌雄鉴别和品系选育提供有效的方法。

本发明公开了一种利用5S rRNA鉴定鱼类早期发育阶段生理性别的方法,步骤是：(1)利用总RNA提取试剂盒或TRIzol试剂常规提取动物细胞总RNA的方法,提取鱼类性腺组织总RNA,利用核酸分析仪测定OD260/280值,判断RNA纯度；利用琼脂糖凝胶电泳法分离总RNA,观察5S rRNA,18S rRNA和28S rRNA的亮度和分布；(2)将提取的性腺总RNA进行微毛细管电泳,根据核酸分析软件所得出的RNA类型覆盖区域面积大小,计算其中5S rRNA占总RNA的比例；(3)根据5S rRNA占总RNA比例判断鱼类早期发育阶段的生理型雌雄,其中5S rRNA比例小于或等于9.0％时判断为精巢组织,5S rRNA比例大于或等于12％时判断为卵巢组织。方法易行,操作简便,在12小时以内实现了100尾以上鱼类个体的生理型性别鉴定,确定了鱼类生理性别。

本发明提供了一种快速鉴定日本对虾遗传性别的分子标记C27449及其应用。所述分子标记C27449的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,用于检测所述分子标记C27449的引物对的核苷酸序列分别为：C27449F：TCATCCAAGTTCCAGCCT和 C27449R：GGTCCCCCACAACATACA。所述分子标记C27449可以不受日本对虾组织特异性及环境的影响,使用步骤简单,结果明显,将日本对虾的基因组DNA与引物对进行PCR反应后电泳检测,若在120bp出现条带,则为雌性日本对虾,若无条带,则为雄性日本对虾,该分子标记还可以促进日本对虾全雌或高雌苗种培育技术的建立,具有广阔的应用前景。

本发明提供了一种快速鉴定日本对虾遗传性别的分子标记C42257及其应用。所述分子标记C42257的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,用于检测所述的分子标记C42257的引物对的核苷酸序列分别为：C42257F：GGGGGACAA ACAGAGACA和C42257R：ATCGGGGTGGATTTAGAA所述分子标记C42257可以不受日本对虾组织特异性及环境的影响,使用步骤简单,结果明显,将日本对虾的基因组DNA与引物对进行PCR反应后电泳检测,若在183bp处出现条带,则为雌性日本对虾,该分子标记还可以促进日本对虾全雌或高雌苗种培育技术的建立,具有广阔的应用前景。

本发明属法医遗传学领域,具体为针对X染色体上50个SNP位点基于MALDI-TOF MS平台检测的法医学复合扩增试剂盒。本发明的主要技术方法为单碱基延伸技术(SBE-PCR)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,利用X-SNP遗传标记对未知来源个体进行性别及其身份的鉴定,在复杂亲缘关系鉴定中也有不错的效果。该试剂盒包括用于复合扩增的50对引物混合物,同时扩增X染色体上的50个SNP位点,较方便地一次性检测50个X-SNP,并完成对未知个体的身份鉴定。