本发明属于生物技术领域,公开了一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的最小启动子。本发明通过缺失突变的方式,筛选出增强细菌中外源蛋白活性和表达的最小启动子为沙门氏菌肠亚种肠衣原体鼠伤寒菌株RM13672SspH1基因编码区上游的265个核苷酸,其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示。本发明得到的增强细菌中外源蛋白活性和表达的最小启动子在大肠杆菌中依然保持活性,是一个有普遍活性的启动子,有潜力应用到其它不同种的原核细菌中,可以在工业界或科研中把它用作一个提升蛋白产量和蛋白活力的工具,有助于科学研究和生物医药工业生产以及抗传染病疫苗制备。