本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种羰基还原酶突变体及其在制备甾体激素--睾酮中的应用。将羰基还原酶突变体PmCRm与甲酸脱氢酶BstFDH-m在大肠埃希氏菌中共表达,并以该共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂催化雄甾-4-烯-3,17-二酮合成睾酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性,可以在10 h以内完全转化28.8 g/L雄甾-4-烯-3,17-二酮生成目标产物睾酮,且无副产物产生,其底物投料量、转化率和时空转化率皆为国内生物法制备睾酮的最高水平,经过分离纯化,产物回收率高达95%以上,说明该生物催化剂是睾酮绿色合成的高效催化剂。
