四氢苯并噻吩类化合物及药物组合物的制备方法和用途
阅读说明：本技术 四氢苯并噻吩类化合物及药物组合物的制备方法和用途 (Tetrahydrobenzothiophene compound, and preparation method and application of pharmaceutical composition ) 是由 裴叔宸 杨金华 李自强 袁康耀 陈骏 柴水琴 于 2021-06-10 设计创作，主要内容包括：本发明属于医药领域,具体涉及一种四氢苯并噻吩类化合物及药物组合物和其制备方法和用途。四氢苯并噻吩类化合物为如式I所示化合物I；其中,R-(1)和R-(2)为C1-4饱和/不饱和烃基、-OCH-(3)、-OCH-(2)CH-(3)、苯基、取代苯基、-NO-(2)、-COR、-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-H其中的一种；R-(1)与R-(2)相同或不同；R-(3)为-F、-Cl、-Br、-I、-OH、氨基、C1-4饱和/不饱和烃基、-OCH-(3)、-OCH-(2)CH-(3)、-H其中的一种；n≥5,n为整数。该化合物通过抑制脂多糖合成通路中的ATP依赖性转运蛋白的合成,有效抑制沙门氏菌、铜绿假单胞菌、抗大肠杆菌、抗金黄色葡萄球菌。(The invention belongs to the field of medicines, and particularly relates to a tetrahydrobenzothiophene compound, a pharmaceutical composition, a preparation method and application thereof. The tetrahydrobenzothiophene compound is a compound I shown as a formula I; wherein R is 1 And R 2 Is C1-4 saturated/unsaturated alkyl, -OCH 3 、‑OCH 2 CH 3 Phenyl, substituted phenyl, -NO 2 One of-COR, -OH, -F, -Cl, -Br, -I and-H; r 1 And R 2 The same or different; r 3 is-F, -Cl, -Br, -I, -OH, amino, C1-4 saturated/unsaturated alkyl, -OCH 3 、‑OCH 2 CH 3 -H; n is not less than 5, and n is an integer. The compounds inhibit ATP-dependent transport in the lipopolysaccharide synthesis pathwayThe synthesis of the protein can effectively inhibit salmonella, pseudomonas aeruginosa, escherichia coli and staphylococcus aureus.)
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种四氢苯并噻吩类化合物及药物组合物和其制备方法和用途。
背景技术
随着抗生素药物的广泛使用，特别是临床上的不合理用药，细菌的耐药性逐年增加，已成为近年来临床上非常棘手的问题。青霉素从1941年开始用于临床治疗细菌感染性疾病，使用1年后出现对其耐药的金黄色葡萄球菌。长久以来，治疗细菌感染性疾病的最后一道防线认为是万古霉素，但在1997年后出现了多种不同程度对万古霉素耐药的菌株。耐药菌株的日益增多，使得细菌对抗生素的耐药性已经由单一耐药逐渐发展成多重耐药。因此，各国出台相应措施加强对抗生素的管制并加大宣传力度，但目前所面临的严峻局面这些措施显然不够，并且临床常见抗生素都是上世纪40至60年代研发，近年对新抗生素的研发远远落后耐药菌株的产生速度，急需开发具有新作用机制的新结构的抗菌活性小分子来改善这一问题。
通过对细菌的结构蛋白、遗传基因和感染增殖周期的研究，已经发现了多种抗生素的作用机制。2018年4月，哈弗大学的Ge Zhang等报道了该课题组对革兰氏阴性细菌中的脂多糖的生物合成通路进行研究，并发现了一个全新的结构相对保守的作用靶点MsbA蛋白，通过抑制脂多糖的生物合成从而抑制细菌生长，具有很高应用前景和临床价值。
发明内容
有鉴于此，本发明目的在于提供一种四氢苯并噻吩类化合物。该化合物为细菌感染的防治提供新的思路。
所述四氢苯并噻吩类化合物为如式I所示化合物I；或所述化合物I的对映异构体、非对映异构体、互变异构体、盐；
其中：
R1取代的位点为式I所示的苯环上的5个位点中其中一个或多个，R1为C1-4饱和/不饱和烃基、-OCH3、-OCH2CH3、苯基、取代苯基、-NO2、-COR、-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-H其中的一种；当R1取代所述苯环上的2个以上位点时，R1相同或不同；
R2为C1-4烷基/不饱和烷基、-OCH3、-OCH2CH3、烯丙基、苯基、取代苯基、-NO2、-COR、-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-H其中的一种；
R1与R2相同或不同；
R3为-F、-Cl、-Br、-I、-OH、氨基、C1-4烷基/不饱和烷基、-OCH3、-OCH2CH3、-H其中的一种；
n≥5，n为整数。
优选地，所述R2为-H或C1-4饱和/不饱和烃基；所述R3为-OCH2CH3或-OH；所述n为5或6。
更优选地，所述四氢苯并噻吩类化合物为式1)-29)中任一种；
进一步，还提供一种所述四氢苯并噻吩类化合物的制备方法，所述包括以下步骤：
(1)将取代环己酮溶于乙醇，然后与吗啉、升华硫、乙酰乙酸乙酯混合，升温回流得反应液；将所述反应液将至室温，在水中析出固体后减压、过滤得化合物a；
(2)将所述化合物a与二氯甲烷、二乙胺于冰浴下混合，然后加入苯甲酰氯衍生物溶液，室温进行反应得反应液b，将所述反应液b依次分别使用二氯甲烷和稀盐酸洗涤，饱和碳酸氢钠溶液洗涤、饱和食盐水洗涤，然后使用无水硫酸钠干燥、过滤、减压浓缩得化合物b；
和/或(3)将所述四氢苯并噻吩类化合物与氢氧化钠溶液和无水乙醇升温回流，然后调节pH至2-3得化合物c；
其中，步骤(2)中所述苯甲酰氯衍生物的制备方法包括：将苯甲酸衍生物、四氢呋喃、二氯亚砜、N,N-二甲基甲酰胺于室温混合后升温至65℃反应，然后减压浓缩得所述苯甲酰氯衍生物。
优选地，R2为-H，n＝6，所述四氢苯并噻吩类化合物的反应式如下：
合成步骤为：
(1)取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出；减压过滤，收集滤饼，即得2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(化合物a)。
(2)取苯甲酸衍生物1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全，减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。取2-氨基-5-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(化合物a)1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯衍生物溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-苯甲酰胺基-5-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(化合物b)。
(3)上述中间体(化合物b)与氢氧化钠溶液和无水乙醇升温回流，然后调节pH至2-3；减压抽滤、干燥得所四氢苯并噻吩类化合物。
更优选地，所述取代环己酮为环己酮、甲基环己酮或乙基环己酮其中一种；所述苯甲酸衍生物为苯甲酸、2-氯苯甲酸、3-氟苯甲酸、4-氟苯甲酸、4-溴苯甲酸、4-硝基苯甲酸、2-甲基苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、4-叔丁基苯甲酸、2-碘苯甲酸、2,6-二氟苯甲酸、2,4-二氟苯甲酸、2-氟-3-硝基苯甲酸、2,4-二甲基苯甲酸、2-甲基-3-硝基苯甲酸、3,5-二硝基苯甲酸或2-氟-5-氯苯甲酸其中一种。
本发明目的在于还提供一种包含前述的四氢苯并噻吩类化合物的药物组合物，所述药物组合物包含其他药学上可接受的活性成分和/或辅料。
进一步，所述药学上可接受的活性成分指的是可与四氢苯并噻吩类化合物一起使用，不会产生拮抗或者联合使用不会中毒等情况的其他药学成分；所述药学上可接受的辅料指的是药物制剂中常会用到的增溶剂。助溶剂、潜溶剂、防腐剂、矫味剂、着色剂、助悬剂等改善药物制剂的稳定性、口感、剂型的物质。
本发明目的在于还提供一种前述的四氢苯并噻吩类化合物在作为或制备细菌抑制剂中的应用。即是说，四氢苯并噻吩类化合物可以单独作为细菌抑制剂，也可以作为细菌抑制剂中的抑菌活性成分。
优选地，所述细菌为沙门氏菌制、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌。
进一步，本发明还提供一种前述的四氢苯并噻吩类化合物在作为或制备脂多糖合成通路中的ATP依赖性转运蛋白(MsbA)抑制剂中的应用。
进一步，本发明还提供一种抑制沙门氏菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌或金黄色葡萄球菌的方法，所述方法包括：使用前的四氢苯并噻吩类化合物或前述的药物组合物。
进一步，本发明目的在于提供一种抑制沙门氏菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌或金黄色葡萄球菌的方法，所述方法包括：使用权前述式I的四氢苯并噻吩类化合物或前述的药物组合物。
本发明有益效果在于：
本发明提供的四氢苯并噻吩类化合物及其药物组合物可以通过抑制脂多糖合成通路中的ATP依赖性转运蛋白(MsbA)的生成，从而有效抑制沙门氏菌、铜绿假单胞菌、抗大肠杆菌、抗金黄色葡萄球菌。如化合物2-苯甲酰胺基-5-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯对铜绿假单胞菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.71μmol/L。
具体实施方式
所举实施例是为了更好地对本发明进行说明，但并不是本发明的内容仅局限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
本发明实施例中，进行抑菌实验的步骤为：
(1)活化菌种：对铜绿假单胞菌、沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌进行摇瓶(西林瓶中加入5ml LB液体培养基，菌种37℃恒温水浴活化，取5ul加入到西林瓶中，放入频率为180pm 37℃恒温空气摇床中振摇生长)，直到其生长到OD595＝0.6-0.8。
(2)配培养基：配制LB液体培养基200ml(蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，蒸馏水定容至1000ml，调节pH值7.2-7.4)，每个锥形瓶加100ml培养基，封口，121℃灭菌30min。
(3)测合成化合物对四种菌抗菌的OD值：配制待测化合物浓度梯度，药液浓度加入到96孔板中均被稀释两倍。配制菌悬液，铜绿假单胞菌、沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌进摇床培养至OD595＝0.6-0.8，根据麦氏比浊法确定细菌浓度(当细菌浓度为1.5X108cfu/ml时相当于麦氏标准管0.5号浑浊度)，用LB液体稀释至与麦氏标准管0.5号相同浊度，再将菌液用LB液体培养基稀释至1X105cfu/ml，制成所需菌悬液。超净工作台紫外灯照射20分钟，关掉紫外打开照明和通风，96孔板每孔200ul。空白对照:只加200ul培养基；阳性对照:100ul菌悬液+100ul不同浓度环丙沙星；阴性对照:200ul菌悬液；待测物:100ul菌悬液+100ul不同浓度待测药物。37℃恒温培养至24小时于酶标仪内测定其OD595值，并观察96孔板澄清度，确定MIC值。
实施例1化合物1的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物1的合成
将上述2-苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物1。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.28(s,1H),12.39(s,2H),7.93–7.86(m,4H),7.71–7.62(m,2H),7.60(dd,J＝8.2,6.5Hz,3H),2.77–2.70(m,4H),2.66–2.59(m,4H),1.73(p,J＝6.5Hz,7H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.12,162.98,146.96,133.24,132.56,131.67,129.71,127.46,126.57,113.04,26.32,24.24,23.02,22.72.
实施例2化合物2的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-氯)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-氯苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-氯)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物2的合成
将上述2-(2-氯)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物2。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.94(s,2H),7.79(dd,J＝7.4,1.7Hz,2H),7.68–7.54(m,5H),7.51(dd,J＝6.9,2.0Hz,1H),2.73(d,J＝4.9Hz,4H),2.65(d,J＝4.9Hz,4H),1.72(dq,J＝11.5,6.3,5.8Hz,8H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.50,162.63,145.77,133.85,133.19,131.81,130.97,130.59,128.30,126.98,113.65,26.31,24.25,23.03,22.74.
实施例3化合物3的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(3-氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取3-氟苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(3-氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物3的合成
将上述2-(3-氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物3。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40(s,2H),7.75–7.61(m,6H),7.53(dddd,J＝9.1,8.2,2.7,1.2Hz,2H),7.18(s,1H),4.12(q,J＝7.1Hz,1H),2.77–2.70(m,4H),2.66–2.60(m,4H),2.60–2.53(m,1H),2.39(dq,J＝6.1,2.9,2.2Hz,1H),1.71(p,J＝6.4,6.0Hz,8H),1.68–1.59(m,1H),1.22(t,J＝7.1Hz,1H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.04,163.92,163.31,161.74,161.71,161.48,146.52,135.12,135.04,132.00,131.92,131.77,131.73,126.82,123.38,123.36,120.22,120.01,115.88,114.68,114.45,113.47,59.05,26.94,26.29,24.36,24.24,23.25,23.00,22.85,22.69,14.82.
实施例4化合物4的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(4-氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取4-氟苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(4-氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物4的合成
将上述2-(4-氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物化合物4。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.24(s,1H),12.33(s,2H),8.00–7.87(m,4H),7.49–7.35(m,4H),2.71(d,J＝4.8Hz,4H),2.61(d,J＝4.9Hz,4H),1.72(h,J＝5.7,4.9Hz,9H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.10,166.75,163.43,161.86,146.93,131.60,130.29,130.16,129.15,129.11,126.53,116.83,116.54,113.01,26.30,24.22,23.01,22.71.
实施例5化合物5的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(4-溴)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取4-溴苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(4-溴)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物5的合成
将上述2-(4-溴)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物5。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19(s,1H),7.85(dd,J＝9.2,7.2Hz,10H),7.75–7.65(m,8H),2.74(s,1H),2.63(s,1H),1.65(d,J＝5.6Hz,1H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.07,162.13,146.71,132.72,132.14,131.74,130.47,129.50,127.34.
实施例6化合物6的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(4-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取4-硝基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(4-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物6的合成
将上述2-(4-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物6。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),8.43–8.33(m,2H),8.12–8.02(m,2H),4.31(q,J＝7.1Hz,1H),2.66(dt,J＝25.5,5.8Hz,4H),1.76–1.64(m,4H),1.39–1.18(m,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.93,166.06,161.27,161.15,150.17,146.27,146.20,138.06,137.84,131.86,131.37,129.00,128.93,127.71,127.23,124.59,113.87,113.20,61.16,26.23,24.26,23.01,22.90,22.68,14.49.
实施例7化合物7的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-甲基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-甲基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-甲基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物7的合成
将上述2-(2-甲基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物7。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.93(s,1H),7.58(dd,J＝8.0,1.5Hz,2H),7.46(td,J＝7.5,1.4Hz,2H),7.35(ddd,J＝7.4,5.8,1.5Hz,4H),2.76–2.69(m,4H),2.61(q,J＝3.8,2.2Hz,4H),2.44(s,6H),1.78–1.65(m,8H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.92,165.32,146.28,137.18,134.22,131.98,131.68,131.58,127.62,126.81,126.24,113.41,26.34,24.23,23.06,22.77,20.30.
实施例8化合物8的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(4-甲氧基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取4-甲氧基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(4-甲氧基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物8的合成
将上述2-(4-甲氧基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物8。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.94–7.81(m,1H),7.20(s,4H),7.18–7.09(m,2H),4.14(q,J＝7.1Hz,5H),3.84(d,J＝10.1Hz,2H),2.75(s,1H),2.65–2.54(m,6H),2.41(dq,J＝6.2,2.9,2.3Hz,5H),1.79–1.59(m,12H),1.24(t,J＝7.1Hz,8H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.23,165.53,163.35,163.22,162.49,147.45,131.79,131.76,131.53,129.45,126.23,124.65,115.90,114.96,114.23,112.51,103.08,59.06,56.03,55.86,26.97,26.35,24.39,24.24,23.29,23.05,22.89,22.76,14.83.
实施例9化合物9的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(4-叔丁基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取4-叔丁基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(4-叔丁基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物9的合成
将上述2-(4-叔丁基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物9。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.47(s,1H),7.86–7.78(m,3H),7.65–7.57(m,3H),2.77–2.70(m,3H),2.65–2.58(m,3H),1.72(q,J＝6.8Hz,7H),1.30(s,16H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.20,162.84,156.23,146.97,131.68,129.89,127.36,126.52,126.32,113.11,35.30,31.27,26.34,24.25,23.05,22.75.
实施例10化合物10的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-碘)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-碘苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-碘)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物10的合成
将上述2-(2-碘)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物10。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.27(s,1H),11.67(s,2H),8.01(dd,J＝7.9,1.0Hz,2H),7.66–7.50(m,5H),7.31(td,J＝7.6,1.9Hz,2H),2.74(t,J＝5.4Hz,5H),2.66(d,J＝5.1Hz,5H),1.75(p,J＝6.1Hz,9H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.63,165.49,145.96,140.60,140.40,132.80,131.77,129.08,129.01,126.94,113.51,93.88,26.34,24.27,23.03,22.74.
实施例11化合物11的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2,6-二氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2,6-二氟苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2,6-二氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物11的合成
将上述2-(2,6-二氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物11。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.92(s,1H),7.67(tt,J＝8.5,6.5Hz,1H),7.34–7.24(m,2H),2.76–2.68(m,2H),2.67–2.59(m,2H),1.72(tt,J＝7.6,3.9Hz,4H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.25,161.19,161.13,158.68,158.62,156.61,144.94,134.37,131.87,127.19,114.01,113.29,113.05,26.26,24.20,22.96,22.68.
实施例12化合物12的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2,4-二氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2,4-二氟苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2,4-二氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物12的合成
将上述2-(2,4-二氟)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得目标化合物。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.52(s,1H),8.10(td,J＝9.0,6.7Hz,2H),7.53(ddd,J＝11.9,9.1,2.5Hz,2H),7.31(td,J＝8.4,2.5Hz,2H),7.18(s,2H),7.07–6.90(m,1H),4.12(q,J＝7.0Hz,2H),2.72(d,J＝5.2Hz,5H),2.61(d,J＝5.9Hz,5H),2.57(s,2H),2.39(s,2H),1.76–1.68(m,10H),1.68–1.59(m,4H),1.37(dt,J＝25.0,7.0Hz,2H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.40,165.49,164.03,163.31,162.23,162.09,159.72,159.58,158.66,158.63,145.82,134.17,134.14,134.06,133.28,131.87,131.73,131.71,126.97,126.66,116.94,116.83,116.79,115.88,113.82,113.48,113.29,105.86,105.59,105.32,103.02,64.82,59.05,26.94,26.30,24.36,24.17,23.25,22.98,22.85,22.72,14.82,14.77,14.34.
实施例13化合物13的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-氟-3-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-氟-3-硝基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-氟-3-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物13的合成
将上述2-(2-氟-3-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物13。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.34(q,J＝7.1Hz,1H),2.72(d,J＝5.0Hz,1H),2.61(d,J＝5.1Hz,1H),1.73(s,2H),1.67(d,J＝5.0Hz,1H),1.34(t,J＝7.1Hz,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ166.64,165.54,164.30,163.36,146.92,140.86,136.76,131.77,131.09,130.72,125.97,122.83,115.94,111.79,107.68,103.10,60.20,59.08,26.98,26.40,24.40,24.26,23.29,23.05,22.99,22.90,14.85,14.74.
实施例14化合物14的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2,4-二甲基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2,4-二甲基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2,4-二甲基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物14的合成
将上述2-(2,4-二甲基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物(化合物14)，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物14。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),7.51(d,J＝8.2Hz,1H),7.16(dt,J＝4.6,2.1Hz,2H),2.72(d,J＝4.9Hz,2H),2.63(q,J＝6.4,5.5Hz,2H),2.45(s,3H),2.33(s,3H),1.73(q,J＝4.3,3.5Hz,4H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.89,165.25,146.87,141.65,137.47,132.73,131.52,131.12,127.75,127.35,126.22,112.71,26.34,24.23,23.06,22.78,21.29,20.41.
实施例15化合物15的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-甲基-3-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-甲基-3-硝基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-甲基-3-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物15的合成
将上述2-(2-甲基-3-硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物15。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.23(s,1H),11.74(s,2H),8.05(dd,J＝8.2,1.3Hz,2H),7.89(dd,J＝7.7,1.3Hz,2H),7.60(t,J＝7.9Hz,2H),2.71(d,J＝5.3Hz,4H),2.64(d,J＝5.4Hz,4H),2.43(s,6H),1.78–1.66(m,8H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.48,164.12,151.46,145.64,137.85,131.78,131.65,130.45,128.24,127.04,126.47,113.94,26.29,24.24,23.01,22.71,15.94,14.46.
实施例16化合物16的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(3,5-二硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取3,5-二硝基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(3,5-二硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物16的合成
将上述2-(3,5-二硝基)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物(化合物16)，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物16。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(d,J＝2.2Hz,1H),7.17(s,1H),4.11(q,J＝7.1Hz,1H),2.60–2.52(m,1H),2.39(td,J＝5.9,5.0,2.9Hz,1H),1.64(th,J＝12.0,3.1,2.7Hz,3H),1.22(t,J＝7.1Hz,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ165.47,164.41,163.30,148.77,134.44,131.72,129.34,122.55,115.88,103.00,59.05,26.93,24.36,23.25,22.84,14.82.
实施例17化合物17的制备
(1)2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-氟-5-氯)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-氟-5-氯苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-氟-5-氯)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物17的合成
将上述2-(2-氟-5-氯)苯甲酰胺基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物17。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(d,J＝10.4Hz,1H),7.92(td,J＝6.2,2.8Hz,2H),7.72(ddt,J＝8.7,4.2,2.1Hz,2H),7.47(ddd,J＝11.2,8.8,4.8Hz,2H),7.19(s,1H),4.27(q,J＝7.1Hz,1H),4.13(q,J＝7.1Hz,1H),2.76–2.53(m,9H),2.40(dq,J＝6.2,2.9,2.3Hz,1H),1.71(q,J＝11.8,8.5Hz,10H),1.27(dt,J＝21.1,7.1Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.24,165.51,163.33,160.67,158.04,158.00,157.36,145.73,145.56,134.91,134.78,131.85,131.76,131.27,131.17,131.14,129.76,129.72,127.67,127.31,121.50,121.32,119.50,119.15,115.91,113.81,112.88,103.11,60.93,59.05,26.96,26.26,24.39,24.17,23.29,22.96,22.88,22.70,14.82,14.49.
实施例18化合物18的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物18的合成
将上述2-苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物18。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(s,1H),7.99–7.85(m,2H),7.72–7.62(m,2H),7.59(d,J＝6.7Hz,1H),2.91(ddd,J＝17.4,5.7,2.8Hz,1H),2.64(ddd,J＝25.3,16.6,8.0Hz,3H),2.20(dt,J＝15.4,6.1Hz,1H),1.88–1.74(m,2H),1.39–1.20(m,1H),1.00(d,J＝6.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.00,162.96,147.10,133.09,132.74,131.36,129.61,128.83,128.09,127.42,126.19,112.98,32.33,31.36,31.00,29.93,29.22,26.05,25.07,21.76,21.56.
实施例19化合物19的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-碘)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-碘苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-碘)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物19的合成
将上述2-(2-碘)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物19。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.65(s,2H),8.01(dd,J＝7.9,1.0Hz,2H),7.66–7.57(m,3H),7.55(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),7.38–7.25(m,2H),3.00–2.85(m,2H),2.75(dd,J＝16.0,4.9Hz,2H),2.70–2.54(m,2H),2.25(dd,J＝16.3,9.8Hz,2H),1.83(dd,J＝11.5,5.7Hz,4H),1.43–1.23(m,2H),1.06(dd,J＝12.9,6.7Hz,7H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.62,165.47,146.07,140.58,140.41,132.80,131.46,129.08,129.00,126.58,113.38,93.87,56.51,32.29,30.98,29.24,26.11,21.68.
实施例20化合物20的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(4-氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取4-氟苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(4-氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物20的合成
将上述2-(4-氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物20。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.03–7.91(m,1H),7.40(t,J＝8.8Hz,1H),2.66(td,J＝23.1,19.4,8.4Hz,1H),2.21(dd,J＝15.9,9.6Hz,1H),1.81(dd,J＝11.8,6.0Hz,1H),1.39–1.20(m,1H),1.01(d,J＝6.4Hz,1H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.69,166.62,163.30,161.62,145.86,131.82,130.28,130.16,129.52,129.48,125.60,116.73,116.43,114.95,32.39,31.11,29.37,26.22,21.77.
实施例21化合物21的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(4-甲氧基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取4-甲氧基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(4-甲氧基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物21的合成
将上述2-(4-甲氧基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物(化合物21)，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物21。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.83(d,J＝8.3Hz,2H),7.12(d,J＝8.4Hz,2H),4.29(t,J＝7.2Hz,1H),3.84(s,3H),2.90(d,J＝17.6Hz,1H),2.66(d,J＝17.7Hz,1H),2.17(s,1H),1.79(d,J＝12.8Hz,2H),1.30(q,J＝8.9,8.0Hz,3H),0.99(d,J＝6.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.08,166.31,163.29,163.23,162.50,162.44,147.65,147.55,131.20,130.67,129.42,129.37,126.25,125.83,124.82,124.65,114.93,112.46,111.70,60.93,56.02,32.32,32.28,30.98,29.23,29.12,26.07,26.03,21.57,21.53,14.51.
实施例22化合物22的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2,6-二氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2,6-二氟苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2,6-二氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物22的合成
将上述2-(2,6-二氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物(化合物22)，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物22。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.97(s,1H),7.68(tt,J＝8.5,6.5Hz,3H),7.33(s,2H),7.28(d,J＝8.5Hz,4H),7.20(s,2H),4.14(q,J＝7.1Hz,2H),2.98–2.83(m,3H),2.83–2.53(m,8H),2.52–2.41(m,5H),2.30–2.16(m,3H),2.11–1.95(m,2H),1.88–1.77(m,6H),1.77–1.67(m,2H),1.41–1.26(m,3H),1.24(t,J＝7.1Hz,5H),1.00(dd,J＝13.8,6.4Hz,13H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.30,165.52,163.48,161.66,161.57,158.32,158.23,156.57,145.12,134.49,134.35,134.20,131.56,131.39,126.81,115.45,113.88,113.32,113.29,113.03,112.99,112.89,112.64,112.39,103.00,59.05,32.52,32.23,31.13,30.94,29.41,29.20,26.73,26.06,21.72,21.61,14.83.
实施例23化合物23的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-甲基-3-硝基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-甲基-3-硝基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-甲基-3-硝基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物23的合成
将上述2-(2-甲基-3-硝基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物23。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.17(s,2H),4.18–4.06(m,2H),2.80–2.69(m,1H),2.45(d,J＝4.8Hz,2H),2.03(dd,J＝15.6,9.6Hz,1H),1.74(d,J＝14.5Hz,2H),1.22(t,J＝7.1Hz,4H),0.97(d,J＝6.5Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ165.49,163.45,131.37,115.42,102.93,59.05,32.49,31.11,29.39,26.72,21.74,14.83.
实施例24化合物24的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2,4-二甲基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2,4-二甲基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2,4-二甲基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物24的合成
将上述2-(2,4-二甲基)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物24。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.52(s,1H),7.19(s,2H),4.28(s,1H),2.92(d,J＝15.8Hz,2H),2.70(s,1H),2.45(s,4H),2.34(s,3H),1.84(s,2H),1.31(s,2H),1.04(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ165.95,165.34,147.01,141.73,137.61,132.77,131.31,130.79,127.68,127.32,126.38,112.03,60.89,32.28,30.99,29.15,26.00,21.49,21.27,20.34,14.50.
实施例25化合物25的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2,4-二氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2,4-二氟苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2,4-二氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物25的合成
将上述2-(2,4-二氟)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物25。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.32(dd,J＝23.1,10.8Hz,2H),8.08(td,J＝9.3,6.8Hz,1H),7.93(t,J＝8.9Hz,1H),7.47(ddd,J＝11.9,9.1,2.5Hz,1H),7.33–7.12(m,1H),7.02–6.86(m,2H),4.44(q,J＝6.9Hz,1H),4.10(q,J＝6.9Hz,2H),2.96–2.84(m,2H),2.64(dt,J＝17.9,8.9Hz,5H),2.17(dd,J＝15.9,9.7Hz,2H),1.84–1.72(m,4H),1.47–1.17(m,6H),0.99(d,J＝6.4Hz,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.20,166.75,164.09,163.93,161.07,159.26,158.62,146.43,145.95,133.19,131.52,131.38,126.73,126.33,113.57,113.02,112.45,111.77,102.91,102.55,65.74,64.83,40.05,32.26,31.01,29.17,26.04,21.57,14.72,14.36.
实施例26化合物26的制备
(1)2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取甲基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-氟-5-氯)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-氟-5-氯苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-氟-5-氯)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物26的合成
将上述2-(2-氟-5-氯)苯甲酰胺基-6-甲基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物26。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.13(q,J＝7.1Hz,1H),2.97–2.74(m,1H),2.69(dd,J＝16.3,4.8Hz,1H),2.51–2.40(m,1H),1.77(ddd,J＝20.4,11.5,5.3Hz,1H),1.27(dt,J＝22.3,7.1Hz,2H),0.99(dd,J＝11.7,6.4Hz,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ167.27,165.52,163.46,160.66,158.04,157.35,145.84,145.67,134.95,134.82,131.55,131.38,131.13,130.97,129.77,129.73,127.36,126.98,121.49,121.32,119.54,119.19,115.45,113.68,112.74,102.97,60.96,59.07,32.51,32.20,31.12,30.96,29.40,29.18,29.07,26.73,26.10,21.74,21.70,21.66,14.83,14.50.
实施例27化合物27的制备
(1)2-氨基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取乙基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(2-氟-3-硝基)苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取2-氟-3-硝基苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(2-氟-3-硝基)苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物27的合成
将上述2-(2-氟-3-硝基)苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物27。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27–8.09(m,2H),7.99(ddd,J＝13.3,8.1,2.0Hz,2H),6.78(t,J＝7.9Hz,1H),6.65(t,J＝7.9Hz,1H),4.33(q,J＝7.1Hz,1H),4.12(dq,J＝9.7,7.0Hz,1H),3.00–2.84(m,2H),2.81–2.50(m,6H),2.21(dd,J＝16.4,9.8Hz,2H),1.93–1.81(m,2H),1.56(d,J＝12.1Hz,2H),1.32(heptd,J＝6.8,2.0Hz,10H),0.92(t,J＝7.3Hz,7H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ166.13,164.64,162.84,162.31,160.35,159.79,146.60,146.01,145.54,140.16,139.85,137.18,137.06,131.77,131.15,130.40,130.27,126.40,126.30,125.63,122.68,122.61,114.97,113.26,113.18,112.09,74.13,60.45,59.06,36.20,35.95,35.90,30.39,30.16,28.93,28.69,28.64,26.79,26.22,15.24,14.83,14.69,11.81.
实施例28化合物28的制备
(1)2-氨基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取乙基环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物28的合成
将上述2-苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物28。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(s,1H),7.95–7.85(m,2H),7.72–7.63(m,1H),7.60(dd,J＝8.1,6.1Hz,2H),2.92(dt,J＝17.5,4.4Hz,1H),2.71(dd,J＝16.1,4.9Hz,1H),2.59(q,J＝9.6,8.4Hz,1H),2.28–2.12(m,1H),1.92–1.79(m,1H),1.63–1.51(m,1H),1.43–1.17(m,3H),0.91(t,J＝7.4Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.00,162.94,147.15,133.08,132.74,131.61,129.60,127.41,126.30,112.90,35.99,30.19,28.75,28.53,26.08,11.69.
实施例29化合物29的制备
(1)2-氨基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯的合成
称取环己酮1.0eq溶于乙醇中，依次加入吗啉1.2eq、升华硫1.2eq、乙酰乙酸乙酯1.2eq，升温搅拌回流1h，至TLC检测反应完全。将反应液降至室温，缓慢倾倒至纯化水中，有黄色固体析出。减压过滤，收集滤饼，即得目标化合物。
(2)2-(4-氯)苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物的合成
称取4-氯苯甲酸1.5eq，加入四氢呋喃、10eq二氯亚砜和1滴N,N-二甲基甲酰胺，于室温下搅拌，溶液无色透明。升温至65℃，搅拌1小时，至TLC检测反应完全。减压浓缩反应液得苯甲酰氯衍生物，备用。
称取2-氨基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯1eq，加入二氯甲烷和2eq三乙胺，于冰浴下搅拌。滴加上述苯甲酰氯衍生物溶液，滴毕，于室温搅拌3h，至TLC检测反应完全。向反应液中加入二氯甲烷和稀盐酸洗涤3次，收集有机层，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次，饱和食盐水洗涤一次，收集有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，即得粗品。向粗品中加入乙醇，升温回流至固体全部溶解，再缓慢降至室温，减压抽滤即得中间体2-(4-氯)苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物。
(3)化合物29的合成
将上述2-(4-氯)苯甲酰胺基-6-乙基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯衍生物(化合物29)，加入1mol/L氢氧化钠溶液和无水乙醇，升温回流3h，至TLC监测反应完全。向反应液中滴加1mol/L的稀盐酸调节pH至2-3，有大量固体析出，减压抽滤，减压干燥，即得化合物29。
核磁氢谱和碳谱数据如下：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.18(d,J＝5.0Hz,1H),4.15(qd,J＝7.1,1.2Hz,1H),2.66–2.55(m,1H),2.41(q,J＝3.7,2.2Hz,1H),1.69(p,J＝6.9,6.2Hz,2H),1.25(t,J＝7.0Hz,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ165.53,163.35,131.76,115.91,103.09,59.06,26.98,24.40,23.30,22.90,14.83.
实施例30抑菌实验
以下编号1-29四氢苯并噻吩衍生物进行抑菌实验，其情况如下表1所示。
表1四氢苯并噻吩类化合物1-29抑菌实验情况
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。