阅读说明：本技术 一种云芝糖肽抗病毒剂及其制备方法 (Corious versicolor glycopeptide antiviral agent and preparation method thereof ) 是由 赵磊 侯彩婷 吴云锋 于 2019-04-12 设计创作，主要内容包括：本发明涉及抗植物病毒制剂及其制备方法,尤其是涉及一种含云芝糖肽的抗病毒制剂及其制备方法。本发明公开了一种云芝糖肽抗病毒剂及其制备方法,该抗病毒剂由以下原料按照重量百分比制成：云芝糖肽：8％-10％,表面活性剂：3-5％,稳定剂：2-3％,防腐剂：0.3-0.5％,抗冻剂：2-3％,余量为水,所有原料的重量百分比之和为100％。本发明所涉及的云芝糖肽制剂对多种植物病毒病具有防治效果,例如烟草花叶病毒病、小麦黄矮病毒病或水稻条纹叶枯病毒病等。此外,云芝糖肽对人畜和生态环境无毒害作用,是发展绿色、有机农业的理想生物农药。(The invention relates to a plant virus resisting preparation and a preparation method thereof, in particular to an antiviral preparation containing polysaccharopeptide and a preparation method thereof. The invention discloses a corious versicolor glycopeptide antiviral agent and a preparation method thereof, wherein the antiviral agent is prepared from the following raw materials in percentage by weight: polysaccharide-peptide of corious versicolor: 8% -10%, surfactant: 3-5%, stabilizer: 2-3%, preservative: 0.3-0.5%, antifreeze agent: 2-3 percent of water, and the balance of water, wherein the sum of the weight percentages of all the raw materials is 100 percent. The polysaccharide peptide preparation has prevention and treatment effects on various plant virus diseases, such as tobacco mosaic virus disease, wheat yellow dwarf virus disease or rice stripe disease virus disease. In addition, the polysaccharopeptide has no toxic action on human, livestock and ecological environment, and is an ideal biological pesticide for developing green and organic agriculture.)

一种云芝糖肽抗病毒剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及农药技术领域，特别是抗植物病毒农药领域，更进一步地涉及一种含云芝糖肽的抗病毒制剂及其制备方法。

背景技术

植物病毒病是一类重要的植物病害，全球每年因植物病毒病危害而造成的经济损失多达600亿美元，其中仅粮食作物一项的损失就高达200亿美元。植物病毒没有完整的细胞结构，它对植物是绝对寄生的，再加上植物本身缺乏完整的免疫系统，植物一旦被病毒侵染后，便终生带毒，持续遭受危害，这给植物病毒病的防治带来了极大的困难。目前，农业生产上还没有特效的抗植物病毒药剂。面对植物病毒病危害严重，抗植物病毒药剂短缺的局面，开发新型的抗植物病毒活性成分并研究其抗病毒机理具有重要的意义。近年来，高活性、低毒性、环境相容性好、副作用小的生物源多糖、糖肽、蛋白质等活性成分的研究受到了众多科研工作者的青睐。更有大量研究表明，许多生物源多糖、糖肽以及寡糖等对植物防御病原菌的入侵具有较好的免疫调控作用。这些发现为抗植物病毒药剂的开发提供了新的思路。

本实验室前期开展了生物源抗植物病毒活性材料的筛选、活性成分的分离鉴定及其抗病毒机理研究，由微生物源材料中得到云芝糖肽对烟草花叶病毒和大麦黄矮病毒等具有较高的抑制活性。该云芝糖肽是从多孔菌科真菌云芝(Coriolus versicolor)Cov-1菌株的菌丝体中提取分离的高分子糖肽聚合物。该糖肽分子结构稳定，可通过云芝菌的发酵提取来大量获得，其发酵获取成本低、提取工艺简单且不受外界环境条件的限制。更重要的是，该糖肽为微生物源天然产物，具有对人畜安全、对植物无副作用、无残留和不易产生抗药性的特点，是农业生产上急需的低毒性、高活性的抗病毒物质，具有极大的产业化应用的潜力。

关于云芝糖肽的生物活性，前人认为该糖肽具有抗肿瘤和抗肝炎的作用，在抗植物病毒的活性及其作用机理方面，在国内外一直未见相关的研究报道。本实验室发现了它具有较高的抗植物病毒活性并进一步研究其抗病毒机理，发现云芝糖肽处理可显著提高拟南芥许多TIR-NBS-LRR受体蛋白基因、MAPK蛋白激酶基因、WRKY转录因子基因以及其它许多抗病相关基因的表达量，显著提高植物的抗病毒活性。

发明内容

本发明提供了一种云芝糖肽抗病毒制剂及其配制方法。

为了实现上述任务，本发明采用如下解决方案：

一种含云芝糖肽的抗病毒剂，其特征在于，该抗病毒剂由以下原料按重量百分比制成：云芝糖肽：8％-10％，表面活性剂：3-5％，稳定剂：2-3％，防腐剂：0.3-0.5％，抗冻剂：2-3％，余量为水，所有原料的重量百分比之和为100％。

所述的表面活性剂为烷基酚聚氧乙烯醚；

所述的抗冻剂为丙二醇或甲醇；

所述的稳定剂为液体钙锌；

所述的防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸其中一种；

上述抗病毒剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，将云芝孢子粉置于含有液体培养基的摇瓶，28℃左右震荡培养2天制成种子培养基，然后将种子培养基转接到含有液体培养基的发酵罐中，28℃左右发酵5天；

步骤二，将发酵液过40目筛后，滤出物干燥后使用粉碎机粉碎，过40目筛，制成粉末，过滤液则进行减压浓缩；

步骤三，将滤出物制成的粉末加25倍体积的水溶解，再加入1.2％的纤维素酶溶液，55℃酶解30min，再超声提取30min后过40目筛，将滤液减压浓缩；

步骤四，将步骤二和步骤三所得浓缩物合并，得到云芝糖肽，加入适量水溶解，按配方再加入表面活性剂、稳定剂、防腐剂、抗冻剂，最后加水补足到100％，即得到云芝糖肽抗病毒剂。

本发明所涉及的云芝糖肽制剂对多种植物病毒病具有防治效果，例如烟草花叶病毒病、小麦黄矮病毒病或水稻条纹叶枯病毒病等。此外，云芝糖肽对人畜和生态环境无毒害作用，是发展绿色、有机农业的理想生物农药。

具体实施方式

为了理解本发明，下面以实施例进一步说明本发明，但下述实施例并不限制本发明。

在以下实例中首先制备云芝糖肽，步骤如下：

步骤一，将云芝孢子粉置于含有液体培养基的摇瓶，28℃左右震荡培养2天制成种子培养基，然后将种子培养基转接到含有液体培养基的发酵罐中，28℃左右发酵5天；

步骤二，将发酵液过40目筛后，滤出物干燥后使用粉碎机粉碎，过40目筛，制成粉末，过滤液则进行减压浓缩；

步骤三，将滤出物制成的粉末加25倍体积的水溶解，再加入1.2％的纤维素酶溶液，55℃酶解30min，再超声提取30min后过40目筛，将滤液减压浓缩；

步骤四，将步骤二和步骤三所得浓缩物合并，得到云芝糖肽。

制备实施例1：10％云芝糖肽水剂的制备

称取10g云芝糖肽粉末溶解于适量水中，加入表面活性剂5g，稳定剂3g，防腐剂0.5g，抗冻剂3g，加水补足到100g，得到10％云芝糖肽水剂。

本实施例中表面活性剂选择烷基酚聚氧乙烯醚，抗冻剂为丙二醇，稳定剂为液体钙锌，防腐剂为山梨酸钾。

制备实施例2：8％云芝糖肽水剂的制备

称取8g云芝糖肽粉末溶解于适量水中，加入表面活性剂3g，稳定剂2g，防腐剂0.3g，抗冻剂2g，加水补足到100g，得到8％云芝糖肽水剂。

本实施例中表面活性剂选择烷基酚聚氧乙烯醚，抗冻剂为甲醇，稳定剂为液体钙锌，防腐剂为苯甲酸钠。