一种红豆蔻花精油的制备方法及其应用
阅读说明：本技术 一种红豆蔻花精油的制备方法及其应用 (Preparation method and application of galangal seed flower essential oil ) 是由 李仁� 于 2021-07-26 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种红豆蔻花精油的制备方法及其应用,属于化妆品领域。取红豆蔻花,加入适量超纯水,水蒸气蒸馏提取4小时,收集馏出液,分液后用无水硫酸钠干燥,获得红豆蔻花精油。将红豆蔻花精油按照添加量为0.01％-100％制备包括乳液类、膏霜类、面膜类、喷雾类、精华类、精油类、皂类的化妆品中。本发明研究发现,从红豆蔻花中蒸馏提取的天然植物精油,具有显著抑制金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌、红色毛癣菌、絮状表皮癣菌、石膏样小孢子菌的活性,显著抑制酪氨酸酶活性,特别在DPPH、ABTS和FRAP实验中均显示出优于玫瑰精油的抗氧化活性。将红豆蔻花精油用于制备乳液类、膏霜类、面膜、喷雾类、精华类、精油类、皂类等化妆品,具有显著的抑菌、美白和抗氧化功效。(The invention discloses a preparation method and application of galangal seed flower essential oil, and belongs to the field of cosmetics. Taking the galangal flower, adding a proper amount of ultrapure water, distilling and extracting for 4 hours by using steam, collecting distillate, separating liquid, and drying by using anhydrous sodium sulfate to obtain the galangal flower essential oil. The galangal seed flower essential oil is prepared into cosmetics including emulsions, creams, masks, sprays, essences, essential oils and soaps according to the addition amount of 0.01-100%. The research of the invention finds that the natural plant essential oil distilled and extracted from the red cardamom flower has the activity of obviously inhibiting staphylococcus aureus, candida albicans, trichophyton rubrum, epidermophyton floccosum and microsporum gypseum, and the activity of tyrosinase is obviously inhibited, and particularly shows the antioxidant activity superior to that of the rose essential oil in DPPH, ABTS and FRAP experiments. The galangal flower essential oil is used for preparing cosmetics such as emulsions, creams, masks, sprays, essences, essential oils and soaps, and has remarkable antibacterial, whitening and antioxidant effects.)
技术领域
本发明公开了一种红豆蔻花精油的制备方法及其应用，具体涉及一种具有抑菌、美白和抗氧化活性的红豆蔻花精油及其应用，属于化妆品领域。
背景技术
红豆蔻(Alpinia galanga(L.)Willd.)是姜科山姜属植物，广泛分布于亚洲热带地区。在中国分布于台湾、广东、广西和云南等省区，生长于海拔100-1300米的山野沟谷荫湿林下或灌木丛中和草丛中。红豆蔻果实供药用，称红豆蔻，有去湿、散寒、醒脾、消食的功用。根茎亦供药用，称大高良姜，味辛，性热，能散寒、暖胃、止痛，用于胃脘冷痛，脾寒吐泻。目前对于红豆蔻的研究主要聚焦在红豆蔻果实和块根的化学成分分析和相关药理活性研究上，关于红豆蔻花精油的研究未见任何报道。
精油又称挥发油、芳香油，是芳香植物含有的一类具有挥发性和脂溶性的油状物质。精油化学成分比较复杂，按结构可分为萜类化合物、芳香族化合物、脂肪族化合物、含硫含氮杂环化合物、有巨环内酯结构的特殊化合物。精油具有多种生理活性，包括抗菌、消炎、抗病毒、镇痛、抗肿瘤、驱蚊虫、促渗透、抗氧化等。因此，为了寻找红豆蔻精油的新用途，本发明开展了相关的研究。现有技术中未见红豆蔻精油在制备具有抑菌、美白和抗氧化作用的化妆品领域中的应用。
基于上述分析，本发明提供了一种添加红豆蔻精油的化妆品，使其具有抑菌、美白和抗氧化作用。
发明内容
针对上述技术问题，本发明提供一种具有抑菌、美白和抗氧化活性红豆蔻花精油及其应用。
本发明的目的通过以下技术方案实现：
一种红豆蔻花精油的应用，包括红豆蔻花精油在制备化妆品中的应用。
进一步的，所述化妆品具有抑菌、美白和抗氧化功效。
进一步的，所述化妆品包括但不限于：乳液类、膏霜类、面膜类、喷雾类、精华类、精油类、皂类。
进一步的，所述红豆蔻花精油采用水蒸气蒸馏法获得。
进一步的，所述红豆蔻花精油在化妆品中的添加量为0.01％-100％。
本发明还公开了一种化妆品，该化妆品中含有上述的红豆蔻花精油。
进一步的，所述化妆品含有0.01％-100％的红豆蔻花精油。
进一步的，所述化妆品具有抑菌、美白和抗氧化功效。
进一步的，所述的化妆品包括但不限于：乳液类、膏霜类、面膜类、喷雾类、精华类、精油类、皂类。
本发明的有益效果在于：
本发明提供了红豆蔻花精油在制备具有抑菌、美白和抗氧化功效的化妆品中的应用，为进一步探索红豆蔻花精油的功能和生物活性奠定了物质基础，为合理开发利用这一植物资源提供科学依据，并最终为推动具有抑菌、美白和抗氧化功效的化妆品的产业开发提供一种新的资源。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
水蒸气蒸馏制备红豆蔻花精油
取新鲜红豆蔻花，加入3倍量的超纯水，水蒸气蒸馏提取4小时，收集馏出液，用无水硫酸钠干燥后获得红豆蔻花精油，得率为0.05-0.1％。红豆蔻精油用棕色精油瓶装好后，存于4℃冰箱保存备用。
应用例1
红豆蔻花精油乳液的制备
按质量百分比计，吐温602％、甘油3％、星油藤油10％、EDTA二钠0.01％、乳木果油2％、丁二醇6.00％、红豆蔻花精油0.5％、其余为超纯水。乳液制备方法为行业内常规工艺，本应用例选用实施例1制得的红豆蔻花精油。
应用例2
红豆蔻花精油面膜的制备
按质量百分比计，甘油3％、聚乙二醇1％、丙二醇1％、星油藤油2％、卡波9411％水溶液15.00％、透明质酸钠0.10％、EDTA二钠0.01％、泛醇1.00％、红豆蔻花精油0.5％，其余为超纯水。面膜制备方法为行业内常规工艺，本应用例选用实施例1制得的红豆蔻花精油。
应用例3
红豆蔻花精油喷雾的制备
按质量百分比计，异丁烷5％、伏特加75％、甲氧基肉桂酸乙基己酯5％、甘油2％、透明质酸钠0.2％，红豆蔻花精油5％，其余为超纯水。精油喷雾制备方法为行业内常规工艺，本应用例选用实施例1制得的红豆蔻花精油。
应用例4
红豆蔻花精油皂的制备
按质量计，椰子油100g、甘油50g、星油藤油100g、乳木果油50g、氢氧化钠50g、超纯水150ml、红豆蔻花精油1g。精油皂制备方法为行业内常规工艺，本应用例选用实施例1制得的红豆蔻花精油。
试验例1
抑菌活性试验
金黄色葡萄球菌金黄亚种(Staphylococcus aureus subsp.aureus)购自中国普通微生物菌种保藏管理中心；白色念珠菌(Candida albicans)ATCC10231购自美国Microbiologics公司；絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)CBS 566.94、红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)ATCC4438、石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)CBS118893购自中国医学科学院医学真菌保藏中心。
(1)抗细菌实验
取96孔培养板，将待测样品进行稀释，各孔加入细菌菌液，终浓度为5×105CFU/mL；37℃培养24小时，酶标仪检测625nm吸光值。实验同时设置培养基空白对照、细菌对照以及头孢他啶、青霉素G钠阳性药对照。
(2)抗真菌实验
取96孔培养板，将待测样品进行稀释，各孔加入真菌菌液，终浓度为1×105CFU/mL(白色念珠菌)和5×105CFU/mL(丝状真菌)，白色念珠菌37℃培养24小时，丝状真菌25℃培养5天，酶标仪检测625nm吸光值。实验同时设置培养基空白对照、真菌对照以及两性霉素B、盐酸特比萘芬阳性药对照。最小杀菌浓度MIC90(90％minimum inhibitory concentration)按Reed&Muench法计算。
具体结果如表1所示：
表1红豆蔻花精油抑菌活性
菌种
MIC<sub>90</sub>(μg/mL)
金黄色葡萄球菌
230.501±1.053
白色念珠菌
485.184±5.258
红色毛癣菌
188.525±2.006
絮状表皮癣菌
12.36±0.257
石膏样小孢子菌
87.568±3.237
根据表1的试验结果，红豆蔻花精油通过显著的抑制金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌、红色毛癣菌、絮状表皮癣菌、石膏样小孢子菌的效果，由此推断出红豆蔻花精油具有良好的抑菌活性。
试验例2
抑制酪氨酸酶活性试验
将不同浓度待测样品与左旋多巴L-Dopa(终浓度1.25mM)混合，加入酪氨酸酶(终浓度25U/mL)开始反应，设定3个重复孔，同时设置不含药物的空白对照和曲酸Kojic Acid阳性对照，室温下反应5分钟后，在波长为490nm下，用酶标仪测定OD值。计算得到酪氨酸酶活性抑制率。
酪氨酸酶活性抑制率(％)＝(1-样品孔OD490nm/实验空白对照孔OD490nm)×100
具体结果如表2所示：
表2红豆蔻花精油抑制酪氨酸酶活性
样品
IC<sub>50</sub>(μg/mL)
曲酸Kojic Acid
4.835±0.258
红豆蔻花精油
31.159±0.481
根据表2的试验结果，红豆蔻花精油通过显著抑制酪氨酸酶活性，由此可见，红豆蔻花精油具备良好的美白功能。
试验例3
抗氧化活性试验
(1)DPPH自由基清除试验
在96孔板中加入100μL不同浓度样品提取液，再加入100μL的DPPH溶液(100umoL/L)，避光反应30分钟后，在517测定其吸光值，以无水乙醇作为空白对照，以VC作为阳性对照，检测提取物的抗氧化活性，每个浓度做3个重复，取其平均值。DPPH自由基清除率计算公式：
DPPH自由基清除率＝(D0-D1)/A0*100％
式中，D1为植物精油和DPPH溶液反应后的吸光度；
D0为无水乙醇和DPPH溶液反应后的吸光度。
(2)ABTS自由基清除试验
ABTS.+试剂由0.0384g ABTS和0.0060g过硫酸铵溶于10mL超纯水避光反应12-16h后生成，该溶液需提前1天配制，并且必须当天使用。使用前用无水乙醇稀释到吸光值在732nm处为0.70±0.02即可。取96孔板，将10μL不同浓度样品加到190μL ABTS·+溶液中，室温避光反应6min后，在732nm下酶标仪测定吸光值，每个样品重复实验3次，取其平均值。ABTS自由基清除率计算公式为：
ABTS自由基清除率＝(A0-A1)/A0*100％
式中，A1为植物精油和ABTS溶液反应后的吸光度；
A0为无水乙醇和ABTS溶液反应后的吸光度。
(3)FRAP铁离子还原能力试验
TPTZ溶液的配制：由0.3mol/L醋酸盐缓冲液25mL，10mmol/L TPTZ工作液2.5mL，20mmol/L FeCl3溶液2.5mL组成，现用现配。取96孔板，分别加入10μL不同浓度样品和180μLTPTZ溶液，混匀后37℃反应10min，在593nm处酶标仪测定吸光值，每个样品重复实验3次，取其平均值。采用Trolox作为标准品，精油样品的铁离子还原能力采用Trolox等量抗氧化能力TEAC(Trolox-Equivalent Antioxidant Capacity)来表示。
具体结果如表3所示：
表3红豆蔻花精油抗氧化活性
样品
DPPH IC<sub>50</sub>(mg/ml)
ABTS IC<sub>50</sub>(mg/ml)
FRAP TEAC(mM)
红豆蔻花精油
0.25
1.41
0.73
玫瑰花精油
0.53
4.34
0.19
注：自由基半数清除浓度IC50值越小，表示抗氧化活性越强；FRAP TEAC为红豆蔻花精油和玫瑰花精油在浓度为2.5mg/ml时Trolox等量抗氧化能力值,TEAC值越大抗氧化活性越强。
根据表3的试验结果，红豆蔻花精油在DPPH、ABTS和FRAP抗氧化试验中均显示出优于玫瑰花精油的抗氧化活性，显示其在抗氧化产品中良好的应用前景。
总之，本试验结果表明，将红豆蔻花精油应用于制备乳液类、膏霜类、面膜、喷雾类、精华类、精油类、皂类等化妆品中，具有显著的抑菌、美白和抗氧化功效。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
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