阅读说明：本技术 一种酰基胍类化合物及其制备方法与应用 (Acylguanidine compound and preparation method and application thereof ) 是由 陈蔚 穆帅 闫少杰 王浩 李树军 张慕军 雷勇胜 崔轶达 刘福景 孙靖 于玲丽 于 2020-07-27 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种具有式I结构的酰基胍类化合物及其药学上可接受的盐。本发明还公开了上述化合物的制备方法,并同时公开了以该化合物或其药学上可接受的盐作为活性有效成分的药物组合物,以及他们在预防或治疗与精氨酸加压素V1a受体、精氨酸加压素V1b受体、精氨酸加压素V2受体相关的疾病(如高血压、慢性充血性心力衰竭、抗利尿激素分泌紊乱综合症或慢性心力衰竭/肝硬化/抗利尿激素分泌紊乱引起的低钠血症)中的应用。(The invention discloses an acylguanidine compound with a structure shown in a formula I and pharmaceutically acceptable salts thereof. The invention also discloses a preparation method of the compound, and also discloses a pharmaceutical composition taking the compound or pharmaceutically acceptable salts thereof as active effective components, and application of the compound or pharmaceutically acceptable salts thereof in preventing or treating diseases (such as hypertension, chronic congestive heart failure, anti-diuretic hormone secretion disorder syndrome or hyponatremia caused by chronic heart failure/liver cirrhosis/anti-diuretic hormone secretion disorder) related to arginine vasopressin V1a receptor, arginine vasopressin V1b receptor and arginine vasopressin V2 receptor.)

一种酰基胍类化合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，更确切地说，是涉及一种具有酰基胍结构的化合物及其制备方法、含有它们的药物组合物和作为精氨酸加压素受体拮抗剂尤其是精氨酸加压素V₂受体拮抗剂的用途。

背景技术

精氨酸加压素（arginine vasopressin，AVP）是一种肽类激素，在调节游离水的重吸收、体液的渗透压、血液容积、血压、细胞收缩、细胞增殖和肾上腺皮质激素（ACTH）的分泌等方面扮演重要角色。精氨酸加压素通过V_1a，V₂，和V_1b三种受体亚型的调节而发挥作用。AVP受体亚型的分布和生理作用如下表所示：

表1 AVP受体亚型的分布和生理作用

AVP浓度的升高与产生不正常的水潴留的临床症状相关，如心力衰竭，肝硬化，抗利尿激素分泌过多综合征（SIADH），而且可能潜在的成为这些临床症状的发病机制和进展的原因。

众多试验证明，精氨酸加压素受体在充血性心力衰竭、肝硬化、抗利尿激素分泌紊乱综合症、高血压、低钠血症的发生、发展和治疗中有着重要作用。而许多有精氨酸加压素受体拮抗活性的药物是目前和未来治疗各种原因所致低钠血症的最佳选择，如托伐普坦等。但由于托伐普坦的水溶性低，肠道吸收不充分，剂型和给药途径受到许多限制。

发明内容

本发明的一个目的是提供式（I）化合物及其药学上可接受的盐。

本发明的另一个目的是提供式（I）化合物及其药学上可接受的盐的制备方法。

本发明还有一个目的是提供式（I）化合物及其药学上可接受的盐作为有效成分，以及含有一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的药用组合物，及其作为AVP受体拮抗剂，在治疗高血压、慢性充血性心力衰竭、抗利尿激素分泌紊乱综合症或慢性心力衰竭/肝硬化/抗利尿激素分泌紊乱引起的低钠血症中的应用。特别是在制备预防或治疗高血压药物方面的应用；其中所述的预防或治疗高血压指的是式（I）化合物可以结合精氨酸加压素受体，从而产生拮抗作用，表现利尿活性。

本发明的酰基胍类化合物具有下述结构式：

式（I）化合物的MS图谱见附图1。

式（I）化合物具有胍基，因此可以和有机酸和无机酸成盐，包括但不限于盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐、氨基酸盐。

式（I）化合物可以通过下面的方法制得：

在溶剂中，化合物（II）和化合物（III）通过酯化反应得到化合物（IV），化合物（IV）继续和化合物（III）反应，得到式（I）化合物。

上述溶剂为乙腈、丙酮、二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、甲苯、吡啶、二氧六环，缩合过程使用缩合剂，如二环己基碳二亚胺（DCC）、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐（EDCI），或者先将化合物（III）用氯化亚砜或者草酰氯转化为对应的酰氯，再进行反应。

上述两步反应可以使用“一锅法”，在同一反应体系中实现。

上述化合物（III）市售品通常为盐酸盐的形式，不影响本反应的进行。

得到的式（I）化合物可以悬浮或者溶解在溶剂中，滴加上面所述的有机酸或者无机酸成盐。所述成盐溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、水、乙酸乙酯、乙腈、丙酮、二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、甲苯、吡啶、二氧六环、***、异丙醚、甲基叔丁基醚。

式（I）化合物也可以通过下面的方法制得：

在溶剂中，化合物（III）通过酰胺化反应得到化合物（V），化合物（V）继续和化合物（II）反应，得到式（I）化合物。

上述溶剂为乙腈、丙酮、二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、甲苯、吡啶、二氧六环，缩合过程使用缩合剂，如二环己基碳二亚胺（DCC）、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐（EDCI），或者先将其中二分之一的化合物（III）用氯化亚砜或者草酰氯转化为对应的酰氯，再进行反应。

上述两步反应可以使用“一锅法”，在同一反应体系中实现。

上述化合物（III）市售品通常为盐酸盐的形式，不影响本反应的进行。

得到的式（I）化合物可以悬浮或者溶解在溶剂中，滴加上面所述的有机酸或者无机酸成盐。所述成盐溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、水、乙酸乙酯、乙腈、丙酮、二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、甲苯、吡啶、二氧六环、***、异丙醚、甲基叔丁基醚。

尽管本发明的化合物可以不经任何配制直接给药，但所述的各种化合物优选以药物制剂的形式使用，给药途径可以是非肠道途径( 如静脉、肌肉给药) 及口服给药。

本发明化合物的药物组合物制备如下：使用标准和常规的技术，使本发明化合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸等等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液例如注射剂、粉剂等等。

药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份( 本发明化合物) 的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围内调节。通常，活性化合物的量范围为组合物的0.5 ～ 90％ ( 重量)，另一优选的范围为0.5 ～ 70％。

溶解度研究表明，式（I）化合物的盐酸盐、硫酸盐和甲磺酸盐在水中微溶，具有良好的制剂潜能。同时，式（I）化合物虽然在水中难溶，但是，在酸性水溶液中，其溶解度显著增加，提示其在胃中的溶解和吸收具有一定的优势。

放射性配体结合实验的操作如下：

将Uni-filter 96 GF/C过滤板用100 μL/孔0.5% PEI（Polyethyleneimine，Sigma-Aldrich, Cat. No.# 408727，溶解于milli-Q水）浸泡，置于4℃下大约30-60min。用真空抽滤装置（8-15 mmHg）吸走板中的PEI，再用4℃洗脱缓冲液按1 mL/孔洗去残留PEI。在24孔板中配制含有膜蛋白、氚标配体和未标配体的反应体系，25℃时转速350 RPM条件下孵育2小时。将反应体系转入滤板（8-15 mmHg），用冷却的洗脱缓冲液按2 mL/孔洗涤滤板，然后室温下吹干120 min。用Bottom sealTM（不透明，Perkin elmer）封口膜贴于板底。每孔加入50 µL MicroScint 20TM （Perkin elmer）。在板上贴以封口膜Topseal A （Perkin elmer），在TopCount NXT上按1分钟/孔计数。

大鼠利尿作用实验操作如下：雄性SD大鼠（BW 260±20g）饲养于代谢笼中，环境恒温，湿度为60-80%，自由饮水及光照（明暗周期约12h），实验前禁食12h。将上述雄性SD大鼠，随机分组（包括一个空白对照组和一个阳性对照组），每组5只，口服灌胃给药（10mg/kg）。阳性对照组分别以托伐普坦和利希普坦给药，空白对照组仅以相同量的溶媒灌胃，实验组以供试目标化合物给药。大鼠于代谢笼中饲养，收集自发性尿。给药前用生理盐水灌胃（5%BW），以增加水负荷。记录各组中0~20 h尿量。

表2 活性研究结果

配体结合实验表明，式（I）化合物对AVP V₂受体具有极强的亲和力，同时对V_1a的亲和力较弱，具有一定的选择性。动物实验结果显示，与对照组相比，该类化合物有明显的利尿作用。该实验进一步表明了式（I）化合物可以结合精氨酸加压素受体，从而产生拮抗作用，在动物实验中也发现了尿量增加，表现出一定的利尿活性，从而降低体内液量负荷，降低血压。在尿量增加的同时，但几乎没有尿钠增加或尿钾增加。因此，式（I）化合物同时对低钠血症具有一定的纠正效果。

大鼠左冠拮扎, 造成左室大面积梗死, 存活5 周, 行左心室、股动脉、股静脉插管, 测定其平均血压( MBP) 、心率( HR) 、左心室压峰值( LVSP) 、左室舒张末期压(LVEDP) 、左室内压最大上升速率( + dp / dt ) , 左室内压最大下降速率( - dp /dt )。大鼠随机分为两组，一组为给式（I）化合物，口服灌胃给药（10mg/kg），另一组为给等量的空白溶剂。研究结果表明该化合物对大鼠的平均血压有一定的降低作用，心肌的收缩、舒张功能得以改善, 对充血性心衰有一定的治疗作用。给药5周后测定相关数据如下表所示：

表3 大鼠心衰模型研究结果

以上临床前体内和体外实验表明，该化合物具有精氨酸加压素受体拮抗活性，同时又具有利尿作用，但不影响钠和钾的代谢，从而能够纠正低钠血症。而且该化合物对心力衰竭（CHF）大鼠具有一定的治疗效果，从而纠正高血压和心力衰竭。

此外，很多文献已经报道，具有精氨酸加压素受体拮抗作用的化合物有预防或治疗高血压、雷氏综合症、痛经、早产、促肾上腺皮质激素释放激素分泌紊乱、肾上腺增生、抑郁症、慢性充血性心力衰竭、肝硬化、抗利尿激素分泌紊乱综合症或慢性心力衰竭/肝硬化/抗利尿激素分泌紊乱引起的低钠血症等疾病的潜在用途。所以，该化合物具有显著的药用价值。

附图说明

图1为1式（I）化合物的MS图谱；

图2为本发明酰基胍类化合物（I）结构式图。

具体实施方式

下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。本发明所用原料及试剂均有市售。其中化合物（II）、化合物（III）购买于北京伊诺凯科技有限公司，EDCI有市售。

实施例1

在反应瓶中加入化合物（II）30g，乙腈500ml，化合物（III）27g，EDCI（1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐）共29g，升温至回流，反应5h。反应完毕，蒸干，得到油状物。加水500ml，剧烈搅拌，过滤得到式（IV）化合物粗品。粗品采用快速制备色谱纯化，得到化合物（IV）38.2g。

上述式（IV）化合物，加入乙腈500ml中，加入化合物（III）27g，EDCI共29g，升温至回流，反应48h。反应完毕，蒸干，得到油状物。加水500ml，剧烈搅拌，过滤得到式（I）化合物粗品。粗品采用快速制备色谱纯化，得到化合物（I）45.5g。¹H NMR：8.11(d, 2H, J=8.8Hz),7.96(d, 2H, J=8.4Hz), 7.85(d, 2H, J=84Hz), 7.39(d, 2H, J=8.4Hz), 7.23(dd, 2H,J=2Hz, 6.4Hz), 6.84(d, 2H, J=8.4Hz), 5.44(br s), 4.82(s, 2H), 3.81(s, 2H),2.91(s, 3H), 2.91(s, 3H)。ESI-MS ：560.3。

实施例2

在反应瓶中加入化合物（II）30g，甲苯500ml，EDCI共58g，升温至回流，分两批加入化合物（III）54g，反应9h。反应完毕，蒸干，得到油状物。加水1000ml，剧烈搅拌，过滤得到式（I）化合物粗品。粗品采用快速制备色谱纯化，得到化合物（I）49.3 g。¹H NMR：8.11(d, 2H, J=8.8Hz), 7.96(d, 2H, J=8.4Hz), 7.85(d, 2H, J=84Hz), 7.39(d, 2H, J=8.4Hz), 7.23(dd, 2H, J=2Hz, 6.4Hz), 6.84(d, 2H, J=8.4Hz), 5.44(br s), 4.82(s, 2H), 3.81(s, 2H), 2.91(s, 3H), 2.91(s, 3H)。ESI-MS ：560.3。

实施例3

在反应瓶中加入100ml氯化亚砜、27g化合物（III），回流搅拌4h，蒸干，用甲苯夹带，除去氯化亚砜。加入500ml二氯甲烷，27g化合物（III），回流反应12h。蒸干，得到油状物（V），不加处理继续下一步反应。

将上面得到的（V）溶液四氢呋喃，加入化合物（II）30g，EDCI共29g，回流48h，停止反应，蒸干后加入1000ml水剧烈搅拌，过滤得到式（I）化合物粗品。粗品采用快速制备色谱纯化，得到化合物（I）52.8 g。¹H NMR：8.11(d, 2H, J=8.8Hz), 7.96(d, 2H, J=8.4Hz),7.85(d, 2H, J=84Hz), 7.39(d, 2H, J=8.4Hz), 7.23(dd, 2H, J=2Hz, 6.4Hz), 6.84(d, 2H, J=8.4Hz), 5.44(br s), 4.82(s, 2H), 3.81(s, 2H), 2.91(s, 3H), 2.91(s,3H)。ESI-MS ：560.3。

实施例4：

将式（I）化合物悬浮于丙酮中，滴入甲磺酸，调节pH至2左右，室温搅拌1h，过滤，得到式（I）化合物的甲磺酸盐。

实施例5：

将式（I）化合物悬浮于N,N-二甲基甲酰胺中，滴入冰醋酸，调节pH至3左右，室温搅拌1h，溶解，降温至-5~5℃析晶2h，过滤，得到式（I）化合物的醋酸盐。

实施例6：

用下述成分制备片剂：

制备工艺：将原辅料预先干燥，过80目筛备用。先将处方量的辅料充分混匀。将原料药以递增稀释法加到辅料中，每次加时充分混匀2～3次，保证药与辅料充分混匀，过20 目筛，在60℃通风烘箱中干燥1h，干颗粒过16目筛整粒，混合均匀，在压片机上压片。

实施例7

用下述成分制备注射剂：

制备方法：取活性成分加入到已溶解聚山梨酯和丙二醇的注射用水中，加入药用碱调节pH 值至4 ～ 8 使其溶解。精滤、灌封、灭菌即得。