具体实施方式

酒泥提取物中含有较多的天然活性成分，但是，这些物质大都有水溶性差、刺激性强和稳定性低等问题。液晶作为一种良好的载体，不仅可以提高水溶性酚类物质的溶解度，而且可以保护活性成分，解决其稳定性差的问题。液晶面膜中存在的十字形晶体结构，在一定程度上可以对使用时酒泥中活性成分的释放速度进行调控，同时还可以减少其与皮肤长时间直接接触产生的刺激性。其将天然成分与新材料相结合，可以最大限度地发挥抗氧化作用，抑制氧化引起的皮肤老化，改善肌肤微环境。

术语“抗氧化”是指由于细胞内代谢或紫外光引起的氧化应激产生的高活性自由基或活性氧对细胞氧化的抑制作用，包括去除自由基或活性氧，从而减少细胞损伤。人工合成的抗氧化剂虽然具有较高的抗氧化活性，但由于其存在安全的不确定性以及加工稳定性的问题，它们的使用受到了限制。当天然抗氧化剂成分被应用于化妆品时，如果化妆品中天然成分含量过低，难以获得足够的抗氧化效果。另一方面，高浓度的抗氧化成分，如果短时间内停留在皮肤上，可能造成皮肤局部抗氧化剂成分相对浓度过高的现象，而在皮肤上停留很长一段时间的话，可能会出现瘙痒，皮疹和过敏等不良反应。虽然目前有许多产品包含了酒泥中的提取物，但仍然存在利用率不高和制备工艺复杂的问题。

液晶在学术研究中被认为是一种处于液体与晶状固体之间的稳定形态，即第四态物质。液晶既具有像液体一样的流动性，也像晶体一样具有双折射性。在W/O/W型乳化体系中液晶的存在能够增加稳定性、延长水合性能和缓释有效成分；液晶非常容易在配方中形成，所得到的W/O/W型乳化体系具有较为清爽的肤感并且可以提高活性物质的溶解度，另外液晶与皮肤具有相似的结构，对皮肤有良好的亲和力和渗透性。因此，运用液晶结构来解决天然抗氧化成分局部浓度过高造成的不良反应，使活性成分均匀分布在面膜液中，既可以获得较强的保湿效果，又能缓慢释放酒泥中多种活性成分深入表皮。

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明提供一种含有酒泥提取物的液晶乳霜类面膜，所述面膜含有3％的酒泥提取物复配液，17.75％的液晶面膜基质，其余为去离子水。

其中液晶面膜基质包括以下的原料：卵磷脂2份、胆固醇2份、霍霍巴油5份、十八醇1～2份、甘油4.5份、丙二醇1.4份、透明质酸0.1份、吐温-80 0.5-1.3份、对羟基苯甲酸乙酯0.1～0.2份、三乙醇胺0.5份～1份、一水合柠檬酸0.3份、海藻酸钠0.1份～0.3份、卡波姆940 0.5份～1份、酒泥提取物复配液3份、香精适量、去离子水添加至100份。

其中酒泥提取物复配液由酒泥提取物、L-抗坏血酸、维生素E油复配而成，其质量比为10：1：20。

上述酒泥提取物复配液为赤霞珠酒泥提取物。

一种含有酒泥提取物的液晶乳霜类面膜的制备方法，步骤为：

1)按处方量称取油相(卵磷脂、胆固醇、霍霍巴油、吐温-80)和水相(十八醇、海藻酸钠、卡波姆940、甘油、丙二醇、透明质酸)原料于烧杯中；

2)将油相和水相分别置于水浴锅中加热到85℃，在400r/min的揽拌速度下，将少量加热至85℃的水加入其中，维续加热搅拌，至体系均一，形成液晶包油的胶状乳液

3)使用均质机，在16000rpm转速下均质液晶包油的胶状乳液，将水相加入到含液晶包油的胶状乳液中，均质时间为3min；

4)继续在400r/min转速条件下机械搅拌30min，使样品冷却至40℃以下后加入三乙醇胺和酒泥提取物复配液；

5)加入对羟基苯甲酸乙酯和香精，用一水合柠檬酸调节pH值，最后加入去离子水至100％，相同转速下继续搅拌20min至室温即可制得液晶结构乳状面膜液；

6)面膜静止过夜，脱去气泡，辐照灭菌后灌装。

上述酒泥提取物提取方法采用超声波辅助有机溶剂提取法，具体提取方法为取新鲜酒泥，3500r/min离心20min，将沉淀物放入40℃的烘箱内充分干燥，粉碎，过100目筛，称取酒泥粉末，加50％乙醇-水溶液混合，用1％的柠檬酸溶液调节pH值至3，置于超声波清洗机，在超声功率500W、温度为50℃条件下超声辅助提取60min，然后离心过滤，减压浓缩后，再干燥至恒重即可得酒泥提取物。

提取的最佳条件为：乙醇-水溶液浓度为50％，超声时间50min，超声温度50℃。

酒泥粉末与50％乙醇-水溶液的质量比为1：20。

赤霞珠酒泥有效成分提取工艺优化

本发明采用超声波辅助有机溶剂提取，采用L9(3⁴)正交试验设计方案，分别考察500W超声功率条件下不同料液比、超声时间、提取温度和有机溶剂乙醇-水溶液的浓度对总酚和总黄酮提取量的影响，以提高葡萄酒酒泥提取物中活性成分含量。按正交设计表进行试验，因素水平见表1，实验结果见表2，方差分析结果见表3。

表1正交试验因素水平表

表2正交实验结果

表3方差分析

由正交试验结果表2可知，超声波辅助有机溶剂法提取总黄酮最优实验方案为A₁B₂C₃D₁，而提取总酚最优工艺为A₃B₂C₃D₁，故对两种组合组合进行验证，正交试验验证结果见表4。

表4正交试验验证

赤霞珠酒泥与L-抗坏血酸、维生素E油的协同抗氧化效应

研究复配体系的抗氧化活性通常以单一体系清除DPPH的IC50值为参照，本文以赤霞珠酒泥提取物的质量浓度为0.01mg/L为基准(约为IC50值的二分之一)，在控制酒泥提取物质量浓度不变的前提下，设置酒泥提取物与L-抗坏血酸、维生素E油不同质量比，计算出酒泥提取物协同L-抗坏血酸、维生素E油抗氧化作用，即复配溶液清除DPPH能力和协同系数，见表5。

表5复配液清除DPPH自由基实验结果

注：协同系数(SE)取决于各体系得到ESC与理论计算的清除率(TSC)之间的比值，即：SC＝ESC/TSC

理论清除率(TSC)的计算公式如下：

TSC/％＝(ESC₁+ESC₂)－(ESC₁×ESC₂)/100

ESC₁、ESC₂分别为酒泥提取物和其他活性成分单一溶液的实验清除率。当协同系数＞1，说明复配液之间有一定的协同作用；当协同系数＜1，说明没有明显的协同效果。

液晶面膜基质配方

在前期单因素实验的基础上，选择卵磷脂、霍霍巴油、胆固醇、三乙醇胺、卡波姆940、保湿剂和吐温-80作为试验因素，以保湿率为因变量，设计七因素三水平的正交试验。面膜见图1。

表6因素水平表

本发明所制备的面膜性能测试

保湿性能和缓性能的测试选用体外实验。本实验将1.0g面膜涂布在医用胶带上，放入含有变色硅胶的干燥器内。将测定时间定为20min，称重计数，然后计算不同配方的面膜液的保湿率。体外缓释实验结果见图2。

表7体外保湿率实验结果

本发明所制备的面膜抗氧化能力测试

本试验将从抗氧化方面进行探究，对以酒泥提取物为原料的天然面膜进行抗氧化研究，分别测定了酒泥液晶面膜的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和羟自由基清除能力。试验结果见图3、图4、图5。本发明的天然活性成分通过抑制氧化引起的皮肤损伤，促进胶原生成或抑制基质金属蛋白酶1(MMP^-1)的生物合成，从而改善皮肤状态，增加皮肤弹性，提供抗氧化作用。

本发明所制备的面膜美白性能测试

以L-酪氨酸为底物，取1.5mL，5mmol/L酪氨酸溶液于试管中，加入3.1mL PBS磷酸缓冲液(pH＝6.8)，在30℃水浴中恒温10min，加入0.2mL试样和0.2mL 0.5g/L酪氨酸酶溶液，反应20min，475nm处测其吸光度为A_样品，底物和酪氨酸酶的反应物为吸光度为A_对照，只有底物的吸光度为A₁，底物加样品的吸光度为A₂。实验结果见图6。

人类皮肤的颜色取决于黑色素的含量和分布。黑色素的合成始于前体L-酪氨酸，通过酪氨酸酶的作用转化为第二前体多巴醌。黑色素的合成发生在黑色素小体中，黑色素小体存在于表皮基底层的黑色素细胞中，这些细胞中黑色素的合成是由紫外线诱导的。黑色素合成后迁移到表皮细胞，并分散在其中。黑色素在皮肤代谢后被脱色，然后以污垢的形式在表皮细胞更新时被排出体外。高含量的黑色素会导致皮肤变暗，而不均匀的分布会产生黄褐斑和雀斑。由于黑色素的合成涉及氧化反应，所以抗氧化剂阻断从酪氨酸到黑色素的各个阶段的氧化最终抑制黑色素的合成。例如，L-抗坏血酸在黑色素中间体上起还原剂的作用，通过阻止氧化反应来达到美白的功效。

本发明液晶面膜物性学特征

7.1液晶面膜流变特性

采用DHR-1旋转流变仪测定面膜的流变性质。测量夹具选择直径40mm的珀尔帖板钢锥板，测量温度在振荡测量过程中的最大允许偏差±0.1℃。频率1.0Hz和实验温度(25℃)下开始测量，先对样品进行应力扫描，确定体系线性黏弹性区，选择线性黏弹区内一个固定应力值，在0.08rad/s～200rad/s频率范围内对样品进行频率扫描。液晶面膜的流变特性曲线见图7。

由液晶面膜的流变特性曲线可知，粘度随剪切速率的变化曲线表明了随着剪切速率的增加，粘度均急剧下降，证明了液晶面膜具有良好的高剪切变稀性能，因为液晶结构的存在使得面膜肤感优良，易于铺展，粘度较高，稳定性良好；由粘弹性曲线可以得到，在应变较小时，液晶面膜的G'>G"，弹性模量大于粘性模量，说明液晶面膜稳定性良好，随着剪切应变增加，液晶面膜的G'<G"，粘性模量大于弹性模量，液晶面膜流动性良好，在涂抹时容易铺展，液晶面膜具有非常突出的肤感优良的特质。

7.2液晶面膜偏光显微镜观察实验结果

使用具有数码相机LECIA DM6 B03040108自动荧光显微镜的偏光镜观察面膜液的液晶分布情况，偏振光用于识别暗场下的液晶相。将样品置于载物台，通过调整粗准焦螺旋和细准焦螺旋使物象清晰，并调整偏振片观察样品在亮场和暗场条件下的结构，对样品进行拍照。实验结果见图8。

如图8所示，当基质配方合理的情况下，面膜中形成了层状液晶相。亲水基伸向水中，疏水基相互聚集，分子排列更加有序，具有各向异性的特征，因此在显微镜下可以清晰的观察到十字状液晶。

以上公开的仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以上述权利要求的保护范围为准。