阅读说明：本技术 一种桑叶茶香料及其提取方法和应用 (Mulberry leaf tea spice and extraction method and application thereof ) 是由 高阳 张丽娜 许利平 王辉 徐清泉 吴兆明 刘崇盛 于 2020-05-21 设计创作，主要内容包括：本发明属于桑叶茶深加工领域,尤其涉及一种桑叶茶香料的提取方法,包括：将桑叶茶粉碎过筛后浸泡于乙醇水溶液搅拌均匀,再进行深冷冻超微粉碎,得到的产物经过超声提取后离心,收集上清液；所述上清液加入N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶进行酶解,得酶解产物；所述酶解产物进行真空蒸馏收集馏分,冷却后依次经破乳、萃取、浓缩及烘干后即得。本发明方法不仅实现了不使用或少使用有毒的有机溶剂,同时还提高了提取效率和回收率,并增加了产品香气感官品质和香气成分浓度。(The invention belongs to the field of deep processing of mulberry leaf tea, and particularly relates to a method for extracting mulberry leaf tea spice, which comprises the following steps: crushing and sieving mulberry leaf tea, soaking the mulberry leaf tea in an ethanol water solution, uniformly stirring, deep-freezing and micronizing, performing ultrasonic extraction on the obtained product, centrifuging, and collecting supernatant; adding N-acetyl-beta-D glucosaminidase into the supernatant for enzymolysis to obtain an enzymolysis product; and (3) carrying out vacuum distillation on the enzymolysis product to collect fractions, cooling, and then sequentially carrying out demulsification, extraction, concentration and drying to obtain the enzymatic hydrolysate. The method of the invention not only realizes no use or little use of toxic organic solvent, but also improves the extraction efficiency and the recovery rate, and increases the sensory quality of the aroma and the concentration of the aroma components of the product.)

一种桑叶茶香料及其提取方法和应用

技术领域

本发明属于桑叶茶深加工技术领域，尤其涉及一种桑叶茶香料的提取方法。

背景技术

桑叶是卫生部认可的药食同源植物资源之一；其富含生物碱、糖类、矿物质元素、各种氨基酸、酚类化合物、生物活性成分等。桑叶茶主要参照普通茶叶加工工艺加工而成，利用更薄桑叶制成桑叶茶后更容易溶解有效成分。此外，桑叶茶加工成本低，是桑叶保健品的主要形式之一。桑叶茶具有清热解毒、降血压、利尿、润肺止咳、降血糖、降血脂、减肥降脂、预防动脉硬化的功效，具有一定的保健作用。桑叶茶不含咖啡因，也是老少咸宜的健康饮品。然而，由于桑叶和普通茶的成分不同，加工后的桑叶茶冲泡的茶汤色泽较暗，容易有青涩味和豆腥味，在一定程度上限制了桑叶茶的开发和推广(《一种陈皮桑叶茶及其生产方法》，专利号：201611090670.2；《一种保健桑叶茶的制备方法》，专利号：201510582142.8；《一种桑叶茶及其生产工艺》，专利号：201310725726.7；《一种保健桑叶茶的制备方法》，专利号：201510582142.8；《一种纯天然杜仲雄花桑叶茶及其制备方法》，专利号：201510445325.5)。

目前拓展桑叶茶利用的途径之一就是将其制备成香料，目前国内桑叶茶香料的提取方法主要有传统的水蒸汽蒸馏法、有机溶剂萃取法及酶处理方法等。目前，提取烟用香料领域的桑叶茶香料的传统方法普遍存在着诸多缺点，如：效率低、回收率低、溶剂残留多，以及高温引起热敏性成分的破坏，从而导致产品香气感官品质下降或涩味明显。因此，亟待研发出一种新型桑叶茶香料的提取方法，总而提高提取效率以及产品品质。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种桑叶茶香料的提取方法，不仅实现了不使用或少使用有毒的有机溶剂，同时还提高了提取效率和回收率，并增加了产品香气感官品质和香气成分浓度。

本发明提供了一种桑叶茶香料的提取方法，包括如下步骤：

(1)前处理：将桑叶茶粉碎过筛后浸泡于乙醇水溶液搅拌均匀，再进行深冷冻超微粉碎，得到的产物经过超声提取后离心，收集上清液；

(2)酶解：所述上清液加入N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶进行酶解，得酶解产物；

(3)后处理：所述酶解产物进行真空蒸馏收集馏分，冷却后依次经破乳、萃取、浓缩及烘干后，得所述桑叶茶香料。

本发明方法所述的桑叶茶的原料来源可选自江苏宜兴本地的大叶桑，其富含氨基酸类物质(18.6％)及糖类物质(47.2％)。

优选地，采用桑叶菊花粉茶作为混合原料，避免了后期处理带入涩味，减少溶剂残留以及增加产品香气感官品质和香气成分浓度。

优选地，所述过筛后得到的产物粒径为200～400目。

优选地，所述过筛后得到的产物与所述乙醇水溶液的质量比为1:(30～70)，所述乙醇水溶液的体积浓度为70～80％。

优选地，所述深冷冻超微粉碎的功率为50～150kW，所述深冷冻超微粉碎的次数为1～3次。

优选地，所述超声提取的功率为300～800W，所述超声提取的时间为1～3小时。

优选地，所述离心的转速为11000～13000rpm，所述离心的时间为25～35min。

优选地，所述N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶与所述桑叶茶的质量比为(0.005～0.02):1。

优选地，所述酶解的pH为5.5～6.5，所述酶解的时间为2.5～3.5h，所述酶解的温度为40～60℃。

优选地，所述真空蒸馏的压力为0.01MPa，所述真空蒸馏的时间为2.5～3.5h。

优选地，所述萃取的溶剂为乙醚，所述萃取的次数为1～3次。

本发明的提取过程在上述优选条件的协同作用下，能最大限度的提高香料的提取效率，同时最大限度的增加产品的香气感官品质和香气成分浓度。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明利用无毒的乙醇水溶液进行提取，并用低沸点的乙醚进行萃取，可以有效地减少溶剂残留；同时，本发明利用特定的酶进行酶解，极大的提高了香料的提取效率；另外，酶解的加热温度仅为50oC，还减少了高温过高造成的热敏性成分的丧失，从而可以起到增加产品香气感官品质和香气成分浓度的效果。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

为了更详细说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种桑叶茶香料的提取方法进行具体地描述，下列实施例所用原料桑叶茶购自江苏宜兴农贸市场，其富含氨基酸类物质(18.6％)及糖类物质(47.2％)。

实施例1

称量桑叶茶100.0g，用超微粉碎机进行初步粉碎后过筛，得到粒径为300目的第一产物A。将第一产物A溶解于4000.0g体积浓度为75％的乙醇水溶液中，浸泡搅拌后，用功率为100kW深冷冻超微粉碎机粉碎，循环次数为2次，得第二产物A。将第二产物A在600W的超声功率下提取2h后，12000rpm下离心30分钟，取上清液，得第三产物A。向第三产物A中添加1.0g的N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶，调节pH为6.0，并在50℃温度条件下酶解3h，得第四产物A。将第四产物A在0.01MPa条件下真空蒸馏3h，收集馏分并在液氮冷阱中冷却，得第五产物A。向第五产物A中添加10.0gNaCl破乳，用乙醚萃取3次，每次使用乙醚100ml，收集上层精油部分，真空浓缩，在40℃的烘箱中烘至恒重即得。

本实施例制得桑叶茶香料A的质量为3.66g，桑叶茶香料A的产率为3.66％。均高于以传统乙醚索氏提取法得到的桑叶茶香料Y的产率1.26％以及传统水蒸气蒸馏提取法得到的桑叶茶香料Z的产率1.14％。

实施例2

称量桑叶茶100.0g，用超微粉碎机进行初步粉碎后过筛，得到粒径为200目的第一产物B。将第一产物B溶解于3000.0g体积浓度为75％的乙醇水溶液中，浸泡搅拌后，用功率为50kW深冷冻超微粉碎机粉碎，循环次数为2次，得第二产物B。将第二产物B在300W的超声功率下提取2h后，12000rpm下离心30分钟，取上清液，得第三产物B。向第三产物B中添加2.0g的N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶，调节pH为6.0，并在50℃温度条件下酶解3h，得第四产物B。将第四产物B在0.01MPa条件下真空蒸馏3h，收集馏分并在液氮冷阱中冷却，得第五产物B。向第五产物B中添加10.0gNaCl破乳，用乙醚萃取3次，每次使用乙醚100ml，收集上层精油部分，真空浓缩，在40℃的烘箱中烘至恒重即得。

本实施例制得桑叶茶香料B的质量为3.15g，桑叶茶香料B的产率为3.15％。均高于以传统乙醚索氏提取法得到的桑叶茶香料Y的产率1.26％以及传统水蒸气蒸馏提取法得到的桑叶茶香料Z的产率1.14％。

实施例3

称量桑叶茶100.0g，用超微粉碎机进行初步粉碎后过筛，得到粒径为400目的第一产物C。将第一产物C溶解于6000.0g体积浓度为70％的乙醇水溶液中，浸泡搅拌后，用功率为150kW深冷冻超微粉碎机粉碎，循环次数为2次，得第二产物C。将第二产物C在800W的超声功率下提取3h后，12000rpm下离心30分钟，取上清液，得第三产物C。向第三产物C中添加0.5g的N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶，调节pH为6.0，并在50℃温度条件下酶解3h，得第四产物C。将第四产物C在0.01MPa条件下真空蒸馏3h，收集馏分并在液氮冷阱中冷却，得第五产物C。向第五产物C中添加10.0gNaCl破乳，用乙醚萃取3次，每次使用乙醚100ml，收集上层精油部分，真空浓缩，在40℃的烘箱中烘至恒重即得。

本实施例制得桑叶茶香料C的质量为2.87g，桑叶茶香料C的产率为2.87％。均高于以传统乙醚索氏提取法得到的桑叶茶香料Y的产率1.26％以及传统水蒸气蒸馏提取法得到的桑叶茶香料Z的产率1.14％。

实施例4

称量桑叶茶100.0g，用超微粉碎机进行初步粉碎后过筛，得到粒径为200目的第一产物D。将第一产物D溶解于7000.0g体积浓度为80％的乙醇水溶液中，浸泡搅拌后，用功率为80kW深冷冻超微粉碎机粉碎，循环次数为2次，得第二产物D。将第二产物D在400W的超声功率下提取1h后，12000rpm下离心30分钟，取上清液，得第三产物D。向第三产物D中添加1.0g的N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶，调节pH为6.0，并在50℃温度条件下酶解3h，得第四产物D。将第四产物D在0.01MPa条件下真空蒸馏3h，收集馏分并在液氮冷阱中冷却，得第五产物D。向第五产物D中添加10.0gNaCl破乳，用乙醚萃取3次，每次使用乙醚100ml，收集上层精油部分，真空浓缩，在40℃的烘箱中烘至恒重即得。

本实施例制得桑叶茶香料D的质量为2.54g，桑叶茶香料D的产率为2.54％。均高于以传统乙醚索氏提取法得到的桑叶茶香料Y的产率1.26％以及传统水蒸气蒸馏提取法得到的桑叶茶香料Z的产率1.14％。

实施例5

桑叶茶香料的香气感官评价及香气成分总浓度测定采用《YC/T138-1998烟草及烟草制品感官评价方法》及《YC/T 145.9-2012烟用香料挥发性成分总量》方法进行；桑叶茶香料中伞形花内酯、东莨菪素、羟基香豆素、缬草酸、愈创木酚和丁香油酚的浓度采用GC/MS方法进行测定，色谱毛细管柱为PEG-20M柱(柱长30m，内径0.25mm；液膜厚度0.25μm)；载气为He，流速1.0mL/min；不分流；程序升温，起始温度30℃，保持3min，以10℃/min的速率升温到45℃，然后以4℃/min的速率升温到120℃，最后以12℃/min的速率升温到240℃，保持5min；汽化室温度250℃。质谱条件：EI电离源，电子能量70eV，灯丝发射电流为200μA，离子源温度为200℃，接口温度250℃，检测器电压350V，扫描质量范围为33-450amu。

现将实施例制备得桑叶茶香料与桑叶茶香料Z比较的香气感官评价、香气成分总浓度以及特征成分相对值的实验结果列于下表1中，桑叶茶香料Y购于浙江杭州古茗茶叶有限公司，桑叶茶香料Z购于安徽大别山桑叶茶科技有限公司，其中：

香气感官评分相对值＝桑叶茶香料感官评分值/桑叶茶香料Z感官评分值×100％；

伞形花内酯浓度相对值＝桑叶茶香料伞形花内酯浓度/桑叶茶香料Z伞形花内酯浓度×100％；

东莨菪素浓度相对值＝桑叶茶香料东莨菪素浓度/桑叶茶香料Z东莨菪素浓度×100％；

羟基香豆素浓度相对值＝桑叶茶香料羟基香豆素浓度/桑叶茶香料Z羟基香豆素浓度×100％；

缬草酸浓度相对值＝桑叶茶香料缬草酸浓度/桑叶茶香料Z缬草酸浓度×100％；

愈创木酚浓度相对值＝桑叶茶香料愈创木酚浓度/桑叶茶香料Z愈创木酚浓度×100％；

丁香油酚浓度相对值＝桑叶茶香料丁香油酚浓度/桑叶茶香料Z丁香油酚浓度×100％；

香气成分总浓度相对值＝桑叶茶香料香气成分总浓度/桑叶茶香料Z香气成分总浓度×100％。

表1与桑叶茶香料Z比较的香气感官评价、香气成分总浓度以及特征成分的相对值

应用例

将实施例分别制备所得的桑叶茶香料A、桑叶茶香料B、桑叶茶香料C、桑叶茶香料D、桑叶茶香料Y、桑叶茶香料Z以5.00mg/kg比例添加到空白卷烟中，混合均匀，制成烟支后以GB 5606.4-2005及YC/T 145.8的标准方法进行感官评价，得分分别为93.7分、92.3分、91.6分、91.0分、89.4分、90.5分。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。