阅读说明：本技术 一种生物标记物在制备用于制备皮肤自荧光检测皮肤癌产品中的方法及其应用 (Method for preparing product for detecting skin cancer by using biological marker in skin autofluorescence and application thereof ) 是由 殷卫海 张铭超 陶钺 李雨嘉 于 2019-01-04 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种生物标记物在制备用于制备皮肤自荧光检测皮肤癌产品中的方法及其应用,所述分子标记物为使用400nm至700nm之间的激发光激发受试者皮肤的自发荧光强度,所述自发荧光的波长范围在420nm至800nm之间。自荧光强度与皮肤癌的严重程度呈正相关,因此通过检测皮肤的该自荧光强度,可以实时无创地检测皮肤癌。根据自发荧光的强度、形态以及左右对称性等性质,我们可以判断患者患皮肤癌分型和分期。(The invention provides a method for preparing a product for detecting skin cancer by skin autofluorescence and an application of a biomarker, wherein the molecular marker is the autofluorescence intensity of the skin of a subject excited by exciting light between 400nm and 700nm, and the wavelength of the autofluorescence is between 420nm and 800 nm. Since the autofluorescence intensity positively correlates with the severity of skin cancer, skin cancer can be detected noninvasively in real time by detecting the autofluorescence intensity of the skin. According to the strength, the form, the left-right symmetry and other properties of the autofluorescence, the classification and the stage of the skin cancer of the patient can be judged.)

一种生物标记物在制备用于制备皮肤自荧光检测皮肤癌产品 中的方法及其应用

技术领域

本发明涉及基于皮肤自荧光的检测皮肤癌的生物荧光物质，具体是基于检测皮肤组织的自荧光强度，作为检测皮肤癌的检测方法及其应用。

背景技术

目前检测皮肤癌的方法普遍通过取皮肤组织样本染色或者验血。前者有创且时间较长，或者的准确性以及对于不同疾病的区分程度有限。所以寻找一种实时无创快速检测皮肤癌的生物学指标变得非常重要，而且也具有重大的社会经济意义以及临床意义。

发明内容

本发明人发现，可以使用皮肤组织的自荧光，检测皮肤癌检测方法的新型生物标志物。从而提出一种可以用于基于皮肤自荧光的检测皮肤癌的方法。

本发明以脂多糖处理活体皮肤后，皮肤自荧光显著增加，以此作为基于皮肤自荧光检测皮肤癌的生物学指标。建立新型的检测皮肤癌的方法和应用。

本发明的具体技术方案是：

1.一种生物标记物在制备用于制备皮肤自荧光检测皮肤癌产品中的方法：

(1)将皮肤置于波长在400-700nm范围内的激光下，以激发出皮肤的自荧光。

(2)检测皮肤发出的波长在420-800nm范围内的自荧光分布以及强度；

(3)将该自荧光的分布以及强度与健康皮肤组织自荧光的分布以及强度比较

(4)判断是否患有皮肤癌，以及皮肤癌的程度，从而完成基于皮肤自荧光检测皮肤癌的检测方法。

进一步的，所述皮肤包括细胞，动物组织和人体组织的任意一种。

进一步的，所述实验方法无需对皮肤进行任何标记。

进一步的，本发明的检测方法中，激发光的波长优选为420-680nm的范围内，更优选为460-643nm的范围内。

进一步的本发明的检测方法中，所检测的自发荧光的波长优选为440-750nm的范围内，更优选为450-741nm的范围内。

进一步的，所述皮肤癌包括但不局限于鳞状细胞癌、基底细胞癌、恶性黑色素瘤、恶性淋巴瘤、特发性出血性肉瘤、汗腺癌、隆突性皮肤纤维肉瘤和血管肉瘤。

进一步的，所述利用激发光激发皮肤自荧光的方式包括使用普通的连续光输出进行激发的方式、使用电调制进行调制激发的方式或者使用脉冲激光进行激发的方式中的至少一种。

进一步的，所述激发光的波长在400-700nm范围内。

进一步的，所述自荧光的波长在420-800nm范围内。

进一步的，所述荧光强度增加，可以与自身无病灶区域皮肤组织的自荧光强度相比。也可以与健康人群皮肤组织自荧光比较。

进一步的，所述荧光强度增加，与皮肤癌的严重程度呈正相关。荧光强度越高，皮肤癌的严重程度越高。

本发明还提供了一种生物标记物在制备用于制备皮肤自荧光检测皮肤癌产品中的应用。

各皮肤癌都具有其独特的自发荧光的强度、形态以及左右对称性。本发明根据自发荧光的强度、形态以及左右对称性等性质，我们可以无创快速地判断患者皮肤癌分型和分期。

附图说明

图1：激发光488nm激发皮肤自荧光，接受波长范围500-550nm的接受光。皮肤鳞癌病灶组织自荧光增加代表图。

图2：激发光488nm激发皮肤自荧光，接受波长范围500-550nm的接受光。皮肤癌病灶组织自荧光增加代表图。

具体实施方式

下面将通过具体描述，对本发明作进一步的说明。

除非另有限定，本文中所使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解相同的含义。

本发明中使用的术语“自荧光”，其含义为生物分子在受到适当波长的激发光照射时，吸收激发光的能量进入激发态，再退出激发态从而发射出比激发光波长更长的光的现象中，所述波长比激发光波长更长的光。

本发明中使用的术语“激发光”，其含义为能够激发生物分子发生自发荧光现象的光，其波长应比自发荧光短

本发明中使用的术语“皮肤癌”，其含义包括但不仅仅局限于以下疾病：鳞状细胞癌、基底细胞癌、恶性黑色素瘤、恶性淋巴瘤、特发性出血性肉瘤、汗腺癌、隆突性皮肤纤维肉瘤和血管肉瘤。

发明人进行了大量的实验，确定皮肤自荧光与皮肤癌之间的关系。

实施例1：

对患有疑似皮肤癌的患者，疑似病灶组织以及癌旁组织进行成像，发现疑似病灶组织荧光显著高于癌旁组织，且有明显的分界线。

将此处病灶组织切下进行成像，发现疑似病灶组织荧光显著高于癌旁组织，且有明显的分界线。如图2所示鲍温病皮肤病灶组织自荧光强于癌旁组织。

之后组织送进病理科进行病理切片。3天后病理诊断结果为鲍温病，且病灶组织和癌旁组织有明显分界线。

实施例2：

对患有疑似皮肤癌的患者，疑似病灶组织以及癌旁组织进行成像，发现疑似病灶组织荧光显著高于癌旁组织，且有明显的分界线。

将此处病灶组织切下进行成像，发现疑似病灶组织荧光显著高于癌旁组织，且有明显的分界线。图1所示皮肤鳞癌患者皮肤病灶组织自荧光强于癌旁组织。

之后组织送进病理科进行病理切片。3天后病理诊断结果为鲍温样型日光性角化病，且病灶组织和癌旁组织有明显分界线。

实施例3：

对患有疑似皮肤癌的患者，疑似病灶组织以及癌旁组织进行成像，发现疑似病灶组织荧光显著高于癌旁组织，且有明显的分界线。

将此处病灶组织切下进行成像，发现疑似病灶组织荧光显著高于癌旁组织，且有明显的分界线。

之后组织送进病理科进行病理切片。3天后病理诊断结果为皮肤鳞癌，且病灶组织和癌旁组织有明显分界线。

实施例4：

皮肤组织荧光上升，具有明显的环状结构。来源于表皮组织的自荧光。

由上实验可以得出，皮肤自荧光可以用来预测和检测皮肤癌组织，且可以清晰的区分病灶组织以及癌旁组织。病灶组织皮肤自荧光相较于癌旁组织显著升高。相较于传统病理检验，这种方法，实时无创，短时间内可以判断是否是皮肤癌。因此，皮肤自荧光能够作为无创实时检测皮肤癌的标志物。

本发明基于这一发现，建立一种基于皮肤自荧光无创实时检测皮肤癌的方法，该方法包括以下步骤：

1.一种基于皮肤自荧光检测皮肤癌的原理以及方法：

(1)将皮肤置于波长在400-700nm范围内的激光下，以激发出皮肤的自荧光。

(2)检测皮肤发出的波长在420-800nm范围内的自荧光分布以及强度；

(3)将该自荧光的分布以及强度与健康皮肤组织自荧光的分布以及强度比较

(4)判断是否患有皮肤癌，以及皮肤癌的程度，从而完成基于皮肤自荧光检测皮肤癌的检测方法。

本发明的利用激发光激发皮肤自荧光的方式包括使用普通的连续光输出进行激发的方式、使用电调制进行调制激发的方式或者使用脉冲激光进行激发的方式中的至少一种。

本领域的技术人员应当明了，尽管为了举例说明的目的，本文描述了本发明的具体实施方式，但可以对其进行各种修改而不偏离本发明的精神和范围。因此，本发明的具体实施方式和实施例不应当视为限制本发明的范围。本发明仅受所附权利要求的限制。本申请中引用的所有文献均完整地并入本文作为参考。