阅读说明：本技术 衢枳壳、衢枳壳提取物和含有他们的产品在预防和/或治疗代谢性肝病中的应用 (Application of thoroughfare bitter orange, thoroughfare bitter orange extract and products containing thoroughfare bitter orange extract in preventing and/or treating metabolic liver diseases ) 是由 张峰 王思为 白永凤 宋剑锋 于 2019-11-19 设计创作，主要内容包括：本发明涉及代谢性肝病技术领域,具体地涉及衢枳壳、衢枳壳提取物或含有他们的组合物在制备用于预防和/或治疗代谢性肝病,特别是非酒精性脂肪肝的产品中的应用。本发明的衢枳壳、衢枳壳提取物或含有他们的组合物具有减少肝脏脂质积累,或改善和/或缓解肝脏脂肪病变的作用,且药理作用强、安全无毒。本发明的产品原料来源丰富、价廉、安全无毒副作用,制备工艺路线简单、生产成本低廉,可制成口服剂型、片剂等常规剂型,还可以制备成食品,使用方便,是一种非常有前景和开发价值的用于预防和/或治疗代谢性肝病,特别是非酒精性脂肪肝的产品。(The invention relates to the technical field of metabolic liver diseases, in particular to application of thoroughfare bitter orange, thoroughfare bitter orange extract or a composition containing thoroughfare bitter orange extract in preparation of products for preventing and/or treating metabolic liver diseases, particularly non-alcoholic fatty liver diseases. The thoroughfare type fructus aurantii and thoroughfare type fructus aurantii extract or the composition containing the thoroughfare type fructus aurantii extract and thoroughfare type fructus aurantii extract have the effects of reducing liver lipid accumulation or improving and/or relieving liver fatty lesion, and are strong in pharmacological effect, safe and non-toxic. The product has the advantages of rich raw material sources, low price, safety, no toxic or side effect, simple preparation process route, low production cost, capability of being prepared into conventional dosage forms such as oral dosage forms, tablets and the like, convenience in use and great prospect and development value, and is a product for preventing and/or treating metabolic liver diseases, particularly non-alcoholic fatty liver diseases.)

衢枳壳、衢枳壳提取物和含有他们的产品在预防和/或治疗代 谢性肝病中的应用

技术领域

本发明涉及代谢性肝病技术领域，具体地涉及衢枳壳、衢枳壳提取物和含有他们的产品在预防和/或治疗代谢性肝病，特别是非酒精性脂肪肝中的应用。

背景技术

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是指一种无过量饮酒史、以肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征，造成肝脏功能损害的慢性炎性肝脏疾病。研究表明，NAFLD的进展会导致肝硬化，甚至肝癌。在我国，NAFLD的患病率显著上升，已成为仅次于病毒性肝炎的第二大肝病，严重威胁着我国人民的生命健康。然而，目前对于NAFLD仍无确切有效的治疗方法。

因此，寻找安全、有效、经济的用于预防和/或治疗代谢性肝病，特别是非酒精性脂肪肝的产品，显得尤为迫切和需要。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的上述问题，提供衢枳壳、衢枳壳提取物和含有他们的产品在用于预防和/或治疗代谢性肝病，特别是非酒精性脂肪肝中的应用。本发明以衢枳壳作为主要成分，用于预防和/或治疗代谢性肝病，特别是非酒精性脂肪肝，疗效显著。

为了实现上述目的，本发明的第一方面提供衢枳壳、衢枳壳提取物或含有他们的组合物在制备用于预防和/或治疗代谢性肝病，特别是非酒精性脂肪肝的产品中的应用。

本发明的第二方面提供衢枳壳、衢枳壳提取物或含有他们的组合物在制备用于减少肝脏脂质积累，或改善和/或缓解肝脏脂肪性病变的产品中的应用。

优选地，所述衢枳壳提取物为通过加热回流提取制备的衢枳壳醇取物。

优选的，在回流提取之前，将所述衢枳壳粉碎产物在醇溶剂中浸渍0.5-2 小时。

本发明创造性对衢枳壳发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。本发明的衢枳壳、衢枳壳提取物或含有他们的组合物具有减少肝脏脂质积累，或改善和/或缓解肝脏脂肪病变的作用，且药理作用强、安全无毒。本发明的产品原料来源丰富、价廉、安全无毒副作用，制备工艺路线简单、生产成本低廉，可制成口服剂型、片剂等常规剂型，还可以制备成食品，使用方便，是一种非常有前景和开发价值的用于预防和/或治疗代谢性肝病，特别是非酒精性脂肪肝的产品。

附图说明

图1显示了DBM组、DB组、DB-QFA组、DB-QFAE组和DB-QFAW 组小鼠肝脏细胞形态(HE染色和油红O染色)。

图2显示了CON组、HFD组、HFD-QFA组、HFD-QFAE组和HFD-QFAW 组小鼠肝脏细胞形态(HE染色和油红O染色)。

具体实施方式

在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。

根据本发明的第一方面，提供了衢枳壳、衢枳壳提取物或含有他们的组合物在制备用于预防和/或治疗代谢性肝病，特别是非酒精性脂肪肝的产品中的应用。

本发明的第二方面，提供了衢枳壳、衢枳壳提取物或含有他们的组合物在制备用于减少肝脏脂质积累，或改善和/或缓解肝脏脂肪病变的产品中的应用。

衢枳壳，即胡柚片，为芸香科植物常山胡柚(Citrus changshan-huyou Y.B.Chang)的干燥未成熟果实，7月果皮尚绿时采收，自中部切断为两半，晒干或低温干燥。味苦、辛、酸，性微寒，归脾、胃经，有理气宽中、行滞消胀功效，可用于胸胁气滞、胀满疼痛、食积不化、痰饮内停、胃下垂、脱肛、子宫脱垂等症。于2016年8月被纳入2015年版《浙江省中药炮制规范》。

根据本发明，当以衢枳壳直接入药时，可以直接将所述衢枳壳研磨成衢枳壳粉服用，所述衢枳壳粉的粒度没有特别的限定，只要能够使患者易于服用即可。此外，所述衢枳壳粉也可以和其他食材或药材进行联合服用。

根据本发明，当以衢枳壳提取物入药时，可以通过本领域公知的各种方法进行衢枳壳提取物的制备，例如，可以将所述衢枳壳以代茶包的方式进行冲泡提取制备，可以以醇(例如酒)作为溶剂进行泡制提取制备，还可以通过水煮煎药的方式进行制备，也可以通过加热回流的方式、超声提取的方式、超临界流体萃取法、大孔树脂吸附法等进行提取制备。

根据本发明，所述衢枳壳提取物可以为衢枳壳的醇提取物，也可以为衢枳壳的水提取。其中，所述醇优选为乙醇。

根据本发明一种优选的实施方式，所述衢枳壳提取物为通过加热回流提取制备的衢枳壳醇取物，提取方法包括：

(1)将衢枳壳粉碎，并将粉碎产物用醇溶剂进行回流提取，得到提取液；

(2)将所述提取液固液分离，并回收醇溶剂，得到浓缩液；

(3)将浓缩液干燥，得到所述衢枳壳提取物。

根据本发明，步骤(1)中，所述衢枳壳粉碎产物的粒度可以在较宽的范围内进行选择。

其中，所述醇溶剂的用量可以在较宽的范围内进行选择，优选的，相对于每千克的衢枳壳，所述醇溶剂的用量为10-20倍，进一步优选为12-18倍，更进一步优选为14-16倍，最优选为15倍。

其中，所述醇溶剂的浓度也没有特别的限制，优选的，采用高浓度的醇溶剂，例如，70-90重量％，更优选为75-85重量％，最优选为80重量％。

其中，所述加热回流的条件也可以在较宽的范围内进行选择，优选的，所述加热回流的温度为50-90℃，时间为0.5-6小时，更优选的，回流的温度为60-80℃，时间为1-3小时，最优选的，回流的温度为70℃，时间为2小时。

根据本发明一种优选的实施方式，为了进一步提高提取效率以及提取物中活性物质的含量，在所述加热回流提取之前，还包括将衢枳壳粉碎产物在醇溶剂中浸渍0.5-2小时。

进一步优选的，为了进一步加强提取效率，所述加热回流提取可以分为多次进行，例如，可以分为2次、3次、4次、5次等，然后将每次提取的提取液合并作为最终的提取液。本领域技术人员可以根据实际的提取效果进行选择，只要将回流提取的总时间控制在如上的范围内即可，每次提取可以等时间进行。

根据本发明，步骤(2)中，将所述提取液进行固液分离的方法可以为本领域常规的各种方法，例如，过滤、离心等等，只要能够将提取液中的固体残渣充分去除即可。本领域技术人员可以根据需要的滤液的固含量来适当的选择固液分离的条件。

其中，所述固液分离可以在常温下进行。

根据本发明，步骤(2)中，从滤液中回收醇溶剂的方法可以按照本领域公知的各种方法进行，例如，冷冻冷凝法等。

根据本发明，步骤(3)中，浓缩液干燥方法可以按照本领域公知的各种方法进行，例如，冷冻干燥法、喷雾干燥法等。

根据本发明，所述产品为药物、保健品或食品。所述药物含有衢枳壳或衢枳壳提取物以及药学上可接受的佐剂、防腐剂或稳定剂；所述保健品含有衢枳壳或衢枳壳提取物以及保健品中可接受的辅料；所述食品含有衢枳壳或衢枳壳提取物以及食品中可接受的辅料或佐剂。其中，辅料、佐剂、防腐剂或稳定剂的种类和含量为本领域技术人员所公知，在此不再赘述。

根据本发明，所述药物或保健品可以制备为各种剂型，例如，可以制备为但不限于片剂、胶囊(包括软胶囊和硬胶囊)、散剂、口服液、颗粒剂和丸剂。所述食品可以制备为本领域常规形式。

根据本发明，用于减少肝脏脂质积累(例如，可降低肝脏TG水平、减少肝脏脂滴数量)，或改善和/或缓解肝脏脂肪病变(例如，可降低血清ALT、 AST、NEFA、TG以及改善肝细胞形态)时，以衢枳壳或衢枳壳提取物计，可以按照每天每千克体重0.1-0.3g的剂量服用，可以分为多次服用。

以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中，

1、材料与试剂

衢枳壳：由衢州南孔中药有限公司提供并鉴定。

小鼠高脂饲料(Research diet D12492)：购自美国Research Diet公司。

正常饲料：由浙江中医药大学动物实验中心提供。

谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、游离脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)检测试剂盒：购自南京建成生物工程研究所。

油红O染色试剂盒：购自中国Solarbio公司。

2实验动物

雄性自发性2型糖尿病C57BLKS/J db/db小鼠(db/db小鼠)，Stock No:000642，7-8周龄，体重30-40g；同遗传背景C57BLKS/J db野生型小鼠 (db/m)，7-8周龄，体重18-22g，以上动物购自南京大学—南京生物医药研究院，动物生产许可证号：SYXK(苏)2015-0001。饲养于浙江中医药大学动物实验中心，自由摄食及饮水。动物实验经衢州市人民医院医学伦理委员会批准。

雄性C57BL/6小鼠，7-8周龄，体重22-25g，SPF级，由浙江中医药大学动物实验中心提供，生产许可证号：SCXK(沪)2008-0016。

制备例

制备例1

本制备例用于说明衢枳壳干粉的制备

称取衢枳壳药材1kg净制，粉碎成粗粉，即得衢枳壳干粉(QFA)。

制备例2

本制备例用于说明衢枳壳醇提取物的制备

称取衢枳壳药材1kg净制，粉碎，加15倍量的80％乙醇(15000mL)，浸泡1h，加热回流提取3次，每次2h，合并提取液，冷却过滤，滤液回收溶剂，干燥，即得衢枳壳醇提取物(QFAE)。

制备例3

本制备例用于说明衢枳壳水提取物的制备

称取衢枳壳药材1kg净制，粉碎，加15倍量的水(15000mL)，浸泡 1h，加热回流提取3次，每次2h，合并提取液，冷却过滤，浓缩并干燥，即得衢枳壳水提取物(QFAW)。

对比制备例1

本对比制备例用于说明成熟的胡柚醇提取的制备

按照制备例2的方法进行成熟的胡柚醇提取物(HYE)的制备，不同的是，将衢枳壳替换为等量的成熟胡柚。

对比制备例2

本对比制备例用于说明成熟的胡柚皮醇提取的制备

按照制备例2的方法进行成熟的胡柚皮醇提取物(HYPE)的制备，不同的是，将衢枳壳替换为等量的成熟胡柚皮。

实施例

1、动物分组及给药

(1)54只雄性自发性2型糖尿病小鼠(db/db小鼠)，7-8周龄，适应性饲养一周后，随机分为6组，每组9只，分别为：

DB组，db/db小鼠以蒸馏水灌胃；

DB-QFA组，db/db小鼠以300mg/kg/d衢枳壳干粉灌胃；

DB-QFAE组，db/db小鼠以300mg/kg/d衢枳壳醇提取物灌胃；

DB-QFAW组，db/db小鼠以300mg/kg/d衢枳壳水提取物灌胃；

DB-HYE组，db/db小鼠以300mg/kg/d成熟的胡柚醇提取物灌胃；

DB-HYPE组，db/db小鼠以300mg/kg/d成熟的胡柚皮醇提取物灌胃；

另取9只野生型db/m小鼠作为DBM组，以蒸馏水灌胃，即正常对照组；

所有小鼠正常饮食和饮水，连续给药6周。

(2)84只C57BL/6小鼠，7-8周龄，适应性饲养一周后，随机分为7 组，每组12只，分别为：

CON组，即正常对照组，以正常饲料喂养，并以蒸馏水灌胃；

HFD组，以高脂饲料喂养，并以蒸馏水灌胃；

HFD-QFA组，以高脂饲料喂养，并以300mg/kg/d衢枳壳干粉灌胃；

HFD-QFAE组，以高脂饲料喂养，并以300mg/kg/d衢枳壳醇提取物灌胃；

HFD-QFAW组，以高脂饲料喂养，并以300mg/kg/d衢枳壳水提取物灌胃；

HFD-HYE组，以高脂饲料喂养，并以300mg/kg/d成熟的胡柚醇提取物灌胃；

HFD-HYPE组，以高脂饲料喂养，并以300mg/kg/d成熟的胡柚皮醇提取物灌胃；

所有小鼠正常饮水，连续给药14周。

2、体重、肝重测定

末次给药24h后，测定各组小鼠的体重，然后处死小鼠，取出肝脏称重，每组取平均值，结果见表1和表2。

3、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、游离脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)测定

末次给药24h后，戊巴比妥钠麻醉小鼠，腹主动脉采血，分离血清，分别采用谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、游离脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)检测试剂盒测定各组小鼠血清ALT、AST、NEFA和TG水平，每组取平均值，结果见表3和表4。

4、肝脏甘油三酯(TG)测定

取肝脏组织，采用常规有机溶剂提取法提取各组小鼠肝组织油脂，采用甘油三酯(TG)检测试剂盒测定各组小鼠肝组织TG水平，每组取平均值，结果见表5。

5、肝组织病理学观察及油红O染色

取肝脏组织，用10％***固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，400 倍显微镜下观察，其中，DBM组、DB组、DB-QFA组、DB-QFAE组和 DB-QFAW组小鼠的HE染色见图1；CON组、HFD组、HFD-QFA组、HFD-QFAE和HFD-QFAW组小鼠的HE染色见图2。

油红O染色：肝组织冰冻切片，蒸馏水浸洗，洗掉包埋剂，60％异丙醇浸洗2min，油红O工作液染色5min，60％异丙醇调色，后蒸馏水浸洗，苏木精复染，流水反蓝，甘油明胶封片，400倍显微镜下观察，其中，DBM组、 DB组、DB-QFA组、DB-QFAE组和DB-QFAW组小鼠的油红O染色见图 1；CON组、HFD组、HFD-QFA组、HFD-QFAE和HFD-QFAW组小鼠的油红O染色见图2。

6、数据处理

所有数据均用SPSS 17.0统计软件进行处理，数据以均值±标准差

表示，组间差异按方差分析进行检验，并用最小显著差法检验作两两比较，以P<0.05时有统计学意义。

7、结果

(1)对小鼠体重和肝重的影响

2型糖尿病db/db小鼠体重和肝重的变化结果见表1(

n＝9)。

表1

注：与DBM组相比，^*P<0.05；与DB组相比，^#P<0.05。

由表1可知，与正常对照组(即DBM组)比较，2型糖尿病db/db小鼠的体重和肝重显著升高；与DB组比较，衢枳壳干粉(DB-QFA组)、衢枳壳醇提取物(DB-QFAE组)和衢枳壳水提取物(DB-QFAW组)能够显著降低db/db小鼠的肝重，但对体重的降低效果并不显著。但相比之下，胡柚成熟果实醇提物(DB-HYE组)以及胡柚果皮醇提物(DB-HYPE组)对于降低2型糖尿病db/db小鼠的体重和肝重的效果均不明显。

高脂饮食诱导的肥胖小鼠体重和肝重的变化结果见表2(

n＝12)。

表2

组别	体重(g)	肝重(g)
			CON组	28.83±1.65	1.12±0.08
HFD组	42.70±1.77<sup>*</sup>	1.69±0.13<sup>*</sup>
			HFD-QFA组	35.17±1.55<sup>#</sup>	1.23±0.17<sup>#</sup>
HFD-QFAE组	32.27±3.41<sup>#</sup>	1.20±0.09<sup>#</sup>
			HFD-QFAW组	32.00±3.60<sup>#</sup>	1.20±0.10<sup>#</sup>
HFD-HYE组	39.11±3.21<sup>*</sup>	1.61±0.05<sup>*</sup>
			HFD-HYPE组	38.78±3.01<sup>*</sup>	1.57±0.19<sup>*</sup>

注：与CON组相比，^*P<0.05；与HFD组相比，^#P<0.05。

由表2可知，与正常对照组(即CON组)比较，高脂饮食诱导的肥胖小鼠的体重和肝重显著升高；与HFD组比较，衢枳壳干粉(HFD-QFA组)、衢枳壳醇提取物(HFD-QFAE组)和衢枳壳水提取物(HFD-QFAW组)能够显著降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠的体重和肝重。但相比之下，胡柚成熟果实醇提物(HFD-HYE组)以及胡柚果皮醇提物(HFD-HYPE组)对于降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠的体重和肝重的效果均不明显。

(2)对小鼠血清ALT、AST、NEFA和TG水平的影响

2型糖尿病db/db小鼠血清ALT、AST、NEFA和TG的水平变化结果见表3(

n＝9)。

表3

组别	ALT(IU/L)	AST(IU/L)	NEFA(mmol/L)	TG(mmol/L)
					DBM组	51.08±4.05	116.40±9.56	3.37±0.49	0.90±0.09
DB组	68.12±3.97<sup>*</sup>	205.27±22.46<sup>*</sup>	9.20±1.09<sup>*</sup>	6.10±0.96<sup>*</sup>
					DB-QFA组	53.74±2.17<sup>#</sup>	138.88±21.43<sup>#</sup>	5.83±0.99<sup>*#</sup>	4.53±0.20<sup>*#</sup>
DB-QFAE组	60.78±3.46<sup>#</sup>	139.63±22.48<sup>#</sup>	5.80±0.99<sup>*#</sup>	3.38±0.78<sup>*#</sup>
					DB-QFAW组	53.08±5.26<sup>#</sup>	133.10±13.48<sup>#</sup>	3.75±1.12<sup>*#</sup>	3.29±0.56<sup>*#</sup>
DB-HYE组	63.87±5.10	163.98±26.37	7.89±1.01<sup>*</sup>	5.71±0.36
					DB-HYPE组	65.27±3.98	159.77±21.89	6.98±0.73<sup>*</sup>	5.22±0.77<sup>*</sup>

注：与DBM组相比，^*P<0.05；与DB组相比，^#P<0.05。

由表3可知，与正常对照组(即DBM组)比较，2型糖尿病db/db小鼠血清ALT、AST、NEFA和TG水平显著升高；与DB组比较，衢枳壳干粉(DB-QFA组)、衢枳壳醇提取物(DB-QFAE组)和衢枳壳水提取物 (DB-QFAW组)能够显著降低db/db小鼠血清ALT、AST、NEFA和TG 水平。但相比之下，胡柚成熟果实醇提物(DB-HYE组)以及胡柚果皮醇提物(DB-HYPE组)对于降低db/db小鼠血清ALT、AST、NEFA和TG水平效果均不明显。

高脂饮食诱导的肥胖小鼠血清ALT、AST、NEFA和TG的水平变化结果见表4(n＝12)。

表4

组别	ALT(IU/L)	AST(IU/L)	NEFA(mmol/L)	TG(mmol/L)
					CON组	37.10±7.02	101.07±10.30	3.25±0.87	0.86±0.14
HFD组	78.50±7.34<sup>*</sup>	460.50±62.60<sup>*</sup>	6.51±1.05<sup>*</sup>	1.98±0.20<sup>*</sup>
					HFD-QFA组	48.90±4.69<sup>#</sup>	246.05±74.10<sup>*#</sup>	5.48±0.51<sup>#</sup>	1.51±0.08<sup>*#</sup>
HFD-QFAE组	52.87±7.39<sup>#</sup>	246.20±16.10<sup>*#</sup>	5.39±0.63<sup>#</sup>	1.17±0.21<sup>*#</sup>
					HFD-QFAW组	54.77±2.78<sup>#</sup>	266.90±24.06<sup>*#</sup>	5.18±0.45<sup>#</sup>	1.19±0.11<sup>*#</sup>
HFD-HYE组	67.59±5.67<sup>*</sup>	397.29±31.67<sup>*</sup>	6.37±0.71	1.71±0.21<sup>*</sup>
					HFD-HYPE组	70.14±1.98<sup>*</sup>	377.99±58.10<sup>*</sup>	6.80±1.03	1.73±0.14<sup>*</sup>

注：与CON组相比，^*P<0.05；与HFD组相比，^#P<0.05。

由表4可知，与正常对照组(即CON组)比较，高脂饮食诱导的肥胖小鼠的血清ALT、AST、NEFA和TG显著升高；与HFD组比较，衢枳壳干粉(HFD-QFA组)、衢枳壳醇提取物(HFD-QFAE组)和衢枳壳水提取物 (HFD-QFAW组)能够显著降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠的血清ALT、AST、 NEFA和TG水平。但相比之下，胡柚成熟果实醇提物(HFD-HYE组)以及胡柚果皮醇提物(HFD-HYPE组)对于降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠的血清ALT、AST、NEFA和TG水平效果均不明显。

(3)对小鼠肝脏TG水平的影响

2型糖尿病db/db小鼠肝脏TG的水平变化结果(

n＝9)以及高脂饮食导致的肥胖小鼠肝脏TG的水平变化结果(

n＝12)见表5。

表5

注：与DBM组相比，^*P<0.05；与DB组相比，^#P<0.05。与CON组相比，^△P<0.05；与 HFD组相比，^▲P<0.05。

由表5可知，与正常对照组(即DBM组或CON组)比较，2型糖尿病 db/db小鼠和高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏TG水平显著升高；与DB组或 HFD组比较，衢枳壳干粉、衢枳壳醇提取物和衢枳壳水提取物能够显著降低 db/db小鼠或高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏TG水平。但相比之下，胡柚成熟果实醇提物以及胡柚果皮醇提物对于降低2型糖尿病db/db小鼠或高脂饮食诱导的肥胖小鼠的肝脏TG水平效果均不明显。

(4)对小鼠肝组织病理形态和肝脏红色脂滴数量的影响

如图1和图2结果所示，正常对照组(DBM组或CON组)小鼠肝细胞结构完整，排列整齐，肝小叶清晰可见，且无红色脂滴；而2型糖尿病db/db 小鼠(DB组)或高脂饮食导致的肥胖小鼠(HFD组)肝脏组织结构紊乱，肝小叶分界不清、肝细胞体积增大、肿胀，肝细胞出现大量大泡性空泡样改变，且空泡内含有大量红色脂滴，表明2型糖尿病db/db小鼠和高脂饮食导致的肥胖小鼠出现肝脏脂肪性病变，且脂质积累显著增高；而2型糖尿病 db/db小鼠和高脂饮食导致的肥胖小鼠分别以衢枳壳干粉、衢枳壳醇提取物和衢枳壳水提取物干预后，小鼠肝脏结构紊乱、肝细胞体积增大、肝细胞空泡样改变等症状得到明显改善或缓解，且肝脏脂质积累显著降低。但相比之下，胡柚成熟果实醇提物以及胡柚果皮醇提物对于改善两种模型小鼠的肝脏细胞形态的效果并不明显(结果未示出)。

由以上结果可知，衢枳壳干粉、衢枳壳醇提取物和衢枳壳水提取物具有降低自发性2型糖尿病小鼠和高脂饮食导致的肥胖小鼠肝脏脂质积累，或改善和/或缓解肝脏脂肪性病变的作用。具体表现在降低体重和肝重，降低血清 ALT、AST、NEFA和TG水平，降低肝脏TG水平，改善肝细胞形态以及降低红色脂滴数量等方面。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。