阅读说明：本技术 放射性卤素标记化合物的制造方法及放射性医药的制造方法 (Method for producing radioactive halogen-labeled compound and method for producing radiopharmaceutical ) 是由 奥村侑纪 中村大作 桐生真登 市川浩章 殿谷豪太 杉本尚美 于 2018-05-28 设计创作，主要内容包括：本发明提供放射性卤素标记化合物的制造方法,其包含以下的工序：通过对于具备有可利用放射性卤化物离子(X<Sup>-</Sup>)而进行亲核取代的离去基团(L)的放射性卤素标记前体化合物(S-L),实行放射性卤化反应,从而获得包含放射性卤素标记前体化合物(S-L)与放射性卤化反应的反应产物(S-X)的反应混合物RM1的工序；通过将反应混合物RM1与多元酸或其盐进行混合,从而获得反应混合物RM2的工序；以及利用固相萃取法,从反应混合物RM2中将反应产物(S-X)进行纯化的工序。(The present invention provides a method for producing a radioactive halogen-labeled compound, comprising the steps of: by having available radioactive halide ions (X) ‑ ) And a radiohalogen-labeled precursor compound (S-L) of the leaving group (L) undergoing nucleophilic substitution, performing a radiohalogenation reaction to thereby obtain a reaction product (S-X) comprising the reaction product of the radiohalogen-labeled precursor compound (S-L) and the radiohalogenation reactionA step of preparing a mixture RM 1; a step of mixing reaction mixture RM1 with a polybasic acid or a salt thereof to obtain reaction mixture RM 2; and a step of purifying the reaction product (S-X) from the reaction mixture RM2 by a solid-phase extraction method.)

放射性卤素标记化合物的制造方法及放射性医药的制造方法

技术领域

本发明涉及放射性卤素标记化合物的制造方法以及放射性医药的制造方法。

背景技术

在经放射性卤化的医药的制备方面，大多是准备通过使得离去基团结合于靶底物的卤素标记部位而得到的化合物作为标记前体化合物，进行放射性卤化物离子与该标记前体化合物反应的亲核取代反应。而且，关于此反应，一般通过将少量的放射性卤化物离子使用于大量的标记前体化合物而进行。因此，关于所获得的放射性卤素标记化合物的纯化，通常通过利用高效液相色谱法(HPLC法)来将大量的未反应的标记前体化合物分离来进行。但是，HPLC法复杂且需要时间，考虑到放射性卤素的衰减的话，则成为招致目标化合物的收获量降低的主要原因。

作为不需要HPLC纯化的代替性战略，专利文献1中提出了：准备通过利用化合物M(纯化部分)将上述标记前体化合物的离去基团的部分进行修饰而得到的化合物作为标记前体化合物，通过使放射性卤化物离子等亲核剂与该化合物进行反应，从而可将含有纯化部分M的种物从不含纯化部分M的其它种物中容易地分离。

另外，在专利文献2、3中提出了一种具有导入了脂溶性官能团的离去基团的放射性卤素标记前体化合物以及放射性卤素标记方法。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2009/127372号公报

专利文献2：国际公开第2011/006610号公报

专利文献3：日本特开2017-52713号公报

发明内容

专利文献1中记载的方法的构思在于，在放射性卤化反应后，使固定于树脂上的活性基团以化学方式作用于标记前体化合物的纯化部分M。由此存在如下的问题：对放射性卤化反应产物的收率造成不良影响；或者需要进行导入特殊的活性基团等的树脂的制备；等等。

另外，关于专利文献2、3中记载的方法，需要对现有的标记前体化合物的结构进行设计变更。

本发明是鉴于上述情形而完成的，在于提供下述技术：其用于不对标记前体化合物的结构进行设计变更，利用不依赖于HPLC法的方法，将放射性卤化反应的反应产物从未反应的放射性卤素标记前体化合物中进行分离纯化。

本发明的一个实施方式提供放射性卤素标记化合物的制造方法，其包含以下的工序：

通过对于具备有可利用放射性卤化物离子而进行亲核取代的离去基团的放射性卤素标记前体化合物，实行放射性卤化反应，从而获得包含放射性卤素标记前体化合物与放射性卤化反应的反应产物的第一反应混合物的工序；

通过将前述第一反应混合物与多元酸或其盐进行混合，从而获得第二反应混合物的工序；以及

利用固相萃取法，从前述第二反应混合物中将前述反应产物进行纯化的工序。

本发明的其它的实施方式提供以放射性卤素标记化合物为有效成分的放射性医药的制造方法，其包含实行上述的放射性卤素标记化合物的制造方法。

根据本发明，不对标记前体化合物的结构进行设计变更，可利用不依赖于HPLC法的方法，将放射性卤化反应的反应产物从未反应的放射性卤素标记前体化合物中进行分离纯化。

另外，在根据专利文献2、3记载的方法中，由于放射性卤素标记前体化合物与放射性卤素标记化合物的脂溶性之差变大，因而在利用反相体系对以放射性卤素标记化合物为有效成分的放射性医药中的非放射性杂质进行分析的情况下，在分析时间方面需要时间，结果是存在有在放射性医药的品质试验上耗费的时间延长了的担忧。但在本发明的方法中，不进行使放射性卤素标记前体化合物与放射性卤素标记化合物的脂溶性之差增大那样的放射性卤素标记前体化合物的设计，因而不会延长在放射性医药的品质试验上所需要的时间，并且能够缩短放射性医药的合成时间，能够在整体上缩短放射性医药的制造时间。

具体实施方式

关于本发明的放射性卤素标记化合物的制造方法，依次地实行以下的[工序1]～[工序3]的工序。

[工序1]

通过对于具备有可利用放射性卤化物离子(X^-)而进行亲核取代的离去基团(L)的放射性卤素标记前体化合物(S-L)，实行放射性卤化反应，从而获得包含放射性卤素标记前体化合物(S-L)与放射性卤化反应的反应产物(S-X)的反应混合物RM1(第一反应混合物)的工序。

[工序2]通过将反应混合物RM1与多元酸(AH)或其盐(A^-B⁺)进行混合，从而获得反应混合物RM2(第二反应混合物)的工序。

[工序3]利用固相萃取法，从反应混合物RM2中将反应产物(S-X)进行纯化的工序。

[工序1]放射性卤化工序

在放射性卤化工序中，通过对于具备有可利用放射性卤化物离子(X^-)而进行亲核取代的离去基团(L)的放射性卤素标记前体化合物(S-L)，实行放射性卤化反应，从而获得包含放射性卤素标记前体化合物(S-L)与放射性卤化反应的反应产物(S-X)的反应混合物RM1。

此处，“放射性卤素”选自氟、氯、溴、碘以及砹(astatine)的各放射性同位素，具体而言，可列举¹⁸F、^34mCl、⁷⁶Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、¹³¹I、²¹¹At。其中，优选为放射性氟(¹⁸F)。

关于放射性卤化物离子(X^-)，可利用通常使用的方法而生成。例如，在放射性氟化物离子的情况下，可利用回旋加速器(cyclotron)而从[¹⁸O]水利用¹⁸O(p，n)¹⁸F反应而生成。

另外，放射性卤化物离子(X^-)也可具备对离子。例如，在放射性氟化物离子的情况下，可将碱金属离子和/或、四烷基铵离子作为对离子。此处，关于碱金属离子，可示例锂离子、钠离子、钾离子、铷离子、铯离子。另外，关于四烷基铵离子，可示例四甲基铵离子、四乙基铵离子、四丙基铵离子、四丁基铵离子。为了制备具备有目标的对离子的放射性卤化物离子(X^-)，可使用阴离子交换树脂。作为一个例子，可通过将包含放射性氟化物离子的[¹⁸O]水通液于已制备为碳酸型或者碳酸氢型的阴离子交换树脂，从而使其吸附放射性氟化物离子，并使用碳酸钾水溶液、或者、四乙基碳酸氢铵水溶液将放射性氟化物离子进行洗脱，从而制备。

关于放射性卤化物离子(X^-)，也可以为通过使用相转移催化剂而被活化的放射性卤化物离子(X^-)。作为此处使用的相转移催化剂的例子，可列举四甲基铵盐、四乙基铵盐、四丙基铵盐、四丁基铵盐等四烷基铵盐，冠醚、穴醚(cryptand)。例如，在放射性氟化物离子的情况下，通过与4，7，13，16，21，24-六氧杂-1，10-二氮杂双环[8.8.8]二十六烷(商品名：Kryptofix 222)或者四烷基铵盐进行混合，根据需要进行加热，从而可进行活化。关于放射性氟化物离子的活化，存在有以下的方法：(i)使用阴离子交换树脂以及碳酸钾水溶液，制备出放射性氟化钾水溶液，然后与4，7，13，16，21，24-六氧杂-1，10-二氮杂双环[8.8.8]二十六烷(商品名：Kryptofix 222)进行混合，一边与乙腈进行共沸，一边将放射性氟化物离子进行活化并且进行水蒸散的方法；或者，(ii)一边将通过使用阴离子交换树脂以及四乙基碳酸氢铵水溶液而制备出的放射性四乙基氟化铵水溶液与乙腈进行共沸，一边将放射性氟化物离子进行活化并且进行水蒸散的方法。

关于离去基团(L)，只要是通过使放射性卤化物离子(X^-)作为亲核剂进行攻击从而离去的基团则没有限定，优选为磺酰基氧基。关于“磺酰基氧基”，为芳香族磺酰基氧基、烷基磺酰基氧基或者卤代烷基磺酰基氧基，作为芳香族磺酰基氧基，可示例苯磺酰基氧基、对甲苯磺酰基氧基以及对硝基苯磺酰基氧基。另外，关于烷基磺酰基氧基，可示例甲磺酰基氧基。另外，作为卤代烷基磺酰基氧基，可示例三氟甲磺酰基氧基。

放射性卤素标记前体化合物(S-L)是通过将离去基团(L)导入到包含生物体分子识别部位等的底物(S)而得到的化合物(此处，底物(S)包括将羟基、氨基、羧基等、放射性卤化物离子(X^-)可与其发生作用的基团进行了保护的底物)，可示例以下的化合物。

·由式(1)表示的化合物：氟脱氧葡萄糖(¹⁸F)的标记前体化合物

·由式(2)表示的化合物：fluciclovine(¹⁸F)的标记前体化合物

·由式(3)表示的化合物：[¹⁸F]FLT(3’-[¹⁸F]氟-3’-脱氧胸苷)的标记前体化合物

·由式(4)表示的化合物：[¹⁸F]FET(O-(2-[¹⁸F]氟乙基)-L-酪氨酸)的标记前体化合物

·由式(5)表示的化合物：[¹⁸F]FES(6α-[¹⁸F]氟-17β-***)的标记前体化合物

·由式(6)表示的化合物：[¹⁸F]FMISO([¹⁸F]氟米索硝唑(fluoromisonidazole))的标记前体化合物

·由式(7)表示的化合物：[¹⁸F]FRP-170(1-(2-[¹⁸F]氟-1-(羟甲基)乙氧基)甲基-2-硝基咪唑)的标记前体化合物

·由式(8)表示的化合物：[¹⁸F]FAZA([¹⁸F]氟氮霉素阿糖胞苷(fluoroazomycinarabinoside))的标记前体化合物

·由式(9)表示的化合物：1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑(WO2013/042668的化合物1)的标记前体化合物

·由式(10)表示的化合物：氟贝他吡(florbetapir)(¹⁸F)的标记前体化合物

·由式(11)表示的化合物：氟比他班(florbetaben)(¹⁸F)的标记前体化合物

·由式(12)表示的化合物：[¹⁸F]FP-CIT的标记前体化合物

·由式(13)表示的化合物：[¹⁸F]FDDNP(2-(1-{6-[(2-[¹⁸F]氟乙基)(甲基)氨基]-2-萘基}-亚乙基)丙二腈(malono nitrile))的标记前体化合物

·由式(14)表示的化合物：WO2015/199205中记载的具有CYP11B2选择性抑制能力的化合物的标记前体化合物

(式(14)中，R₁表示氢原子或CO₂Ra，R₂表示氢原子、卤素原子或CO₂R_a，R₃表示氢原子或碳原子数为1～10的羟基烷基，R₄表示氢原子、羟基或碳原子数为1～10的烷氧基，n表示1～5的整数，A表示CH或氮原子，X₁、X₃各自独立地表示氢原子或卤素原子，X₂表示氢原子、卤素原子或腈基，X₁、X₂、X₃中的至少1者是卤素原子，R_a各自独立地表示碳原子数为1～10的烷基。)

[化学式1]

[化学式2]

需要说明的是，式(1)～(14)中，L是离去基团，P₁是羟基的保护基，P₂是氨基的保护基，P₃是羧基的保护基。关于L，可从前述的离去基团之中，针对于每个由式(1)～(14)表示的化合物而分别进行选择。另外，关于P₁、P₂、P₃，可从Greene’s Protective Groups inOrganic Synthesis(格林有机合成中的保护基)(John Wiley&Sons Inc公司出版，第5版，2014年10月27日发行)中记载的基团之中，针对于每个由式(1)～(14)表示的化合物而分别进行选择。

关于放射性卤化反应，只要是使得以放射性卤化物离子(X^-)为亲核剂的放射性卤素标记前体化合物(S-L)的亲核取代反应进行的条件，则没有特别限定，可适当使用已知的方法。优选的是，使用非质子性溶剂，在碱存在下实行。为了提高反应速度，也可在加热条件下实行。

作为非质子性溶剂，可示例丙酮、***、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈等。

作为碱，优选使用碳酸钾、三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、二氮杂双环十一碳烯等非亲核性碱。

在使用了放射性氟化物离子作为放射性卤化物离子(X^-)的放射性氟化反应的情况下，可列举在相转移催化剂以及碱的存在下实行的方法。代表性地可列举：使用4，7，13，16，21，24-六氧杂-1，10-二氮杂双环[8.8.8]二十六烷(商品名：Kryptofix 222)以及碳酸钾的例子；使用碳酸氢四甲基铵、四乙基碳酸氢铵、碳酸氢四丙基铵、碳酸氢四丁基铵等碳酸氢四烷基铵的例子。另外，在放射性氟化反应方面，可优选在20～180℃的温度条件下实行。

在放射性卤化反应方面，关于放射性卤素标记前体化合物(S-L)的物质的量，相对于放射性卤化物离子的物质的量而言过量地使用。由此，关于通过实行放射性卤化反应而获得的反应混合物RM1至少包含放射性卤素标记前体化合物(S-L)和反应产物(S-X)。

[工序2]放射性卤素标记前体化合物的分解工序

在放射性卤素标记前体化合物(S-L)的分解工序中，通过将反应混合物RM1与多元酸(AH)或其盐(A^-B⁺)进行混合，从而实行放射性卤素标记前体化合物(S-L)的离去基团(L)与多元酸根离子(A^-)的取代反应，从而获得放射性卤素标记前体化合物的分解物(S-A)。由此，可获得包含放射性氟化反应的反应产物(S-X)与放射性卤素标记前体化合物的分解物(S-A)的反应混合物RM2。

多元酸(AH)是指价数为2以上的酸，可适当使用与放射性卤素标记前体化合物(S-L)的离去基团(L)进行取代、但不与反应产物(S-X)发生作用的多元酸。多元酸可以是多元有机酸，也可以是多元无机酸。多元有机酸是指，具备多个选自羧基、磺酸基以及酚基中的一者的酸性基团的多元有机酸、或者、将这些酸性基团组合而具备的多元有机酸，例如，作为具备多个羧基的多元有机酸，可列举柠檬酸、草酸、邻苯二甲酸、苹果酸、酒石酸、二亚乙基三胺五乙酸(diethylenetriamine pentaacetic acid，DTPA)、乙二胺四乙酸(EDTA)。另外，作为将羧基与酚基组合而具备的多元有机酸，可列举龙胆酸。另外，关于多元无机酸，可示例磷酸。

关于多元酸，为了提高与放射性卤素标记前体化合物(S-L)的反应性，也可形成盐(A^-B⁺)。多元酸的盐(A^-B⁺)是多元酸根离子(A^-)与阳离子(B⁺)的盐，优选为通过使得多元酸与相转移催化剂进行成盐而得到的盐，更优选为通过使得多元有机酸与相转移催化剂进行成盐而得到的盐。在优选的例子中，关于多元酸的盐(A^-B⁺)，可通过将多元酸与相转移催化剂进行混合从而制备。关于此处使用的相转移催化剂的例子，可列举四甲基铵盐、四乙基铵盐、四丙基铵盐、四丁基铵盐等四烷基铵盐，冠醚、穴醚的碱金属络合物(例如，4，7，13，16，21，24-六氧杂-1，10-二氮杂双环[8.8.8]二十六烷(商品名：Kryptofix 222)的钾离子(K⁺)络合物)。为了将多元酸与相转移催化剂进行成盐，优选通过在多元酸的物质的量乘以价数而得到的量与相转移催化剂的物质的量成为等价的条件下进行混合从而制备。另外，在多元酸的盐的制备中，也可将多元酸与相转移催化剂在任意的溶剂下混合。作为溶剂，可适当选择将多元酸以及相转移催化剂溶解且容易蒸散的溶剂，可列举：水；甲醇、乙醇等醇；丙酮；四氢呋喃；乙酸乙酯；等等。

关于在工序2中使用的多元酸或其盐的物质的量，在理论上，与在工序1的放射性氟化反应中残留的放射性卤素标记前体化合物(S-L)的物质的量为等价即可，但是也可以与在工序1中使用的放射性卤素标记前体化合物(S-L)的物质的量为等价。从使得放射性卤素标记前体化合物(S-L)迅速地分解的观点考虑，关于多元酸或其盐的物质的量，优选相对于在工序1中使用的放射性卤素标记前体化合物(S-L)的物质的量而言过量地使用。例如，相对于在工序1中使用的放射性卤素标记前体化合物(S-L)的物质的量而言，将多元酸或其盐的物质的量设为1～100摩尔当量，优选设为1.5～50摩尔当量，更优选设为2～20摩尔当量。

关于多元酸或其盐与反应混合物RM1的混合物，为了促进多元酸根离子(A^-)与放射性卤素标记前体化合物(S-L)的反应速度，也可根据需要而进行加热。另外，对反应混合物RM1与多元酸或其盐的混合物进行加热的情况下，优选在溶剂下进行加热。作为溶剂的种类以及温度条件，选择可提高多元酸根离子(A^-)的反应性、且使得反应产物(S-X)不发生反应或者不发生分解的溶剂的种类以及温度条件。在工序1中在非质子性溶剂下进行了放射性卤化反应的情况下，反应混合物RM1也可在包含非质子性溶剂的状态下与多元酸或其盐进行混合。另外，相对于反应混合物RM1，也可添加溶剂，或者也可将在放射性卤化反应中使用的非质子性溶剂进行蒸散，使用与在放射性卤化反应中使用的溶剂不同的溶剂。作为此处使用的溶剂，优选使用乙腈、二甲基亚砜或者二甲基甲酰胺。另外，温度条件优选为60～180℃。

需要说明的是，从提高多元酸根离子(A^-)相对于放射性卤素标记前体化合物(S-L)的反应性的观点考虑，反应混合物RM1优选包含在放射性卤化反应中使用的相转移催化剂。

通过这样操作，可获得包含反应产物(S-X)与放射性卤素标记前体化合物的分解物(S-A)的反应混合物RM2。

[工序3]纯化工序

在纯化工序中，利用固相萃取法，从反应混合物RM2中将放射性卤化反应的反应产物(S-X)进行纯化。

关于在工序3中使用的固相萃取法，只要是可将放射性卤化反应的反应产物(S-X)与放射性卤素标记前体化合物的分解物(S-A)进行分离的条件则没有特别限制，但是优选使用具有阴离子交换基团的固相柱(solid phase cartridge)。通过这样操作，使得多元酸所具有的多个酸性基团之中的、除了通过与离去基团(L)进行取代而与S(底物)结合了的一种酸性基团以外的酸性基团、与固相柱的阴离子交换基团进行离子键合，因而可使分解物(S-A)保持于固相柱。另一方面，放射性卤化反应的反应产物(S-X)未与固相柱的阴离子交换基团进行离子键合，因而向固相柱的吸附能力相对于放射性卤素标记前体化合物的分解物(S-A)而言相对地变弱。因此，能够将放射性卤化反应的反应产物(S-X)与放射性卤素标记前体化合物的分解物(S-A)分离。

另外，关于在工序3中使用的固相萃取法，更优选使用一并具有反相分配能力与阴离子交换能力的固相柱(混合模式(mix mode)的固相柱)。具体而言，优选使用通过将阴离子交换基团结合于包含二乙烯基苯以及乙烯基吡咯烷酮的共聚物的多孔性聚合物而得到的固相柱、或者、具有十八烷基和阴离子交换基团的固相柱。通过这样操作，从而可将反应混合物RM2中所含的非放射性杂质与放射性卤化反应的反应产物(S-X)分离，进一步提高放射性卤化反应的反应产物(S-X)的纯度。

作为固相萃取法的操作中的一个例子，可列举如下的方法：用水将反应混合物RM2进行稀释，通液于混合模式的固相柱，然后将放射性卤化反应的反应产物(S-X)以及放射性卤素标记前体化合物的分解物(S-A)吸附于固相柱，利用乙醇，在将放射性卤素标记前体化合物的分解物(S-A)吸附于固相柱的状态下将反应产物(S-X)溶出。但是，稀释液以及溶出液的种类不限定于此例子，可根据放射性卤化反应的反应产物(S-X)的种类而采用各种稀释液以及溶出液。

在放射性卤化反应的反应产物(S-X)是目标放射性卤素标记化合物的情况下，通过在工序3中实施固相萃取法，从而可获得目标的放射性卤化物。在工序1中，使用了式(1)～(11)所示那样的具有保护基(P₁、P₂、P₃)的化合物作为放射性卤素标记前体化合物(S-L)的情况下，在工序3之后，通过对放射性卤化反应的反应产物(S-X)进一步进行脱保护反应，从而可获得目标放射性卤素标记化合物。

另外，在工序3之后，为了将放射性卤素标记化合物进行纯化，也可进一步进行下述纯化：为了去除放射性卤化物离子而使用氧化铝的纯化；以分离非放射性杂质为目的而使用反相固相柱的纯化；等等。

可通过向所获得的放射性卤素标记化合物中适当添加pH调节剂、增溶剂、稳定剂或者抗氧化剂，并利用水或者生理盐溶液等的等渗液进行稀释，从而制备放射性医药。

实施例

以下，记载实施例来进一步详细地说明本发明，但本发明不限定于这些内容。

(实施例1)柠檬酸四乙基铵盐的合成

将四乙基碳酸氢铵盐(15.6mmol、2.98g)溶解于甲醇30ml，加入柠檬酸(5.2mmol、1.0g)。将其于室温搅拌30分钟，然后将溶剂蒸馏去除。通过用氯仿(20mL)将残留物进行3次清洗，然后在减压下进行干燥，从而获得了柠檬酸四乙基铵盐(5.0mmol、2.8g)。

使用NMR装置：AVANCE-III(Bruker公司制造)

¹H-NMR(溶剂：氘代二甲基甲酰胺，共振频率：500MHz)：δ3.23(q，J＝7.2Hz，24H)，2.23以及2.17(qa-b，J＝14.6Hz，4H)，1.18(t，J＝7.2Hz，36H)。

(实施例2)[¹⁸F]CDP2230的制备

按照以下的工序1～3的步骤，制造醛固酮(aldosterone)合酶(CYP11B2)显像剂(imaging agent)的6-氯-5-氟-1-(2-[¹⁸F]氟乙基)-2-[5-(咪唑-1-基甲基)吡啶-3-基]苯并咪唑([¹⁸F]CDP2230；WO2015/199205的化合物[¹⁸F]100)。

[工序1]

将含有[¹⁸F]氟化物离子的[¹⁸O]水(放射能量43.8MBq，合成开始时修正值)，通液于制备为碳酸型的Sep-Pak Light QMA(商品名，Nihon Waters K.K制造)，吸附捕集[¹⁸F]氟化物离子。接着，通过将四乙基碳酸氢铵水溶液(5.1μmol/L、0.2mL)以及乙腈0.8mL溶液通液于该色谱柱(colume)，从而溶出[¹⁸F]氟化物离子。将其在氩气的通气下、于110℃进行加热而将水蒸发，然后加入乙腈(0.3mL×3)而进行共沸并且使其干固。此处，通过加入溶解了6-氯-5-氟-2-[5-(咪唑-1-基甲基)吡啶-3-基]-1-[2-(对甲苯磺酰基氧基)乙基]苯并咪唑(WO2015/199205的化合物17，前体化合物1)(5mg，相当于9.52μmol)的二甲基亚砜溶液(1.0mL)，并于100℃加热7分钟，从而实行放射性氟化反应。

[工序2]

在工序1结束后，将由实施例1制备出的柠檬酸四乙基铵盐55.2mg(相当于95.2μmol)溶于二甲基亚砜溶液0.5mL，添加于放射性氟化反应的反应液，并于100℃加热5分钟。

[工序3]

在工序2结束后，加入注射用水15mL，通液于Oasis(注册商标)WAX Plus(商品名，Nihon Waters K.K.制造)，将[¹⁸F]CDP2230吸附捕集于该色谱柱。用水(10mL)将该色谱柱进行清洗，然后将乙醇(5mL)进行通液从而溶出[¹⁸F]CDP2230。

在工序3中获得的溶出液的放射能量为18.2MBq(合成开始后45分钟)。基于下述的条件而进行了TLC分析，结果是放射化学纯度为97.5％。另外，基于下述的条件而进行了HPLC分析，结果是未确认到前体化合物1，通过换算为前体化合物1，确认到混入了1.94mg的非放射性杂质。

[TLC条件]

板(plate)：TLC玻璃板硅胶60F₂₅₄

展开剂：乙腈/二乙胺/水＝10∶1∶1

[HPLC条件]

色谱柱：XBridge Phenyl(商品名，Nihon Waters K.K.制造，粒径：3.5μm，尺寸：

)

柱温：40℃附近的一定温度

流动相：10mM碳酸氢铵溶液/甲醇＝50/50→35/65(0→10分钟)，35/65→0/100(10→25分钟)

流速：1.0mL/分钟

检测器：紫外可见吸光光度计(检测波长：300nm)

(比较例1)[¹⁸F]CDP2230的制备

除省略了实施例2的工序2以外，与实施例2大致同样地操作，如以下那样，制造[¹⁸F]CDP2230。

将含有[¹⁸F]氟化物离子的H₂ ¹⁸O(放射能量34.9MBq，合成开始时修正值)，通液于制备为碳酸型的Sep-Pak Light QMA(商品名，Nihon Waters K.K.制造)，吸附捕集[¹⁸F]氟化物离子。接着，通过将四乙基碳酸氢铵水溶液(5.1μmol/L、0.2mL)以及乙腈0.8mL溶液通液于该色谱柱，从而溶出[¹⁸F]氟化物离子。将其在氩气的通气下、于110℃进行加热而将水蒸发，然后加入乙腈(0.3mL×2)而进行共沸并使其干固。通过向其中加入溶解了5mg(相当于9.52μmol)的前体化合物1的二甲基亚砜溶液1.0mL，并于100℃加热7分钟，从而实行放射性氟化反应。

在放射性氟化反应结束后，将注射用水15mL加入于放射性氟化反应的反应液，通液于Oasis(注册商标)WAX Plas(商品名，Nihon Waters K.K.制造)，将[¹⁸F]CDP2230吸附捕集于该色谱柱。用水(10mL)将该色谱柱进行清洗，然后将乙醇(5mL)进行通液而溶出[¹⁸F]CDP2230。

所获得的溶出液的放射能量为13.4MBq(合成开始后46分钟)。基于实施例2的条件而进行TLC分析，结果是放射化学纯度为97.44％。另外，基于实施例2的条件而进行了HPLC分析，结果是，通过换算为前体化合物1，确认到混入了1.13mg的前体化合物1、合计为2.39mg的非放射性杂质。

(实施例3)放射性氟化1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑的制备

按照以下的工序1～4的步骤，制造作为乏氧显像剂的1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑(WO2013/042668的化合物1的¹⁸F标记体)。

[工序1]

将含有[¹⁸F]氟化物离子的H₂ ¹⁸O(放射能量85.1MBq，合成开始时修正值)，通液于制备为碳酸型的Sep-Pak Light QMA(商品名，Nihon Waters K.K制造)，吸附捕集[¹⁸F]氟化物离子。接着，通过将四乙基碳酸氢铵水溶液(5.1μmol/L、0.2mL)以及乙腈0.8mL溶液通液于该色谱柱，从而溶出[¹⁸F]氟化物离子。

将其在氩气的通气下、于110℃进行加热而将水蒸发，然后加入乙腈(0.3mL×2)而进行共沸并且使其干固。通过向其中加入溶解了2，2-二甲基-5-[(2-硝基-1H-咪唑-1-基)甲基]-5-(对甲苯磺酰基氧基甲基)-1，3-二氧杂环己烷(WO2013/042668的图1步骤5的产物，前体化合物2)5mg(相当于11.7μmol)的二甲基亚砜溶液1.0mL，并于100℃加热10分钟，从而实行放射性氟化反应。

[工序2]

在工序1结束后，将由实施例1制备出的柠檬酸四乙基铵盐(相当于100μmol)溶于二甲基亚砜溶液0.5mL，添加于放射性氟化反应的反应液，并于100℃加热5分钟。

[工序3]

在工序2结束后，加入注射用水10mL，通液于Oasis(注册商标)WAX Plas(商品名，Nihon Waters K.K.制造)，将1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑的保护体吸附捕集于该色谱柱。用水(10mL)将该色谱柱进行清洗，然后将乙醇(3mL)进行通液从而溶出1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑的保护体。

[工序4]

向工序3中获得的溶出液中加入1mol/L盐酸2.0mL，并于110℃加热3分钟而进行脱保护反应。反应终止后，加入注射用水10mL，通液于Oasis(注册商标)HLB Plas(商品名，Nihon Waters K.K.制造)，将1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑吸附捕集于该色谱柱。用水(10mL)将该色谱柱进行清洗，然后将乙醇(3mL)进行通液从而溶出1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑。

所获得的溶出液的放射能量为15.9MBq(合成开始后99分钟)。基于下述条件而进行TLC分析，结果是放射化学纯度为98.84％。另外，基于下述的条件而进行HPLC分析，结果是，通过换算为前体化合物2，确认到混入了0.91mg的源自前体化合物2的杂质、合计为1.27mg的非放射性杂质。

[TLC条件]

板：TLC玻璃板硅胶60F₂₅₄

展开剂：乙酸乙酯/甲醇/三乙胺＝5∶1∶0.5

[HPLC条件]

色谱柱：YMC-TriartC18(商品名，YMC公司制造，粒径：5μm、尺寸：

)

柱温：25℃附近的一定温度

流动相：50mM碳酸铵水溶液/乙腈＝100/0→30/70(0→40分钟)

流速：1.0mL/分钟

检测器：紫外可见吸光光度计(检测波长：254nm)

(比较例2)乏氧显像剂的合成

除省略了实施例3的工序2以外，与实施例3大致同样地操作，如以下那样，制造1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑。

将含有[¹⁸F]氟化物离子的H₂ ¹⁸O(放射能量51.6MBq，合成开始时修正值)，通液于制备为碳酸型的Sep-Pak Light QMA(商品名，Nihon Waters K.K.制造)，吸附捕集[¹⁸F]氟化物离子。接着，通过将四乙基碳酸氢铵水溶液(5.1μmol/L、0.2mL)以及乙腈0.8mL溶液通液于该色谱柱，从而溶出[¹⁸F]氟化物离子。将其在氩气的通气下以110℃加热而将水蒸发，然后加入乙腈(0.3mL×2)而进行共沸并且使其干固。通过向其中加入溶解了5mg(相当于11Aμmol)的前体化合物2的二甲基亚砜溶液1.0mL，并于100℃加热7分钟，从而实行放射性氟化反应。

在放射性氟化反应结束后，将注射用水10mL加入于放射性氟化反应的反应液，通液于Oasis(注册商标)WAX Plas(商品名，Nihon Waters K.K制造)，将1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑的保护体吸附捕集于该色谱柱。用水(10mL)将该色谱柱进行清洗，然后将乙醇(3mL)进行通液而溶出1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑的保护体。

向该溶出液中加入1mol/L盐酸2.0mL，并于110℃加热3分钟。反应终止后，加入注射用水10mL，通液于Oasis(注册商标)HLB Plas(商品名，Nihon Waters K.K.制造)，将1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑吸附捕集于该色谱柱。用水(10mL)将该色谱柱进行清洗，然后将乙醇(3mL)进行通液从而溶出1-(2，2-二羟基甲基-3-[¹⁸F]氟丙基)-2-硝基咪唑。

所获得的溶出液的放射能量为13.2MBq(合成开始后90分钟)。基于实施例3的条件而进行TLC分析，结果是放射化学纯度为98.00％。另外，基于实施例3的条件而进行HPLC分析，结果是，通过换算为前体化合物2，确认到混入了2.23mg的源自前体化合物2的杂质、2.27mg的非放射性杂质。

根据以上的实施例而揭示了，利用本发明的方法，可不依赖于以往的HPLC法，而利用固相萃取法将放射性卤化反应的反应产物从未反应的放射性卤素标记前体化合物中进行分离纯化。

本申请主张以于2017年6月23日提出申请的日本申请特愿2017-122981号为基础的优先权，将其公开内容的全部并入本文中。