2-吡啶取代脲结构小分子化合物及其合成和应用
阅读说明：本技术 2-吡啶取代脲结构小分子化合物及其合成和应用 (2-pyridine substituted urea structure small molecule compound and synthesis and application thereof ) 是由 赵玉军 李佳 王增涛 张世言 臧奕 王培培 孙丹丹 张含烟 于 2019-08-05 设计创作，主要内容包括：本发明涉及2-吡啶取代脲结构小分子化合物及其合成和应用。具体地,本发明公开了式(I)所述的化合物,其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物,或其药学上可接受的盐、水合物及溶剂合物及其制备方法和在制备ASK1小分子抑制剂,或预防和/或治疗与ASK1相关疾病,尤其是肝脏疾病、肺部疾病、心血管疾病、肾脏疾病和代谢性疾病的药物中的用途。<Image he="332" wi="433" file="DDA0002155692710000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The invention relates to a 2-pyridine substituted urea structure micromolecule compound and synthesis and application thereof. Specifically, the invention discloses a compound shown in formula (I), an enantiomer, a diastereoisomer, a racemate or a mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, a hydrate or a solvate thereof, a preparation method thereof, and an application of the compound in preparing ASK1 small molecule inhibitors, or medicines for preventing and/or treating ASK1 related diseases, especially liver diseases, lung diseases, cardiovascular diseases, kidney diseases and metabolic diseases.)
技术领域
本发明属于医药领域，具体地，本发明涉及一类ASK1激酶的小分子抑制剂，具体涉及一类具有2-吡啶取代脲结构的小分子化合物及其制备方法和在制备ASK1小分子抑制剂或预防和/或治疗与ASK1相关疾病，尤其是肝脏疾病、肺部疾病、心血管疾病、肾脏疾病和代谢性疾病的药物中的用途。
发明背景
ASK1激酶，全称细胞凋亡信号调节激酶-1(Apoptosis Signal-regulatingKinase 1)是一种细胞胞浆内激酶，属于细胞丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase kinase,MAP3Ks)的家族成员之一。ASK1激酶具有激活细胞信号通路下游JNK激酶和p38激酶的能力，在调节细胞氧化应激、炎性基因功能失调、线粒体功能失常、细胞内质网应激和细胞凋亡具有重要作用。
ASK1激酶对于治疗一系列心血管疾病，例如心脏功能衰竭，具有潜在的治疗价值。最新的研究还表明，ASK1激酶抑制剂对于治疗常见的肝脏疾病，例如非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝炎、慢性肝病、代谢性肝病、肝纤维化、原发性硬化性胆管炎、肝脏缺血-再灌注损伤、原发性胆汁肝硬化、糖尿病相关的肝脏疾病等疾病，具有潜在治疗前景。生物学和医学相关研究还表明，ASK1激酶激酶抑制剂具有治疗肺部疾病(例如肺动脉高压、肺纤维化)的疗效。此外，抑制ASK1激酶也具有治疗肾脏疾病(血管球性肾炎、糖尿病肾病、高血压性肾病)的可行性。抑制ASK1激酶活性在糖尿病小鼠模型中，具有显著的治疗效果；使用ASK1小分子抑制剂GS-444217可以降低糖尿病的参数指标。
目前，已经有一些文献报到了一些ASK1激酶小分子抑制剂及其潜在的生物学研究和潜在的临床应用前景，
文献中报道的部分ASK1激酶小分子抑制剂具有分子水平活性较差，ASK1靶点选择性欠佳，动物药效量效关系不明显，化合物的类药性不好等潜在问题。另外，部分化合物具有化学稳定性和体内代谢稳定性的潜在问题。还有一些ASK1激酶小分子抑制剂水溶性太强，动物口服药物后体内暴露量偏低，相应的药物在动物体内的药代动力学性质欠佳，导致化合物的体内药效有待提高。
因此，本领域仍然需要研发一种效果更好的ASK1激酶小分子抑制剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一类结构新颖的ASK1激酶的小分子抑制剂。
本发明的目的还在于提供上述化合物的制备方法和用途。
本发明第一方面提供了一种式(I)所述的化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或其药学上可接受的盐、水合物及溶剂合物，
其中，
R3表示取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-6元杂芳环，所述的取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C6烷氧基；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：羟基、氨基、羧基；
M表示氢、氘、卤素、取代或未取代的C1-C4烷基或取代或未取代的C1-C4烷氧基，所述的取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、C3-C6环烷基、C1-C6烷氧基；
A表示氧原子、硫原子或NH；
且Y表示氮原子或氧原子；
其中，
当Y表示氧原子时，
R1为无；
R2表示氢、C1-C6烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-14元杂环；
其中，所述的取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：氧原子、卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的苯环、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环，取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-13元杂环，取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的C2-C4炔基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基、取代或未取代的C1-C4烷基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4磺酰基、取代或未取代的C1-C4烷基硫基、取代或未取代的C2-C10酰基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基羰基，或其组合；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氰基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基氨基、C1-C4烷基氨基、C3-C4环氧烷基、C3-C6环烷基、氨基羰基；
当Y表示氮原子时，
R1表示氢或者C1-C6烷基；
R2表示氢、C1-C6烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-14元杂环；
其中，所述的取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：氧原子、卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的苯环、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环，取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-13元杂环，取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的C2-C4炔基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基、取代或未取代的C1-C4烷基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4磺酰基、取代或未取代的C1-C4烷基硫基、取代或未取代的C2-C10酰基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基羰基，或其组合；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氰基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基氨基、C1-C4烷基氨基、C3-C4环氧烷基、氨基羰基；
或，当Y表示氮原子时，R1、R2和连接的氮原子可以组成如下环状结构：
其中，环D表示未取代的或取代的部分不饱和或不饱和的含有1-4个选自N、O和S原子的5-14元杂环、或未取代的或取代的饱和的含有1-4个选自N、O和S原子的5-12元杂芳环，且这些杂环或杂芳环通过环内的N原子和羰基连接；
其中，所述的取代是指上述的环D的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：氧原子、卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、亚氨基、硝基、取代或未取代的苯环、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S原子的5-12元杂芳环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-13元杂环，取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的C2-C4炔基、取代或未取代的C3-C6环烷基，取代或未取代的C1-C4烷基氨基、取代或未取代的C1-C4烷基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4磺酰基、取代或未取代的C1-C4烷基硫基、取代或未取代的C2-C10酰基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基羰基，或其组合；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氰基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基氨基、C1-C4烷基氨基、C3-C4环氧烷基、C3-C6环烷基、氨基羰基。
在另一优选例中，所述的化合物具有如下式Ia所示的结构：
其中，
R3表示取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-6元杂芳环(如四唑基、***基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噻唑基、恶唑基等)，所述的取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、取代或未取代的C3-C6环烷基；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：羟基、氨基；
M表示氢、氘、卤素、取代或未取代的C1-C4烷基或取代或未取代的C1-C4烷氧基；
且Y表示氮原子或氧原子；
其中，
当Y表示氧原子时，
R1为无；
R2表示氢、C1-C6烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环(如吡啶、苯并吡啶、吡唑、苯并吡咯、苯并吡唑、咪唑、苯并咪唑、苯并哒嗪、吡啶并吡咯等)、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-14元杂环(如苯并四氢吡咯、吡啶并四氢吡咯、苯并二氧环戊基等)；
其中，所述的取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：氧原子、卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的苯环、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环，取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-13元杂环，取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的C2-C4炔基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基、取代或未取代的C1-C4烷基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4磺酰基、取代或未取代的C1-C4烷基硫基、取代或未取代的C2-C10酰基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基羰基，或其组合；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氰基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基氨基、C1-C4烷基氨基、C3-C4环氧烷基、氨基羰基；
当Y表示氮原子时，
R1表示氢或者C1-C6烷基；
R2表示氢、C1-C6烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的苄基、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环(如吡啶、苯并吡啶、吡唑、苯并吡咯、苯并吡唑、咪唑、苯并咪唑、苯并哒嗪、吡啶并吡咯等)、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-14元杂环(如苯并四氢吡咯、吡啶并四氢吡咯、苯并二氧环戊基等)；
其中，所述的取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：氧原子、卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的苯环、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环，取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-13元杂环，取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的C2-C4炔基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基、取代或未取代的C1-C4烷基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4磺酰基、取代或未取代的C1-C4烷基硫基、取代或未取代的C2-C10酰基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基羰基，或其组合；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氰基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基氨基、C1-C4烷基氨基、C3-C4环氧烷基、氨基羰基；
或，当Y表示氮原子时，R1、R2和连接的氮原子可以组成如下环状结构：
其中，环D表示部分不饱和或不饱和的含有1-4个选自N、O和S原子的5-14元杂环(例如单环杂环、双环稠环杂环或三环稠环杂环)或饱和的含有1-4个选自N、O和S原子的5-12元杂芳环，且这些杂环或杂芳环通过环内的N原子和羰基连接；
其中，所述的取代是指上述的环D的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：氧原子、卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的苯环、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S原子的5-12元杂芳环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-13元杂环，取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的C2-C4炔基、取代或未取代的C3-C6环烷基，取代或未取代的C1-C4烷基氨基、取代或未取代的C1-C4烷基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4磺酰基、取代或未取代的C1-C4烷基硫基、取代或未取代的C2-C10酰基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基羰基，或其组合；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氰基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基氨基、C1-C4烷基氨基、C3-C4环氧烷基、氨基羰基。
在另一优选例中，所述的化合物具有如下式I-1或I-2所示的结构：
其中，R1、R2、R3、M的定义同前。
在另一优选例中，所述的化合物具有如下式I-3所示的结构：
其中，环D、R3和M的定义同前；
其中，R4、R4a各自独立地为氧原子、卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、亚氨基、硝基、取代或未取代的苯环、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环，取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-13元杂环，取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的C2-C4炔基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基、取代或未取代的C1-C4烷基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4磺酰基、取代或未取代的C1-C4烷基硫基、取代或未取代的C2-C10酰基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基羰基，或其组合；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氰基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基氨基、C1-C4烷基氨基、C3-C4环氧烷基、C3-C6环烷基、氨基羰基。
在另一优选例中，所述的化合物具有如下式式I-4、I-5或I-6所示的结构：
其中，R4、R4a、R3和M的定义同前；
X表示-CH2-、-O-、-NR5-或-S-；其中，R5表示氢、C1-C6烷基、甲酰基、C1-C5烷基羰基、或C1-C5烷基磺酰基。
在另一优选例中，所述的化合物具有I-7、I-8、I-9或I-10所示的结构：
其中环A，环B，环C，R4，R4a定义同前，且环A和环B为稠环体系，环A和环B和环C为稠环体系。
在另一优选例中，所述的化合物具有如下式I-19和I-20所示的结构：
其中环A，环B，环C，R4，R4a定义同前，且环A和环B为稠环体系，环A和环B和环C为稠环体系。
在另一优选例中，所述化合物选自下组：
在另一优选例中，所述化合物选自下组：序号1至序号336的化合物。
在另一优选例中，R3为序号1至序号336的化合物中对应的具体基团，如
在另一优选例中，类似地，R1、R2也为序号1至序号336的化合物中对应的具体基团，限于篇幅，不一一例举。
本发明第二方面提供了一种ASK1激酶抑制剂，所述的抑制剂包括本发明第一方面所述的化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或其药学上可接受的盐、水合物及溶剂合物。
本发明第三方面提供了一种药物组合物，包括：(A)治疗有效量的本发明第一方面所述的化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或其药学上可接受的盐、水合物及溶剂合物中的一种或多种；和(B)药学上可接受的载体。
在另一优选例中，所述药学上可接受的载体选自下组：粘合剂、填充剂、稀释剂、崩解剂、混悬剂、助悬剂、缓(控)释剂、冻干保护剂、包衣剂、肠溶材料、润滑剂、助流剂、抗粘剂、甜味剂、风味剂、增塑剂、遮光剂、增溶剂、保湿剂、溶剂、渗透压调节剂、着色剂、色素、表面活性剂、乳化剂、水溶性基质、脂溶性基质、油脂性基质、致孔剂、凝胶剂、防腐剂、缓冲剂、螯合剂、抗氧剂，或其组合。
本发明第四方面提供了第一方面所述的化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或其药学上可接受的盐、水合物及溶剂合物的用途，用于制备用于治疗与ASK1激酶的活性或表达量相关的疾病的药物。
在另一优选例中，所述与ASK1激酶相关的疾病选自下组：肝脏疾病、肺部疾病、心血管疾病、肾脏疾病和代谢性疾病。
在另一优选例中，所述肝脏疾病选自下组：非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝炎、慢性肝病、代谢性肝病、肝纤维化、原发性硬化性胆管炎、肝脏缺血-再灌注损伤、原发性胆汁肝硬化、糖尿病相关的肝脏疾病。在另一优选例中，所述肺部疾病选自下组：肺动脉高压、肺纤维化。在另一优选例中，所述心血管疾病选自下组：心脏功能衰竭。在另一优选例中，所述肾脏疾病选自下组：血管球性肾炎、糖尿病肾病、高血压性肾病。在另一优选例中，所述代谢性疾病选自下组：二型糖尿病，一型糖尿病。
本发明第五方面提供了本发明第一方面所述的化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或其药学上可接受的盐、水合物及溶剂合物的制备方法，
所述化合物为式(I-1-1)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：在惰性溶剂中，将化合物S1与化合物S2反应，从而形成中间体S3；
步骤二：在惰性溶剂中，将化合物S3与化合物S4反应，从而形成终产物I-1-1；
其中，M、R3、R1、R2定义同前；Z表示H或者苯环上的取代基，所述取代基选自下组：硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基磺酰基。
所述化合物为式(I-3)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：在惰性溶剂中，将化合物SS1与化合物S5反应，从而形成终产物I-3；
其中，M和R3、R4和R4a定义同前；Z表示H或者苯环上的取代基，所述取代基选自下组：硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基磺酰基；
或所述化合物为式(I-4)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：在惰性溶剂中，将化合物S10与化合物S11反应，从而形成化合物S14；或者，在惰性溶剂中，将化合物S12和化合物S13反应，从而形成化合物S14；
步骤三：在惰性溶剂中，将化合物S14除去Boc保护基团，从而形成中间体S15；
步骤四：在惰性溶剂中，将中间体S15和化合物S3反应，从而形成终产物I-4；
其中，M和R3、R4和R4a定义同前；Z表示H或者苯环上的取代基，所述取代基选自下组：硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基磺酰基，
或所述式(I)化合物为式(I-5)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：在惰性溶剂中，将化合物S16与化合物S3反应，从而形成终产物I-5；
其中，M和R3、R4和R4a定义同前；Z表示H或者苯环上的取代基，所述取代基选自下组：硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基磺酰基；
或所述式(I)化合物为式(I-6)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：在惰性溶剂中，将化合物S17与化合物S3反应，从而形成终产物I-6；
其中，M和R3、R4和R4a定义同前；Z表示H或者苯环上的取代基，所述取代基选自下组：硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基磺酰基。
所述化合物为式(I-7)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：在惰性溶剂中，将化合物S18与化合物S2反应，从而形成中间体S19；
步骤二：在惰性溶剂中，将化合物S19与化合物S20反应，从而形成终产物I-7。
其中，R3、R4、R4a定义同权利要求1；Z表示H或者苯环上的取代基，所述取代基选自下组：硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基磺酰基；利用类似合成方法，可以制备I-8、I-9和I-10。
所述化合物为式(I-19)和(I-20)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：在惰性溶剂中，将化合物I-4与化合物劳森试剂反应，从而得到化合物I-20；
步骤二：在惰性溶剂中，将化合物I-20和氨水反应，从而得到化合物I-19；
其中，R3、R4、R4a定义同权利要求1；Z表示H或者苯环上的取代基，所述取代基选自下组：硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基磺酰基；
所述化合物为式(I-21)和(I-22)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：在惰性溶剂中，将化合物I-5与化合物劳森试剂反应，从而得到化合物I-22；
步骤二：在惰性溶剂中，将化合物I-22和氨水反应，从而得到化合物I-21；
其中，R3、R4、R4a定义同权利要求1；Z表示H或者苯环上的取代基，所述取代基选自下组：硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基磺酰基。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
具体实施方式
本发明人通过广泛而深入的研究，发现了一类结构新颖的可作为ASK1激酶抑制剂的化合物。本发明的化合物具有很好的ASK1激酶抑制活性。在此基础上，完成了本发明。
术语
在本文中，除特别说明之处，术语“取代”指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：氧原子、卤素、氘原子、氰基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的苯环、取代或未取代的萘环、取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳环，取代或未取代的含1-4个选自N、O和S的杂原子的5-13元杂环，取代或未取代的C1-C4烷基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷氧基、取代或未取代的C2-C4烯基、取代或未取代的C2-C4炔基、取代或未取代的C3-C6环烷基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基、取代或未取代的C1-C4烷基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基氨基、取代或未取代的C1-C4磺酰基、取代或未取代的C1-C4烷基硫基、取代或未取代的C2-C10酰基、取代或未取代的C1-C4烷氧基羰基、取代或未取代的C1-C4烷基氨基羰基，或其组合；其中，所述的取代基团上的一个或多个氢原子被选自下组的基团取代：卤素、氰基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基氨基、C1-C4烷基氨基、C3-C4环氧烷基、氨基羰基。
当烷基之前标注的碳原子数目改变时，说明烷基具有相应的的碳原子数目。
术语“C1-C6烷基”指具有1～6个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、或类似基团。
术语“C2-C4烯基”指具有2-4个碳原子的直链或支链烯基，例如乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、异丁烯基、仲丁烯基、或类似基团。
术语“C2-C4炔基”指具有2-4个碳原子的直链或支链炔基，例如乙炔基、丙炔基、异丙炔基、丁炔基、异丁炔基、仲丁炔基、或类似基团。
术语“C3-C6环烷基”指具有3-6个碳原子的环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基、或类似基团。
术语“C1-C4烷氧基”指具有1-4个碳原子的直链或支链烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、或类似基团。
术语“卤素”指F、Cl、Br和I。
术语“C1-C4烷氨基(或烷基氨基)”指被胺基取代的C1-C4烷基，例如具有“(C1-C4烷基)-NH-”或“(C1-C4烷基)2-N-”、“-(C1-C4亚烷基)-NH2”、“(C1-C4烷基)-NH-(C1-C4亚烷基)-”、或“(C1-C4烷基)2-N-(C1-C4亚烷基)-”结构的基团，例如CH3NH-、C2H5NH-、C3H7NH-、(CH3)2N-、-CH2NH2、-C2H5NH2、-C3H7NH2、-C2H4N(CH3)2，或类似基团。其中，C1-C4烷基的定义如前所述。
术语“C2-C10酰基”指具有1-9个碳原子的直链或支链烷基/环烷基/杂芳基-羰基”结构的取代基，如乙酰基、丙酰基、丁酰基、异戊基酰基、新戊基酰基、环己基酰基、环苯甲酰基、2-萘甲酰基、3-四氢呋喃酰基、4-吡啶酰基，3-吡咯酰基或类似基团。
术语“C1-C4磺酰基”指具有1-4个碳原子的磺酰基(-S(O)2-)；
术语“C3-C4环氧烷基”指具有3或4个碳原子且具有一个氧原子的环基；
术语“C6-C10芳基”指具有6-10个碳原子的芳基，例如苯基、萘基等，所述的芳基可以是取代或未取代的。
术语“5-14元的杂环”指具有5-14元的环状饱和、部分不饱和或芳香性基团，其中，所述的杂环具有至少1个(1个、2个、3个或4个)选自下组的环原子：O、S和/或N。
术语“5-12元杂芳环”指具有5-12元的环状芳香性基团，其中，所述的杂环具有至少1个(1个、2个、3个或4个)选自下组的环原子：O、S和/或N
特别地，形如“C1-Cn”的表述指基团具有1-n个碳原子，例如，“C1-C12”的表述指基团具有1个，2个，3个，4个，5个，6个，7个，8个，9个，10个，11个或12个碳原子；“C6～C10”指基团具有6个，7个，8个，9个或10个碳原子。
本发明中，术语“药学上可接受的”成分是指适用于人和/或动物而无过度不良副反应(如毒性、刺激和***反应)，即有合理的效益/风险比的物质。
本发明中，术语“有效量”指治疗剂治疗、缓解或预防目标疾病或状况的量，或是表现出可检测的治疗或预防效果的量。对于某一对象的精确有效量取决于该对象的体型和健康状况、病症的性质和程度、以及选择给予的治疗剂和/或治疗剂的组合。因此，预先指定准确的有效量是没用的。然而，对于某给定的状况而言，可以用常规实验来确定该有效量，临床医师是能够判断出来的。
除非特别说明，本发明中，所有出现的化合物均意在包括所有可能的光学异构体，如单一手性的化合物，或各种不同手性化合物的混合物(即外消旋体)。本发明的所有化合物之中，各手性碳原子可以任选地为R构型或S构型，或R构型和S构型的混合物。
如本文所用，术语“本发明化合物”指式I所示的化合物。该术语还包括及式I化合物的各种晶型形式、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐。药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐。一类优选的盐是本发明化合物与酸形成的盐。适合形成盐的酸包括但并不限于：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、苯甲磺酸，苯磺酸等有机酸；以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。
药物组合物和施用方法
由于本发明化合物具有优异的ASK1抑制活性，因此本发明化合物及其各种晶型，药学上可接受的无机或有机盐，水合物或溶剂合物，以及含有本发明化合物为主要活性成分的药物组合物可用于治疗、预防以及缓解与ASK1相关的疾病。根据现有技术，本发明化合物可用于预防和治疗肝脏疾病、肺部疾病、心血管疾病、肾脏疾病和代谢性疾病的应用。
本发明的药物组合物包含安全有效量范围内的本发明化合物或其药理上可接受的盐及药理上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-2000mg本发明化合物/剂，更佳地，含有5-200mg本发明化合物/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个胶囊或药片。
“药学上可以接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。
本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和***胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。
固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。
用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。
除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。
除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。
用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。
本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。
使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选5～500mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
制备方法
本发明化合物可以通过常规方法制得，也可以通过本发明提供的制备例来制备。
(a)所述化合物为式(I-1-1)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：胺S1与相应的酰氯S2在适当溶剂，例如四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷、或者N、N-二甲基甲酰胺等中混合。加入碱(三乙基胺、二异丙基乙基胺、或N-甲基吗啉等)，在室温、适当低温条件(-10℃至0℃)或适当升高温度条件下(例如40-50℃),反应得到中间体S3。
步骤二：S3与相应原料S4在适当溶剂中混合，在室温或适当升高温度条件下(例如50-70℃),反应得到终产物I-1-1。
(b)所述化合物为式(I-2-1)化合物，所述方法包括步骤：
胺S1与相应的酰氯S5在适当溶剂，例如四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷、或者N、N-二甲基甲酰胺等中混合。加入碱(三乙基胺、二异丙基乙基胺、或N-甲基吗啉等)，在室温、适当低温条件(-10℃至0℃)或适当升高温度条件下(例如40-50℃),反应得到终产物I-2-1；
(c)所述化合物为式(I-3-1)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：中间体S3与适当的原料S6在溶剂中混合，在室温或适当升高温度条件下(例如40-50℃),反应得到中间体S7。
步骤二：中间体S7可以与硼酸S8或者硼酸酯S9反应，通过Suzuki偶联制备目标化合物I-3。如果R4-H是含有N-H的胺，S7可以与R4-H通过Buchwald-Hartwig偶联反应，或者Cu(I)催化的C-N偶联,制备目标化合物I-3。如果R4-H是末端炔烃，S7可以与R4-H通过Sonogashira偶联反应，目标化合物制备I-3-1。
(d)所述化合物为式(I-8-1)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：S10与S11通过Suzuki偶联反应制备S14。S14也可以通过S12和S13发生Suzuki偶联反应制备。
步骤三：S14在酸性条件下，例如三氟醋酸二氯甲烷溶液、或HCl-1,4二氧六环溶液中除去Boc保护基团得到中间体S15。
步骤四:S15和S3在适当溶剂中混合，加入碱(三乙基胺、二异丙基乙基胺、或N-甲基吗啉等)，在室温或适当升高温度条件下(例如50-70℃),反应得到终产物I-8-1。
(e)所述化合物为式(I-11-1)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：胺S18与相应的酰氯S2在适当溶剂，例如四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷、或者N、N-二甲基甲酰胺等中混合。加入碱(三乙基胺、二异丙基乙基胺、或N-甲基吗啉等)，在室温、适当低温条件(-10℃至0℃)或适当升高温度条件下(例如40-50℃),反应得到中间体S19。；
步骤二：S19与相应原料S20在适当溶剂中混合，在室温或适当升高温度条件下(例如50-70℃),反应得到终产物I-11-1。
(f)所述化合物为式(I-15)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：胺S18与相应的酰氯S2在适当溶剂，例如四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷、或者N、N-二甲基甲酰胺等中混合。加入碱(三乙基胺、二异丙基乙基胺、或N-甲基吗啉等)，在室温、适当低温条件(-10℃至0℃)或适当升高温度条件下(例如40-50℃),反应得到中间体S19。；
步骤二：S19与相应原料S21在适当溶剂中混合，在室温或适当升高温度条件下(例如50-70℃),反应得到终产物I-15。I-16，I-117和I-18可以利用上述合成策略合成制备。
(g)所述化合物为式(I-19)和(I-20)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：化合物I-4与劳森试剂或者P2S5，在适当的溶剂中，例如甲苯、苯、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷、或者N、N-二甲基甲酰胺等溶剂中混合，在室温、适当低温条件(-10℃至0℃)或适当升高温度条件下(例如40-120℃)反应。得到化合物I-20；
步骤二：将化合物I-20和氨水，在适当的溶剂中甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、甲苯、苯、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷、或者N、N-二甲基甲酰胺等溶剂中混合，在室温、适当低温条件(-10℃至0℃)或适当升高温度条件下(例如40-120℃)反应，得到化合物I-19；
(h)所述化合物为式(I-21)和(I-22)化合物，所述方法包括步骤：
步骤一：化合物I-5与劳森试剂或者P2S5，在适当的溶剂中，例如甲苯、苯、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷、或者N、N-二甲基甲酰胺等溶剂中混合，在室温、适当低温条件(-10℃至0℃)或适当升高温度条件下(例如40-120℃)反应。得到化合物I-22；
步骤二：将化合物I-22和氨水，在适当的溶剂中甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、甲苯、苯、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷、或者N、N-二甲基甲酰胺等溶剂中混合，在室温、适当低温条件(-10℃至0℃)或适当升高温度条件下(例如40-120℃)反应，得到化合物I-21；
上述各式中的基团定义同前。
与现有技术相比，本发明的主要优点包括：
(1)提供了一类结构新颖的具有2-吡啶取代脲结构及其类似结构的小分子化合物，其制备方法具有反应条件温和、原料丰富易得、操作及后处理简单、对应选择性好等优点。所述的化合物具有很好的ASK1激酶抑制活性。
(2)提供了一种ASK1激酶抑制剂，该类抑制剂体现出很强的ASK1激酶抑制活性，是一类潜在的治疗肝脏疾病、肝脏疾病、肺部疾病、心血管疾病、肾脏疾病、代谢性疾病、自免疫疾病和炎症的药物。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
以下实施例中所用的实验材料和试剂如无特别说明均可从市售渠道获得。
实验实施例1：化合物的合成
合成中间体01：6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-胺(EB048)
将6-氨基吡啶酰肼(1.5g,10mmol)加入到100mL茄型烧瓶中，加入甲苯20mL。加入1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(3.6g,30mmol)和异丙胺(4.13g,70mmol)，冰水浴使反应体系温度降到0℃，加入冰醋酸(1.8g,30mmol)。撤去冰水浴，改用油浴，升高反应温度至95℃搅拌20h。反应结束后，旋转蒸发仪80℃浓缩。加入50mL水，旋转蒸发仪80℃蒸干。加入150mL水，85℃搅拌过夜。过滤，水洗，滤液用***萃取(50mL×3次)，取水相用二氯甲烷萃取3次，每次50mL，合并二氯甲烷相，旋转蒸发仪浓缩，得到目标化合物粗品2.15g。直接用于下一步。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.77(s,1H),7.59(dd,J＝8.45,7.39Hz,1H),7.21(dd,J＝7.39,0.83Hz,1H),6.67(dd,J＝8.45,0.83Hz,1H),5.60-5.50(m,1H),1.54(d,J＝6.84Hz,6H)。
合成中间体02：(R)-2-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1,2,4-***-4-基)丙-1-醇(EB110)
步骤一：合成(E)-N'-(6-(2-(E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒(EB109)
将6-氨基吡啶酰肼(5g,32.9mmol)加入到100mL茄型烧瓶中，加入甲苯50mL。加入1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(15.6g,131mmol),80℃搅拌过夜。冷却反应液，加入适量***，过滤，得固体粗品。产物无需纯化，直接用于下一步。
步骤二：合成(R)-2-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1,2,4-***-4-基)丙-1-醇(EB110)
将步骤一产物和(R)-2-氨基丙-1-醇(9.9g,132mmol)加入到100mL茄型烧瓶中，加入甲苯30mL。加入醋酸，升高温度至95℃搅拌过夜。反应结束后，旋转蒸发仪80℃浓缩。加入50mL水，旋转蒸发仪95℃蒸干。加入150mL水，95℃搅拌过夜。过滤，水洗，滤液用***萃取(50mL×3次)，取水相用二氯甲烷萃取3次，每次50mL，合并二氯甲烷相，再用二氯甲烷/乙醇(V/V＝1/1)体系萃取，合并有机相，旋转蒸发仪浓缩，得到目标化合物粗品2.48g，产率34％。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.77(s,1H),7.59(dd,J＝8.45,7.43Hz,1H),7.24(dd,J＝7.43,0.76Hz,1H),6.67(dd,J＝8.45,0.76Hz,1H),5.54-5.46(m,1H),3.85-3.81(m,2H),1.56(d,J＝7.09Hz,3H)。
合成中间体03：(R)-3-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1,2,4-***-4-基)丁-1-醇(EB125)
步骤一：合成(E)-N'-(6-(2-((E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒
将6-氨基吡啶酰肼(2.12g,14mmol)加入到100mL茄型烧瓶中，加入甲苯50mL。加入1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(5.71g,48mmol),80℃搅拌过夜。旋转蒸发仪蒸干，直接用于下一步。
步骤二：合成(R)-3-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1,2,4-***-4-基)丁-1-醇(EB125)
将步骤一产物和(R)-3-氨基丁-1-醇(3.7g,42mmol)加入到100mL茄型烧瓶中，加入甲苯30mL。加入醋酸，升高温度至95℃搅拌过夜。反应结束后，旋转蒸发仪80℃浓缩。加入50mL水，旋转蒸发仪95℃蒸干。加入150mL水，95℃搅拌过夜。旋转蒸发仪蒸干，正相硅胶柱纯化，产物质量为3.226g，含有10％-20％杂质。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.13(s,1H),7.78(dd,J＝8.72,7.40Hz,1H),7.27(d,J＝7.40Hz,1H),6.93(d,J＝8.72Hz,1H),5.37-5.27(m,1H),3.67-3.58(m,1H),3.49-3.41(m,1H),2.25-2.01(m,2H),1.61(d,J＝6.85Hz,3H)。ESI-MS理论计算值C11H15N5O[M+H]+＝234.13；实验测得：234.22。
合成中间体04：(R)-2-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1,2,4-***-4-基)丙酸叔丁酸(EB145-3)
步骤一：合成(E)-N'-(6-(2-((E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒(EB143)
将6-氨基吡啶酰肼(1.52g,10mmol)加入到100mL茄型烧瓶中，加入甲苯30mL。加入1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(4.4g,40mmol),80℃搅拌过夜。旋转蒸发仪蒸干，直接用于下一步。
步骤二：合成(R)-2-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1,2,4-***-4-基)丙酸叔丁酸(EB145-3)
将步骤一产物(2.15g,8.2mmol)和D-丙氨酸叔丁酯(3.0g,16.5mmol)加入到100mL茄型烧瓶中，加入乙腈50mL。加入醋酸，升高温度至95℃搅拌过夜。反应结束后，旋转蒸发仪浓缩。加入150mL水，95℃搅拌过夜。加入浓氨水，旋转蒸发仪浓缩，加入二氯甲烷和水，过滤，滤液用二氯甲烷萃取，取水相，旋转蒸发仪蒸干，用20mL甲醇溶解，加入苯120mL，析出固体，HPLC纯化得目标化合物粗品2.48g。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.72(s,1H),7.55(dd,J＝8.32,7.43Hz,1H),7.30(dd,J＝7.43,0.64Hz,1H),6.93(dd,J＝8.32,0.64,1H),5.99-5.92(m,1H),1.82(d,J＝7.46Hz,3H)。ESI-MS理论计算值C10H11N5O2[M+H]+＝234.09；实验测得：233.96。
中间体05：O-苯基(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)氨基甲硫代甲酸酯(ZTB-6)
将6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-胺(304.5mg,1.5mmol)，氯硫代甲酸苯酯(258.9mg,1.5mmol)和碳酸钠(238.5mg,2.25mmol)加入25mL反应瓶中，加入5mL二氧六环溶解反应物。室温搅拌过夜。反应结束，加入乙酸乙酯和水，有机层萃取、干燥、浓缩得粗品299.7mg，直接用于下一步反应。
中间体06：5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-3-胺(ZTB-44)
将5-溴-1H-吲唑-3-胺(636.2mg,3mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡唑(936.5mg,4.5mmol)和Na2CO3(636mg,6mmol)加入50mL反应瓶中，加入10mL DME溶解反应物,除O2，加催化剂(Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(245mg,0.3mmol),再次除O2，100℃下搅拌过夜。反应结束，过滤，滤液加入10mL水，HPLC纯化，得到目标化合物517.5mg。1HNMR(MeOD-d4,400MHz):8.06(s,1H),7.98(s,1H),7.84-7.86(m,2H),7.45(d,J＝8.92Hz,1H),3.96(s,3H)。ESI-MS理论计算值C17H18N6O[M+H]+＝214.10；实验测得：214.58。
中间体07：6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-3-胺(ZTB-45)
将6-溴-1H-吲唑-3-胺(636.2mg,3mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡唑(936.5mg,4.5mmol)和Na2CO3(636mg,6mmol)加入50mL反应瓶中，加入10mL DME溶解反应物,除O2，加催化剂(Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(245mg,0.3mmol),再次除O2，100℃下搅拌过夜。反应结束，过滤，滤液加入10mL水，HPLC纯化，得到目标化合物530.1mg。1HNMR(MeOD-d4,400MHz):8.13(s,1H),7.94(s,1H),7.91(d,J＝8.56Hz,1H),7.57(s,1H),7.46(d,J＝8.52Hz,1H),。ESI-MS理论计算值C17H18N6O[M+H]+＝214.10；实验测得：214.01。
中间体08：2-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-4-胺(ZTB-82)
步骤一:将原料4-氨基吡啶-1-甲酸甲酯(4.32g,28.4mmol)加入100mL反应瓶中，加入50mL MeOH溶解反应物，加水合肼(2.84g,56.8mmol)。回流3h。反应结束后，冷却至室温，析出固体，过滤，用乙酸乙酯洗涤固体(200ml后，次)，干燥得到ZTB-79化合物3.74g。获得的ZTB-79粗品直接用于下一步反应。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.03(d,J＝5.68Hz,1H),7.24(d,J＝2.34Hz,1H),6.65(dd,J＝5.68,2.34Hz,1H)。
步骤二:将ZTB-79(3.74g,24.6mmol)溶于40mL甲苯中，加1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(8.78g,73.8mmol)和异丙胺(10.2g,172.2mmol)，然后冰浴下加醋酸(4.43g,73.8mmol)，加毕后，升温至95℃，反应20h。TLC监测，反应结束后，冷却至室温，然后将反应液浓缩，加100ml水，旋转蒸干。然后再加10倍体积的水，85℃，过夜。次日，过滤，滤液首先用***萃取，***层弃掉。再次用二氯甲烷萃取3次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩，得ZTB-82粗产品3.92g.1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.80(s,1H),8.15(d,J＝5.78Hz,1H),7.10(d,J＝2.29Hz,1H),6.68(dd,J＝5.78,2.29Hz,1H),5.23-5.33(m,1H),1.51(s,3H),1.50(s,3H)。
中间体09：苯基(2-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-4-基)氨基甲酸酯(ZTB-83)
将ZTB-82(203mg,1.0mmol)溶于5mL二氧六环中，加氯甲酸苯酯(156.6mg,1.0mmol)和碳酸钠(159mg,1.5mmol)，室温搅拌过夜。反应结束后，乙酸乙酯和水萃取3次，有机层合并，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得ZTB-83粗品221.7mg。未经进一步纯化，直接用于后续反应。
中间体10：4-(4-异丙基-4H-1,1,4-***-3-基)吡啶-2-胺(ZTB-81)
步骤一:将原料2-氨基异烟酸甲酯(4.32g,28.4mmol)加入100mL反应瓶中，加入50mL MeOH溶解反应物，加水合肼(2.84g,56.8mmol)。回流3h。反应结束后，冷却至室温，析出固体，过滤，用乙酸乙酯洗涤固体(200ml后，次)，干燥得到ZTB-80化合物3.72g。获得的ZTB-80粗品直接用于下一步反应。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):7.99(d,J＝5.47Hz,1H),6.89(s,1H),6.86(dd,J＝5.47,1.49Hz,1H)。
步骤二:将ZTB-80(3.72g,24.5mmol)溶于40mL甲苯中，加1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(8.73g,73.8mmol)和异丙胺(10.1g,171.3mmol)，然后冰浴下加醋酸(4.40g,73.4mmol)，加毕后，升温至95℃，反应20h。TLC监测，反应结束后，冷却至室温，然后将反应液浓缩，加100ml水，旋转蒸干。然后再加10倍体积的水，85℃，过夜。次日，过滤，滤液首先用***萃取，***层弃掉。再次用二氯甲烷萃取3次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩，得ZTB-81粗产品3.22g.1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.87(s,1H),8.10(d,J＝5.18Hz,1H),6.83(s,1H),6.80(d,J＝5.28Hz,1H),4.57-4.66(m,1H),1.52(s,3H),1.51(s,3H)。
中间体11：苯基(4-(4-异丙基-4H-1,2，4-***-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(ZTB-84)
将ZTB-81(203mg,1.0mmol)溶于5mL二氧六环中，加氯甲酸苯酯(156.6mg,1.0mmol)和碳酸钠(159mg,1.5mmol)，室温搅拌过夜。反应结束后，乙酸乙酯和水萃取3次，有机层合并，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得ZTB-83粗品324.9mg。未经进一步纯化，直接用于后续反应。
终产物01：苄基(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(01，ZTA41)
将中间体01(30mg,0.148mmol)加入50mL茄型烧瓶中，加入5mL 1,4-二氧六环溶解。向反应瓶中加入氯化苄基酯(25.1mg,0.148mmol)和碳酸钠(23.5mg,0.222mmol)。室温条件搅拌过夜。反应结束后，HPLC纯化，得到目标化合物。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.91(s,1H),8.18-8.11(m,1H),7.93-7.85(m,2H),7.51-7.35(m,5H),5.68-5.58(m,1H),5.25(s,2H),1.57(d,J＝6.81Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H19N5O2[M+H]+＝338.16；实验测得：238.66。
终产物02：(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸乙酯(02，ZTA42)
将中间体01(30mg,0.148mmol)加入50mL茄型烧瓶中，加入5mL 1,4-二氧六环溶解。向反应瓶中加入氯代甲酸乙酯(16mg,0.148mmol)和碳酸钠(23.5mg,0.222mmol)。室温条件搅拌过夜。反应结束后，HPLC纯化，得到目标化合物。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.32(s,1H),8.24-8.10(m,1H),7.95-7.81(m,2H),5.76-5.65(m,1H),4.30(q,J＝7.13Hz,2H),1.63(d,J＝6.73Hz,6H),1.36(t,J＝7.13Hz,3H)。ESI-MS理论计算值C18H19N5O2[M+H]+＝276.14；实验测得：277.2。
终产物03：苯基(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(03，ZTA45)
将中间体01(30mg,0.148mmol)加入50mL茄型烧瓶中，加入3mL 1,4-二氧六环溶解。向反应瓶中加入氯代甲酸苯酯(23.2mg,0.148mmol)和碳酸钠(23.5mg,0.222mmol)。室温条件搅拌过夜。反应结束后，HPLC纯化，得到目标化合物。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.19-9.10(m,1H),8.15-8.20(m,1H),7.97-7.92(m,2H),7.44(t,J＝7.8Hz,2H),7.30(t,J＝7.34Hz,1H),7.22(d,J＝8.26Hz,2H),5.76-5.68(m,1H),1.64(d,J＝6.73Hz,6H)。
终产物04：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-苯基脲(04，ZTA46)
将终产物03(57mg,0.176mmol)，苯胺(49.2mg,0.528mmol)和三乙胺(57.9mg,0.572mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.5mL水，HPLC纯化，得到目标化合物。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.74(s,1H),7.86(d,J＝8.64Hz,1H),7.71(dd,J＝8.64,7.29Hz,1H),7.51(d,J＝7.29Hz,1H),7.44(d,J＝7.64Hz,2H),7.27-7.22(m,2H),7.02(t,J＝7.28Hz,1H),5.40-5.30(m,1H),1.42(d,J＝6.81Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C17H18N6O[M+H]+＝323.16；实验测得：322.9。
终产物05：1-苄基-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(05，ZTA47)
将终产物03(57mg,0.176mmol)，苄胺(56.6mg,0.528mmol)和三乙胺(57.9mg,0.572mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.5mL水，HPLC纯化，得到目标化合物。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.77(s,1H),7.77(dd,J＝8.39,7.27Hz,1H),7.50(d,J＝7.27Hz,1H),7.36(d,J＝8.39Hz,1H),7.30-7.20(m,5H),5.00-4.89(m,1H),4.52(s,1H),1.26(d,J＝6.67Hz,6H)。
终产物06：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯基)脲(06，ZTA54)
步骤一：合成1-(3-溴苯基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(ZTA050)
将间溴苯胺(645mg,3.76mmol)，终产物03(405mg,1.25mmol)和三乙胺(411mg,4.06mmol)加入50mL茄型烧瓶中，加10mL DMF，50℃搅拌过夜。反应结束后，向反应瓶加入20mL水，有固体析出，过滤得目标化合物粗品，部分粗品HPLC纯化。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.52(s,1H),7.87-7.80(m,1H),7.77(s,1H),7.57(d,J＝7.20Hz,1H),7.41-7.30(m,2H),7.26-7.14(m,2H),5.13-5.04(m,1H),1.47(d,J＝6.64Hz,6H)。
步骤二：合成4-(3-(3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲基)苯基)-3,6-二氢吡啶-4-叔丁酯-1(2H)-羧酸叔丁酯(ZTA053)
将ZTA050(182mg,0.455mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(281.4mg,0.91mmol)，碳酸钾(125.8mg,0.91mmol)，PdCl2(dppf)-CH2Cl2(37.2mg,0.0455mmol)加到50mL反应瓶中，加入二氧六环溶解反应物。去除氧气，加热到100℃，搅拌5h。反应结束，向反应瓶加乙酸乙酯和水，萃取有机层，减压旋干有机相得粗品130mg，直接用于下一步。
步骤三：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基基)苯基)脲(06，ZTA54)
将ZTA053(约130mg)加入50mL反应瓶中，加1mL三氟醋酸和4mL二氯甲烷，40℃搅拌至反应结束。反应结束，过HPLC得93mg黄色油状物。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.46(s,1H),8.10(d,J＝8.34Hz,1H),7.94(t,J＝8.12Hz,1H),7.74(d,J＝7.27Hz,1H),7.69(s,1H),7.40(d,J＝8.15Hz,1H),7.31(t,J＝7.89Hz,1H),7.16(d,J＝7.75Hz,1H),6.19-6.14(m,1H),5.78-5.65(m,1H),3.87(s,2H),3.52-3.45(m,2H),2.86-2.76(m,2H),1.22(d,J＝6.85Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C22H25N7O[M+H]+＝404.22；实验测得：404.62。
终产物07：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基基)苯基)脲(07，ZTA55)
步骤一：合成1-(4-溴苯基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(ZTA49)
将对溴苯胺(645mg,3.76mmol)，终产物03(405mg,1.25mmol)和三乙胺(411mg,4.06mmol)加入50mL茄型烧瓶中，加10mL DMF，50℃搅拌过夜。反应结束后，向反应瓶加入20mL水，有固体析出，过滤得目标化合物粗品181mg，部分粗品HPLC纯化。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.54(s,1H),7.82(t,J＝7.95Hz,1H),7.66(d,J＝8.34Hz,1H),7.51(d,J＝7.41Hz,1H),7.45-7.35(m,4H),5.18-5.08(m,1H),1.46(d,J＝6.72Hz,6H)。
步骤二：合成4-(4-(3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲基)苯基)-3,6-二氢吡啶-4-叔丁酯-1(2H)-羧酸叔丁酯(ZTA52)
将ZA049(170mg,0.425mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(262.8mg,0.85mmol)，碳酸钾(117.5mg,0.85mmol)，PdCl2(dppf)-CH2Cl2(34.7mg,0.0425mmol)加到50mL反应瓶中，加入二氧六环溶解反应物。去除氧气，加热到100℃，搅拌5h。反应结束，向反应瓶加乙酸乙酯和水，萃取有机层，减压旋干有机相得粗品80mg，直接用于下一步。
步骤三：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基基)苯基)脲(07，ZTA55)
将ZTA052(约80mg)加入50mL反应瓶中，加1mL三氟醋酸和4mL二氯甲烷，40℃搅拌至反应结束。反应结束，过HPLC得82mg黄色固体。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.39(s,1H),8.09(d,J＝8.70Hz,1H),7.92(t,J＝8.09Hz,1H),7.73(d,J＝7.54Hz,1H),7.49(d,J＝8.67Hz,2H),7.40(d,J＝8.67Hz,2H),6.10(s,1H),5.74-5.64(m,1H),3.85(s,2H),3.51-3.42(m,2H),2.82-2.73(m,2H),1.62(d,J＝6.62Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C22H25N7O[M+H]+＝404.22；实验测得：404.58。
终产物08：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(哌啶-4-基)苯基)脲(08，ZTA-56)
将终产物07(62mg,0.072mmol)加入圆底烧瓶，去除氧气。加入7mL甲醇，去除氧气。加入10％Pd/C(6.2mg)，去除氧气，通氢气，室温搅拌过夜。反应结束，过滤，滤液旋干，HPLC纯化得目标化合物。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.35(s,1H),8.07(d,J＝8.37Hz,1H),7.94(t,J＝7.69Hz,1H),7.73(d,J＝7.21Hz,1H),7.45(s,J＝8.41Hz,2H),7.22(d,J＝8.41Hz,2H),5.72-5.62(m,1H),3.56-3.43(m,2H),3.22-3.06(m,2H),2.94-2.81(m,1H),2.10-1.83(m,4H),1.61(d,J＝6.72Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C22H27N7O[M+H]+＝406.23；实验测得：406.0,405.88。
终产物09：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-(哌啶-4-基)苯基)脲(09，ZTA-57)
将终产物06(73mg)加入圆底烧瓶，去除氧气。加入4mL甲醇，去除氧气。加入10％Pd/C(7.3mg)，去除氧气，通氢气，室温搅拌过夜。反应结束，过滤，滤液旋干，HPLC纯化得目标化合物。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.38(s,1H),8.08(d,J＝8.56Hz,1H),7.95(t,J＝8.56Hz,1H),7.74(d,J＝7.24Hz,1H),7.51(s,1H),7.37-7.24(m,2H),7.01-6.96(m,1H),5.74-5.61(m,1H),3.59-3.45(m,2H),3.23-3.10(m,2H),2.96-2.82(m,1H),2.15-1.88(m,4H),1.61(d,J＝6.87Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C22H27N7O[M+H]+＝406.23；实验测得：406.67。
终产物10：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹啉-8-基)脲(10，ZTA-63)
将终产物03(135mg,0.63mmol)，8-氨基喹啉(180.7mg,1.88mmol)和三乙胺(138.1mg,2.05mmol)加入50mL反应瓶中，加入5mL DMF溶解反应物。50℃下搅拌过夜。反应结束，加入6mL水，HPLC纯化，得到目标化合物8.2mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.50(s,1H),8.60-8.53(m,2H),8.32(dd,J＝8.34,1.63Hz,1H),8.03-7.93(m,2H),7.72(dd,J＝6.84,1.41Hz,1H),7.61-7.49(m,3H),5.72-5.60(m,1H),1.52(d,J＝6.71Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C20H19N7O[M+H]+＝374.17；实验测得：373.56。
终产物11：3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1-苯基脲(11，ZTA-64)
将N-甲基苯胺(201.3mg,1.88mmol)，终产物03(135mg,0.63mmol)，和三乙胺(207.2mg,2.05mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2mL水，三氟醋酸酸化，HPLC纯化，得到目标化合物22.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.32(s,1H),8.11(dd,J＝8.48,0.64Hz,1H),7.98-7.92(m,1H),7.73(dd,J＝7.55,0.64Hz,1H),7.60-7.52(m,2H),7.49-7.51(m,3H),5.42-5.29(m,1H),3.38(s,3H),1.47(d,J＝6.71Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H20N6O2[M+H]+＝337.17；实验测得：336.32。
终产物12：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)尿素(09，ZTA-67)
步骤一：合成3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯胺
将1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(312mg,1.5mmol)和间溴苯胺(172mg,1mmol)加入圆底烧瓶，DME 5mL溶解。向反应瓶加入碳酸钠(212mg,2mmol,2M in H2O)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2(81.7mg,0.1mmol)。100℃搅拌过夜。反应结束，加入20mL水，乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥后减压浓缩，过柱得目标化合物118mg，产率70％。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):7.84(s,1H),7.74(s,1H),7.09(t,J＝7.82Hz,1H),6.94-6.85(m,2H),6.63-6.58(m,1H),3.91(s,3H)。
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)尿素(12，ZTA-67)
将步骤一产物(97.9mg,0.57mmol)，终产物03(135mg,0.63mmol)和三乙胺(138.1mg,2.05mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2.5mL水，HPLC纯化得无色油状目标化合物27.2mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.49(s,1H),8.10(d,J＝8.3Hz,1H),8.01-7.91(m,2H),7.81(s,1H),7.77-7.70(m,2H),7.34-7.21(m,3H),5.74-5.61(m,1H),3.94(s,3H),1.63(d,J＝6.81Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C21H22N8O[M+H]+＝403.20；实验测得：402.5。
终产物13：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)尿素(13，ZTA-68)
步骤一：合成4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯胺(ZTA59-2)
将1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(312mg,1.5mmol)和对溴苯胺(172mg,1mmol)加入圆底烧瓶，DME 5mL溶解。向反应瓶加入碳酸钠(212mg,2mmol,2M in H2O)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2(81.7mg,0.1mmol)。100℃搅拌过夜。反应结束，加入20mL水，乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥后减压浓缩，过柱得目标化合物65mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):7.74(s,1H),7.67(s,1H),7.31-7.26(m,2H),6.77-6.72(m,2H),3.88(s,3H)。
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)尿素(13，ZTA-68)
将步骤一产物(45mg,0.26mmol)，终产物03(135mg,0.63mmol)和三乙胺(207.2mg,2.05mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2.5mL水，HPLC纯化得目标化合物2.7mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.27(s,1H),8.05(d,J＝8.15Hz,1H),8.01-7.95(m,1H),7.92(s,1H),7.80(s,1H),7.73(d,J＝7.31Hz,1H),7.55-7.46(m,4H),5.66-5.54(m,1H),3.94(s,3H),1.62(d,J＝6.86Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C21H22N8O[M+H]+＝403.20；实验测得：402.0。
终产物14：1-(1H-吲唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(14，ZTA69-28.5)
步骤一：合成1H-吲唑-5-胺
将5-硝基-1H-吲唑(326.3mg,2mmol)溶于甲醇，除氧气。加入119.2mg Pd/C(10％)，除氧气，通氢气，搅拌过夜。反应结束，硅藻土过滤，滤液浓缩，HPLC纯化得目标化合物190.6mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.15(d,J＝0.95Hz,1H),7.89-7.86(m,1H),7.75-7.70(m,1H),7.45-7.40(m,1H)。
步骤二：合成1-(1H-吲唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(14，ZTA69-28.5)
将步骤一产物(160.6mg,1.21mmol)，终产物03(130mg,0.4mmol)，三乙胺(131.56mg,1.3mmol)加入圆底烧瓶中，2mL DMF溶解。50℃搅拌过夜。反应结束，加水2mL，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标产物4.3mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.12(s,1H),8.31(s,1H),8.19-8.12(m,2H),8.07-7.94(m,2H),7.73(d,J＝7.26Hz,1H),7.60(dd,J＝9.15,1.98Hz,1H),5.62-5.51(m,1H),1.61(d,J＝6.63Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.16；实验测得：363.60。
终产物15：5-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(15,ZTA-69-21.5)
将步骤一产物(160.6mg,1.21mmol)，终产物03(130mg,0.4mmol)，三乙胺(131.56mg,1.3mmol)加入圆底烧瓶中，2mL DMF溶解。50℃搅拌过夜。反应结束，加水2mL，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标产物35.4mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.61(s,1H),8.17-7.95(m,4H),7.82-7.71(m,1H),7.55(d,J＝9.09Hz,1H),7.43(dd,J＝9.09,2.04Hz,1H),5.77-5.64(m,1H),1.65(d,J＝6.72Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.16；实验测得：364.41。
终产物16：1-(4,5-二氢-[1,2,4]***并[4,3-a]喹啉-6-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(16，ZTA-70)
将4,5-二氢-[1,2,4]***并[4,3-a]喹啉-6-胺(44mg,0.24mmol)，终产物03(77.5mg,0.24mmol)，三乙胺(79mg,0.78mmol)加入圆底烧瓶中，2mL DMF溶解。50℃搅拌过夜。反应结束，加水2mL，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标产物。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.51(s,1H),9.25(s,1H),8.08-7.89(m,2H),7.83(d,J＝8.36Hz,1H),7.71(d,J＝7.11Hz,1H),7.63(d,J＝7.94Hz,1H),7.54-7.45(m,1H),5.55-5.43(m,1H),3.30-3.20(m,2H),3.15-3.04(m,2H),1.61(d,J＝6.62Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C21H21N9O[M+H]+＝416.19；实验测得：415.9。
终产物17：1-(5,6-二氢-[1,2,4]***并[3,4-α]异喹啉-7-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(17，ZTA-71)
将5,6-二氢-[1,2,4]***并[3,4-α]异喹啉-7-胺(46.7mg,0.25mmol)，终产物03(81.1mg,0.25mmol)，三乙胺(75.9mg,0.75mmol)加入圆底烧瓶中，2mL DMF溶解。50℃搅拌过夜。反应结束，加水2mL，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标产物1.0mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.30(s,1H),9.21(s,1H),8.05-7.86(m,4H),7.72(d,J＝7.24Hz,1H),7.56(t,J＝7.24Hz,1H),5.59-5.47(m,1H),4.49(t,J＝6.97Hz,2H),3.28(t,J＝6.97Hz,2H),1.61(d,J＝6.67Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C21H21N9O[M+H]+＝416.19；实验测得：415.8。
终产物18：1-(5,6-二氢-4H-苯并[f][1,2,4]***并[4,3-a]氮杂-7-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(18，ZTA-72)
将5,6-二氢-4H-苯并[f][1,2,4]***并[4,3-a]氮杂-7-胺(35mg,0.175mmol)，终产物03(56.5mg,0.175mmol)，三乙胺(53.1mg,0.525mmol)加入圆底烧瓶中，2mL DMF溶解。50℃搅拌过夜。反应结束，加水2mL，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标产物3.0mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.25(s,1H),9.24(s,1H),8.04-7.88(m,2H),7.93-7.88(m,1H),7.75-7.71(m,1H),7.54(t,J＝8.05Hz,1H),7.47-7.43(m,1H),5.58-5.47(m,1H),2.99(t,J＝7.03Hz,2H),2.70(t,J＝6.82Hz,2H),2.38-2.28(m,2H),1.61(d,J＝6.86Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C22H23N9O[M+H]+＝430.21；实验测得：430.21。
终产物19：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)尿素(19，ZTA-77)
将1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-胺(102.8mg,0.63mmol)，终产物03(135mg,0.63mmol)和三乙胺(207.2mg,2.05mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2.5mL水，HPLC纯化得目标化合物3.3mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.34(s,1H),8.19(d,J＝8.69Hz,1H),8.09-7.99(m,2H),7.76(d,J＝7.51Hz,1H),7.28(d,J＝3.37Hz,1H),7.18-7.07(m,1H),6.51(d,J＝3.37Hz,1H),5.62-5.50(m,1H),1.62(d,J＝6.74Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.16；实验测得：362.41。
终产物20：1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(20，ZTA78)
将苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-胺(259.2mg,1.89mmol)，终产物03(135mg,0.63mmol)和三乙胺(207.2mg,2.05mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2.5mL水，HPLC纯化得目标化合物93.7mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.54(s,1H),8.06(d,J＝8.66Hz,1H),7.97(dd,J＝8.66,7.55Hz,1H),7.74(d,J＝7.55Hz,1H),7.17(s,1H),6.78(s,2H),5.94(s,2H),5.74-5.61(m,1H),1.64(d,J＝6.72Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H18N6O3[M+H]+＝367.14；实验测得：367.45。
终产物21：(R)-1-(6-(4-(4-羟基丁-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-苯基脲(21，ZTA80)
步骤一：合成苯基(R)-(6-(4-(4-((苯氧基羰基)氧基)丁-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(ZTA74)
将中间体03(64.2mg,0.293mmol)加入圆底烧瓶，2mL二氧六环溶解固体。加碳酸钠(46.6mg,0.44mmol)，搅拌。0℃下加入氯代甲酸苯酯(49.8mg,0.293mmol)，室温过夜。反应结束，加水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩有机相得粗品，直接用于下一步。
步骤二：合成(R)-1-(6-(4-(4-羟基丁-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-苯基脲(21,ZTA80)
将步骤一产物(94.7mg,0.293mmol)，苯胺(81.9mg,0.879mmol)和三乙胺(96.4mg,0.952mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.5mL水，HPLC纯化，得到目标化合物1.6mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.36(s,1H),8.09(d,J＝7.94Hz,1H),8.02(dd,J＝7.94,6.94Hz,1H),7.88(d,J＝6.94Hz,1H),7.49-7.42(m,2H),7.32-7.22(m,3H),6.06-5.94(m,1H),3.71-3.60(m,2H),2.34-2.22(m,1H),2.13-2.01(m,1H),1.65(d,J＝6.86Hz,3H)。ESI-MS理论计算值C18H20N6O2[M+H]+＝353.17；实验测得：353.2。
终产物22：1-(1H-吲哚-6-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(22,ZTA84)
将1H-吲哚-6-胺(116.3mg,0.88mmol)，终产物03(94.5mg,0.29mmol)和三乙胺(95.4mg,0.94mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得黄色油状物87.4mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.45(s,1H),8.04(d,J＝8.59Hz,1H),7.95-7.86(m,1H),7.75-7.63(m,2H),7.45(d,J＝8.31Hz,1H),7.18(s,1H),6.91(dd,J＝8.45,1.88Hz,1H),5.71-5.55(m,1H),1.58(d,J＝6.71Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C19H19N7O[M+H]+＝362.17；实验测得：362.44。
终产物23：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹喔啉-6-基)脲(23,ZTA85)
将喹喔啉-6-胺(127.4mg,0.88mmol)，终产物03(94.5mg,0.29mmol)和三乙胺(95.4mg,0.94mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标化合物124mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.58(s,1H),8.90-8.68(m,2H),8.47-8.40(m,1H),8.24-8.15(m,1H),8.09-7.94(m,2H),7.92-7.84(m,1H),7.82-7.72(m,1H),5.82-5.67(m,1H),1.67(d,J＝6.71Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C19H18N8O[M+H]+＝365.16；实验测得：374.64。
终产物24：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹啉-5-基)脲(24，ZTA86)
将喹啉-5-胺(126.9mg,0.88mmol)，终产物03(94.5mg,0.29mmol)和三乙胺(95.4mg,0.94mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标化合物65.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.27-9.22(m,1H),9.21-9.17(m,1H),9.15(s,1H),8.46(d,J＝7.91Hz,1H),8.14(t,J＝8.23Hz,1H),8.06-7.91(m,4H),7.72(d,J＝7.55Hz,1H),5.47-5.35(m,1H),1.59(d,J＝6.75Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C20H19N7O[M+H]+＝374.17；实验测得：374.49。
终产物25：(R)-1-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-苯基脲(25，ZTA88)
步骤一：苯基(R)-(6-(4-(1-((苯氧基羰基)氧基)丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯
将中间体02(69.7mg,0.32mmol)加入50mL茄型烧瓶中，加入2mL 1,4-二氧六环溶解。向反应瓶中加入氯代甲酸苯酯(54.1mg,0.32mmol)和碳酸钠(50.9mg,0.48mmol)。室温条件搅拌过夜。反应结束后，过滤，滤液浓缩得到目标化合物。直接用于下一步反应。
步骤二：合成(R)-1-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-苯基脲(25，ZTA88)
将苯胺(89.4mg,0.96mmol)，步骤一产物(108.5mg,0.32mmol)和三乙胺(328.9mg,1.04mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标化合物1.3mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.39(s,1H),8.11-7.93(m,2H),7.76(d,J＝7.34Hz,1H),7.49(d,J＝7.93Hz,2H),7.33(t,J＝7.74Hz,2H),7.12-7.05(m,1H),5.68-5.58(m,1H),3.94-3.81(m,2H),1.64(d,J＝6.97Hz,3H)。ESI-MS理论计算值C17H18N6O2[M+H]+＝339.15；实验测得：338.4。
终产物26：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)二氢吲哚-1-甲酰胺(26，ZTA89)
将吲哚啉(55.3mg,0.464mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(51mg,0.50mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得粉白色固体61.8mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.63(s,1H),8.08(d,J＝8.26Hz,1H),7.96(t,J＝8.26Hz,1H),7.89(d,J＝8.01Hz,1H),7.79(d,J＝7.51Hz,1H),7.24-7.12(m,2H),6.97(t,J＝7.44Hz,1H),5.96-5.84(m,1H),4.18(t,J＝8.77Hz,2H),3.21(t,J＝8.64Hz,2H),1.62(d,J＝6.65Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C19H20N6O[M+H]+＝349.17；实验测得：349.4。
终产物27：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酰胺(27，ZTA-90)
将1,2,3,4-四氢喹啉(61mg,0.464mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(51mg,0.50mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得无色油状目标化合物46mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.36(s,1H),8.10(d,J＝8.70Hz,1H),7.97(dd,J＝8.70,7.31Hz,1H),7.78(d,J＝7.31Hz,1H),7.39(d,J＝7.961Hz,1H),7.29-7.19(m,2H),7.17-7.10(m,1H),5.72-5.61(m,1H),3.83(t,J＝6.32Hz,2H),2.84(t,J＝6.58Hz,2H),2.08-1.97(m,2H),1.54(d,J＝6.62Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C20H22N6O[M+H]+＝363.19；实验测得：363.52。
终产物28：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(2-氧代吲哚-5-基)脲(28，ZTA-91)
步骤将5-氨基二氢吲哚-2-酮(79.5mg,0.54mmol)，终产物03(57.8mg,0.178mmol)和三乙胺(161.9mg,1.6mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得白色固体22.4mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.36(s,1H),8.07-7.93(m,2H),7.73(d,J＝7.25Hz,1H),7.46(s,1H),7.30-7.25(m,1H),6.88(d,J＝8.42Hz,1H),5.67-5.55(m,1H),3.56(s,2H),1.62(d,J＝6.76Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C19H19N7O2[M+H]+＝378.16；实验测得：377.11。
终产物29：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1,3-二氢-2H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-甲酰胺(29，ZTA94)
将2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶盐酸盐(90mg,0.465mmol)和三乙胺(98mg,0.97mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。搅拌10分钟后，将上述溶液加入含终产物03(50mg,0.155mmol)的反应瓶中。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得黄色油状化合物19.9mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.24(s,1H),8.91(s,1H),8.81(d,J＝5.85Hz,1H),8.10-7.95(m,3H),7.78(d,J＝7.34Hz,1H),5.88-5.73(m,1H),5.26-5.12(m,4H),1.59(d,J＝6.66Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H19N7O[M+H]+＝350.17；实验测得：350.57。
终产物30：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)异吲哚-2-甲酰胺(30，ZTA96)
将异吲哚啉(55.4mg,0.465mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(51mg,0.5mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得黄色油状化合物49.9mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.44(s,1H),8.10(d,J＝8.45Hz,1H),7.96(dd,J＝8.45,7.54Hz,1H),7.77(d,J＝7.54Hz,1H),7.40-7.29(m,4H),5.95-5.82(m,1H),5.89(s,2H),1.62(d,J＝6.76Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C19H20N6O[M+H]+＝349.17；实验测得：350.15。
终产物31：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酰胺(31，ZTA97)
将哌啶(39.6mg,0.465mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(51mg,0.5mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得无色油状化合物58.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.53(s,1H),7.99-7.84(m,2H),7.74(dd,J＝7.31,0.92Hz,1H),5.96-5.85(m,1H),3.63-3.52(m,4H),1.77-1.62(m,6H),1.59(d,J＝6.71Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C16H22N6O[M+H]+＝315.19；实验测得：315.9。
终产物32：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌嗪-1-甲酰胺(32，ZTA98)
将1-甲基哌嗪(46.6mg,0.465mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(51mg,0.5mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得无色油状化合物66.4mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.44(s,1H),7.99-7.91(m,2H),7.77(d,J＝5.75Hz,1H),5.93-5.80(m,1H),4.54-4.31(m,2H),3.73-3.09(m,6H),2.99(s,3H),1.58(d,J＝6.81Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C16H23N7O[M+H]+＝330.20；实验测得：330.97。
终产物33：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)吗啉-4-甲酰胺(33，ZTA99)
将吗啉(40.5mg,0.465mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(51mg,0.5mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标化合物81.2mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.61(s,1H),8.00-7.89(m,2H),7.77(d,J＝6.48Hz,1H),6.00-5.85(m,1H),3.78-3.70(m,4H),3.63-3.56(m,4H),1.60(d,J＝6.80Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C15H20N6O2[M+H]+＝317.16；实验测得：317.72。
终产物34：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(34，ZTA102)
将1,2,3,6-四氢吡啶(55.6mg,0.465mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(51mg,0.5mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得无色油状化合物49.5mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.47(s,1H),7.96-7.85(m,2H),7.73(dd,J＝6.91,1.2Hz,1H),5.99-5.69(m,3H),4.12-4.02(m,2H),3.66(t,J＝5.55Hz,2H),2.29-2.20(m,2H),1.57(d,J＝6.73Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C16H20N6O[M+H]+＝313.17；实验测得：313.63。
终产物35：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酰胺(35，ZTA104)
将1,2,3,4-四氢异喹啉(62mg,0.465mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(51mg,0.5mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得目标化合物53.9mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.30(s,1H),7.93-7.86(m,2H),7.73-7.70(m,1H),7.21-7.13(m,4H),5.90-5.76(m,1H),4.72(s,2H),3.79(t,J＝5.89Hz,2H),2.93(t,J＝5.92Hz,2H),1.55(d,J＝6.75Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C20H22N6O[M+H]+＝363.19；实验测得：363.65。
终产物36：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(36，ZTA110)
步骤一：合成5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(ZTA103)
将4-溴-1-甲基-1H-吡唑(161mg,1mmol)，5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(618.4mg,2mmol)和2M碳酸钠(4mL,2mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(86.7mg,0.1mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，过柱得568.2mg粗品，直接用于下一步。
步骤二：合成5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(ZTA106)
将步骤一产物加入圆底烧瓶，加入1mL三氟乙酸，4mL二氯甲烷，回流过夜。反应结束，旋干，加3mL水，三氟乙酸调节pH小于或等于1，HPLC纯化得399.7mg产物。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):7.74(s,1H),7.64(s,1H),6.24-6.19(m,1H),4.00-3.91(m,2H),3.89(s,3H),3.39-3.34(m,2H),2.58-2.50(m,2H)。
步骤三：合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(36，ZTA110)
将步骤二产物(129mg,0.465mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(102mg,1mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得黄色油状化合物44.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.52(s,1H),7.98-7.85(m,2H),7.78-7.67(m,2H),7.61(s,1H),6.22-6.13(m,1H),5.93-5.81(m,1H),4.31(s,2H),3.87(s,3H),3.70(t,J＝5.61Hz,2H),2.43-2.31(m,2H),1.58(d,J＝6.71Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C20H24N8O[M+H]+＝393.21；实验测得：393.70。
终产物37：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(37，ZTA111)
步骤一：合成4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(ZTA105)
将4-溴-1-甲基-1H-吡唑(161mg,1mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(618.4mg,2mmol)和2M碳酸钠(4mL,2mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(86.7mg,0.1mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，过柱得542.7mg粗品，直接用于下一步。
步骤二：合成4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(ZTA107)
将步骤一产物加入圆底烧瓶，加入1mL三氟乙酸，4mL二氯甲烷，回流过夜。反应结束，旋干，加3mL水，三氟乙酸调节pH小于或等于1，HPLC纯化得367.7mg产物。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):7.74(s,1H),7.64(s,1H),6.04-5.97(m,1H),3.87(s,3H),3.81-3.76(m,2H),3.42(t,J＝6.22Hz,2H),2.71-2.64(m,2H)。
步骤三：合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(37，ZTA111)
将步骤二产物(129mg,0.465mmol)，终产物03(50mg,0.155mmol)和三乙胺(102mg,1mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，三氟乙酸酸化，HPLC纯化得黄色油状化合物68.3mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.69(s,1H),7.99-7.89(m,2H),7.82-7.74(m,1H),7.70(s,1H),7.64(s,1H),6.07-6.00(m,1H),6.00-5.88(m,1H),4.22(s,2H),3.89(s,3H),3.79(t,J＝5.61Hz,2H),2.60-2.45(m,2H),1.61(d,J＝6.54Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C20H24N8O[M+H]+＝393.21；实验测得：393.65。
终产物38：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)异吲哚啉-2-甲酰胺(38，ZTA118)
步骤一：合成4-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)异吲哚-2-甲酰胺(ZTA114)
将4-溴异吲哚啉盐酸盐(174mg,0.74mmol)和三乙胺(158.1mg,1.56mmol)加入圆底烧瓶，DMF溶解，搅拌10分钟。加入终产物03(80mg,0.25mmol)，50℃搅拌过夜。反应结束，HPLC纯化得100mg无色油状化合物。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.47(s,1H),8.03(d,J＝8.75Hz,1H),7.87(dd,J＝8.75,7.50Hz,1H),7.72(d,J＝7.50Hz,1H),7.39(d,J＝7.81Hz,1H),7.26(d,J＝7.25Hz,1H),7.21-7.15(m,1H),5.96-5.82(m,1H),4.89(s,2H),4.74(s,2H),1.59(d,J＝6.68Hz,6H)。
步骤二：合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)异吲哚啉-2-甲酰胺(38，ZTA118)
将步骤一产物(61mg,0.143mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(59.6mg,0.286mmol)和2M碳酸钠(1mL,0.286mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(11.7mg,0.0143mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，抽滤，滤液萃取，有机相干燥浓缩，HPLC纯化得目标化合物56.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.61(s,1H),8.14-7.99(m,1H),7.96-7.79(m,2H),7.79-7.67(m,2H),7.43(d,J＝7.51Hz,1H),7.27(t,J＝7.66Hz,1H),7.13(d,J＝7.21Hz,1H),5.98-5.72(m,1H),4.91-4.70(m,4H),3.90(s,3H),1.61(d,J＝6.55Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C23H24N8O[M+H]+＝429.21；实验测得：429.81。
终产物39：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)异吲哚啉-2-甲酰胺(39，ZTA119)
步骤一：合成5-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)异吲哚-2-甲酰胺(ZTA115)
将5-溴异吲哚啉盐酸盐(174mg,0.74mmol)和三乙胺(158.1mg,1.56mmol)加入圆底烧瓶，DMF溶解，搅拌10分钟。加入终产物03(80mg,0.25mmol)，50℃搅拌过夜。反应结束，HPLC纯化得83.8mg白色固体。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.43(s,1H),8.06(d,J＝8.39Hz,1H),7.95(t,J＝8.39,7.27Hz,1H),7.75(d,J＝7.27Hz,1H),7.52(s,1H),7.49-7.44(m,1H),7.29-7.24(m,1H),5.92-5.81(m,1H),4.87(s,2H),4.83(s,2H),1.59(d,J＝6.78Hz,6H)。
步骤二：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)异吲哚啉-2-甲酰胺(39，ZTA119)
将步骤一产物(61mg,0.143mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(59.6mg,0.286mmol)和2M碳酸钠(1mL,0.286mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(11.7mg,0.0143mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，抽滤，滤液萃取，有机相干燥浓缩，HPLC纯化得目标化合物47.2mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.40(s,1H),7.92-7.76(m,1H),7.76-7.58(m,2H),7.58-7.44(m,2H),7.22(d,J＝7.63Hz,1H),7.06(t,J＝7.53Hz,1H),6.92(d,J＝7.48Hz,1H),5.72-5.50(m,1H),4.72-4.42(m,4H),3.69(s,3H),1.40(d,J＝6.66Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C23H24N8O[M+H]+＝429.21；实验测得：429.73。
终产物40：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酰胺(40，ZTA120)
步骤一：合成8-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酰胺(ZTA116)
将8-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(159mg,0.75mmol)，终产物03(80mg,0.25mmol)和三乙胺(82.2mg,0.813mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得白色固体94.2mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.46(s,1H),8.00-7.84(m,2H),7.75(d,J＝7.19Hz,1H),7.47(d,J＝7.59Hz,1H),7.22(d,J＝7.39Hz,1H),7.17-7.10(m,1H),5.94-5.79(m,1H),4.73(s,2H),3.81(t,J＝6.08Hz,2H),2.99(t,J＝5.85Hz,2H),1.59(d,J＝6.70Hz,6H)。
步骤二：合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酰胺(40，ZTA120)
将步骤一产物(83mg,0.189mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(78.5mg,0.377mmol)和2M碳酸钠(1mL,0.377mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(15.4mg,0.0189mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，抽滤，滤液萃取，有机相干燥浓缩，HPLC纯化得目标化合物66.6mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.53(s,1H),7.93-7.83(m,2H),7.76(s,1H),7.73-7.66(m,1H),7.62(s,1H),7.24-7.17(m,2H),7.16-7.09(m,1H),5.87-5.72(m,1H),4.72(s,2H),3.93(s,3H),3.79(t,J＝6.11Hz,2H),3.01(t,J＝6.05Hz,2H),1.55(d,J＝6.80Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C24H26N8O[M+H]+＝443.22；实验测得：443.80。
终产物41：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酰胺(41，ZTA121)
步骤一：合成7-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酰胺(ZTA117)
将7-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(159mg,0.75mmol)，终产物03(80mg,0.25mmol)和三乙胺(82.2mg,0.813mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得无色油状化合物115mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.54(s,1H),7.96-7.86(m,2H),7.77-7.69(m,1H),7.35-7.24(m,2H),7.07(d,J＝8.00Hz,1H),5.97-5.82(m,1H),4.70(s,2H),3.78(t,J＝5.96Hz,2H),2.87(t,J＝5.84Hz,2H),1.57(d,J＝6.77Hz,6H)。
步骤二：合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酰胺(41，ZTA121)
将步骤一产物(100.4mg,0.228mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(95mg,0.456mmol)和2M碳酸钠(1mL,0.456mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(18.6mg,0.0228mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，抽滤，滤液萃取，有机相干燥浓缩，HPLC纯化得目标化合物240.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.53(s,1H),7.97-7.87(m,3H),7.78(s,1H),7.76-7.69(m,1H),7.39-7.31(m,2H),7.16(d,J＝8.07Hz,1H),5.94-5.82(m,1H),4.74(s,2H),3.91(s,3H),3.80(t,J＝5.62Hz,2H),2.92(t,J＝5.56Hz,2H),1.57(d,J＝6.81Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C24H26N8O[M+H]+＝443.22；实验测得：443.75。
终产物42：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶吡啶-2-基)脲(42，ZTA123)
将5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(65.1mg,0.372mmol)，终产物03(40mg,0.124mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得目标化合物48.3mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.40(s,1H),8.42(d,J＝1.86Hz,1H),8.24-8.15(m,2H),8.06(s,1H),8.00(t,J＝8.16Hz,1H),7.88(s,1H),7.84(d,J＝7.59Hz,1H),7.50(d,J＝8.31Hz,1H),5.82-5.69(m,1H),3.96(s,3H),1.66(d,J＝6.76Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C20H21N9O[M+H]+＝404.19；实验测得：404.62。
终产物43和180：1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(43，ZTA128-1)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(180,ZTA128-2)
将1H-吲唑-3-胺(49.5mg,0.371mmol)，终产物03(40mg,0.124mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得目标化合物ZTA128-1(11.9mg),1H NMR(MeOD-d4,400MHz):1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.39(s,1H),8.28-8.18(m,1H),8.06-7.98(m,1H),7.91(d,J＝8.36Hz,1H),7.82(d,J＝7.35Hz,1H),7.51-7.40(m,2H),7.19-7.12(m,1H),5.66(septuple,J＝6.75Hz,1H),1.70(d,J＝6.76Hz,6H).实验测得：363.57。ZTA128-2(6.2mg),9.27(s,1H),8.35(d,J＝8.57Hz,1H),8.24(d,J＝8.57Hz,1H),8.03(dd,J＝8.57,7.91Hz,1H),7.88-7.76(m,2H),7.55(t,J＝8.30Hz,1H),7.30(t,J＝7.66Hz,1H),5.75-5.62(m,1H),1.64(d,J＝6.78Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.16；ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.16；实验测得：363.71。
终产物44：1-(1H-苯并[d]咪唑-6-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(44，ZTA129)
将1H-苯并[d]咪唑-6-胺(49.4mg,0.371mmol)，终产物03(40mg,0.124mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得白色固体59.2mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.41(s,1H),9.31(s,1H),8.41(d,J＝1.64Hz,1H),8.14(d,J＝8.44Hz,1H),8.02(t,J＝7.78Hz,1H),7.82-7.75(m,2H),7.53(dd,J＝8.93,1.86Hz,1H),5.73-5.61(m,1H),1.65(d,J＝6.79Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.16；实验测得：363.77。
终产物45和179：1-(1H-吲哚-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(45，ZTA130-1)和5-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲哚-1-甲酰胺(179,ZTA130-2)
将1H-吲哚-5-胺(49.0mg,0.371mmol)，终产物03(40mg,0.124mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得黄色油状化合物31.5mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz,mixture of twoisomers,45:179＝2:1):9.11(s,0.3H),9.04(s,0.6H),8.00-7.94(m,0.3H),7.88-7.78(m,1.7H),7.70-7.54(m,2H),7.36-7.26(m,1H),7.20-7.12(m,1H),7.09-7.03(m,0.6H),5.56-5.36(m,1H),3.70-3.62(m,0.6H),1.53(d,J＝6.83Hz,2H),1.49-1.40(m,4H)。ESI-MS理论计算值C19H19N7O[M+H]+＝362.17；实验测得：362.89。
终产物46：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)吡咯烷-1-甲酰胺(46，ZTA131)
将吡咯烷(26.4mg,0.371mmol)，终产物03(40mg,0.124mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得黄棕色油状化合物45mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.62(s,1H),8.03(d,J＝8.36Hz,1H),7.98-7.91(m,1H),7.74(t,J＝7.48Hz,1H),5.93-5.79(m,1H),3.60-3.43(m,4H),2.05-1.92(m,4H),1.59(d,J＝6.72Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C15H20N6O[M+H]+＝301.17；实验测得：301.75。
终产物47：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酰胺(47，ZTA132)
将2,5-二氢-1H-吡咯盐酸盐(39.2mg,0.371mmol)，终产物03(40mg,0.124mmol)和三乙胺(78.4mg,0.775mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得无色油状化合物50.9mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.56(s,1H),8.06(d,J＝8.32Hz,1H),7.97(t,J＝8.40Hz,1H),7.76(d,J＝7.20Hz,1H),5.95(s,2H),5.84-5.90(m,1H),4.35(s,4H),1.61(d,J＝6.40Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C15H18N6O[M+H]+＝299.15；实验测得：299.72。
终产物48：3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)脲(48，ZTA133)
步骤一：合成1-(4-溴苯基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(ZTA124)
将终产物03(80mg,0.25mmol)和4-溴-N-甲基苯胺(139.5mg,0.75mmol)和三乙胺(82.2mg,0.813mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得目标化合物75.5mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.24(s,1H),8.08-7.89(m,2H),7.78-7.59(m,3H),7.36(d,J＝8.33Hz,2H),5.51-5.32(m,1H),3.37(s,3H),1.48(d,J＝6.65Hz,6H)。
步骤二：合成3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)脲(48，ZTA133)
将ZTA124(45mg,0.11mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(45mg,0.22mmol)和碳酸钠(23.32mg,0.22mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(9mg,0.011mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，HPLC纯化得目标化合物28.4mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.17(s,1H),8.06-8.10(m,1H),8.05(s,1H),7.91-7.98(m,1H),7.89(s,1H),7.73-7.75(m,3H),7.43-7.45(m,2H),5.30-5.35(m,1H),3.96(s,3H),1.42(d,J＝6.00Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C22H24N8O[M+H]+＝417.21；实验测得：417.58。
终产物49：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)脲(49，ZTA134)
步骤一：合成1-(6-溴吡啶-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(ZTA125)
将终产物03(80mg,0.25mmol)和6-溴吡啶-3-胺(129.8mg,0.75mmol)和三乙胺(82.2mg,0.813mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得目标化合物67.7mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.43(s,1H),8.52(d,J＝2.60Hz,1H),8.12(d,J＝8.48Hz,1H),8.04-7.93(m,2H),7.78(d,J＝7.12Hz,1H),7.56(d,J＝8.48Hz,1H),5.73-5.61(m,1H),1.64(d,J＝6.73Hz,6H)。
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)脲(49，ZTA134)
将ZTA125(30mg,0.075mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(31.1mg,0.15mmol)和碳酸钠(15.9mg,0.15mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(6.2mg,0.0075mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，HPLC纯化得目标化合物25.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.19(s,1H),9.13(d,J＝2.0Hz,1H),8.38(s,1H),8.34(dd,J＝8.80,2.00Hz,1H),8.15(s,1H),8.09-8.11(m,2H),8.00(t,J＝8.36Hz,1H),7.79(d,J＝7.20Hz,1H),5.63-5.69(m,1H),4.03(s,3H),1.63(d,J＝6.60Hz,6H)。ESI-MS理论计算值C20H21N9O[M+H]+＝404.19；实验测得：404.68。
终产物51：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)二氢吲哚-1-甲酰胺(51,ZTA136)
步骤一:5-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)二氢吲哚-1-甲酰胺(ZTA127)
将终产物03(80mg,0.25mmol)和5溴二氢吲哚(148.5mg,0.75mmol)和三乙胺(82.2mg,0.813mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得目标化合物ZTA127(93.3mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.28(s,1H),8.07(d,J＝8.25Hz,1H),8.00(t,J＝8.49Hz,1H),7.84(d,J＝8.74Hz,1H)7.79(d,J＝7.28Hz,1H),7.38(s,1H),7.34-7.29(m,1H),5.81(sept,J＝6.70Hz,1H),4.25(d,J＝8.52Hz,2H),3.27(d,J＝8.52Hz,2H),1.59(d,J＝6.70Hz,6H).
步骤二：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)二氢吲哚-1-甲酰胺(51,ZTA136)
将ZTA127(48mg,0.113mmol)，1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(46.9mg,0.225mmol)和碳酸钠(23.9mg,0.225mmol,2M in H2O)加入圆底烧瓶，用DME溶解。加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(9.22mg,0.0113mmol)，95℃搅拌过夜。反应结束，HPLC纯化得目标化合物ZTA136(37.8mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.50(s,1H),8.12-8.06(m,1H),8.05-7.97(m,1H),7.94-7.86(m,2H),7.84-7.75(m,2H),7.44(s,1H),7.41-7.35(m,1H),5.87(septet,J＝6.68Hz,1H),4.24(t,J＝8.27Hz,2H),3.28(t,J＝8.27Hz.,2H),1.62(d,J＝6.55Hz,6H).
终产物55：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1-甲基-1H-吲唑-3-基)脲(55,YB138)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、1-甲基-1H-吲唑-3-胺(41mg,0.278mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB138(38mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.27(s,1H),8.23(d,J＝8.4Hz,1H),8.02(dd,J＝7.6,8.5Hz,1H),7.90(dt,J＝1.0,8.3Hz,1H),7.81(d,J＝7.5Hz,1H),7.55–7.38(m,2H),7.16(ddd,J＝2.0,5.8,8.1Hz,1H),5.64(p,J＝6.7Hz,1H),4.02(s,3H),1.68(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C19H20N8O[M+H]+＝377.18,实验测得：377.77。
终产物59:1-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(59,YB115)
将终产物03(30mg,0.0973mmol)、3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-胺(38mg,0.278mmol)和Et3N(38mg)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB115(23mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.35(s,1H),8.07(d,J＝8.15Hz,1H),8.03-7.97(s,1H),7.78(d,J＝7.77Hz,1H),6.23(s,1H),5.63(septet,J＝6.80Hz,1H),3.76(s,3H),1.97-1.89(m,1H),1.62(d,J＝6.80Hz,6H),1.07-0.99(m,2H),0.83-0.76(m,2H).ESI-MS理论计算值C18H23N8O[M+H]+＝367.20,实验测得：367.58。
终产物60:1-(4-(1H-咪唑-1-基)苯基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(60,YB130)
步骤一:合成1-(4-硝基苯基)-1H-咪唑(YB112)
玻璃反应瓶中加入咪唑(68mg,1mmol)溶解于DMF(5mL),加入4-氟硝基苯(169mg,1.2mmol)和碳酸钾(300mg,2.2mmol)。反应加热至110℃,反应2小时。冷却反应后加入乙酸乙酯20mL并用水洗三次。无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱纯化的目标产物YB112(162mg)。1HNMR(MeOD-d4,400MHz):8.45-8.40(m,2H),8.38(s,1H),7.92-7.86(m,2H),7.79-7.76(m,1H),7.24(s,1H).
步骤二:合成4-(1H-咪唑-1-基)苯胺(YB126)
YB112(162mg)溶解于THF溶剂中，反应体系除空气后，加入10％Pd/C 20mg。反应体系加上氢气球，反应过夜。过滤反应并用乙酸乙酯洗涤、浓缩、硅胶柱纯化的目标产物YB126(154mg)。1H NMR(CDCl3,400MHz):7.74(s,1H),7.21-7.14(m,4H),6.79-6.72(m,2H),4.05-3.55(br,2H).
步骤三:合成1-(4-(1H-咪唑-1-基)苯基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(60,YB130)
将终产物03(30mg,0.0973mmol)、YB126(45mg,0.278mmol)和Et3N(38mg)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB130。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.43(s,1H),9.34(s,1H),8.13(d,J＝8.58Hz,1H),8.05(s,1H),8.02-7.96(m,1H),7.85-7.74(m,4H),7.72-7.65(m,2H),5.68(septet,J＝6.73Hz,1H),1.64(d,J＝6.73Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H21N8O[M+H]+＝389.18,实验测得：389.62。
终产物142:N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5,6-二氢-[3,3'-联吡啶]-1(2H)-甲酰胺(142,YB127)
步骤一:合成5,6-二氢-[3,3'-联吡啶]-1(2H)-羧酸叔丁酯(YB119)
5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(200mg,0.65mmol)和3-溴吡啶(51.1mg,0.323mmol)称入瓶中，加入1，2-二甲氧基乙烷(4mL)和2M Na2CO3水溶液(1.5mL)。反应体系除氧气后再加入Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(26.4mg,0.032mmol)。反应在95℃加热过夜，加入水稀释并用乙酸乙酯萃取、干燥浓缩，过柱纯化得目标化合物YB119。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.58(s,1H),8.45(d,J＝4.10Hz,1H),7.61(dt,J＝7.91,1.80Hz,1H),7.26-7.18(m,1H),6.24-6.16(m,1H),4.21(s,2H),3.51(t,J＝5.70Hz,2H),2.29(s,2H),1.45(s,9H).
步骤二:合成1,2,5,6-四氢-3,3'-联吡啶(YB123)
全部YB119粗品溶解于4mL CH2Cl2后加入1mL三氟醋酸。反应室温搅拌过夜。旋干反应溶液，加水并调节pH值至7-8。用乙酸乙酯萃取，干燥、蒸除溶剂得粗品103mg，未纯化直接用于下一步反应。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.55(d,J＝2.00Hz,1H),8.42(dd,J＝4.86,1.38Hz,1H),7.82(dt,J＝8.10,2.00Hz,1H),6.36-6.29(m,1H),3.68-3.64(m,2H),2.97(t,J＝5.87Hz,2H),2.36-2.28(m,2H).
步骤三:合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5,6-二氢-[3,3'-联吡啶]-1(2H)-甲酰胺(142,YB127)
将终产物03(30mg,0.0973mmol)、YB123(45mg,0.278mmol)和Et3N(38mg)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB127。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.66(s,1H),8.98(d,J＝2.0Hz,1H),8.78(d,J＝5.66Hz,1H),8.74(dt,J＝8.43,1.65Hz,1H),8.14-8.08(m,1H),8.02-7.96(m,1H),7.92(d,J＝7.86Hz,1H),7.78(d,J＝7.17Hz,1H),6.83-6.77(m,1H),5.91(septet,J＝6.66Hz,1H),4.63-4.53(m,2H),3.82(t,J＝5.88Hz,2H),2.62-2.52(m,2H),1.61(d,J＝6.66Hz,6H).ESI-MS理论计算值C21H24N7O[M+H]+＝390.20,实验测得：390.78。
终产物146：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(吡嗪-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(146,YB147)
步骤一:合成5-(吡嗪-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(YB131)
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(100mg,0.32mmol)和2-溴吡嗪(103.3mg,0.65mmol)称入瓶中，加入1，2-二甲氧基乙烷(4mL)和2M Na2CO3水溶液(1.5mL)。反应体系除氧气后再加入Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(26.4mg,0.032mmol)。反应在95℃加热过夜，加入水稀释并用乙酸乙酯萃取、干燥浓缩，未纯化得100mg粗品，直接用于下一步反应。
步骤二:合成2-(1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)吡嗪(YB136)
YB131(100mg,0.38mmol)粗品溶解于4mL CH2Cl2后加入1mL三氟醋酸。反应室温搅拌过夜。旋干反应溶液，加水并调节pH值至7-8。用乙酸乙酯萃取，干燥、蒸除溶剂得粗品，纯化得到目标化合物YB136(35.5mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ8.80(d,J＝1.5Hz,1H),8.53(dd,J＝1.6,2.6Hz,1H),8.42(d,J＝2.6Hz,1H),6.90(tt,J＝1.7,3.9Hz,1H),3.85(q,J＝2.3Hz,2H),3.04(t,J＝5.8Hz,2H),2.43(dd,J＝3.6,6.7Hz,2H).
步骤三:合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(吡嗪-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(146,YB147)
将终产物03(30mg,0.0973mmol)、YB136(25.5mg,0.22mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB147(30.9mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.48(s,1H),8.90(d,J＝1.5Hz,1H),8.58(dd,J＝1.6,2.6Hz,1H),8.45(d,J＝2.6Hz,1H),8.01–7.85(m,2H),7.76(dd,J＝1.2,7.2Hz,1H),6.99(tt,J＝1.9,4.2Hz,1H),5.89(h,J＝6.6Hz,1H),4.64(q,J＝2.4Hz,2H),3.78(t,J＝5.7Hz,2H),2.54(dh,J＝2.6,8.5Hz,2H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H22N8O[M+H]+＝391.2,实验测得：391.2。
终产物150：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5,6-二氢-[3,4'-联吡啶]-1(2H)-甲酰胺(150,YB133)
步骤一:合成5,6-二氢-[3,4'-联吡啶]-1(2H)-羧酸叔丁酯(YB121)
5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(100mg,0.32mmol)和4-溴吡啶(126mg,0.65mmol)称入瓶中，加入1，2-二甲氧基乙烷(4mL)和2M Na2CO3水溶液(1.5mL)。反应体系除氧气后再加入Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(26.4mg,0.032mmol)。反应在95℃加热过夜，加入水稀释并用乙酸乙酯萃取、干燥浓缩，过柱纯化得产品YB121(81mg)。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.68-8.42(m,2H),7.43-7.26(m,2H),6.60-6.46(m,1H),4.34-4.16(m,2H),3.62-3.45(m,2H),2.42-2.23(m,2H),1.46(s,9H).
步骤二:合成1,2,5,6-四氢-3,4'-联吡啶(YB128)
YB121粗品溶解于4mL CH2Cl2后加入1mL三氟醋酸。反应室温搅拌过夜。旋干反应溶液，加水并调节pH值至7-8。用乙酸乙酯萃取，干燥、蒸除溶剂得粗品，未纯化直接用于下一步反应。
步骤三:合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5,6-二氢-[3,4'-联吡啶]-1(2H)-甲酰胺(150,YB133)
将终产物03(30mg,0.0973mmol)、YB128(50mg,0.278mmol)和Et3N(38mg)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB133。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.58(s,1H),8.79(d,J＝6.80Hz,2H),8.16(d,J＝6.93Hz,2H),8.00-7.94(m,1H),7.91(d,J＝8.22Hz,1H),7.77(d,J＝7.41Hz,1H),7.25-7.20(m,1H),5.90(septet,J＝6.71Hz,1H),4.66-4.58(m,2H),3.82(t,J＝5.72Hz,2H),2.71-2.59(m,2H),1.60(d,J＝6.71Hz,6H).
终产物187：6-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酰胺(187,ZTA126)
将终产物03(80mg,0.25mmol)和6-溴-1,2,3,4-四氢喹啉(159.1mg,0.75mmol)和三乙胺(82.2mg,0.813mmol)加入圆底烧瓶，2mL DMF溶解。加热到50℃搅拌过夜。反应结束加2mL水，HPLC纯化得目标化合物ZTA126(61.6mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.63(s,1H),8.10-7.98(m,2H),7.84-7.79(m,1H),7.42(s,1H),7.35(s,2H),5.80(septet,J＝6.73Hz,1H),3.84(t,J＝6.23Hz,2H),2.85(t,J＝6.56Hz,2H),2.09-2.00(m,2H),1.59(d,J＝6.73Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H22 79BrN6O[M+H]+＝441.10,实验测得：440.48.
终产物189：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5',6'-二氢-[2,3'-联吡啶]-1'(2'H)-甲酰胺(189,YB129)
步骤一:合成5'，6'-二氢-[2,3'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(YB120)
5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(100mg,0.32mmol)和2-溴吡啶(102mg,0.65mmol)称入瓶中，加入1，2-二甲氧基乙烷(4mL)和2M Na2CO3水溶液(1.5mL)。反应体系除氧气后再加入Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(26.4mg,0.032mmol)。反应在95℃加热过夜，加入水稀释并用乙酸乙酯萃取、干燥浓缩，未纯化直接用于下一步反应。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.57-8.48(m,1H),7.62(t,J＝7.69Hz,1H),7.45-7.29(m,1H),7.19-7.06(m,1),6.84-6.63(m,1H),4.49-4.34(m,2H),3.64-3.48(m,1H),2.41-2.23(m,2H),1.48(s,9H).
步骤二:合成1’,2’,5’,6'-四氢-2,3'-联吡啶(YB125)
YB120(84mg,0.32mmol)粗品溶解于4mL CH2Cl2后加入1mL三氟醋酸。反应室温搅拌过夜。旋干反应溶液，加水并调节pH值至7-8。用乙酸乙酯萃取，干燥、蒸除溶剂得粗品，纯化得到目标化合物YB125(28.3mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.47(d,J＝8.46Hz,1H),7.77(td,J＝7.80,1.49Hz,1H),7.55(d,J＝8.10Hz,1H),7.29-7.21(m,1H),6.77-6.68(m,1H)，3.91-3.83(m,2H),3.05(t,J＝5.72Hz,2H),2.44-2.36(m,2H).
步骤三:合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5’,6'-二氢-[2,3'-联吡啶]-1'(2'H)-甲酰胺(189,YB129)
将终产物03(30mg,0.0973mmol)、YB125(28.3mg,0.177mmol)和Et3N(38mg)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB129。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.51(s,1H),8.74(dd,J＝5.71,0.98Hz,1H),8.49(td,J＝8.00,1.44Hz,1H),8.09(d,J＝8.25Hz,1H),7.99-7.92(m,2H),7.92-7.85(m,1H),7.77(dd,J＝7.17,0.92Hz,1H),7.05-7.00(m,1H),5.88(septet,J＝6.74Hz,1H),4.66-4.61(m,2H),3.83(t,J＝5.72Hz,2H),2.67-2.58(m,2H),1.60(d,J＝6.69Hz,6H).ESI-MS理论计算值C21H24N7O[M+H]+＝390.2,实验测得：390.9。
终产物190：N-(6-(4-异丙基-4H-1,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(190,ZTB-8)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，1H-吲唑(43.8mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物14.2mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.44(s,1H),8.32-8.40(m,2H),8.08(t,J＝4.06Hz,1H),7.86-7.92(m,2H),7.61(t,J＝7.64Hz,1H),7.39(t,J＝7.48Hz,1H),5.72-5.82(m,1H),1.67(s,3H),1.65(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18N7O[M+H]+＝348.2,实验测得：347.7。
终产物191：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基)脲(191,ZTB-10)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-胺(43.8mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物7.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):13.22(s,1H),10.19(s,1H),8.90(s,1H),8.53-8.54(m,2H),8.07(d,J＝8.31Hz,1H),7.98(t,J＝8.12Hz,1H),7.76(d,J＝7.44Hz,1H),7.16-7.19(m,1H),5.39-5.45(m,1H),1.54(s,3H),1.53(s,3H)。ESI-MS理论计算值C17H18N9O[M+H]+＝364.2,实验测得：364.2.
终产物192：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-苯基硫脲(192,ZTB-11)
将终产物ZTB-6(100mg,0.295mmol)，苯胺(82.4mg,0.885mmol)和三乙胺(97mg,0.959mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.5mL水，HPLC纯化，得到目标化合物60mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.07(s,1H),8.04(t,J＝8.08Hz,1H),7.66(d,J＝7.52Hz,1H),7.58(d,J＝7.52Hz,1H),7.38-7.43(m,3H),7.26(t,J＝7.46Hz,1H),5.06-5.13(m,1H),1.40(s,3H),1.39(s,3H)。ESI-MS理论计算值C17H19N6S[M+H]+＝339.1,实验测得：339.2。
终产物193：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)硫脲(193,ZTB-12)
将中间体ZTB-6(50mg,0.147mmol)，4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯胺(76.6mg,0.442mmol)和三乙胺(40.3mg,0.478mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.5mL水，HPLC纯化，得到目标化合物35mg。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):12.54(s,br,1H),11.00(s,br,1H),8.87(s,1H),8.14(s,1H),8.03(t,J＝8.04Hz,1H),7.87(s,1H),7.64(d,J＝7.46Hz,1H),7.56(s,3H),7.48(d,J＝8.46Hz,1H),4.95-5.02(m,1H),3.87(s,3H),1.29(s,3H),1.27(s,3H)。ESI-MS理论计算值C21H23N8S[M+H]+＝419.2,实验测得：419.0。
终产物194和195：1-(6-氟-1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(194,ZTB-13-14g)和3-氨基-6-氟-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(195,ZTB-13-18g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，6-氟-1H-吲唑-3-胺(56mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-13-14g(9.2mg)和ZTB-13-18g(16mg)。ZTB-13-14g：1H NMR(DMSO-d6,400MHz):12.72(s,1H),10.53(s,1H),10.14(s,1H),8.95(s,1H),8.08-8.12(m,2H),7.98(d,J＝8.14Hz,1H),7.76(d,J＝7.48Hz,1H),7.24(dd,J＝9.60,1.96Hz,1H),6.85(td,J＝9.10,2.09Hz,1H),5.37-5.44(m,1H),1.56(s,3H),1.54(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18FN8O[M+H]+＝381.2,实验测得:380.3.ZTB-13-18g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.40(s,1H),8.31(d,J＝7.68Hz,1H),8.02(t,J＝8.08Hz,1H),7.76-7.89(m,3H),7.05(td,J＝8.02,1.78Hz,1H),5.68-5.74(m,1H),1.67(s,3H),1.65(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18FN8O[M+H]+＝380.2,实验测得：380.3.
终产物196：1-(6-溴-1H-吲唑-3-基)-3(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(196,ZTB-14)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，6-溴-1H-吲唑-3-胺(78.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物7.0mg。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):12.78(s,1H),10.39(s,1H),10.14(s,1H),8.93(s,1H),8.09(d,J＝8.41Hz,1H),7.96-8.02(m,2H),7.76(d,J＝5.74Hz,1H),7.69(d,J＝1.19Hz,1H),7.23(dd,J＝8.73,1.47Hz,1H),5.37-5.44(m,1H),1.55(s,3H),1.54(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 79BrN8O[M+H]+＝441.1,实验测得:441.9.
终产物197和198：1-(5-溴-1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(197,ZTB-15-11g)和3-氨基-5-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(198,ZTB-15-16g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，5-溴-1H-吲唑-3-胺(78.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-15-11g(8.7mg)和ZTB-15-16g(10.7mg)。ZTB-15-11g：1H NMR(DMSO-d6,400MHz):12.85(s,1H),10.31(s,1H),10.08(s,1H),8.95(s,1H),8.29(s,1H),8.09(d,J＝8.48Hz,1H),7.98(t,J＝8.20Hz,1H),7.76(d,J＝7.48Hz,1H),7.44-7.51(m,2H),5.38-5.45(m,1H),1.55(s,3H),1.53(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 79BrN8O[M+H]+＝441.1,实验测得:441.1.ZTB-15-16g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.21(s,1H),8.32(d,J＝8.44Hz,1H),8.16(d,J＝8.83Hz,1H),8.00-8.05(m,2H),7.84(d,J＝7.60Hz,1H),7.65(d,J＝8.83,1.82Hz,1H),5.64-5.71(m,1H),1.65(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 79BrN8O[M+H]+＝441.1,实验测得:441.3.
终产物199：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)胍(199,ZTB-17)
将终产物ZTB-12(20mg,0.048mmol)，氨水(1.24mg,0.072mmol)和NaIO4(11.3mg,0.053mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF和2mL H2O溶解反应物。85℃下搅拌过夜。反应结束，HPLC纯化，得到目标化合物20mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.06(s,1H),8.14(t,J＝8.16Hz,1H),8.05(s,1H),7.88(s,1H),7.84(d,J＝3.83Hz,1H),7.73(d,J＝8.55Hz,1H),7.41(t,J＝7.66Hz,1H),5.14-5.25(m,1H),3.96(s,3H),1.51(s,3H),1.50(s,3H)。ESI-MS理论计算值C21H24N9[M+H]+＝402.2,实验测得：402.3。
终产物200：3-氨基-4-氯-N-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(200,ZTB-28)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，4-氯-1H-吲唑-3-胺(62mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物7.6mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.33(s,1H),8.36(d,J＝8.36Hz,1H),8.25(d,J＝9.04Hz,1H),8.07(d,J＝8.22Hz,1H),7.86-7.88(m,2H),7.56(dd,J＝8.80,1.72Hz,1H),5.68-5.75(m,1H),1.67(s,3H),1.65(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 35ClN8O[M+H]+＝397.1,实验测得:397.2.
终产物201：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-基)脲(201,ZTB-29)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-胺(49.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物7.6mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.40(s,1H),9.08(s,1H),8.75(d,J＝6.08Hz,1H),8.34(d,J＝6.16Hz,1H),8.00-8.08(m,2H),7.79(d,J＝6.98Hz,1H),5.53-5.60(m,1H),1.64(s,3H),1.63(s,3H)。ESI-MS理论计算值C17H18N9O[M+H]+＝364.2,实验测得：364.2.
终产物202：1-(6-(4-异丙基-4H-1,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(7-甲基-1H-吲唑-3-基)脲(202,ZTB-35)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，7-甲基-1H-吲唑-3-胺(79mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物30.3mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.47(s,1H),8.25(d,J＝8.16Hz,1H),8.03(t,J＝8.04Hz,1H),7.83(d,J＝7.52Hz,1H),7.72(d,J＝8.24Hz,1H),7.22(d,J＝6.84Hz,1H),7.07(t,J＝7.63Hz,1H),5.64-5.71(m,1H),2.56(s,3H),1.72(s,3H),1.70(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O[M+H]+＝377.2,实验测得：377.2。
终产物203和204：1-(6-(4-异丙基-4H-1,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-甲基-1H-吲唑-3-基)脲(203,ZTB-36-30g)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-6-甲基-1H-吲唑-1-甲酰胺(204,ZTB-36-32g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，6-甲基-1H-吲唑-3-胺(79mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-36-30g(10.7mg)和ZTB-36-32g(8.4mg)。ZTB-36-30g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.15(s,1H),8.18(s,1H),8.00(t,J＝8.00Hz,1H),7.76-7.81(m,2H),7.25(s,1H),7.00(d,J＝8.42Hz,1H),5.57-5.63(m,1H),2.49(s,3H),1.68(s,3H),1.66(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O[M+H]+＝377.2,实验测得：376.4。ZTB-36-32g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.35(s,1H),8.39(d,J＝7.96Hz,1H),8.06-8.10(m,2H),7.87(d,J＝7.12Hz,1H),7.69(d,J＝8.16Hz,1H),7.17(d,J＝8.36Hz,1H),5.68-5.75(m,1H),2.54(s,3H),1.68(s,3H),1.66(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O[M+H]+＝377.2,实验测得：376.7。
终产物205和206：1-(6-(4-异丙基-4H-1,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(5-甲基-1H-吲唑-3-基)脲(205,ZTB-37-46g)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吲唑-1-甲酰胺(206,ZTB-37-49g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，5-甲基-1H-吲唑-3-胺(79mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-37-46g(12.2mg)和ZTB-37-49g(13.9mg)。ZTB-37-46g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.66(s,1H),8.27(d,J＝7.64Hz,1H),8.06(t,J＝8.56Hz,1H),7.85(d,J＝7.04Hz,1H),7.67(s,1H),7.38(d,J＝8.52Hz,1H),7.31(d,J＝8.64Hz,1H),5.66-5.75(m,1H),2.48(s,3H),1.73(s,3H),1.71(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O[M+H]+＝377.2,实验测得：376.5.ZTB-37-49g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.18(s,1H),8.34(d,J＝8.32Hz,1H),8.12(d,J＝8.36Hz,1H),8.04(t,J＝8.12Hz,1H),7.83(d,J＝7.52Hz,1H),7.59(s,1H),7.40(d,J＝8.44Hz,1H),5.64-5.71(m,1H),2.48(s,3H),1.66(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O[M+H]+＝377.2,实验测得：376.3.
终产物207和208：1-(6-氯-1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(207,ZTB-38-9g)和3-氨基-6-氯-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(208,ZTB-38-15g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，6-氯-1H-吲唑-3-胺(62mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-38-9g(24mg)和ZTB-38-15g(18.1mg)。ZTB-38-9g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.54(s,1H),8.24(d,J＝7.84Hz,1H),8.04(d,J＝8.08Hz,1H),7.92(d,J＝8.80Hz,1H),7.83(d,J＝7.44Hz,1H),7.49(s,1H),7.13(d,J＝8.64Hz,1H),5.65-5.71(m,1H),1.72(s,3H),1.70(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 35ClN8O[M+H]+＝397.1,实验测得:397.2.ZTB-38-15g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.29(s,1H),8.35(d,J＝8.28Hz,1H),8.29(s,1H),8.09(t,J＝7.84Hz,1H),7.88(d,J＝7.92Hz,1H),7.80(d,J＝8.51Hz,1H),7.32(d,J＝8.88Hz,1H),5.66-5.73(m,1H),1.67(s,3H),1.65(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 35ClN8O[M+H]+＝397.1,实验测得：397.2.
终产物209和210：1-(6-(4-异丙基-4H-1,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-甲基-1H-吲唑-3-基)脲(209,ZTB-39-19g)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-4-甲基-1H-吲唑-1-甲酰胺(210,ZTB-39-24g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，4-甲基-1H-吲唑-3-胺(79mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-39-19g(14.7mg)和ZTB-39-24g(14.4mg)。ZTB-39-19g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.12(s,1H),7.94-8.00(m,2H),7.76(d,J＝7.68Hz,1H),7.27-7.34(m,2H),6.91(s,J＝6.52Hz,1H),5.51-5.58(m,1H),2.65(s,3H),1.58(s,3H),1.56(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O[M+H]+＝377.2,实验测得：376.0.ZTB-39-24g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.18(s,1H),8.33(d,J＝8.32Hz,1H),8.10(d,J＝8.37Hz,1H),8.03(t,J＝8.20Hz,1H),7.83(d,J＝7.52Hz,1H),7.40(t,J＝7.90Hz,1H),7.03(d,J＝7.24Hz,1H),5.64-5.70(m,1H),2.70(s,3H),1.66(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O[M+H]+＝377.2,实验测得：376.1.
终产物211和212：1-(6–(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-3-基)脲(211,ZTB-49-9g)和3-氨基-N-(6–(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H吡唑并[4,3-b)]吡啶-1-甲酰胺(212,ZTB-49-18g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-3-胺(49.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-49-9g(6.9mg)和ZTB-49-18g(9.9mg)。ZTB-49-9g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.10(s,1H),8.68(d,J＝4.66Hz,1H),8.36(d,J＝8.36Hz,1H),8.13(t,J＝8.36Hz,1H),8.03(t,J＝8.34Hz,1H),7.80(d,J＝7.48Hz,1H),7.71-7.74(m,1H),5.54-5.60(m,1H),1.65(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS理论计算值C17H18N9O[M+H]+＝364.2,实验测得：364.6.ZTB-49-18g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.35(s,1H),8.62(dd,J＝8.43,1.17Hz,1H),8.59(dd,J＝4.53,1.17Hz,1H),8.36(d,J＝9.28Hz,1H),8.08(t,J＝8.24Hz,1H),7.89(d,J＝7.52Hz,1H),7.59(q,J＝4.64Hz,1H),5.70-5.77(m,1H),1.67(s,3H),1.66(s,3H)。ESI-MS理论计算值C17H18N9O[M+H]+＝364.2,实验测得：363.9.
终产物213和214：1-(6-(4-异丙基-4H-1,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-3-基)脲(213,ZTB-51-14g)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(214,ZTB-51-17g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-3-胺(79mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.5mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-51-14g(6.8mg)和ZTB-51-17g(19.3mg)。ZTB-51-14g：1H NMR(DMSO-d6,400MHz):12.62(s,br,1H),10.59(s,br,1H),10.02(s,br,1H),8.90(s,1H),8.19(s,1H),8.12(d,J＝8.35Hz,1H),8.05(s,1H),7.98(t,J＝8.10Hz,1H),7.79(s,1H),7.76(d,J＝7.49Hz,1H),7.61(d,J＝7.15Hz,1H),7.46(d,J＝8.68Hz,1H),5.39-5.46(m,1H),3.89(s,3H),1.56(s,3H),1.55(s,3H)。ESI-MS理论计算值C22H23N10O[M+H]+＝443.2,实验测得：443.4。ZTB-51-17g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.27(s,1H),8.37(d,J＝8.34Hz,1H),8.19(d,J＝8.42Hz,1H),8.03(t,J＝8.04Hz,1H),7.96(d,J＝8.20Hz,1H),7.86(s,1H),7.84(d,J＝7.44Hz,1H),7.73(d,J＝7.15Hz,1H),5.66-5.72(m,1H),3.95(s,3H),1.67(s,3H),1.65(s,3H)。ESI-MS理论计算值C22H23N10O[M+H]+＝443.2,实验测得：443.5。
终产物215和216：1-(6-(4-异丙基-4H-1,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-3-基)脲(215,ZTB-52-20g)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(216,ZTB-52-22g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-3-胺(79mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.5mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-52-20g(5.6mg)和ZTB-52-22g(7.5mg)。ZTB-52-20g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.64(s,1H),8.27(s,1H),8.01-8.11(m,2H),7.81-7.97(m,3H),7.60(s,1H),7.39(d,J＝7.60Hz,1H),5.65-5.77(m,1H),3.97(s,3H),1.73(s,3H),1.71(s,3H)。ESI-MS理论计算值C22H23N10O[M+H]+＝443.2,实验测得：443.9。ZTB-52-22g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.24(s,1H),8.41(s,1H),8.38(d,J＝8.48Hz,1H),8.09(s,1H),8.06(t,J＝8.24Hz,1H),7.93(s,1H),7.85(d,J＝7.60Hz,1H),7.52(dd,J＝8.20,1.3Hz,1H),5.65-5.72(m,1H),3.98(s,3H),1.67(s,3H),1.65(s,3H)。ESI-MS理论计算值C22H23N10O[M+H]+＝443.2,实验测得：443.6。
终产物217：1-(7-氟-1H-吲唑-3-基)-3-(6–(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(217,ZTB-53)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，7-氟-1H-吲唑-3-胺(56mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物16.6mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.56(s,1H),9.25(d,J＝8.68Hz,1H),8.05(t,J＝8.20Hz,1H),7.85(d,J＝7.52Hz,1H),7.73(d,J＝8.16Hz,1H),7.08-7.20(m,2H),5.66-5.72(m,1H),1.72(s,3H),1.71(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18FN8O[M+H]+＝381.2,实验测得：380.6.
终产物218和219：1-(5-氟-1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(218,ZTB-54-27g)和3-氨基-5-氟-N-(6–(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(219,ZTB-54-32g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，5-氟-1H-吲唑-3-胺(56mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-54-27g(12.7mg)和ZTB-54-32g(12.4mg)。ZTB-54-27g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.38(s,1H),8.19(d,J＝7.96Hz,1H),8.02(t,J＝8.21Hz,1H),7.81(t,J＝7.58Hz,1H),7.61(t,J＝8.72Hz,1H),7.46-7.49(m,1H),7.26(d,J＝9.04Hz,1H),5.61-5.68(m,1H),1.70(s,3H),1.68(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18FN8O[M+H]+＝381.2,实验测得:390.6.ZTB-54-32g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.20(s,1H),9.33(d,J＝8.41Hz,1H),8.22-8.26(m,1H),8.03(d,J＝8.04Hz,1H),7.84(d,J＝7.64Hz,1H),7.53(dd,J＝8.17,2.31Hz,1H),7.35(td,J＝9.00,2.23Hz,1H),5.64-5.71(m,1H),1.66(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18FN8O[M+H]+＝381.2,实验测得：380.5.
终产物220：3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-4-甲氧基-1H-吲唑-1-甲酰胺(220,ZTB-57)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，4-甲氧基-1H-吲唑-3-胺(49.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物8.9mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.69(s,1H),8.27(d,J＝8.20Hz,1H),8.05(t,J＝8.16Hz,1H),7.84(d,J＝7.64Hz,1H),7.44(d,J＝8.20Hz,1H),7.08(d,J＝7.85Hz,1H),6.89(d,J＝7.49Hz,1H),5.69-5.76(m,1H),1.73(s,3H),1.71(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O2[M+H]+＝393.2；实验测得：393.0.
终产物221：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(7-甲氧基-1H-吲唑-3-基)脲(221,ZTB-58)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，7-甲氧基-1H-吲唑-3-胺(49.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物24.1mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.73(s,1H),8.28(d,J＝8.12Hz,1H),8.05(t,J＝8.14Hz,1H),7.85(d,J＝7.28Hz,1H),7.44(d,J＝8.36Hz,1H),7.08(t,J＝8.00Hz,1H),6.90(d,J＝7.52Hz,1H),5.70-5.77(m,1H),4.03(s,3H),1.73(s,3H),1.72(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O2[M+H]+＝393.2,实验测得：393.2.
终产物222和223：1-(6–(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-甲氧基-1H-吲唑-3-基)脲(222,ZTB-61-18g)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-甲氧基-1H-吲唑-1-甲酰胺(223,ZTB-61-24g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，5-甲氧基-1H-吲唑-3-胺(49.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-61-18g(9.8mg)和ZTB-61-24g(13.4mg)。ZTB-61-18g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.44(s,1H),8.21(s,1H),8.01(s,1H),7.81(d,J＝7.12Hz,1H),7.38(d,J＝9.16Hz,1H),7.32(s,1H),7.11(d,J＝8.96Hz,1H),5.64-5.70(m,1H),3.86(s,3H),1.70(s,3H),1.68(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O2[M+H]+＝393.2,实验测得：393.3.ZTB-61-24g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.33(d,J＝8.04Hz,1H),8.10(d,J＝8.84Hz,1H),8.02(t,J＝8.16Hz,1H),7.82(d,J＝7.76Hz,1H),7.29(d,J＝2.37Hz,1H),7.15(d,J＝8.64Hz,1H),5.63-5.73(m,1H),3.87(s,3H),1.66(s,3H),1.65(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O2[M+H]+＝393.2,实验测得：393.2.
终产物224：3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-1-甲酰胺(224,ZTB-62)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，6-甲氧基-1H-吲唑-3-胺(49.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物6.2mg。1H NMR(MeOD,400MHz):9.09(s,1H),8.36(d,J＝8.32Hz,1H),8.06(t,J＝8.32Hz,1H),7.85(d,J＝7.66Hz,1H),7.80(d,J＝1.95Hz,1H),7.67(d,J＝8.70Hz,1H),6.92(dd,J＝8.68,2.11Hz,1H),5.62-5.69(m,1H),3.93(s,3H),1.65(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O2[M+H]+＝393.2,实验测得：393.4.
终产物225：1-(7-氯-1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(225,ZTB-64)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，7-氯-1H-吲唑-3-胺(62mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-64:其异构体(2.3:1,27mg,HPLC无法分开)：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.18(s,1H),8.98(d,J＝7.80Hz,1H),8.01(t,J＝8.24Hz,1H),7.89(d,J＝8.13Hz,1H),7.81(d,J＝7.60Hz,1H),7.46(d,J＝7.45Hz,1H),7.13(t,J＝7.80Hz,1H),5.57-5.64(m,1H),1.68(s,3H),1.66(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 35ClN8O[M+H]+＝397.1,实验测得:397.6.
终产物226：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1H-吡唑并[4]吡啶-3-基)脲(226,ZTB-66)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-胺(49.7mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物16.2mg。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):10.00(s,1H),9.21(s,1H),8.43(d,J＝6.72Hz,1H),8.14(d,J＝6.76Hz,1H),8.04(t,J＝8.04Hz,1H),7.96(d,J＝6.84Hz,1H),7.82(d,J＝7.08Hz,1H),5.56-5.67(m,1H),1.65(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS理论计算值C17H18N9O[M+H]+＝364.2,实验测得：363.5.
终产物227和228：1-(5-氯-1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(227,ZTB-69-21g)和3-氨基-5-氯-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(228,ZTB-69-25g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，5-氯-1H-吲唑-3-胺(62mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-69-21g(7.9mg)和ZTB-64-25g(9.1mg)。ZTB-69-21g：1H NMR(DMSO-d6,400MHz):12.85(s,1H),10.33(s,1H),10.08(s,1H),8.98(s,1H),8.13(d,J＝1.80Hz,1H),8.10(d,J＝8.30Hz,1H),7.98(t,J＝8.12Hz,1H),7.76(d,J＝7.44Hz,1H),7.51(d,J＝8.92Hz,1H),7.39(d,J＝8.88,2.01Hz,1H),5.39-5.46(m,1H),1.55(s,3H),1.54(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 35ClN8O[M+H]+＝397.1,实验测得:397.1.ZTB-64-25g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.36(s,1H),8.33(d,J＝8.00Hz,1H),8.21(d,J＝8.60Hz,1H),8.04(t,J＝8.00Hz,1H),7.85(d,J＝7.88Hz,1H),7.84(s,1H),7.53(d,J＝8.40Hz,1H),5.67-5.74(m,1H),1.67(s,3H),1.65(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18 35ClN8O[M+H]+＝397.1,实验测得：397.1.
终产物229和230：3-氨基-4-氟-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(229,ZTB-71-12g)和1-(4-氟-1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(230,ZTB-71-15g)
将终产物03(40mg,0.124mmol)，4-氟-1H-吲唑-3-胺(56mg,0.371mmol)和三乙胺(40.8mg,0.403mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-71-12g(23.6mg)和ZTB-71-15g(5mg)。ZTB-71-12g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.71(s,1H),9.37(s,1H),8.37(d,J＝8.38Hz,1H),8.03-8.10(m,2H),7.88(d,J＝7.53Hz,1H),7.50-7.55(m,1H),6.95-7.00(m,1H),5.77-5.83(m,1H),1.70(s,3H),1.68(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18FN8O[M+H]+＝381.2；实验测得：380.2.ZTB-71-15g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.51(s,1H),8.12(d,J＝8.44Hz,1H),7.98(t,J＝8.26Hz,1H),7.78(d,J＝7.52Hz,1H),7.33-7.39(m,1H),7.27(d,J＝8.49Hz,1H),6.75-6.80(m,1H),5.61-5.68(m,1H),1.66(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H18FN8O[M+H]+＝381.2,实验测得：380.2.
终产物231：1-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(231,YB141)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、1,3-二甲基-1H-吡唑-5-胺(37mg,0.33mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB141(27mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.26(s,1H),8.10(d,J＝4.3Hz,2H),7.86(t,J＝4.2Hz,1H),6.38(s,1H),5.62(p,J＝6.8Hz,1H),3.83(s,3H),2.37(s,3H),1.72(d,J＝6.8Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H20N8O[M+H]+＝341.2,实验测得：341.5。
终产物232：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)脲(232,YB144)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-胺(27mg,0.278mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB144(39.6mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.52(s,1H),8.12–7.87(m,2H),7.87–7.65(m,2H),7.51(s,1H),5.75–5.56(m,1H),3.89(s,3H),1.63(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C15H18N8O[M+H]+＝327.2,实验测得：327.3。
终产物233：1-(3-环丙基-1H-吡唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(233,YB145)
步骤一:合成3-环丙基-1H-吡唑-5-胺(YB140)
将3-环丙基-3-氧代丙腈(109mg,1mmol)溶于10mL乙醇，加入水合肼(200mg,40mmol)，回流搅拌过夜，旋干反应液，乙酸乙酯溶解，盐水洗3次，有机相干燥旋干，硅胶柱纯化得90.2mg粗品。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ5.25(s,1H),1.76(tt,J＝5.0,8.4Hz,1H),0.95–0.81(m,2H),0.68–0.58(m,2H).
步骤二：合成1-(3-环丙基-1H-吡唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(YB145)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、3-环丙基-1H-吡唑-5-胺(45mg,0.366mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB145(46.9mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.45(s,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),7.96(t,J＝8.0Hz,1H),7.80(d,J＝7.5Hz,1H),6.01(s,1H),5.78(hept,J＝6.8Hz,1H),1.98(tt,J＝4.9,8.6Hz,1H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H),1.12(dt,J＝3.4,8.5Hz,2H),0.87(dt,J＝4.7,7.1Hz,2H).ESI-MS理论计算值C17H20N8O[M+H]+＝353.2,实验测得：352.9。
终产物234：1-(3-乙基-1H-吡唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(234,YB146)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、3-乙基-1H-吡唑-5-胺(31mg,0.278mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB146(33.7mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.49(s,1H),8.15(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(t,J＝8.0Hz,1H),7.80(d,J＝7.5Hz,1H),6.20(s,1H),5.77(hept,J＝6.8Hz,1H),2.72(q,J＝7.6Hz,2H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H),1.31(t,J＝7.6Hz,3H).ESI-MS理论计算值C16H20N8O[M+H]+＝341.2,实验测得：341.7。
终产物235：N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(嘧啶-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(235,YB148)
步骤一:合成5-(嘧啶-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(YB132)
5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(100mg,0.32mmol)和5-溴嘧啶(103mg,0.65mmol)称入瓶中，加入1，2-二甲氧基乙烷(4mL)和2M Na2CO3水溶液(1.5mL)。反应体系除氧气后再加入Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(26.4mg,0.032mmol)。反应在95℃加热过夜，加入水稀释并用乙酸乙酯萃取、干燥浓缩，硅胶柱纯化得88mg粗品，直接用于下一步反应。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.06(s,1H),8.70(s,2H),6.30(tt,J＝2.0,4.3Hz,1H),4.23(s,2H),3.53(t,J＝5.7Hz,2H),2.42–2.24(m,2H),1.45(s,9H).
步骤二:合成5-(1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)嘧啶(YB137)
YB132(88mg,0.34mmol)粗品溶解于4mL CH2Cl2后加入1mL三氟醋酸。反应室温搅拌过夜。旋干反应溶液，加水并调节pH值至7-8。用乙酸乙酯萃取，干燥、蒸除溶剂得粗品，纯化得到目标化合物YB137粗品(54mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.03(d,J＝3.9Hz,1H),8.84(d,J＝21.0Hz,2H),6.48(t,J＝4.4Hz,1H),3.64(s,2H),2.98(t,J＝5.8Hz,2H),2.35(tt,J＝2.8,5.8Hz,2H).
步骤三:合成N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-(嘧啶-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酰胺(235,YB148)
将终产物03(27mg,0.0927mmol)、YB137(54mg,0.34mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB148(34.4mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.63(s,1H),9.09(s,1H),8.93(s,2H),8.06–7.84(m,2H),7.77(dd,J＝1.3,7.1Hz,1H),6.58(tt,J＝1.9,4.1Hz,1H),5.91(hept,J＝6.7,7.1Hz,1H),4.53(q,J＝2.4Hz,2H),3.86–3.71(m,2H),2.52(dq,J＝3.2,6.0Hz,2H),1.61(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H22N8O[M+H]+＝391.2,实验测得：391.3。
终产物236：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)脲(236,YB150)
将终产物03(74mg,0.229mmol)、3-甲基-1H-吡唑-5-胺(19mg,0.195mmol)和Et3N(56mg,0.554mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB150(76mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.64(s,1H),8.20(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(t,J＝8.0Hz,1H),7.83(d,J＝7.5Hz,1H),6.18(s,1H),5.87(p,J＝6.7Hz,1H),2.36(d,J＝0.0Hz,3H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C15H18N8O[M+H]+＝327.2,实验测得：326.3。
终产物237：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1H-吡唑-5-基)脲(237,YB151)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、1H-吡唑-3-胺(30mg,0.361mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB151(35.6mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.62(s,1H),8.12(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(t,J＝8.0Hz,1H),7.78(d,J＝7.5Hz,1H),7.70(d,J＝2.6Hz,1H),6.36(s,1H),5.79–5.61(m,1H),1.64(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C14H16N8O[M+H]+＝313.2,实验测得：312.1。
终产物238：1-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(238,YB152)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、1,5-二甲基-1H-吡唑-3-胺(31mg,0.278mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB152(54.7mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.36(s,1H),8.21–7.89(m,2H),7.73(d,J＝7.5Hz,1H),6.08(s,1H),5.57(p,J＝6.7Hz,1H),3.69(s,3H),2.28(s,3H),1.63(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H20N8O[M+H]+＝341.2,实验测得：340.3。
终产物239：1-(3-异丙基-1H-吡唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(239,YB154)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、3-异丙基-1H-吡唑-5-胺(38mg,0.376mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB154(46.8mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.36(d,J＝4.4Hz,1H),8.07(d,J＝8.6Hz,1H),7.99(dd,J＝7.5,8.5Hz,1H),7.76(d,J＝7.4Hz,1H),6.17(s,1H),5.64–5.48(m,1H),3.02(dt,J＝6.9,13.8Hz,1H),1.63(d,J＝6.8Hz,6H),1.31(d,J＝7.0Hz,6H).ESI-MS理论计算值C17H22N8O[M+H]+＝355.2,实验测得：354.2。
终产物240：3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-1-甲酰胺(240,YB158)
步骤一:合成(3-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯(YB153)
将3-甲基-1H-吡唑-5-胺(153mg,1.57mmol)溶于干燥的THF，加入二碳酸二叔丁酯(0.4mL)和DMAP(61.4mg,0.5mmol)，室温搅拌过夜，旋干，加水后用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩过正相硅胶柱得产物163mg。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ5.18(s,1H),2.12(s,3H),1.60(s,9H)。
步骤二:合成5-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-1-甲酰胺(YB158)
将终产物03(31mg,0.0927mmol)、(3-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯(56mg,0.28mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB158(3.7mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.28(s,1H),8.06(d,J＝8.5Hz,1H),7.98(dd,J＝7.5,8.5Hz,1H),7.76(d,J＝7.4Hz,1H),6.13(s,1H),5.58(h,J＝6.8Hz,1H),2.32(s,3H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C15H18N8O[M+H]+＝327.2,实验测得：326.9。
终产物241和242：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-3-基)脲(241,YB160-1)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-甲酰胺(242,YB160-2)
将终产物03(50mg,0.15mmol)、3-氨基-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑盐酸盐(50mg,0.29mmol)和Et3N(61mg,0.6mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YB160-1(28mg)，YB160-2(30.8mg)。YB160-1:1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.40(s,1H),8.40–7.61(m,3H),6.03–5.47(m,1H),2.83–2.60(m,2H),2.57–2.34(m,2H),2.06–1.73(m,4H),1.62(d,J＝7.4Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H22N8O[M+H]+＝367.2,实验测得：366.6。YB160-2:1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.23(s,1H),8.25(dd,J＝0.8,8.4Hz,1H),8.02(dd,J＝7.6,8.5Hz,1H),7.83(dd,J＝0.9,7.6Hz,1H),5.66(p,J＝6.7Hz,1H),2.97(t,J＝6.1Hz,2H),2.34(t,J＝5.9Hz,2H),1.80(ddd,J＝5.1,8.5,17.6Hz,4H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H22N8O[M+H]+＝367.2,实验测得：366.6。
终产物243：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)脲(243,YC005)
步骤一:合成3-苯基-1H-吡唑-5-胺(YC001)
将3-氧代-3-苯基丙腈(145mg,1mmol)溶于10mL乙醇，加入水合肼(200mg,4mmol)，回流搅拌过夜，旋干，加水后用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩过正相硅胶柱得产物63.5mg。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.62–7.46(m,2H),7.38–7.22(m,3H),5.86(s,1H)。
步骤二:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(3-苯基-1H-吡唑-5-基)脲(YC005)
将终产物03(30mg,0.0929mmol)、3-苯基-1H-吡唑-5-胺(63.5mg,0.4mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC005(34.1mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.60(s,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.99(t,J＝8.0Hz,1H),7.77(d,J＝7.5Hz,1H),7.70(d,J＝7.5Hz,2H),7.46(t,J＝7.5Hz,2H),7.39(t,J＝7.3Hz,1H),6.69(s,1H),5.68(p,J＝6.7Hz,1H),1.65(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H20N8O[M+H]+＝389.2,实验测得：388.5。
终产物244：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-苯基-1H-吡唑-5-基)脲(244,YC008)
步骤一:合成4-苯基-1H-吡唑-5-胺(YC006)
将3-氧代-2-苯基丙腈(660mg,4.6mmol)溶于20mL乙醇，加入水合肼(910mg,18mmol)，回流搅拌过夜，旋干，加水后用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩过正相硅胶柱得产物36mg。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ7.58(s,1H),7.51–7.43(m,2H),7.36(t,J＝7.7Hz,2H),7.24–7.15(m,1H)。
步骤二:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-苯基-1H-吡唑-5-基)脲(YC008)
将终产物03(24.4mg,0.075mmol)、4-苯基-1H-吡唑-5-胺(36mg,0.226mmol)和Et3N(30mg,0.3mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC008(22mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.33(s,1H),8.02–7.87(m,3H),7.73(dd,J＝1.7,6.6Hz,1H),7.52–7.44(m,2H),7.34(dd,J＝6.8,8.3Hz,2H),7.29–7.21(m,1H),5.56–5.26(m,1H),1.49(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H20N8O[M+H]+＝389.2,实验测得：390.4。
终产物245和246：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(2,4,5,6-四氢环戊[c]吡唑-3基)脲(245,YC033-1)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5,6-二氢环戊二烯并[c]吡唑-1-(4H)-甲酰胺(246,YC033-2)
步骤一:合成2,4,5,6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-3-基胺(YC027)
将2-氧代环戊烷-1-腈(124mg,1.13mmol)溶于乙醇环，加入水合肼(65mg,1.3mmol)和冰醋酸(0.1mL,1.76mmol)，回流搅拌16h，浓缩反应液，用饱和碳酸氢钠稀释，二氯甲烷萃取3次，合并有机相，盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干得粗品(52mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ2.63–2.53(m,2H),2.52–2.37(m,4H)。
步骤二:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(2,4,5,6-四氢环戊[c]吡唑-3基)脲(YC033-1)和3-氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-5,6-二氢环戊二烯并[c]吡唑-2(4H)-甲酰胺(YC033-2)
将终产物03(30mg,0.0927mmol)、2,4,5,6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-3-基胺(52mg,0.42mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC033-1(10.4mg)，YC033-2(8mg)。YC033-1:1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.09(s,1H),8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(t,J＝8.0Hz,1H),7.80–7.72(m,1H),5.51(p,J＝6.8Hz,1H),2.85(t,J＝7.3Hz,2H),2.73(t,J＝7.0Hz,2H),2.59(p,J＝7.5Hz,2H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C17H20N8O[M+H]+＝353.2,实验测得：352.5。YC033-2:1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.34(s,1H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),8.00(t,J＝8.0Hz,1H),7.84(d,J＝7.6Hz,1H),5.69(hept,J＝6.7Hz,1H),3.01–2.93(m,2H),2.63–2.47(m,4H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C17H20N8O[M+H]+＝353.2,实验测得：352.6。
终产物247：1-(5-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基基)吡啶-2-基)脲(247,YC036)
步骤一:合成5-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-硝基吡啶(YC022)
将(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸(100mg,0.71mmol)、5-溴,2-硝基吡啶(290mg,1.436mmol)溶于DME，加入2M碳酸钠水溶液2.8mL，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2﹒CH2Cl2(21mg)，再次抽真空后通入氮气，95℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC022(121mg)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.72(d,J＝2.2Hz,1H),8.36(dd,J＝0.7,8.4Hz,1H),8.06(dd,J＝2.3,8.4Hz,1H),7.26(s,1H),3.90(s,3H),2.32(s,3H)。
步骤二:合成5-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-氨基吡啶(YC030)
将YC022(121mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％pd/C(15mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC030粗品(116mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ7.95(d,J＝2.3Hz,1H),7.48(dd,J＝2.4,8.6Hz,1H),6.64(d,J＝8.6Hz,1H),6.06(d,J＝19.7Hz,1H),3.71(s,3H),2.20(s,3H)。
步骤三:合成1-(5-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基基)吡啶-2-基)脲(YC036)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC030(116mg,0.617mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC036(4.6mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.37(s,1H),8.37(d,J＝2.3Hz,1H),8.20(d,J＝8.4Hz,1H),8.01(t,J＝7.5Hz,1H),7.94(dd,J＝2.4,8.7Hz,1H),7.80(d,J＝7.5Hz,1H),7.60(d,J＝8.7Hz,1H),6.27(s,1H),5.61(p,J＝6.7Hz,1H),3.83(s,3H),2.28(s,3H),1.67(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C21H23N9O[M+H]+＝418.2,实验测得：418.1。
终产物248：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶吡啶-2-基)脲(248,YC045)
步骤一:合成5-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-2-硝基吡啶(YC028)
将4-甲基咪唑(82mg,1mmol)、5-氟,2-硝基吡啶(170mg,1.2mmol)和碳酸钾(300mg,2.2mmol)与5mL DMF混匀，110℃搅拌2小时，加20mL乙酸乙酯稀释，饱和氯化钠洗三次，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC028(99mg)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.72(d,J＝2.7Hz,1H),8.42(d,J＝8.7Hz,1H),8.00(dd,J＝2.7,8.7Hz,1H),7.92(d,J＝1.5Hz,1H),7.19–7.02(m,1H),2.33(d,J＝1.1Hz,3H)。
步骤二:合成5-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-2-氨基吡啶(YC032)
将YC028(99mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(20mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC032粗品(75.4mg)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.11(d,J＝2.7Hz,1H),7.58(d,J＝1.4Hz,1H),7.42(dd,J＝2.7,8.7Hz,1H),6.86(t,J＝1.3Hz,1H),6.56(d,J＝8.7Hz,1H),2.29(d,J＝1.0Hz,3H)。
步骤三:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶吡啶-2-基)脲(YC045)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC032(24mg,0.138mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC045(6.8mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.39(s,1H),9.33(d,J＝1.6Hz,1H),8.60(d,J＝2.7Hz,1H),8.18(d,J＝8.4Hz,1H),8.10(dd,J＝2.8,9.0Hz,1H),8.05–7.92(m,2H),7.85–7.75(m,2H),5.90–5.49(m,1H),2.46(s,3H),1.66(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H21N9O[M+H]+＝404.2,实验测得：405.0。
终产物249：1-(5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶吡啶-2-基)脲(249,YC048)
步骤一:合成2-硝基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶(YC042)
将双(频哪醇合)二硼(1.56g,6.2mmol)、5-溴,2-硝基吡啶(1g,4.9mmol)和乙酸钾(1.44g,14.7mmol)溶于1,4-二氧六环，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2﹒CH2Cl2(200mg)，再次抽真空后通入氮气，90℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC042(1g)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.95(dd,J＝0.8,1.7Hz,1H),8.40(dd,J＝1.8,8.0Hz,1H),8.21(dd,J＝0.8,8.1Hz,1H),1.38(s,12H)。
步骤二:合成5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-2-硝基吡啶(YC041)
将YC042(100mg,0.4mmol)、1-异丙基-4-溴-1H-吡唑151mg,0.8mmol)溶于DME，加入2M碳酸钠水溶液1.6mL，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2-CH2Cl2(16mg)，再次抽真空后通入氮气，95℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC041(47mg)。
步骤三:合成5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-2-氨基吡啶(YC046)
将YC041(47mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(10mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC046粗品(32.6mg)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)：δ8.17(d,J＝2.4Hz,1H),7.65(s,1H),7.55(s,1H),7.51(dd,J＝2.4,8.5Hz,1H),6.50(d,J＝8.4Hz,1H),4.49(hept,J＝6.7Hz,1H),1.51(d,J＝6.7Hz,6H)。
步骤四:合成1-(5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶吡啶-2-基)脲(YC048)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC046(32mg,0.158mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC048(12mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.38(s,1H),8.45(d,J＝2.3Hz,1H),8.30–8.11(m,3H),8.00(t,J＝8.0Hz,1H),7.94–7.86(m,1H),7.83(d,J＝7.5Hz,1H),7.52(d,J＝8.8Hz,1H),5.74(p,J＝6.7Hz,1H),4.58(p,J＝6.7Hz,1H),1.65(d,J＝6.7Hz,6H),1.54(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C22H25N9O[M+H]+＝432.2,实验测得：433.9。
终产物250和251：1-(5-(1H-咪唑-1-基)吡啶-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(250,YC053-7)和3-(1H-咪唑-1-基)-2-亚氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)吡啶-1-(2H)-甲酰胺(251,YC053-8)
步骤一:合成5-(1H-咪唑-1-基)-2-硝基吡啶(YC038)
将咪唑(54mg,0.79mmol)、5-氟,2-硝基吡啶(145mg,1.03mmol)和碳酸钾(240mg,1.65mmol)溶于5mL DMF，110℃搅拌2小时，加20mL乙酸乙酯稀释，饱和氯化钠洗三次，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC038(138.8mg)。
步骤二:合成5-(1H-咪唑-1-基)-2-氨基吡啶(YC047)
将YC038(138.8mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(15mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC047粗品(27.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)：δ8.07(d,J＝2.7Hz,1H),7.95(s,1H),7.61(dd,J＝2.7,8.9Hz,1H),7.40(s,1H),7.13(s,1H),6.68(d,J＝8.9Hz,1H)。
步骤三:合成1-(5-(1H-咪唑-1-基)吡啶-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)尿素(YC053-7)和3-(1H-咪唑-1-基)-2-亚氨基-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)吡啶-1(2H)-甲酰胺(YC053-8)
将终产物03(30mg,0.0929mmol)、YC047(27.2mg,0.17mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC053-7(6.4mg)和YC053-8(3.8mg)。YC053-7:1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.46(t,J＝1.5Hz,1H),9.24(s,1H),8.63(d,J＝2.7Hz,1H),8.19–8.10(m,2H),8.07(t,J＝1.8Hz,1H),8.04–7.96(m,2H),7.84–7.75(m,2H),5.58(p,J＝6.7Hz,1H),1.64(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C19H19N9O[M+H]+＝390.2,实验测得：390.7；YC053-8:1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.70(t,J＝1.5Hz,1H),9.12(s,1H),8.74(d,J＝2.6Hz,1H),8.42–8.28(m,2H),8.11–8.03(m,1H),7.99(dd,J＝7.5,8.5Hz,1H),7.90(d,J＝8.9Hz,1H),7.81–7.64(m,2H),5.56(p,J＝6.7Hz,1H),1.61(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C19H19N9O[M+H]+＝390.2,实验测得：390.8。
终产物252：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶吡啶-2-基)脲(252,YC056)
步骤一:合成5-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-硝基吡啶(YC043)
将YC042(100mg,0.4mmol)、1-甲基-3-溴-1H-吡唑(129mg,0.8mmol)溶于DME，加入2M碳酸钠水溶液1.6mL，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2-CH2Cl2(16mg)，再次抽真空后通入氮气，95℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC043(24mg)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)：δ8.99(d,J＝2.2Hz,1H),8.38(dd,J＝2.2,8.5Hz,1H),8.27(dd,J＝0.6,8.4Hz,1H),7.47(d,J＝2.3Hz,1H),6.69(d,J＝2.3Hz,1H),4.00(s,3H)。
步骤二:合成5-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-氨基吡啶(YC051)
将YC041(24mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(10mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC051粗品(19mg)
步骤三:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶吡啶-2-基)脲(YC056)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC046(19mg,0.109mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC056(8.2mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.44(s,1H),8.80–8.59(m,1H),8.32(dd,J＝2.2,8.8Hz,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),8.03(t,J＝8.0Hz,1H),7.83(d,J＝7.5Hz,1H),7.67(d,J＝2.3Hz,1H),7.48(d,J＝8.9Hz,1H),6.69(d,J＝2.3Hz,1H),5.68(p,J＝6.7Hz,1H),3.96(s,3H),1.69(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H21N9O[M+H]+＝404.2,实验测得：404.6。
终产物253：1-(4-异丙基-1H-吡唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(253,YC058)
步骤一:合成2-甲酰基-3-甲基丁腈(YC049)
将LiHMDS(9.5mL,1N in THF)加入含THF的单口瓶中，冷至-78℃，将异戊腈(800mg,9.6mmol)加入反应瓶，搅拌10分钟后加入甲酸乙酯(741mg,10.12mmol)，-78℃搅拌30分钟，自然升温至室温，搅拌16小时，用1N盐酸调节pH至3左右，收集有机相，水相用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，旋干后正相柱纯化得粗品(277mg)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ9.58(d,J＝1.2Hz,1H),3.40(dd,J＝1.1,4.9Hz,1H),2.53–2.40(m,1H),1.12(d,J＝6.8Hz,6H)。
步骤二:合成4-异丙基-1H-吡唑-5-胺(YC052)
将2-甲酰基-3-甲基丁腈(270mg,2.43mmol)溶于10mL乙醇，加入85％水合肼(286mg,4.86mmol)和冰醋酸(437.4mg,7.29mmol)，回流搅拌过夜，旋干，加水后用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩过正相硅胶柱得产物192mg。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ7.16(s,1H),2.72(hept,J＝6.8Hz,1H),1.18(d,J＝6.9Hz,6H)。
步骤三:合成1-(4-异丙基-1H-吡唑-5-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(YC058)
将终产物03(30mg,0.0929mmol)、4-异丙基-1H-吡唑-5-胺(23mg,0.186mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC058(12.7mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.33(s,1H),8.10(d,J＝8.5Hz,1H),7.99(t,J＝8.0Hz,1H),7.84–7.61(m,2H),5.55(p,J＝6.7Hz,1H),2.88(p,J＝6.8Hz,1H),1.61(d,J＝6.7Hz,6H),1.24(d,J＝6.8Hz,6H).ESI-MS理论计算值C17H22N8O[M+H]+＝355.2,实验测得：355.6。
终产物254：1-([2,3'-联吡啶]-6'-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(254,YC061)
步骤一:合成6'-硝基-2,3'-联吡啶(YC050)
将YC042(100mg,0.4mmol)、2-溴吡啶(126.4mg,0.8mmol)溶于DME，加入2M碳酸钠水溶液1.6mL，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2﹒CH2Cl2(17mg)，再次抽真空后通入氮气，95℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC050(75mg)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)：δ9.26–9.19(m,1H),8.79(dt,J＝1.4,4.8Hz,1H),8.69(dd,J＝2.3,8.5Hz,1H),8.37(dd,J＝0.7,8.4Hz,1H),7.94–7.79(m,2H),7.41(ddd,J＝2.3,4.8,6.3Hz,1H)。
步骤二:合成6'-氨基-2,3'-联吡啶(YC057)
将YC050(75mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(10mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC057粗品(52mg)
步骤三:合成1-([2,3'-联吡啶]-6'-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(YC061)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC057(52mg,0.279mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC061(8.9mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.41(d,J＝2.1Hz,1H),8.87(dd,J＝0.8,2.5Hz,1H),8.76(ddd,J＝0.8,1.7,5.4Hz,1H),8.43(dd,J＝2.5,8.8Hz,1H),8.29(td,J＝1.7,7.9Hz,1H),8.25–8.18(m,1H),8.15(dt,J＝1.0,8.1Hz,1H),8.01(dd,J＝7.6,8.5Hz,1H),7.81(dd,J＝0.8,7.6Hz,1H),7.79–7.59(m,2H),5.67(hept,J＝6.6Hz,1H),1.68(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C21H20N8O[M+H]+＝401.2,实验测得：400.4。
终产物255：1-([3,3'-联吡啶]-6-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(255,YC066)
步骤一:合成6'-硝基-3,3'-联吡啶(YC054)
将YC042(100mg,0.4mmol)、3-溴吡啶(126.4mg,0.8mmol)溶于DME，加入2M碳酸钠水溶液1.6mL，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2-CH2Cl2(17mg)，再次抽真空后通入氮气，95℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC054(68mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.97(dd,J＝2.3,11.7Hz,2H),8.74–8.63(m,1H),8.52(dd,J＝2.2,8.5Hz,1H),8.44(d,J＝8.5Hz,1H),8.28(dt,J＝2.0,8.0Hz,1H),7.63(dd,J＝5.0,8.0Hz,1H)。
步骤二:合成6'-氨基-3,3'-联吡啶(YC059)
将YC054(68mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(10mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC059粗品(59.6mg)
步骤三:合成1-([3,3'-联吡啶]-6-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(YC066)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC059(59.6mg,0.279mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC066(12.1mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.58(s,1H),9.22(d,J＝2.1Hz,1H),8.95–8.80(m,2H),8.71(dd,J＝0.7,2.6Hz,1H),8.32–8.18(m,2H),8.15(dd,J＝5.7,8.2Hz,1H),8.02(td,J＝7.5,8.8Hz,1H),7.86–7.76(m,2H),5.69(hept,J＝6.7Hz,1H),1.69(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C21H20N8O[M+H]+＝401.2,实验测得：400.4。
终产物256：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(嘧啶-5-基)吡啶-2-基)脲(256,YC068)
步骤一:合成5-(6-硝基-吡啶-3-基)嘧啶(YC062)
将YC042(100mg,0.4mmol)、5-溴嘧啶(127mg,0.8mmol)溶于DME，加入2M碳酸钠水溶液1.6mL，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2-CH2Cl2(17mg)，再次抽真空后通入氮气，95℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC062(67.6mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.28(s,1H),9.24(s,2H),9.01(d,J＝2.3Hz,1H),8.57(dd,J＝2.3,8.4Hz,1H),8.47(d,J＝8.4Hz,1H)。
步骤二:合成5-(6-氨基-吡啶-3-基)嘧啶(YC064)
将YC062(67.6mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(10mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC064粗品(54mg)
步骤三:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(嘧啶-5-基)吡啶-2-基)脲(YC068)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC064(54mg,0.314mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC068(2.9mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.37(s,1H),9.14(d,J＝25.1Hz,3H),8.62(d,J＝2.4Hz,1H),8.19(dd,J＝2.5,8.7Hz,2H),8.02(t,J＝8.0Hz,1H),7.80(d,J＝7.6Hz,1H),7.66(d,J＝8.7Hz,1H),5.62(p,J＝6.7Hz,1H),1.68(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H19N9O[M+H]+＝402.2,实验测得：401.3。
终产物257：1-(咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(257,YC072)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、咪唑并[1,2-a]吡啶-3-胺(25mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.248mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC072(27.8mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.39(s,1H),8.71(d,J＝6.8Hz,1H),8.12–7.89(m,5H),7.81(dd,J＝1.4,7.0Hz,1H),7.56(td,J＝1.2,6.9Hz,1H),5.72(hept,J＝6.7Hz,1H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.2,实验测得：362.9。
终产物258：1-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(258,YC074)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、1,3-二甲基-1H-吡唑-4-胺(21mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.248mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC074(27.4mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.33(s,1H),8.10–7.86(m,2H),7.77(s,1H),7.70(dd,J＝1.2,7.3Hz,1H),5.54(hept,J＝6.8Hz,1H),3.81(s,3H),2.17(s,3H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H20N8O[M+H]+＝341.2,实验测得：340.7。
终产物259：1-([3,4'-联吡啶]-6-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(259,YC081)
步骤一:合成6'-硝基-4,3'-联吡啶(YC070)
将YC042(100mg,0.4mmol)、4-溴吡啶盐酸盐(155mg,0.8mmol)溶于DME，加入2M碳酸钠水溶液1.6mL，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2-CH2Cl2(17mg)，再次抽真空后通入氮气，95℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC070(42mg)。
步骤二:合成6'-氨基-4,3'-联吡啶(YC077)
将YC070(42mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(10mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC077粗品(25mg)
步骤三:合成1-([3,4'-联吡啶]-6-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(YC081)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC077(25mg,0.146mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC081(7.8mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.34(s,1H),9.03–8.81(m,3H),8.53–8.33(m,3H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),8.03(dd,J＝7.6,8.5Hz,1H),7.89(d,J＝8.9Hz,1H),7.81(dd,J＝0.8,7.5Hz,1H),5.92–5.41(m,1H),1.69(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C21H20N8O[M+H]+＝401.2,实验测得：401.2。
终产物260：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(吡嗪-2-基)吡啶-2-基)脲(260,YC083)
步骤一:合成2-(6-硝基-吡啶-3-基)吡嗪(YC075)
将YC042(100mg,0.4mmol)、2-溴吡嗪(127mg,0.8mmol)溶于DME，加入2M碳酸钠水溶液1.6mL，抽真空后通入氮气，加入催化剂Pd(dppf)2Cl2-CH2Cl2(17mg)，再次抽真空后通入氮气，95℃回流过夜，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC075(75.8mg)
步骤二:合成2-(6-氨基-吡啶-3-基)吡嗪(YC080)
将YC075(75.8mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(10mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC080粗品(67.1mg)
步骤三:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(吡嗪-2-基)吡啶-2-基)脲(YC083)
将终产物03(30mg,0.0928mmol)、YC080(48mg,0.279mmol)和Et3N(38mg,0.376mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC083(10.2mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.43(s,1H),9.12(d,J＝1.5Hz,1H),8.96(d,J＝2.3Hz,1H),8.77–8.61(m,1H),8.58–8.44(m,2H),8.20(d,J＝8.4Hz,1H),7.99(t,J＝8.0Hz,1H),7.80(d,J＝7.5Hz,1H),7.56(d,J＝8.8Hz,1H),5.66(p,J＝6.7Hz,1H),1.69(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H19N9O[M+H]+＝402.2,实验测得：402.8。
终产物261：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]]吡啶-3-基)脲(261,YC094)
步骤一:合成吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯(YC079)
将1-氨基吡啶-1-碘化物(1.11g,5mmol)、丙炔酸乙酯(624mg,6mmol)和碳酸钾(828mg,6mmol)溶于DMF，室温搅拌3天，加水稀释，乙酸乙酯和石油醚(v/v＝1/1)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC079(610.9mg，产率64％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.52(dt,J＝1.1,7.0Hz,1H),8.40(s,1H),8.16(dt,J＝1.2,8.9Hz,1H),7.40(ddd,J＝1.1,6.8,8.9Hz,1H),6.95(td,J＝1.4,6.9Hz,1H),4.38(q,J＝7.1Hz,2H),1.41(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤二:合成吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸(YC087)
将YC079(610.9mg,3.22mmol)用无水乙醇(10mL)和水(5mL)溶解，加入氢氧化钠(514mg,12.86mmol)，回流搅拌2小时，旋干乙醇，用6N盐酸酸化，过滤得YC087粗品，直接用于下一步。
步骤三:合成苄基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基甲酰胺(YC090)
将YC087(194.4mg,1.2mmol)溶于干燥的THF，加入DIPEA(0.4mL,2.42mmol)和DPPA(0.268mL,1.32mmol)，室温搅拌过夜。加入0.2mL苯甲醇，回流搅拌12小时。旋干反应物，用乙酸乙酯溶解，饱和碳酸氢钠洗2次，无水硫酸钠干燥，正相硅胶柱纯化得79mg粗品。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.32(d,J＝7.1Hz,1H),8.00(s,1H),7.51–7.20(m,5H),7.08–6.97(m,1H),6.87(s,1H),6.68(t,J＝6.9Hz,1H),5.21(s,2H).
步骤四:合成4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]]吡啶-3-胺(YC092)
将YC090(79mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(10mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干得YC092粗品(30.7mg，产率76％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ7.05(s,1H),3.98(t,J＝6.1Hz,2H),2.57(t,J＝6.4Hz,2H),1.95–1.87(m,2H),1.82–1.74(m,2H).
步骤五:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]]吡啶-3-基)脲(YC094)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、YC092(31mg,0.226mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC094(29.8mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.51(s,1H),8.03(d,J＝8.5Hz,1H),7.96(dd,J＝7.4,8.5Hz,1H),7.78–7.66(m,2H),5.64(hept,J＝6.8Hz,1H),4.12(t,J＝6.1Hz,2H),2.74(t,J＝6.4Hz,2H),2.07(td,J＝4.4,7.0,8.2Hz,2H),1.97–1.81(m,2H),1.61(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H22N8O[M+H]+＝367.2,实验测得：367.4。
终产物262：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡嗪-2-基)脲(262,YC096)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、吡嗪-2-胺(18mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC096(4.5mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.18(s,1H),8.98(s,1H),8.30(dd,J＝1.5,2.7Hz,1H),8.26(d,J＝2.7Hz,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),8.00(t,J＝8.0Hz,1H),7.79(d,J＝7.5Hz,1H),5.66–5.41(m,1H),1.64(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C15H16N8O[M+H]+＝325.2,实验测得：324.5。
终产物263：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹啉-2-基)脲(263,YC097)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、2-氨基喹啉(27mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC097(14.5mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.37(s,1H),8.45(d,J＝9.0Hz,1H),8.30(d,J＝8.4Hz,1H),8.02(t,J＝8.0Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.82(t,J＝7.8Hz,1H),7.59(t,J＝7.5Hz,1H),7.39(d,J＝9.0Hz,1H),5.90(p,J＝6.7Hz,1H),1.65(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H19N7O[M+H]+＝374.2,实验测得：373.3。
终产物264：1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(264,YC098)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、1H-苯并[d]咪唑-2-胺(25mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC098(28.5mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.37(s,1H),8.29(d,J＝8.5Hz,1H),8.07(t,J＝8.0Hz,1H),7.92(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(dd,J＝3.2,6.0Hz,2H),7.47(dd,J＝3.2,6.1Hz,2H),5.84(dd,J＝6.9,13.3Hz,1H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.2,实验测得：363.6。
终产物265：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)脲(265,YC102)
步骤一:合成吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺(YC099)
将YC090(73mg,0.273mmol)用10mL乙醇和5mL水溶解，加入KOH(540mg,8.2mmol)，回流搅拌过夜。蒸干乙醇，加水后用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后过正相硅胶柱得10mg粗品。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)：δ8.26(d,J＝7.1Hz,1H),7.63(s,1H),7.38(d,J＝9.0Hz,1H),6.92(dd,J＝6.6,8.9Hz,1H),6.71–6.36(m,1H).
步骤二:合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)脲(YC102)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、YC099(8.2mg,0.06mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC102(22mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.44(s,1H),8.45(dt,J＝1.1,7.1Hz,1H),8.12(s,1H),8.07–7.89(m,2H),7.78–7.65(m,1H),7.58(dt,J＝1.2,8.9Hz,1H),7.21(ddd,J＝1.0,6.7,9.0Hz,1H),6.88(td,J＝1.4,6.9Hz,1H),5.62(hept,J＝6.8Hz,1H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.2,实验测得：363.2。
终产物266：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1H-四唑-5-基)脲(266,YC106)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、1H-四唑-5-胺(15.8mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC106(20.2mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.23(s,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),8.02(t,J＝8.0Hz,1H),7.82(d,J＝7.5Hz,1H),5.57(h,J＝6.7Hz,1H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C12H14N10O[M+H]+＝315.2,实验测得：314.9。
终产物267：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)脲(267,YC107)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、吡唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(25mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC107(32.6mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.01(s,1H),8.46(d,J＝6.9Hz,1H),8.02(d,J＝8.3Hz,1H),7.96(t,J＝7.9Hz,1H),7.71(d,J＝7.3Hz,1H),7.57(d,J＝8.8Hz,1H),7.19(t,J＝7.8Hz,1H),6.85–6.74(m,1H),6.70(s,1H),5.40(p,J＝6.7Hz,1H),1.51(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.2,实验测得：362.6。
终产物268：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹唑啉-2-基)脲(268,YC116)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、2-氨基喹唑啉(26mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC116(0.6mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.51–9.30(m,2H),8.40(d,J＝8.5Hz,1H),8.06(t,J＝7.3Hz,2H),7.98(t,J＝8.0Hz,1H),7.85(dd,J＝8.0,13.5Hz,2H),7.62(t,J＝7.6Hz,1H),5.79(q,J＝6.6Hz,1H),1.72(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C19H18N8O[M+H]+＝375.2,实验测得：375.3。
终产物269：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹喔啉-2-基)脲(269,YC117)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、2-氨基喹喔啉(26mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC117(2.7mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.20(s,1H),8.91(s,1H),8.30(d,J＝8.4Hz,1H),8.08–8.00(m,2H),7.86(t,J＝6.4Hz,2H),7.83–7.76(m,1H),7.69(ddd,J＝1.5,6.8,8.3Hz,1H),5.75(p,J＝6.8Hz,1H),1.68(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C19H18N8O[M+H]+＝375.2,实验测得：375.2。
终产物270：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(异喹啉-3-基)脲(270,YC119)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、3-氨基异喹啉(26mg,0.182mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC119(10.5mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.47(s,1H),9.07(s,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),8.08–7.94(m,3H),7.84(d,J＝8.4Hz,1H),7.81–7.69(m,2H),7.54(ddd,J＝1.1,6.8,8.1Hz,1H),5.70(p,J＝6.7Hz,1H),1.66(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H19N7O[M+H]+＝374.2,实验测得：374.7。
终产物271：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹唑啉-4-基)脲(271,YC120)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、4-氨基喹唑啉(26mg,0.182mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC120(4.1mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.99(s,1H),8.90–8.68(m,2H),8.22(d,J＝8.3Hz,1H),8.12–7.91(m,3H),7.86(d,J＝7.6Hz,1H),7.74(t,J＝7.6Hz,1H),5.46(s,1H),1.61(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C19H18N8O[M+H]+＝375.2,实验测得：375.4。
终产物272：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(异喹啉-1-基)脲(272,YC123)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、1-氨基异喹啉(26mg,0.182mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC123(28.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.23(s,1H),8.48(d,J＝8.6Hz,1H),8.28–8.03(m,5H),8.00–7.78(m,3H),5.63–5.37(m,1H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H19N7O[M+H]+＝374.2,实验测得：374.5。
终产物273：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)尿素(273,YC124)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、2-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(25mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC124(18.8mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.36(s,1H),8.73(s,1H),8.26(dd,J＝0.8,8.4Hz,1H),8.16–8.10(m,1H),7.93(d,J＝4.2Hz,1H),7.87(dd,J＝0.8,7.6Hz,1H),6.79(d,J＝4.2Hz,1H),5.50(p,J＝6.7Hz,1H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C17H17N9O[M+H]+＝364.2,实验测得：363.6。
终产物274：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(7H-嘌呤-6-基)脲(274,YC125)
将终产物03(30mg,0.093mmol)、腺嘌呤(38mg,0.28mmol)和Et3N(38mg,0.37mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC125(5.5mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.46(s,1H),8.67(s,1H),8.55(s,1H),8.30(d,J＝8.4Hz,1H),8.14–7.98(m,1H),7.98–7.77(m,1H),5.64(p,J＝6.8Hz,1H),1.70(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H16N10O[M+H]+＝365.2,实验测得：364.7。
终产物275：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(7H-嘌呤-2-基)脲(275,YC126)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、7H-嘌呤-2-胺(25mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC126(7.9mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.35(s,1H),10.32(s,1H),9.00(s,1H),8.95(s,1H),8.55(s,1H),8.19(d,J＝8.3Hz,1H),8.00(t,J＝8.0Hz,1H),7.80(d,J＝7.5Hz,1H),5.47(p,J＝6.8Hz,1H),1.61(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H16N10O[M+H]+＝365.2,实验测得：365.1。
终产物276：1-([1,2,4]***并[1,5-a]吡嗪-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)-吡啶吡啶-2-基)脲(276,YC127)
将终产物03(30mg,0.093mmol)、[1,2,4]***并[1,5-a]吡嗪-2-胺(38mg,0.28mmol)和Et3N(38mg,0.37mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC127(1.8mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.90(s,1H),10.85(s,1H),9.18(d,J＝1.4Hz,1H),9.01(dd,J＝1.4,4.4Hz,1H),8.98(s,1H),8.30(d,J＝4.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.3Hz,1H),8.02(t,J＝8.0Hz,1H),7.80(d,J＝7.5Hz,1H),5.40(p,J＝6.7Hz,1H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H16N10O[M+H]+＝365.2,实验测得：365.1。
终产物277：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)脲(277,YC128)
将终产物03(20mg,0.062mmol)、3-氨基吡唑并[1,5-a]嘧啶(25mg,0.186mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC128(32.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.53(s,1H),8.81(dd,J＝1.6,7.1Hz,1H),8.50(s,1H),8.43(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.05–7.92(m,2H),7.72(dd,J＝1.7,6.6Hz,1H),6.96(dd,J＝4.0,7.1Hz,1H),5.60(p,J＝6.7Hz,1H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C17H17N9O[M+H]+＝364.2,实验测得：364.1。
终产物278和279：1-(1H-吲唑-3-基)-3-(5-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)脲(278,YC135-1)和3-氨基-N-(5-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(279,YC135-2)
将YC131(45mg,0.139mmol，合成步骤同终产物03)、3-氨基-1H-吲唑(37mg,0.28mmol)和Et3N(38mg,0.38mmol)称入瓶中，加入2mL DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YC135-1(12.9mg)和YC135-2(4.9mg)。YC135-1：1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.37(s,1H),8.98(d,J＝2.4Hz,1H),8.68(t,J＝2.1Hz,1H),8.60(s,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,1H),7.52–7.39(m,2H),7.18–7.11(m,1H),4.71(p,J＝6.7Hz,1H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.2,实验测得：363.8；YC135-2：1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.40(s,1H),9.17(d,J＝2.4Hz,1H),8.78(t,J＝2.2Hz,1H),8.64(d,J＝1.9Hz,1H),8.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(dt,J＝1.0,8.0Hz,1H),7.55(ddd,J＝1.1,7.2,8.3Hz,1H),7.40–7.21(m,1H),4.75(p,J＝6.7Hz,1H),1.62(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H18N8O[M+H]+＝363.2,实验测得：363.7。
终产品280和281：1-(1H-吲唑-3-基)-3-(2-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-4-基)脲(280,ZTB-86-14g)和3-氨基-N-(2-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-4-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(281,ZTB-86-17g)。
将中间体ZTB-83(110.9mg,0.343mmol)，1H-吲唑-3-胺(93.7mg,1.029mmol)和三乙胺(112.8mg,1.11mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-86-14g(22.8mg)和ZTB-86-17g(11.4mg)。ZTB-86-14g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.35(s,1H),8.62(d,J＝5.77Hz,1H),8.41(d,J＝1.82Hz,1H),7.89(d,J＝8.28Hz,1H),7.81(dd,J＝5.77,1.82Hz,1H),7.42-7.50(m,2H),7.16(t,J＝7.40Hz,1H),5.55-5.65(m,1H),1.63(s,3H),1.61(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H19N8O[M+H]+＝363.2；实验测得：363.2；ZTB-86-17g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.27(s,1H),8.61(d,J＝5.50Hz,1H),8.50(s,1H),8.23(d,J＝8.34Hz,1H),7.94(d,J＝5.40Hz,1H),7.79(d,J＝7.94Hz,1H),7.54(t,J＝7.64Hz,1H),7.30(t,J＝7.52Hz,1H),5.54-5.64(m,1H),1.61(s,3H),1.60(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H19N8O[M+H]+＝363.2；实验测得：363.4.
终产品282和283：1-(1H-吲唑-3-基)-3-(4-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(282,ZTB-96-28g)和3-氨-N-(4-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(283,ZTB-96-32g)。
将中间体ZTB-84(156.2mg,0.483mmol)，1H-吲唑-3-胺(193.2mg,1.46mmol)和三乙胺(158.9mg,1.57mmol)加入50mL反应瓶中，加入2mL DMF溶解反应物。60℃下搅拌过夜。反应结束，加入2.0mL水，HPLC纯化，得到目标化合物ZTB-96-28g(21.7mg)和ZTB-96-32g(10.1mg)。ZTB-96-28g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.34(s,1H),8.56(d,J＝5.22Hz,1H),8.12(s,1H),7.91(d,J＝8.09Hz,1H),7.42-7.50(m,3H),7.16(t,J＝7.36Hz,1H),4.72-4.82(m,1H),1.62(s,3H),1.60(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H19N8O[M+H]+＝363.2；实验测得：363.4；ZTB-96-32g：1H NMR(MeOD-d4,400MHz):9.23(s,1H),8.55-8.57(m,2H),8.25(d,J＝8.28Hz,1H),7.82(d,J＝7.92Hz,1H),7.57(t,J＝7.65Hz,1H),7.47(t,J＝5.24Hz,1H),7.32(t,J＝7.49Hz,1H),4.76-4.85(m,1H),1.65(s,3H),1.63(s,3H)。ESI-MS理论计算值C18H19N8O[M+H]+＝363.2；实验测得：363.4.
合成化合物SM6:1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡嗪-2-基)脲
原料SM1和肼在乙醇中回流，可以得到中间体SM2。按照合成中间体02/03的步骤，将SM2和1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺反应可以得到SM3。按照合成中间体02/03的步骤，将SM3与异丙基胺反应，可以得到中间体SM4。按照合成终产物03的步骤，将SM4与氯甲酸苯酯反应，可以得到中间体SM5。按照合成终产物43的步骤，将SM5与1H-吲唑-3-胺反应，可以得到目标化合物SM6。
合成化合物SM18:1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(1-异丙基-3-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)脲
将氰基丙酮和异丙基肼反应在醇溶液中回流，可以得到SM12。溴代SM12可以得到中间体SM13。SM13与SM14进行Suzuki偶联，可以得到中间体SM15。在Pd/C催化下，氢气还原硝基取代中间体SM15得到SM16。SM16与氯甲酸苯酚酯反应可以得到中间体SM17。按照合成终产物43的步骤，SM17与与1H-吲唑-3-胺反应，可以得到目标化合物SM18。
合成化合物SM28:1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(3-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲
将SM21、甲基肼和原甲酸三乙酯反应，可以得到SM22。水解SM22可以得到羧酸SM23。SM23与NBS反应，可以得到中间体SM24。SM24与SM14进行Suzuki偶联，可以得到中间体SM25。在Pd/C催化下，氢气还原硝基取代中间体SM25得到SM26。SM26与氯甲酸苯酚酯反应可以得到中间体SM27。按照合成终产物43的步骤，SM27与与1H-吲唑-3-胺反应，可以得到目标化合物SM28。合成化合物SM6:1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡嗪-2-基)脲
合成化合物SM36:1-(4-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1H-吲唑-3-基)脲
原料SM31和肼在乙醇中回流，可以得到中间体SM32。按照合成中间体02/03的步骤，将SM32和1,1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺反应可以得到SM33。按照合成中间体02/03的步骤，将SM33与异丙基胺反应，可以得到中间体SM34。按照合成终产物03的步骤，将SM34与氯甲酸苯酯反应，可以得到中间体SM35。按照合成终产物43的步骤，将SM35与1H-吲唑-3-胺反应，可以得到目标化合物SM36。
终产物291：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡啶-2-基)脲(YD007)
将终产物03(30mg,0.0929mmol)、2-氨基吡啶(26mg,0.28mmol)和Et3N(38mg,0.37mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD007(22.9mg)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):δ9.48(s,1H),8.31(dd,J＝1.7,6.3Hz,1H),8.27–8.22(m,1H),8.22–8.14(m,1H),8.02(dd,J＝7.6,8.4Hz,1H),7.88(dd,J＝0.8,7.6Hz,1H),7.53(d,J＝8.6Hz,1H),7.42–7.30(m,1H),5.88(p,J＝6.7Hz,1H),1.63(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H18N7O[M+H]+＝324.15,实验测得：324.68。
终产物303和304：1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(3-异丙基-3H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(YD016-1,303)和3-氨基-N-(5-(3-异丙基-3H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(YD016-2,304)
步骤一：合成苄基(6-溴吡啶-2-基)氨基甲酸酯(YC149)
将6-溴-2氨基吡啶(2g,11.5mmol)和碳酸钠(3.7g,34.5mmol)加入反应瓶，用1,4-二氧六环(50mL)溶解，加入Cbz-Cl(3.95g,23.1mmol)，室温搅拌过夜。加100mL水，用乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YC149(2.74g，产率77％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ7.93(d,J＝8.2Hz,1H),7.53(t,J＝8.0Hz,1H),7.41–7.31(m,5H),7.16(dd,J＝0.7,7.7Hz,1H),5.22(s,2H).
步骤二：合成3-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(YC157)
将4-甲基-3-氧代戊酸乙酯(2g,12.66mmol)和原甲酸三乙酯(3.15g,25.32mmol)加入圆底烧瓶，加入6mL醋酐，回流过夜。旋干醋酐，用甲醇溶解，加入甲基肼硫酸盐(3.65g,25.32mmol)，回流6h。冷至室温，真空蒸去甲醇，用乙酸乙酯溶解，有机相用水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干有机相用正相硅胶柱纯化得YC157。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ7.80(s,1H),4.26(q,J＝7.1Hz,2H),3.88(s,3H),3.71(p,J＝7.3Hz,1H),1.41–1.31(m,9H).
步骤三：合成3-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(YC160)
将YC157(1.96g,10mmol)和NaOH(1.6g,40mmol)加入反应瓶，用乙醇(10mL)和水(5mL)溶解，回流过夜。冷至室温，旋干有机溶剂后加水，用2N盐酸调节pH至有固体析出，过滤得YC160粗品1.58g。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ7.77(s,1H),3.89(s,3H),3.72(p,J＝7.2Hz,1H),1.39(d,J＝7.2Hz,6H).
步骤四：合成3-异丙基-4-溴-1-甲基-1H-吡唑(YD003)
将NBS(1.7g,9.4mmol)和NaHCO3(2.4g,28.2mmol)加入含YC160(1.58g,9.4mmol)的反应瓶中，用20mL DMF溶解，室温搅拌过夜。用水稀释反应液，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YD003(1.58g)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.33(s,1H),3.85(s,3H),3.19(hept,J＝7.2Hz,1H),1.36(d,J＝7.1Hz,6H).
步骤五：合成3-异丙基-1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(YD004)
将YD003(1.58g,7.78mmol)和2-异丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.17g,11.67mmol)加入反应瓶，用THF溶解，氮气保护，冷至-78℃，加入1.6M丁基锂(10mL)，搅拌一小时后，升温至-40℃，搅拌2h。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干后用正相硅胶柱纯化得YD004(578mg)。
步骤六：合成N-苄基-6-(3-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(YD008)
将YD004(570mg,2.28mmol)和YC149(1.4g,4.56mmol)称入瓶中，加入1，2-二甲氧基乙烷(20mL)和2M Na2CO3水溶液(9mL)。反应体系除氧气后再加入Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(93mg,0.114mmol)。反应在95℃加热过夜，加入水稀释并用乙酸乙酯萃取、干燥浓缩，硅胶柱纯化得目标化合物398mg。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ7.80(d,J＝8.2Hz,1H),7.66(t,J＝7.9Hz,1H),7.61(s,1H),7.49–7.32(m,5H),7.09(dd,J＝0.9,7.6Hz,1H),5.24(s,2H),3.93(s,3H),3.74(p,J＝7.2Hz,1H),1.35(d,J＝7.2Hz,6H).
步骤七：合成6-(3-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(YD011)
将YD008(398mg)用干燥的THF溶解，抽真空后通入氮气，加入10％Pd/C(40mg)，再次抽真空后通入氢气，室温搅拌过夜，过滤旋干，正相硅胶柱纯化得得YD011(223mg，产率90％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)：δ7.59(s,1H),7.42(t,J＝7.8Hz,1H),6.74(dd,J＝0.8,7.5Hz,1H),6.36(dd,J＝0.8,8.1Hz,1H),3.92(s,3H),3.69(p,J＝7.2Hz,1H),1.36(d,J＝7.2Hz,6H).
步骤八：合成苯基(6-(3-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(YD014)
以YD011为反应原料，参考合成终产物03的方法可以合成YD014。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ7.81(d,J＝8.2Hz,1H),7.69(t,J＝7.9Hz,1H),7.65(s,1H),7.47–7.36(m,2H),7.30–7.18(m,3H),7.14(dd,J＝0.9,7.6Hz,1H),3.95(s,3H),3.77(p,J＝7.2Hz,1H),1.40(d,J＝7.2Hz,6H).
步骤九:合成1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(3-异丙基-3H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(YD016-1)和3-氨基-N-(5-(3-异丙基-3H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(YD016-2)
将YD014(30mg,0.089mmol)、3-氨基-1H吲唑(36mg,0.27mmol)和Et3N(36mg,0.36mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD016-1(8.5mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.05(t,J＝8.1Hz,1H),7.81(d,J＝8.3Hz,1H),7.76(s,1H),7.58–7.39(m,3H),7.32(d,J＝7.7Hz,1H),7.20–7.09(m,1H),3.97(s,3H),3.63(h,J＝7.3Hz,1H),1.39(d,J＝7.2Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H22N7O[M+H]+＝376.18,实验测得：376.61；YD016-2(1.4mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.24(dt,J＝0.9,8.4Hz,1H),8.08–7.98(m,2H),7.82(dt,J＝1.0,8.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.58(ddd,J＝1.1,7.1,8.4Hz,1H),7.38–7.29(m,2H),3.98(s,3H),3.68(p,J＝7.2Hz,1H),1.44(d,J＝7.2Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H22N7O[M+H]+＝376.18,实验测得：376.35。
终产物305和306：1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)脲(YD017-1,305)和3-氨基-N-(5-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-3-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(YD017-2,306)
步骤一：合成3-溴吡唑并[1,5-a]吡啶(YD002)
以YC087为原料，参考YD003的合成方法可以合成YD002。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.43(dt,J＝1.1,7.0Hz,1H),7.93(s,1H),7.52(dt,J＝1.2,8.9Hz,1H),7.20(ddd,J＝1.0,6.7,8.9Hz,1H),6.80(td,J＝1.4,6.9Hz,1H).
步骤二：合成3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(YD005)
以YD002为原料，参考YD004的合成方法可以合成YD005。
步骤三：合成苄基(6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(YD010)
以YD005为原料，参考YD008的合成方法可以合成YD010。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.49(dt,J＝1.1,7.0Hz,1H),8.44(dt,J＝1.2,9.1Hz,1H),8.36(s,1H),7.77(d,J＝8.2Hz,1H),7.70(t,J＝7.9Hz,1H),7.48–7.32(m,6H),7.29–7.23(m,1H),6.84(td,J＝1.4,6.8Hz,1H),5.25(s,2H).
步骤四：合成6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-胺(YD013)
将YD010(480mg,1.4mmol)和KOH(2.76g,42mmol)加入反应瓶，用10mL乙醇和5mL水溶解，回流过夜。旋转蒸发仪旋去乙醇，加水，用乙酸乙酯萃取3次，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干，正相硅胶柱纯化得YD013(263mg,90％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.52–8.42(m,2H),8.34(s,1H),7.46(t,J＝7.8Hz,1H),7.23(ddd,J＝1.0,6.7,9.0Hz,1H),7.03(dd,J＝0.8,7.6Hz,1H),6.81(td,J＝1.3,6.9Hz,1H),6.34(dd,J＝0.7,8.1Hz,1H).
步骤五：合成苯基(6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(YD015)
以YD013为反应原料，参考合成终产物03的方法可以合成YD015。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.57–8.45(m,2H),8.40(s,1H),7.81–7.70(m,2H),7.47–7.37(m,3H),7.35–7.20(m,4H),6.88(td,J＝1.5,6.8Hz,1H).
步骤六：合成1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)脲(YD017-1)和3-氨基-N-(5-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-3-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(YD017-2)
将YD015(30mg,0.089mmol)、3-氨基-1H吲唑(36mg,0.27mmol)和Et3N(36mg,0.36mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD017-1(12.4mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.67(s,1H),10.53–10.13(m,2H),8.79(d,J＝7.0Hz,1H),8.69(s,1H),8.58(d,J＝8.9Hz,1H),8.04(d,J＝8.2Hz,1H),7.79(t,J＝7.9Hz,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.55(d,J＝7.6Hz,1H),7.46(t,J＝8.2Hz,2H),7.38(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(dt,J＝7.2,13.0Hz,2H).ESI-MS理论计算值C20H16N7O[M+H]+＝370.14,实验测得：369.72；YD017-2(2.6mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.63(dt,J＝1.1,7.0Hz,1H),8.59–8.50(m,2H),8.29–8.18(m,1H),7.98–7.88(m,2H),7.81(dt,J＝1.0,8.1Hz,1H),7.64–7.53(m,2H),7.49(ddd,J＝1.1,6.8,9.0Hz,1H),7.31(ddd,J＝0.9,7.2,8.0Hz,1H),7.05(td,J＝1.4,6.9Hz,1H).ESI-MS理论计算值C20H16N7O[M+H]+＝370.14,实验测得：369.69。
终产物307和308：1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)脲(YD021-1,307)和3-氨基-N-(5-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-3-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(YD021-2,308)
步骤一：合成6-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-胺(YD012)
将YD010(480mg,1.39mmol)溶于THF，氮气置换空气2次，加入Pd/C(48mg)，氮气置换空气2次，再次抽真空，氢气置换，插氢气球，室温过夜。过滤得粗品92mg。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)：δ7.84(s,1H),7.39(t,J＝7.8Hz,1H),6.77(dd,J＝0.7,7.6Hz,1H),6.28(dd,J＝0.8,8.1Hz,1H),4.17(t,J＝6.1Hz,2H),3.12(t,J＝6.4Hz,2H),2.03(td,J＝4.6,7.3,8.4Hz,2H),1.93–1.77(m,2H).
步骤二：合成苯基(6-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(YD019)
以YD012为原料，参考终产物03的合成方法，可以合成YD019。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)，δ7.90(s,1H),7.73(d,J＝8.2Hz,1H),7.67(t,J＝7.9Hz,1H),7.56(s,1H),7.46–7.38(m,2H),7.23–7.15(m,3H),4.21(t,J＝6.1Hz,2H),3.18(t,J＝6.4Hz,2H),2.08(ddd,J＝5.0,9.5,12.4Hz,2H),1.94(p,J＝6.2Hz,2H).
步骤三：合成1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)脲(YD021-1)和3-氨基-N-(5-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)吡啶-3-基)-1H-吲唑-1-甲酰胺(YD021-2)
将YD019(30mg,0.089mmol)、3-氨基-1H吲唑(36mg,0.27mmol)和Et3N(36mg,0.36mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD021-1(4mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.02(s,1H),7.93(t,J＝8.0Hz,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,1H),7.46–7.39(m,1H),7.37(d,J＝7.8Hz,1H),7.24(s,1H),7.18–7.10(m,1H),4.19(t,J＝6.1Hz,2H),3.18(t,J＝6.4Hz,2H),2.14–2.03(m,2H),1.97–1.80(m,2H).ESI-MS理论计算值C20H20N7O[M+H]+＝374.17,实验测得：374.21；YD021-2(2.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.24(dt,J＝0.9,8.4Hz,1H),8.07–7.97(m,2H),7.89–7.78(m,2H),7.58(ddd,J＝1.1,7.1,8.3Hz,1H),7.43(dd,J＝0.9,7.8Hz,1H),7.33(ddd,J＝0.9,7.2,8.0Hz,1H),4.21(t,J＝6.1Hz,2H),3.21(t,J＝6.4Hz,2H),2.13(td,J＝4.5,7.0,8.2Hz,2H),2.05–1.88(m,2H).ESI-MS理论计算值C20H20N7O[M+H]+＝374.17,实验测得：374.21。
终产物309：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡嗪吡啶-2-基)脲(YD023)
将YD020(49mg,0.28mmol，合成方法参考YC046的合成方法)、终产物03(30mg,0.0929mmol)和Et3N(38mg,0.37mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD023(7.9mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.47(s,1H),8.94(s,1H),8.50(d,J＝1.5Hz,1H),8.18–8.07(m,2H),8.04–7.93(m,2H),7.78(d,J＝7.5Hz,1H),5.63(p,J＝6.7Hz,1H),3.94(s,3H),1.67(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C19H21N10O[M+H]+＝405.19,实验测得：404.75。
终产物310：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹啉-4-基)脲(YD024)
将4-氨基喹啉(27mg,0.19mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD024(14.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.03–8.96(m,2H),8.92(d,J＝6.8Hz,1H),8.36(d,J＝8.7Hz,1H),8.16–8.10(m,2H),8.07(dd,J＝7.4,8.4Hz,1H),8.02(s,1H),7.87–7.80(m,1H),7.77(d,J＝7.5Hz,1H),5.32(s,1H),1.55(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H20N7O[M+H]+＝374.17,实验测得：374.69。终产物311：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(异喹啉-4-基)脲(YD028)
将4-氨基异喹啉(27mg,0.19mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD028(24.4mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.45(d,J＝24.3Hz,2H),9.11(s,1H),8.49(d,J＝8.2Hz,1H),8.34(d,J＝8.6Hz,1H),8.15(ddd,J＝1.3,7.0,8.5Hz,1H),8.09–7.99(m,2H),7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.71(d,J＝7.5Hz,1H),5.33(p,J＝6.7Hz,1H),1.55(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H20N7O[M+H]+＝374.17,实验测得：374.29。
终产物312：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡啶-3-基)脲(YD030)
将3-氨基吡啶(18mg,0.19mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD030(18.9mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.36(d,J＝2.4Hz,1H),9.15(s,1H),8.57–8.33(m,2H),8.14–8.06(m,1H),8.05–7.93(m,2H),7.78(dd,J＝0.9,7.5Hz,1H),5.60(p,J＝6.7Hz,1H),1.61(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H18N7O[M+H]+＝324.15,实验测得：324.29。
终产物313：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡啶-4-基)脲(YD032)
将4-氨基吡啶(18mg,0.19mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD032(8.4mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.15(s,1H),8.56(d,J＝7.2Hz,2H),8.20–8.09(m,3H),8.02(dd,J＝7.6,8.4Hz,1H),7.84(dd,J＝0.8,7.6Hz,1H),5.68(hept,J＝6.7Hz,1H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C16H18N7O[M+H]+＝324.15,实验测得：324.55。
终产物314：1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)吡啶-2-基)脲(YD036)
步骤一：合成6-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)吡啶-2-胺(YD031)
以YD027为原料，Pd/C和氢气氢化参考YD013的合成方法，可合成YD031(23mg，74％)。
步骤二：合成苯基(6-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(YD035)
以YD031为原料，参考终产物03的合成方法，可合成YD035(20mg,56％)。
步骤三：合成1-(1H-吲唑-3-基)-3-(6-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)吡啶-2-基)脲(YD036)
将YD035(20mg,0.06mmol)、3-氨基-1H吲唑(24mg,0.18mmol)和Et3N(24mg,0.24mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD036(14.5mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.22(dd,J＝1.7,7.0Hz,1H),8.91(s,1H),8.47(s,1H),7.95(t,J＝8.0Hz,2H),7.84(t,J＝7.9Hz,1H),7.48(d,J＝8.4Hz,1H),7.40–7.33(m,1H),7.14(dd,J＝4.1,7.0Hz,2H),7.07(dd,J＝6.8,8.2Hz,1H).ESI-MS理论计算值C19H15N8O[M+H]+＝371.13,实验测得：371.24终产物315：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(5-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)吡嗪-2-基)脲(YD041)
将YD022(58mg,0.28mmol，合成方法参考YC046的合成方法)、终产物03(30mg,0.0929mmol)和Et3N(56mg,0.558mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化，纯化后产物溶于三氟醋酸/二氯甲烷(1mL/3mL)，室温搅拌过夜后，旋干，加入水3mL，甲醇2mL，用反相HPLC纯化得到目标化合物YD041(2.1mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):9.13–9.01(m,1H),8.91(s,1H),8.49(d,J＝1.5Hz,1H),8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(dd,J＝7.5,8.5Hz,1H),7.74(dd,J＝1.0,7.5Hz,1H),6.79–6.55(m,1H),5.48(p,J＝6.7Hz,1H),3.92(d,J＝3.2Hz,2H),3.50(t,J＝6.2Hz,2H),2.89(d,J＝22.6Hz,2H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H24N9O[M+H]+＝406.21,实验测得：406.62。
终产物316：(R)-1-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(异喹啉-1-基)脲(YD043)
步骤一：合成苯基(R)-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)氨基甲酸酯(YD040)
YD040的合成方法参见终产物03的合成方法。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.81(s,1H),8.04–7.89(m,2H),7.83(dd,J＝1.3,7.2Hz,1H),7.54–7.38(m,2H),7.33–7.11(m,3H),5.78(dt,J＝5.4,7.4Hz,1H),3.86–3.74(m,2H),1.57(d,J＝7.0Hz,3H).
步骤二：合成(R)-1-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(异喹啉-1-基)脲(YD043)
将1-氨基异喹啉(45.4mg,0.315mmol)、YD040(35.6mg,0.105mmol)和Et3N(43mg,0.42mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD043(12.4mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):9.12(s,1H),8.42(d,J＝8.5Hz,1H),8.18–8.05(m,4H),7.95(d,J＝10.9Hz,1H),7.90–7.80(m,3H),5.30(s,1H),3.96–3.61(m,2H),1.59(d,J＝7.0Hz,3H).ESI-MS理论计算值C20H20N7O2[M+H]+＝390.16,实验测得：390.06。
终产物317：1-(6-溴-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)尿素(YD044)
将6-溴-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(25mg,0.12mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD044(20.8mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):9.75(s,1H),8.57(s,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,1H),8.03(t,J＝8.0Hz,1H),7.79(d,J＝7.5Hz,1H),7.48(d,J＝9.3Hz,1H),7.29(dd,J＝1.6,9.5Hz,1H),6.76(s,1H),5.68(p,J＝6.7Hz,1H),1.68(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C18H18 79BrN8O[M+H]+＝442.07,实验测得：442.30。
终产物318：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并并[1,5-a]吡啶-2-基)脲(YD054)
步骤一：合成6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(YD050)
YD050的合成方法参考YD008的合成方法(Suzuki偶联)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.31(s,1H),7.83(s,1H),7.74(s,1H),7.28–7.10(m,2H).
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并并[1,5-a]吡啶-2-基)脲(YD054)
将YD050(48.8mg,0.229mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD054(23mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ10.03(s,1H),9.57(s,1H),9.06(s,1H),8.78(s,1H),8.20(s,1H),8.11–7.88(m,3H),7.71(d,J＝7.4Hz,1H),7.59(d,J＝9.1Hz,1H),7.45(d,J＝9.1Hz,1H),6.71(s,1H),5.41(p,J＝6.8Hz,1H),3.87(s,3H),1.52(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C22H23N10O[M+H]+＝443.20,实验测得：443.42。
终产物319：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)异喹啉-1-基)脲(YD055)
步骤一：合成4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)异喹啉-1-胺(YD051)
YD051的合成方法参考YD008的合成方法(Suzuki偶联)，得YD051(38mg,68％)。1HNMR(400MHz,Methanol-d4)：δ8.17(d,J＝8.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.74–7.65(m,2H),7.62(s,1H),7.59–7.50(m,1H),3.97(s,3H).
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)异喹啉-1-基)脲(YD055)
将YD051(38mg,0.17mmol)、终产物03(30mg,0.0929mmol)和Et3N(38mg,0.38mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD055(18.3mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.27(s,1H),8.53(d,J＝8.5Hz,1H),8.32(d,J＝8.4Hz,1H),8.22–8.05(m,4H),8.03(s,1H),7.92(t,J＝7.8Hz,1H),7.88–7.83(m,1H),7.82(s,1H),5.48(s,1H),4.05(s,3H),1.61(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C24H24N9O[M+H]+＝454.21,实验测得：454.61。
终产物320：(R)-1-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)脲(YD057)
将2-氨基吡唑并[1，5-a]吡啶(24mg,0.18mmol)、YD040(30mg,0.088mmol)和Et3N(36mg,0.35mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD057(30.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)：δ9.55(s,1H),8.35(dt,J＝1.1,7.0Hz,1H),8.13–7.89(m,2H),7.76(dd,J＝1.1,7.3Hz,1H),7.49(dt,J＝1.2,9.0Hz,1H),7.18(ddd,J＝1.1,6.8,8.9Hz,1H),6.78(td,J＝1.3,6.9Hz,1H),5.63(dq,J＝6.7,10.7Hz,1H),3.97(dd,J＝3.9,12.0Hz,1H),3.87(dd,J＝5.8,11.9Hz,1H),1.66(d,J＝6.9Hz,3H).ESI-MS理论计算值C18H19N8O2[M+H]+＝379.16,实验测得：378.64。
终产物321：(R)-1-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)脲(YD058)
将2-氨基喹啉(26mg,0.18mmol)、YD040(30mg,0.088mmol)和Et3N(36mg,0.35mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD058(2.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.31(s,1H),8.41(d,J＝8.9Hz,1H),8.28(d,J＝8.4Hz,1H),8.04(dd,J＝7.6,8.5Hz,1H),8.00–7.91(m,2H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.85–7.78(m,1H),7.57(t,J＝7.6Hz,1H),7.35(d,J＝8.9Hz,1H),5.82(dd,J＝6.0,11.0Hz,1H),3.96(dd,J＝3.9,11.9Hz,1H),3.87(dd,J＝5.9,11.9Hz,1H),1.69(d,J＝6.9Hz,3H).ESI-MS理论计算值C20H20N7O2[M+H]+＝390.16,实验测得：389.68。
终产物322：(R)-1-(2-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)嘧啶-4-基)-3-(喹唑啉-2-基)脲(YD059)
将2-氨基喹唑啉(38mg,0.26mmol)、YD040(30mg,0.088mmol)和Et3N(36mg,0.35mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD059(0.6mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.41(s,1H),9.22(s,1H),8.36(d,J＝8.4Hz,1H),8.09–7.94(m,3H),7.91(d,J＝8.5Hz,1H),7.86(dd,J＝0.9,7.6Hz,1H),7.61(ddd,J＝1.2,6.8,8.0Hz,1H),5.74(q,J＝6.4Hz,1H),4.01(dd,J＝4.1,11.8Hz,1H),3.91(dd,J＝6.0,11.8Hz,1H),1.71(d,J＝7.0Hz,3H).ESI-MS理论计算值C19H19N8O2[M+H]+＝391.16,实验测得：391.02。
终产物323：(R)-1-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(喹喔啉-2-基)脲(YD060)
将2-氨基喹喔啉(26mg,0.18mmol)、YD040(30mg,0.088mmol)和Et3N(36mg,0.35mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD060(3.1mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.29(s,1H),10.72(s,1H),9.10(s,1H),8.85(s,1H),8.16(d,J＝8.3Hz,1H),8.08–7.97(m,2H),7.90–7.79(m,3H),7.73–7.65(m,1H),5.53(q,J＝6.2Hz,1H),3.81–3.64(m,2H),1.55(d,J＝6.9Hz,3H).ESI-MS理论计算值C19H19N8O2[M+H]+＝391.16,实验测得：391.76。
终产物324：(R)-1-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1-甲基-1H-吲唑-3-基)脲(YD062)
将1-甲基-3-氨基-1H-吲唑(22mg,0.15mmol)、YD040(25mg,0.074mmol)和Et3N(30mg,0.296mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD062(7.1mg)。ESI-MS理论计算值C19H21N8O2[M+H]+＝393.17,实验测得：392.81。
终产物325：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(丙-1-烯-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)脲(YD063)
步骤一：合成2-氨基-6-(丙-1-烯-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶(YD052)
YD052的合成方法参考YD008的合成方法(Suzuki偶联)，得YD052(22mg，43％)。1HNMR(400MHz,Chloroform-d)：δ8.21(d,J＝1.6Hz,1H),7.26–7.21(m,1H),7.15(d,J＝9.3Hz,1H),5.72(s,1H),5.36(s,1H),5.05(t,J＝1.5Hz,1H),2.11(d,J＝1.3Hz,3H).
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(丙-1-烯-2-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)脲(YD063)
将YD052(22mg,0.127mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD063(3.4mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.22(s,1H),8.37(s,1H),8.08(d,J＝8.5Hz,1H),7.99(t,J＝7.9Hz,1H),7.75(d,J＝7.5Hz,1H),7.56–7.34(m,2H),5.64–5.40(m,2H),5.17(s,1H),2.18(s,3H),1.65(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C21H23N8O[M+H]+＝403.20,实验测得：403.22。
终产物326：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(丙-1-烯-2-基)异喹啉-1-基)脲(YD064)
步骤一：合成4-(丙-1-烯-2-基)异喹啉-1-胺(YD053)
合成方法参考YD008的合成方法(Suzuki偶联)，得YD053(82.1mg,89％)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)：δ8.08(t,J＝9.5Hz,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),7.67–7.54(m,2H),7.51–7.43(m,1H),5.33(t,J＝1.9Hz,1H),4.99(d,J＝2.2Hz,1H),2.10(s,3H).
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(丙-1-烯-2-基)异喹啉-1-基)脲(YD064)
将YD053(24mg,0.13mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD064(29mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.18(s,1H),8.50(d,J＝8.5Hz,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),8.18–8.04(m,3H),7.96–7.80(m,3H),5.74–5.57(m,1H),5.45(s,1H),5.26(s,1H),2.25(s,3H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C23H24N7O[M+H]+＝414.20,实验测得：414.37。
终产物327：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)脲(YD071)
步骤一：合成4-(2-氨基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(YD066)
合成方法参考YD008的合成方法(Suzuki偶联)，得YD066(92mg,71％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d):δ8.11(s,1H),7.17–7.08(m,2H),5.98(s,1H),5.70(s,1H),4.06(p,J＝2.4,2.9Hz,2H),3.61(t,J＝5.7Hz,2H),2.43(s,2H),1.47(s,9H).
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(6-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)脲(YD071)
将YD066(92.4mg,0.29mmol)、终产物03(50mg,0.155mmol)和Et3N(63mg,0.62mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。加水，用乙酸乙酯萃取，有机相水洗，旋干后，粗品溶于二氯甲烷(4mL)，加入三氟醋酸(1mL)，室温搅拌3h，反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD071(46.5mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.46(s,1H),8.34(s,1H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),7.95(dd,J＝7.5,8.5Hz,1H),7.73(d,J＝7.4Hz,1H),7.48–7.42(m,1H),7.37(dd,J＝1.6,9.3Hz,1H),6.22(tt,J＝1.5,3.5Hz,1H),5.61(p,J＝6.7Hz,1H),3.88(q,J＝2.6Hz,2H),3.49(t,J＝6.1Hz,2H),2.79(ddt,J＝2.1,4.6,6.6Hz,2H),1.64(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C23H26N9O[M+H]+＝444.22,实验测得：444.00。
终产物328：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-1-基)脲(YD072)
步骤一：合成4-(1-氨基异喹啉-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(YD068)
YD068合成方法参考YD008的合成方法(Suzuki偶联)，得YD068(134mg,83％)。
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-1-基)脲(YD072)
将YD068(134mg,0.41mmol)、终产物03(50mg,0.15mmol)和Et3N(64mg,0.63mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。加水，用乙酸乙酯萃取，有机相水洗，旋干后，粗品溶于二氯甲烷(4mL)，加入三氟醋酸(1mL)，室温搅拌3h，反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD072(7.5mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.26(s,1H),8.54(d,J＝8.4Hz,1H),8.20(d,J＝8.3Hz,1H),8.11(p,J＝7.5Hz,3H),8.00–7.77(m,3H),6.07(dt,J＝1.9,3.8Hz,1H),5.49(s,1H),3.98(q,J＝2.7Hz,2H),3.60(t,J＝6.0Hz,2H),2.79(q,J＝4.1,4.5Hz,2H),1.61(d,J＝6.6Hz,6H).ESI-MS理论计算值C25H27N8O[M+H]+＝455.23,实验测得：455.07。
终产物329：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-异丙基异喹啉-1-基)脲(YD073)
步骤一：合成4-异丙基异喹啉-1-胺(YD067)
Pd/C氢化YD053，其合成方法参考YD011的合成方法，得YD067(63mg,99％)。
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-异丙基异喹啉-1-基)脲(YD073)
将YD067(54mg,0.186mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD073(10.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)：δ9.21(d,J＝3.7Hz,1H),8.49(d,J＝8.5Hz,1H),8.43(d,J＝8.6Hz,1H),8.20(t,J＝7.8Hz,1H),8.09(d,J＝7.0Hz,2H),7.92(d,J＝8.7Hz,2H),7.84(d,J＝6.9Hz,1H),5.35(d,J＝69.3Hz,1H),3.74(p,J＝6.8Hz,1H),1.59(d,J＝6.7Hz,6H),1.47(dd,J＝2.0,6.8Hz,6H).ESI-MS理论计算值C23H26N7O[M+H]+＝416.22,实验测得：416.03。
终产物330：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-苯基异-1-基)脲(YD074)
步骤一：合成4-苯基异-1-胺(YD069)
合成方法参考YD008的合成方法(Suzuki偶联)，得YD069(65.3mg,59％)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.19–8.12(m,1H),7.71–7.65(m,1H),7.64(s,1H),7.55(ddd,J＝1.4,6.8,8.4Hz,1H),7.48(ddd,J＝1.4,6.9,8.2Hz,1H),7.45–7.38(m,2H),7.34(ddq,J＝1.4,1.9,3.4,6.8Hz,3H).
步骤二：合成1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(4-苯基异-1-基)脲(YD074)
将YD069(65mg,0.295mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD074(20.5mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)：δ9.45(s,1H),8.58(d,J＝8.3Hz,1H),8.24–8.09(m,3H),8.06(d,J＝8.3Hz,1H),8.01(s,1H),7.96(t,J＝7.6Hz,1H),7.90(d,J＝7.2Hz,1H),7.68–7.50(m,5H),5.55(s,1H),1.64(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C26H24N7O[M+H]+＝450.20,实验测得：450.16。
终产物331：1,3-双(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(YD092)
将6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-胺(25mg,0.124mmol)、终产物03(20mg,0.062mmol)和Et3N(25mg,0.25mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD092(5.6mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)：δ9.21(s,2H),8.19(dd,J＝0.8,8.5Hz,2H),8.00(dd,J＝7.6,8.5Hz,2H),7.76(dd,J＝0.8,7.6Hz,2H),5.55(hept,J＝6.8Hz,2H),1.55(d,J＝6.7Hz,12H).ESI-MS理论计算值C21H25N10O[M+H]+＝433.22,实验测得：432.83。
终产物332：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-3-(1-苯基-1H-吲唑-3-基)脲(YD134)
将1-苯基-1H-吲唑-3-氨基(50mg,0.24mmol)、终产物03(30mg,0.093mmol)和Et3N(38mg,0.37mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD134(9.7mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)：δ9.56(s,1H),8.33(d,J＝8.3Hz,1H),8.04(t,J＝8.1Hz,2H),7.83(d,J＝7.4Hz,1H),7.78–7.68(m,3H),7.59(t,J＝7.8Hz,2H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),7.42(t,J＝7.4Hz,1H),7.27(t,J＝7.5Hz,1H),5.53(p,J＝6.8Hz,1H),1.41(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C24H23N8O[M+H]+＝439.20，实验测得：439.78。
终产物334：1-(5-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)脲(YD145)
将YD144(15.5mg,0.0724mmol，合成方法参考YC046的合成方法)、终产物03(20mg,0.0724mmol)和Et3N(22mg,0.217mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YD145(8.1mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.28(s,1H),8.41(dd,J＝0.7,2.3Hz,1H),8.24–8.10(m,2H),8.01(dd,J＝7.5,8.5Hz,1H),7.87–7.76(m,1H),7.66(s,1H),7.51(d,J＝8.8Hz,1H),5.66(h,J＝6.7Hz,1H),3.97(s,3H),1.97(tt,J＝5.4,8.3Hz,1H),1.65(d,J＝6.7Hz,6H),1.20–1.04(m,2H),0.53–0.40(m,2H).ESI-MS理论计算值C23H26N9O[M+H]+＝444.22，实验测得：444.15。
终产物335：1-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1,3-二甲基-3-(吡唑并[1,5-α]吡啶吡啶-2-基)脲(YF037)
将YC107(67.6mg,0.14mmol)溶于2mL DMF，冰水浴降温，加入NaH(60％in oil,23mg,0.56mmol)，搅拌15min后加入MeI(48mg,0.34mmol)，室温搅拌过夜。反应结束后，加水4mL，三氟醋酸酸化，HPLC纯化得YF037(34.2mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.40(s,1H),8.26(dt,J＝1.1,7.0Hz,1H),7.80(dd,J＝7.6,8.3Hz,1H),7.66(dd,J＝0.8,7.6Hz,1H),7.45–7.24(m,2H),7.11(ddd,J＝1.1,6.8,9.0Hz,1H),6.74(td,J＝1.4,6.9Hz,1H),5.52(hept,J＝6.7Hz,1H),3.41(s,3H),3.37(s,3H),1.50(d,J＝6.8Hz,6H).ESI-MS理论计算值C20H23N8O[M+H]+＝391.20，实验测得：389.86。
终产物336：3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基-1-(喹啉-2-基)脲(YF042)
将2-(甲基氨基)喹啉(44mg,0.28mmol)、终产物03(30mg,0.0929mmol)和Et3N(38mg,0.37mmol)称入瓶中，加入DMF溶解反应试剂。反应体系在50℃加热过夜。反应粗品直接用反相HPLC纯化得到目标化合物YF042(8.1mg)。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.27(s,1H),8.27(d,J＝8.9Hz,2H),7.90(t,J＝8.0Hz,1H),7.86–7.70(m,3H),7.70–7.62(m,1H),7.47(t,J＝7.5Hz,1H),7.40(d,J＝9.0Hz,1H),5.77(p,J＝6.8Hz,1H),3.49(s,3H),1.53(d,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS理论计算值C21H22N7O[M+H]+＝388.18，实验测得：388.80。
选用相应的原料，可以合成下述各个化合物：
表1
实验实施例2：ASK1激酶活性测试
筛选方法：细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)活性筛选
仪器：酶标仪EnvisionTM(PerkinElmer,USA)。
材料：人源重组ASK1，购自Carna Bioscience公司，融合GST的ASK1蛋白片断(aa654-971)；
ASK1活性检测试剂盒
原理：本方法采用特异性的生物素标记的多肽S3作为底物，ASK1在ATP的参与下，启动反应，能够催化多肽底物S3的磷酸化修饰。Eu标记的S3特异性磷酸化抗体就能够与底物通过抗原抗体反应而结合在一起，同时链霉亲和素标记的受体通过链霉亲和素与生物素的特异性相互作用而结合在一起。从而使得Eu标记的供体能够与链霉亲和素标记的受体相互作用。在荧光共振能量转移中，当由于生物分子相互作用导致两个荧光基团接近时，在激发时被穴状化合物捕获的部分能量将被释放，发射波长为620nm；另一部分能量转移到受体(acceptor)上，发射波长665nm。665nm的发射光仅由供体(donor)引起的FRET产生。所以，当生物分子相互作用时，有两个激发光620nm和665nm；当不存在相互作用时，只有620nm一个激发光。通过检测665nm和620nm两个发射波长的荧光信号比值能反应ASK1磷酸化活性。同时设置空白对照来判定酶活性的强弱。实验采用GS-4997作为阳性抑制剂。
样品处理：样品用DMSO溶解，低温保存，DMSO在最终体系中的浓度控制在不影响检测活性的范围之内。
ASK1和底物用HTRF激酶缓冲溶液(1X Kinase buffer,5mM MgCl2,1mM DTT)稀释。将4μL酶、4μL底物和2μL不同浓度的待测化合物分别加入384反应板中(ProxiPlateTM-384Plus,PerkinElmer)，具体反应体系为2％DMSO，3ng/μL ASK1，1μM STK3，40μM ATP。室温孵育1个小时后，加入抗体进行检测。同时设以DMSO替代待测化合物的溶剂对照组、GS-4997阳性对照组和空白对照组，每个样品每个浓度设3个复孔。初筛选择单一浓度条件下，例如10μM，对样品的活性进行测试。对于在一定条件下表现出活性的样品，例如抑制率％大于50，测试活性剂量依赖关系，即IC50值，通过样品活性对样品浓度进行非线性拟和得到，计算所用软件为Graphpad Prism 5，拟合所使用的模型为sigmoidal dose-response(varibleslope)，对于大多数抑制剂筛选模型，将拟合曲线底部和顶部设定为0和100。
表2
(表格中，*表示IC50为50-500nM；**表示IC50为501-2000nM；***表示IC50＞2001nM；****表示<50nM)
其中GS4997为Gilead公司的临床化合物，其对于ASK1激酶的抑制活性非常高，具体数值如上表中所示。
YD140为PCT专利WO2018157857报道了实施例20的化合物，发明人合成了此化合物并命名YD140。通过活性测试，YD140对ASK1激酶抑制活性的IC50＝2585nM，活性在μM区间。与之对应的，本申请部分化合物的ASK1激酶抑制活性的IC50<50nM,活性有>50倍的提高。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。