阅读说明：本技术 一种液体发酵的生物叶面肥及其制备方法 (liquid fermented biological foliar fertilizer and preparation method thereof ) 是由 赵学通 王靓贤 朱永立 李奇 张琪 王斌 李绍董 于 2019-09-29 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种液体发酵的生物叶面肥及其制备方法,它包括以下重量份的组分：酵母发酵粉渣1000-2000份、淀粉500-1000份、玉米面500-1000份、米糠600-1000份、硅藻土50-200份,芽孢杆菌发酵液10-20份,微量元素溶液5-20份,20％黄腐酸钾溶液1-20份,0.1％海藻提取物溶液10-20份,50％明胶溶液100-200份；本发明采用液体发酵技术,将芽孢杆菌发酵液与多种有机成分混匀后进行发酵,其中添加无机营养成分,最终形成一种营养全面的微生物肥料。(The invention discloses liquid fermentation biological foliar fertilizer and a preparation method thereof, wherein the biological foliar fertilizer comprises the following components, by weight, 1000 parts of yeast fermentation powder slag 2000-portions, 500 parts of starch 1000-portions, 500 parts of corn flour 1000-portions, 600 parts of rice bran 1000-portions, 50-200 parts of diatomite, 10-20 parts of bacillus fermentation liquid, 5-20 parts of trace element solution, 1-20 parts of 20% potassium fulvate solution, 10-20 parts of 0.1% seaweed extract solution and 200 parts of 50% gelatin solution 100-portions.)

一种液体发酵的生物叶面肥及其制备方法

技术领域

本发明涉及肥料领域，尤其涉及一种液体发酵的生物叶面肥及其制备方法。

背景技术

植物吸收营养元素的途径主要分为根部吸收和叶面吸收，通过除根部外的营养器官吸收养分的营养方式称为植物的根外营养。而向除根系以外的营养体表面施肥的措施叫根外追肥，也称为叶面施肥。用于叶面施肥的肥料则称为叶面肥料。

由于叶面肥料施于植物的叶表面，由植物叶片直接吸收，不需要通过土壤和根系，减少了营养成分的损耗，因此具有肥效利用率较高、养分吸收快、针对性强、施用方法简单易行等特点，对于处于成熟期，根系功能开始衰退的植株，还能弥补因根系衰退所带来的的影响。由于叶面肥料具有多个优点，因此被广泛应用于农业中。经过多年的发展，目前与叶面肥料相关的产品已有数百种，已由最初品种单一，成分多为无机营养元素变得更为多元。同时叶面肥料的应用也取得了很大进展，增产效果也越来越明显。

但是现有的叶面肥普遍使用起来，营养不够全面，有机质欠缺，不能够有效的防止病害。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足而提供一种液体发酵的生物叶面肥及其制备方法，该方法采用液体发酵技术，将芽孢杆菌发酵液与多种有机成分混匀后进行发酵，其中添加无机营养成分，最终形成一种营养全面的微生物肥料。

为达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现。

一种液体发酵的生物叶面肥，其特征在于：它包括以下重量份的组分：酵母发酵粉渣1000-2000份、淀粉500-1000份、玉米面500-1000份、米糠600-1000份、硅藻土50-200份，芽孢杆菌发酵液10-20份，微量元素溶液5-20份，20％黄腐酸钾溶液1-20份,0.1％海藻提取物溶液10-20份，50％明胶溶液100-200份；

所述芽孢杆菌发酵液包括甲基营养型芽孢杆菌，保藏号CGMCC NO.18268；甲基营养型芽孢杆菌，保藏号CGMCC NO.18269；解淀粉芽孢杆菌，保藏号CGMCC NO.18263。

一种液体发酵的生物叶面肥的制备方法，它包括以下步骤：

步骤1，将甲基营养型芽孢杆菌，保藏号CGMCC NO.18268；甲基营养型芽孢杆菌，保藏号CGMCC NO.18269；解淀粉芽孢杆菌保藏号CGMCC NO.18263三种功能株系在无菌条件下分别接种于液体发酵培养基中，于25—37℃条件下培养24—36h活化，然后按10—20Wt％的接菌比例再次接种于另一液体发酵培养基中，于25—37℃条件下扩培24—36h；

步骤2，分别制得甲基营养型芽孢杆菌菌液、甲基营养型芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液；

步骤3，将步骤,2中制得的菌液按体积比1—5:1—5:1—5的比例混匀后，制得芽孢杆菌发酵液；

步骤4，将10—20份步骤3中制得的芽孢杆菌发酵液加入营养源中，添加适量水至淹没原料10cm，通无菌空气搅拌发酵，于25—37℃条件下发酵10—20天；

步骤5，取步骤4完成的产物，经400目筛网，过滤残渣后获取的滤液，即为原液A；

步骤6,将20％黄腐酸钾溶液、微量元素溶液、0.1％海藻提取物溶液、50％明胶溶液按上述比例混匀，即为原液B；

步骤7，将步骤,5制得的原液A与步骤6制得的原液B混匀后，即得液体发酵的微生物叶面肥料。

进一步的，所述步骤1中的液体发酵培养基包含一下重量份的组分：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L。

进一步的，所述步骤4中的营养源包含以下重量份的组分：酵母发酵粉渣1000-2000份、淀粉500-1000份、玉米面500-1000份、米糠600-1000份、硅藻土50-200份。

进一步的，所述步骤6中的微量元素溶液包含以下重量百分比的成分：糖醇钙0.5-1％、糖醇硼0.1-1％、糖醇钼0.04-0.5％、氨基酸螯合铁0.1-1％、氨基酸螯合锌0.5-3％、氨基酸螯合镁0.5-1.5％、柠檬酸螯合铜0.04-0.5％、柠檬酸螯合锰0.5-2％，其余为水。

进一步的，所述步骤6中50％明胶溶液制备方法为按照重量比称取相应的明胶，置于40-60℃温水中搅拌溶解后备用。

甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)，保藏编号为CGMCCNO.18268，保藏日期：2019年7月22日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，保藏编号为CGMCC NO.18263，保藏日期：2019年7月22日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；

甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)，保藏编号为CGMCCNO.18269,保藏日期：2019年7月22日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

本发明有益效果：

1、与现有技术相比，本发明采用液体发酵方式，工序简单；

2、本发明添加了多种微量元素及植物所需养分，营养全面；

3、本发明添加的微量元素均采用螯合元素，易于作物吸收，在施用过程中可降低由于养分流失对环境的影响，并且能减少施用量，降低成本。

3、本发明添加功能芽孢杆菌菌群，具有增强抗逆性，防治白粉病的功效；

4、本发明采用的原料中含有工农业废弃物，充分利用了工农业的废弃物，有利于可持续发展。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不局限于说明书上的内容。

一种液体发酵的微生物叶面肥，其特征在于由下列重量份的原料组成：

酵母发酵粉渣1000-2000份、淀粉500-1000份、玉米面500-1000份、米糠600-1000份、硅藻土50-200份，芽孢杆菌发酵液(甲基营养型芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌)10-20份，微量元素溶液5-20份，20％(质量浓度)黄腐酸钾溶液1-20份,0.1％(质量浓度)海藻提取物溶液10-20份，50％(质量浓度)明胶溶液100-200份。

上述微生物叶面肥料制备方法，包括如下步骤：

(1)将甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)CGMCC NO.18268、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC NO.18269、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)CGMCC NO.18263功能株系在无菌条件下分别接种于液体发酵培养基中，于25-37℃条件下培养24-36h活化，然后按10-20Wt％的接菌比例再次接种于液体发酵培养基中，于25-37℃条件下扩培24-36h；

(2)分别制得甲基营养型芽孢杆菌菌液、甲基营养型芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液；

(3)将步骤(2)中制得的菌液按体积比1～5:1～5:1～5的比例混匀后，制得芽孢杆菌发酵液；

(4)将10-20份步骤(3)制得的芽孢杆菌发酵液加入营养源中，添加适量水至淹没原料10cm，通无菌空气搅拌发酵，于25-37℃条件下发酵10-20天；

(5)步骤(4)完成的产物，经400目筛网，过滤残渣后获取的滤液，即为原液1；

(6)将20％黄腐酸钾溶液、微量元素溶液、0.1％海藻提取物溶液、50％明胶溶液按上述比例混匀，即为原液2；

(7)将步骤(5)制得的原液1与步骤6制得的原液2混匀后，即得液体发酵的微生物叶面肥料。

上述步骤(1)中液体发酵培养基配制方法如下：

蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L。

上述步骤(4)中营养源成分如下：

酵母发酵粉渣1000-2000份、淀粉500-1000份、玉米面500-1000份、米糠600-1000份、硅藻土50-200份。

上述步骤(6)中微量元素溶液成分如下：

糖醇钙0.5-1％、糖醇硼0.1-1％、糖醇钼0.04-0.5％、氨基酸螯合铁0.1-1％、氨基酸螯合锌0.5-3％、氨基酸螯合镁0.5-1.5％、柠檬酸螯合铜0.04-0.5％、柠檬酸螯合锰0.5-2％。

上述步骤(6)中50％明胶溶液制备方式如下：

按照重量比称取相应的明胶，置于40-60℃温水中搅拌溶解后备用。

具体实施例1

一种生物叶面肥，由下列重量份(kg)的原料制成：酵母发酵粉渣1000份、淀粉500份、玉米面500份、米糠600份、硅藻土50份，芽孢杆菌发酵液(甲基营养型芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌)10份，微量元素溶液20份，20％黄腐酸钾溶液1份，0.1％海藻提取物溶液10份，50％明胶溶液100份。

所述生物叶面肥的具体制备步骤如下：

(1)将甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)CGMCC NO.18268、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC NO.18269、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)CGMCC NO.18263功能株系在无菌条件下分别接种于液体发酵培养基中，于37℃条件下培养36h活化，然后按10Wt％的接菌比例再次接种于液体发酵培养基中，于37℃条件下扩培36h；

(2)分别制得甲基营养型芽孢杆菌菌液、甲基营养型芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液；

(3)将步骤(2)中制得的菌液按体积比3:4:3的比例混匀后，制得芽孢杆菌发酵液；

(4)将15份步骤(3)制得的芽孢杆菌发酵液加入营养源中，添加适量水至淹没原料10cm，通无菌空气搅拌发酵，于37℃条件下发酵15天；

(5)步骤(4)完成的产物，经400目筛网，过滤残渣后获取的滤液，即为原液A；

(6)将20％黄腐酸钾溶液、微量元素溶液、0.1％海藻提取物溶液、50％明胶溶液按上述比例混匀，即为原液B；

(7)将步骤(5)制得的原液A与步骤6制得的原液B混匀后，即得液体发酵的微生物叶面肥料。

上述液体发酵培养基配制方法如下：

蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L

上述营养源成分如下：

酵母发酵粉渣1000份、淀粉500份、玉米面500份、米糠600份、硅藻土50份。

上述微量元素溶液成分如下:

糖醇钙0.5％、糖醇硼0.1％、糖醇钼0.5％、氨基酸螯合铁1％、氨基酸螯合锌3％、氨基酸螯合镁0.5％、柠檬酸螯合铜1.5％、柠檬酸螯合锰0.5％。

上述50％明胶溶液制备方式如下：

按照重量比称取相应的明胶，置于40℃温水中搅拌溶解后备用。

具体实施例2

一种生物叶面肥，由下列重量份(kg)的原料制成：酵母发酵粉渣2000份、淀粉1000份、玉米面1000份、米糠1000份、硅藻土200份，芽孢杆菌发酵液(甲基营养型芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌)20份，微量元素溶液5份，20％黄腐酸钾溶液20份，0.1％海藻提取物溶液20份，50％明胶溶液200份。

所述生物叶面肥的具体制备步骤如下：

(1)将甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)CGMCC NO.18268、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC NO.18269、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)CGMCCNO.18263功能株系在无菌条件下分别接种于液体发酵培养基中，于37℃条件下培养36h活化，然后按10Wt％的接菌比例再次接种于液体发酵培养基中，于37℃条件下扩培36h；

(2)分别制得含甲基营养型芽孢杆菌菌液、枯草芽孢菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液；

(3)将步骤(2)中制得的菌液按体积比4:3:3的比例混匀后，制得芽孢杆菌发酵液；

(4)将20份步骤(3)制得的芽孢杆菌发酵液加入营养源中，添加适量水至淹没原材料10cm，通无菌空气搅拌发酵，于37℃条件下发酵15天；

(5)步骤(4)完成的产物，经400目筛网，过滤残渣后获取的滤液，即为原液A；

(6)将20％黄腐酸钾溶液、微量元素溶液、0.1％海藻提取物溶液、50％明胶溶液按上述比例混匀，即为原液B；

(7)将步骤(5)制得的原液A与步骤6制得的原液B混匀后，即得液体发酵的微生物叶面肥料。

上述液体发酵培养基配制方法如下：

蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L

上述营养源成分如下：

酵母发酵粉渣2000份、淀粉1000份、玉米面1000份、米糠1000份、硅藻土200份。

上述微量元素溶液成分如下:

糖醇钙1％、糖醇硼1％、糖醇钼0.04％、氨基酸螯合铁0.1％、氨基酸螯合锌0.5％、氨基酸螯合镁1.5％、柠檬酸螯合铜0.04％、柠檬酸螯合锰2％。

上述50％明胶溶液制备方式如下：

按照重量比称取相应的明胶，置于60℃中搅拌溶解后备用。

具体实施例3

一种生物叶面肥，由下列重量份(kg)的原料制成：酵母发酵粉渣1500份、淀粉750份、玉米面750份、米糠800份、硅藻土125份，芽孢杆菌发酵液(甲基营养型芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌)15份，微量元素溶液12份，20％黄腐酸钾溶液11份，0.1％海藻提取物溶液15份，50％明胶溶液150份。

所述生物叶面肥的具体制备步骤如下：

(1)将甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)CGMCC NO.18268、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC NO.18269、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)CGMCC NO.18263功能株系在无菌条件下分别接种于液体发酵培养基中，于37℃条件下培养36h活化，然后按10Wt％的接菌比例再次接种于液体发酵培养基中，于37℃条件下扩培36h；

(2)分别制得含甲基营养型芽孢杆菌菌液、枯草芽孢菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液；

(3)将步骤(2)中制得的菌液按体积比2:1:1的比例混匀后，制得芽孢杆菌发酵液；

(4)将20份步骤(3)制得的芽孢杆菌发酵液加入营养源中，添加适量水至淹没原材料10cm，通无菌空气搅拌发酵，于37℃条件下发酵15天；

(5)步骤(4)完成的产物，经400目筛网，过滤残渣后获取的滤液，即为原液1；

(6)将20％黄腐酸钾溶液、微量元素溶液、0.1％海藻提取物溶液、50％明胶溶液按上述比例混匀，即为原液2；

(7)将步骤(5)制得的原液1与步骤6制得的原液2混匀后，即得液体发酵的微生物叶面肥料。

上述液体发酵培养基配制方法如下：

蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L

上述营养源成分如下：

酵母发酵粉渣1500份、淀粉750份、玉米面750份、米糠800份、硅藻土125份。

上述微量元素溶液成分如下：

所述的微量元素溶液成分为：糖醇钙0.7％、糖醇硼0.6％、糖醇钼0.3％、氨基酸螯合铁0.5％、氨基酸螯合锌1.2％、氨基酸螯合镁1％、柠檬酸螯合铜0.25％、柠檬酸螯合锰1.3％。

上述50％明胶溶液制备方式如下：

按照重量比称取相应的明胶，置于50℃温水中搅拌溶解后备用。

实施例田间应用效果

在相同的环境下，采用相同的种植管理方法在大棚内种植结球生菜盆栽120株，随机分为4组，每组10株。分别编号为试验组1、试验组2、试验组3、对照组，其中试验组1、2、3分别采用实施例1-3的生物叶面肥喷施于植物表面，而对照组则喷施普通的水，每个试验均重复3次。具体喷施方式为移栽后每7天喷施一次，施用量为生物叶面肥兑水稀释200-300倍喷施于植物叶片表面。结球后期采集各组农艺性状进行对比分析，具体结果如表1所示：

表1各组结球生菜的农艺性状调查结果

	叶片数	地上部鲜重(g)	地下部鲜重(g)
				试验组1	9.4	80-100(86.3)	8.5-10(9.2)
试验组2	9.8	80-100(98.2)	8.5-10(10.6)
				试验组3	10.1	80-100(95.6)	8.5-10(9.8)
对照组	9.2	60-70(64.7)	8(8.4)

由上表1可知，本发明生物叶面肥应用于结球生菜种植，对提高生菜产量有显著效果。

显然，本发明的上述实施方式仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。