阅读说明：本技术 一种新型蛋白质交联剂及其制备方法 (Novel protein cross-linking agent and preparation method thereof ) 是由 聂承斌 李宏林 陆雪根 于 2019-07-25 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种新型蛋白质交联剂的制备方法,包括以下步骤；(a)将式(I)Sulfo-NHS加入第一反应溶剂中,与式(II)3-(2-吡啶二硫代)丙酸在缩合剂和催化剂作用下发生缩合反应,得到式(III)Sulfo-SPDP。本发明以为Sulfo-NHS和3-(2-吡啶二硫代)丙酸为原料,经过缩合反应得到化合物Sulfo-SPDP,合成路线简短,收率可达60％,合成方法具有操作简便、条件易控的特点,材料来源广泛,生产效率高,具有显著的生产优势。(the invention discloses a preparation method of a novel protein cross-linking agent, which comprises the following steps; (a) adding Sulfo-NHS shown in the formula (I) into a first reaction solvent, and carrying out condensation reaction with 3- (2-pyridine dithio) propionic acid shown in the formula (II) under the action of a condensing agent and a catalyst to obtain Sulfo-SPDP shown in the formula (III). The invention takes Sulfo-NHS and 3- (2-pyridine dithio) propionic acid as raw materials, and the compound Sulfo-SPDP is obtained through condensation reaction, the synthetic route is short, the yield can reach 60 percent, the synthetic method has the characteristics of simple and convenient operation, easily controlled conditions, wide material source, high production efficiency and obvious production advantages.)

一种新型蛋白质交联剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及化合物制备技术领域，具体为一种新型蛋白质交联剂及其制备方法。

背景技术

N-羟基琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫)-丙酸酯(SPDP)(IV)是一种异型双功能蛋白质交联剂，其结构中的2-吡啶二硫基团可以与脂肪硫醇反应，还可以与蛋白结构中的巯基发生交换反应，从而实现与蛋白质的交联，另一端的活化酯组分可以与化学药物中氨基等基团发生化学反应，最终获得蛋白与化学药的桥接偶联，使药物具备靶向作用，是抗体偶联(ADC)药物的关键试剂。

由于蛋白质参与的反应一般在水或极性溶剂中进行，水溶性的交联剂能更好的参与反应，从而实现蛋白质和化学药的桥接偶联，因此，研制具有水溶性的蛋白质交联剂具有广泛的应用前景。其中，Sulfo-SPDP(III)是一种具有良好水溶性的蛋白质交联剂，本发明提供了一条水溶***联剂Sulfo-SPDP的合成方法，相关结构式如下所示。

发明内容

本发明的目的在于提供一种合成新型蛋白质交联剂的简便、有效的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种新型蛋白质交联剂，其结构如结构式(III)所示：

一种新型蛋白质交联剂的制备方法，包括以下步骤；

(a)将式(I)Sulfo-NHS加入第一反应溶剂中，与式(II)3-(2-吡啶二硫代)丙酸在缩合剂和催化剂作用下发生缩合反应，得到式(III)Sulfo-SPDP，反应过程如路线(1)所示：

优选的，步骤(a)中，所述Sulfo-NHS、3-(2-吡啶二硫代)丙酸、缩合剂与催化剂的摩尔量之比为1:1～1.5:1～2:0.1～1，摩尔量之比优选为1:1.1:1.2:0.1。

优选的，步骤(a)中，所述缩合剂为EDCI、DCC、DIC的任意一种或者多种，缩合剂优选为DIC。

优选的，步骤(a)中，所述催化剂为四丁基氯化铵、苄基三乙基氯化铵、四丁基溴化铵的任意一种或者多种，催化剂优选为苄基三乙基氯化铵。

优选的，步骤(a)中，所述缩合反应温度为0-25℃，所述缩合反应的时间为10-24小时，反应温度优选为25℃，反应时间为17小时。

优选的，步骤(a)中，所述第一反应溶剂为：四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺的任意一种或者多种，第一反应溶剂优选为N,N-二甲基甲酰胺。

优选的，步骤(a)中，所述缩合反应完成后，还可以包括以下步骤：蒸干溶剂，打浆纯化，且打浆使用的溶剂包括乙酸乙酯，丙酮，甲醇的任意一种或者多种。

本发明提出一种新型蛋白质交联剂及其制备方法，本发明的有益效果是：

1、本发明以为Sulfo-NHS和3-(2-吡啶二硫代)丙酸为原料，经过缩合反应得到化合物Sulfo-SPDP，合成路线简短，收率可达60％；

2、本发明的合成方法具有操作简便、条件易控的特点，材料来源广泛，生产效率高，具有显著的生产优势。

具体实施方式

结合以下具体实施例，对本发明作进一步的详细说明。实施本发明的过程、条件、实验方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本发明没有特别限制内容。

实施例1

在单口瓶中将0.46g Sulfo-NHS和0.5g3-(2-吡啶二硫代)丙酸溶于7mLN,N-二甲基甲酰胺中，搅拌片刻，加入0.35g DIC，室温反应24小时，TLC检测原料反应完全，蒸干N,N-二甲基甲酰胺，用乙酸乙酯打浆一次，丙酮打浆两次，得式(III)Sulfo-SPDP 0.42g，收率为48％；

1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.51-8.49(m,1H),7.68-7.64(m,2H),7.15-7.12(m,1H),4.30-4.27(m,1H),3.33-3.25(m,2H),3.18–3.14(m,2H),3.10–3.07(m,2H)。

实施例2

在单口瓶中将0.46g Sulfo-NHS、0.5g3-(2-吡啶二硫代)丙酸和0.05g苄基三乙基氯化铵溶于7mL N,N-二甲基甲酰胺中，搅拌片刻，加入0.35g DIC，室温反应17小时，TLC检测原料反应完全，蒸干N,N-二甲基甲酰胺，用乙酸乙酯打浆一次，丙酮打浆两次，得式(III)Sulfo-SPDP 0.53g，收率为60％；

1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.51-8.49(m,1H),7.68-7.64(m,2H),7.15-7.12(m,1H),4.30-4.27(m,1H),3.33-3.25(m,2H),3.18–3.14(m,2H),3.10–3.07(m,2H)。

实施例3

在单口瓶中将0.46g Sulfo-NHS、0.5g3-(2-吡啶二硫代)丙酸和0.05g苄基三乙基氯化铵溶于7mL N,N-二甲基甲酰胺中，搅拌片刻，加入0.52g DCC，室温反应17小时，TLC检测原料反应完全，蒸干N,N-二甲基甲酰胺，用乙酸乙酯打浆一次，丙酮打两次，得式(III)Sulfo-SPDP 0.31g，收率为35％；

1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.51-8.49(m,1H),7.68-7.64(m,2H),7.15-7.12(m,1H),4.30-4.27(m,1H),3.33-3.25(m,2H),3.18–3.14(m,2H),3.10–3.07(m,2H)。

综上所述，本发明的制备新型蛋白质交联剂的方法具有合成路线简短、操作简便、成本低、产率高的优点。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。