具体实施方式

本发明提供包含在固体载体上生长出的昆虫寄生丝状菌的害虫防除材料，其特征为在表层中的上述昆虫寄生丝状菌的孢子菌数在给定的范围内。

作为可使用的丝状菌，只要为具有寄生于昆虫而杀虫的效果的丝状菌，且能够利用固体培养基培养的丝状菌即可，没有特别限制，可列举例如选自属于由白僵菌(Beauveria)属，拟青霉(Paecilomyces)属，木霉(Trichoderma)属，轮枝孢菌(Verticillium)属菌，或蜡蚧(Lecanicillium)属菌组成的组中的一种以上的丝状菌。更具体而言，从对属于鞘翅目天牛科的害虫的特异性杀虫效力的观点出发，可列举选自属于由球孢白僵菌(Beauveria bassiana)，布氏白僵菌(Beauveria brongniartii)，多形白僵菌(Beauveria amrpha)组成的组中的一种以上的丝状菌。特别优选可列举球孢白僵菌F-263株或布氏白僵菌NBL-851株。这些丝状菌可以单独或组合两种以上使用。需要说明的是，F-263株已基于布达佩斯条约在2018年12月27日国际保藏于独立行政法人产品评价技术基础机构专利微生物保藏中心NITE Patent Microorganisms Depository(日本国千叶县木更津市上总镰足2-5-8)，保藏号NITE BP-02855；NBL-851株已基于布达佩斯条约在2018年12月27日国际保藏于独立行政法人产品评价技术基础机构专利微生物保藏中心NITE PatentMicroorganisms Depository(日本国千叶县木更津市上总镰足2-5-8)，保藏号NITE BP-02854。

在本发明的材料中，在载体的表层中的昆虫寄生体丝状菌的孢子菌数(表层孢子菌数)为1.0×10⁶～1.0×10¹⁰个/cm²，优选为1.0×10⁶～1.0×10⁹个/cm²，更优选为1.0×10⁷～1.0×10⁸个/cm²。

通过使表层孢子菌数在该范围可以提高材料的保存稳定性，且提高杀虫效果。

作为表层孢子菌数的测定方法，例如可以使用以下方法。通过以固体载体上培养的昆虫寄生丝状菌静置在固体载体上的状态，以使得固体载体的培养面与平板培养基接触的方式将固体载体置于平板培养基上，以不使固体载体发生崩溃的程度的重量从上方施加重量一定时间，然后除去固体载体，用灭菌水或具有少量的表面活性的灭菌水冲洗平板培养基的表面，将该液体的总量回收，在显微镜下测定孢子菌数。此时，以固体载体的表面面积为基础进行表层孢子菌数的换算。即，可以对于表层的一部分测定孢子菌数，通过该面积占整体的比例而计算整个表面的孢子菌数。

固体载体可以为有机物载体或无机物载体中的任一种。

作为有机物载体，具体实例可列举稻壳，锯屑，麸，麦，稻草，大豆，大豆粕或植物残渣，但不限于此，只要含有丝状菌能够利用资源的成分，或能够吸收或在表面上保持对于培养目标昆虫寄生菌而言必需的培养液的载体即可使用。

作为无机物载体，作为具体实例可列举为多孔载体且在上述多孔部分含有培养基成分的粒状，球状或带状的形状的载体，但不限于此，只要为多孔物质且能够吸收或在表面上保持对于培养目标昆虫寄生菌而言必需的培养液的载体，即可使用。优选地，作为无机物载体可以使用矿物，发泡体基质，无纺布，织布。进一步优选地，作为无机物载体可以使用带状无纺布。

作为矿物没有特别限定，可以使用高岭土，粘土，滑石，白垩，石英，硅镁土，蒙脱石，硅藻土等天然矿物，硅酸，氧化铝，硅酸盐等合成矿物。

作为发泡体基质，可列举例如在日本特开昭63-74479号公报，日本特开昭63-190807号公报中公开的聚氨酯泡沫，聚苯乙烯发泡体，氯乙烯发泡体，聚乙烯发泡体，聚苯乙烯发泡体等。将这样的发泡体基质用作基材的情况，可以直接用，也可以使用将能够生成发泡体的发泡体组合物与培养基成分一起进行发泡而得到的物质。

作为无纺布或织布的原料没有特别限定，可以使用市售的原料，考虑培养基成分的保持性，保水性，亲水性，昆虫寄生丝状菌的附着性，作为碳源的利用，天然塌陷性等方面，特别优选浆料(pulp)，人造丝，聚酯等。

对固体载体的形状而言，从考虑能简便并且确实地设置在饵树上，而且可以使其有效性长期持续的观点，及从仅配置少数就能够有效地使对于属于鞘翅目天牛科的害虫的昆虫寄生丝状菌进行感染的观点出发，优选为粒状，球状，带状或片状的形状。更优选为带状形状。

作为带状或片状的培养基材，可列举例如在日本特开昭63-74479号公报，日本特开昭63-190807号公报中公开的发泡体基质，或无纺布，织布等多孔且表观表面积较大的原料，及由它们组合而成的原料。

对固体载体中含有的培养液的成分没有特别限定，使用在有机物中含有糖源，对微生物培养而言必需的养分的那些即可。作为具体成分，优选包含能够进行同化作用的碳源，氮源，无机盐类，天然有机物等。作为碳源，可以例示例如：葡萄糖，蔗糖，乳糖，麦芽糖，甘油，淀粉，纤维素糖蜜等。作为氮源，可以例示硫酸铵，氯化铵，硝酸铵等。作为无机盐类，可以例示磷酸二氢钾等磷酸盐，硝酸镁，镁，钾，钙等。作为天然有机物，可以例示肉浸膏，鱼肉提取液，蚕蛹粉等动物组织提取物，动物组织粉碎物，麦芽浸膏，玉米浸泡水(Corn steepliquor)，大豆油等植物组织提取物，干燥酵母，酵母浸膏，聚蛋白胨等微生物菌体或其提取物等。

对培养液而言，具体而言可以例示在来自谷类的提取物中添加葡萄糖等糖的那些，更具体而言可以例示在来自马铃薯的提取物中添加葡萄糖等糖的那些。

作为使这些培养液包含在固体载体中的方法，可以例示直接涂布培养液的方法，通过浸渗等使其含有培养液的方法。

昆虫寄生丝状菌的培养条件为目标昆虫寄生丝状菌能够生长的条件即可，没有特别限定。作为目标昆虫寄生丝状菌能够生长的温度，优选为15℃～35℃，更优选为20℃～30℃。作为目标昆虫寄生丝状菌能够生长的湿度，可以为0％～100％中的任意值。为了使表层孢子菌数处于目标范围，优选在培养初期和培养后期改变湿度，即，使培养后期的湿度低于培养初期的湿度。例如，培养初期(例如：从培养开始起3～8天)优选以湿度60％～100％进行培养，更优选80％～100％进行培养。之后(培养后期)，优选将湿度降低至30％以上且低于80％，培养2～5天。

昆虫寄生丝状菌的培养物可以通过以下方法等得到：使培养基材含有培养基成分，而后吸取菌进行培养的方法，预先将昆虫寄生丝状菌进行前培养，将得到的培养液与培养基成分进行混合后，使固体载体含有所得到的混合物的方法。

作为防除对象的害虫，可例示例如植物害虫或卫生害虫。植物害虫优选为树木的害虫。进一步，树木的害虫可例示属于鞘翅目或半翅目等的害虫，作为属于鞘翅目的害虫，可列举属于步行象鼻虫(Rhynchophoridae)科，象甲科，天牛科等的害虫，作为属于半翅目的害虫，可列举属于飞虱科，椿象科，盲蝽(Miridae)科，蚜虫科等的害虫。另外，卫生害虫是指对于例如以人，家畜为首的动物造成疾病等害处的昆虫等。

作为本发明中属于鞘翅目天牛科的害虫，可列举例如：松墨天牛(Monochamusalternatus)，白斑星天牛(Anoplophora malasiaca)，黄星天牛(Psacothea hilaris)，奢锦天牛(Acalolepta luxuriosa)，双簇污天牛(Moechotypa diphysis)，桃红颈天牛(Aromia bungii)，Torakamikiri(桑脊虎天牛(Xylotrechus chinensis)，灭字脊虎天牛(Xylotrechus quadripes)或葡萄虎天牛(Xylotrechus pyrrhoderus))等。

对将该昆虫寄生丝状菌的培养物施用至饵树的施用而言，没有特别限定，可以通过例如将利用浆料无纺布的培养物缠绕至饵树，用订书机等进行卡止等进行。为了进一步提高防除效果，更优选在施用时将防除对象的害虫的饵树集聚而进行。

对施用的时期没有特别限定，从提高驱除效率的观点出发，优选根据作为驱除对象的属于鞘翅目天牛科的害虫的生命周期进行施用。通常，属于鞘翅目天牛科的害虫具有如此生命周期：在树木的树皮下产卵，孵化的幼虫在树皮下摄食而造成虫害并生长，在春天来到，气温升高时，在蛹壳中过冬的幼虫成为蛹，羽化的成虫从树木钻出，在进行交尾，产卵前暂时进行成虫后的取食行为。例如，双簇污天牛等在8～10月羽化钻出之后，在日照良好，雨水打不到的比较干燥的石头、落叶下，堆木场的原木的枝叶之间，余茬下面，屋瓦，墙壁等中藏匿过冬，继续进行成虫后取食时期直到次年5月，在次年5月起开始产卵，持续到次年8月。

因此，通过在例如8月以后次年5月之前间实施本发明的驱除方法，可以非常有效地对出于成虫后取食及产卵的目的而集中起来的成虫进行驱除，也可以进一步驱除刚羽化钻出的成虫。

实施例

以下结合实施例对本发明进行更详细的说明，但应理解，本发明的范围不仅限定于实施例。

<实施例1>昆虫寄生丝状菌的培养方法

在4％蚕蛹粉提取液中加入葡萄糖使得为终浓度2％，利用培养基将布氏白僵菌NBL-851株在25℃震荡培养5天，形成了前培养液。将含有4％蚕蛹粉提取液和10％葡萄糖液的灭菌浆料无纺布置于不锈钢网上，使无纺布含有前培养液并在25℃，湿度80～100％开始培养，4天后温度仍为25℃，将湿度改变为80％以下(30％以上)，进行保持该培养条件的培养。培养中使用后述的表层孢子菌数的测定方法进行每天表层孢子菌数的测定，培养进行到表层孢子菌数为5×10⁵个/cm²以上。实际而言，在改变湿度后再进行3天。之后1天，通过送风干燥而去除多余水分。之后，进一步进行表层孢子菌数的测定，确认表层孢子菌数存在5×10⁵个/cm²以上。此时的总孢子菌数为1×10⁸～3×10⁸个/cm²以上。

作为对照，如作为现有技术的日本专利第3764254号记载的方式，将含有蚕蛹粉提取液等的浆料无纺布放入聚丙烯的袋中，在25℃(湿度100％)中培养1周，结果为总孢子菌数为1×10⁸～3×10⁸个/cm²以上，但另一方面，表层孢子菌数为1×10⁵个/cm²以下。

表层孢子菌数的测定如下计算：将进行昆虫寄生丝状菌培养后的无纺布切出5cm×5cm幅度，置于PDA(马铃薯葡萄糖琼脂，Potato Dextrose Agar)培养基上，施加一定重量5分钟后，除去无纺布，利用添加了0.05％tween20的溶液将培养基表面上存在的孢子进行总量回收，在显微镜下使用Thoma血细胞计数器计算了孢子菌数。以无纺布的表面面积为基础进行了表层孢子菌数的换算。

<实施例2>对黄星天牛的杀虫活性

使用了变成蛹约1个月的黄星天牛。在大型的容器中，放入为含有布氏白僵菌NBL-851株的防除材料的测试样品(实施例1)，确认该防除材料跨越并接触黄星天牛，放置1分钟。之后，将黄星天牛转移到放入了桑树(直径约1cm，2株)的大容器中，测量至完全致死的天数。通过达7天的杀虫活性比较了效果。比较例使用了为现有技术的日本专利第3764254号中记载的方法，制备了含有布氏白僵菌NBL-851株的防除材料(比较例1)。

如表1所示，在比较例1中记载的样品和实施例1中记载的样品中，总菌数为相同程度，对表层孢子菌数而言，在比较例1中低于1×10⁶个/cm²，实施例1中为1×10⁶个/cm²以上。作为结果，在实施例1中，在任意重复实验(重复1～4次)中均观察到了7天的杀虫效果，与此相对，在比较例1中在任意重复实验(重复1～4次)中均没有观察到7天的杀虫效果。即，可知本发明涉及的防除材料与现有技术涉及的防除材料相比，杀虫效果提高。