具体实施方式

本文中所用，术语“包含”和“由…构成”与“包括”或“含有”同义，并且包括端值在内或是开放式的，并且不排除另外的未列举的成员、要素或步骤。术语“包含”和“由…构成”也包括术语“由…组成”。

如本文所用，术语“基本上不含”是指基于干燥物质包含小于1重量％，优选地小于0.2重量％，并且更优选地小于0.05重量％。

如本文所用，术语“显著不同的熔融温度/熔点”是指两种材料的熔融温度具有大于15℃，优选地20℃，更优选地30℃的差值。

如本文所用，术语“类似的熔融温度/熔点”是指两种材料的熔融温度之间存在小于或等于15℃的差值。

纯化

纯化尤其适用于从起始原三酰基甘油酯油(即，在紧接经受本发明的方法的步骤(a)或步骤(d)之前的三酰基甘油酯油)中去除污染物，诸如一氯丙二醇酯(MCPDE)的氯化前体和/或MCPDE本身(例如，3-一氯丙-1,2-二醇酯(3-MCPDE)的氯化前体和/或3-MCPDE本身)。

3-卤素-1,2-丙二醇，具体地讲3-一氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)是食物中已知的污染物(《Food Addit.Contam.》，2006年，第23卷，第1290-1298页)。例如，研究已表明，如果以高剂量施用，3-MCPD可能对大鼠有致癌作用(《Evaluation of Certain Food Additives andContaminants》，世界卫生组织，日内瓦，瑞士，1993年，第267-285页；《lnt.J.Toxicol.》，1998年，第17卷，第47页)。然而，还发现精炼食用油可含有脂肪酸酯形式的3-MCPD，而仅含有极少量的游离3-MCPD(《Food Addit.Contam.》，2006年，第23卷，第1290-1298页)。欧洲食品安全局(EFSA)建议在毒性方面将3-MCPD酯视为等同于游离3-MCPD(欧洲食品安全局(2008年))。

众所周知，脱卤反应可在热处理过程期间发生。例如，已显示氯在输入足够的活化能时变成化学组分氯化氢(气体)，该化学组分在植物油的高温(例如最高270℃)脱臭期间是丰富的。本发明人相信，氯化氢可在炼油期间从本来就存在于三酰基甘油酯油精炼过程的原料(例如植物材料)中的含氯化合物中逸出。

实际上，已提出MCPD生成反应呈指数级增长(>150℃)并在短时间段内完成。

不受理论的束缚，已提出在机制上，通过与炼油期间逸出的氯化氢的相互作用，MCPD二酯可在炼油期间经由三酰基甘油酯(TAG)的末端酯基团的质子化形成，三酰基甘油酯在大多数植物油中占据总甘油酯的约88-95％。然后所形成的氧鎓阳离子可经历分子内重排，之后进行氯离子的亲核取代并且释放游离脂肪酸和MCPD二酯。

一旦通过使用本发明的方法去除，潜在的氯供体就不再可用于在炼油的加热步骤期间生成氯化化合物，诸如MCPD酯。从而获得氯化物质含量低的产物油，并且可使纯化油经受各种精炼操作，诸如热处理和脱臭，以便产生MCPDE含量低或不含MCPDE的精炼油。

因此，在一个实施方案中，与起始三酰基甘油酯油相比，纯化的三酰基甘油酯油中的一氯丙二醇酯(MCPDE)的氯化前体的量减少。

在另一个实施方案中，与起始三酰基甘油酯油相比，纯化的三酰基甘油酯油中一氯丙二醇酯(MCPDE)的氯化前体的量减少至少40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％或99％。

使用本发明的方法制备的精炼油可含有例如小于3ppm、1ppm、小于0.5ppm或优选地小于0.3ppm的MCPDE。

可使用本领域熟知的方案容易地分析MCPDE及其氯化前体的量。例如，基于液相色谱/质谱(LC/MS)的方法适用于分析MCPDE及其氯化前体的水平，如在本发明实施例中所示。MCPDE的示例性氯化前体包括m/z702.61807、716.59723、718.61357、734.60809、776.581271和804.57813的已知氯化前体(《Food Additives and Contaminants》，第28卷，第11期，2011年11月，第1492-1500页)。

在一个实施方案中，输入到本发明的方法的步骤(a)或(d)中的原三酰基甘油酯油是粗制三酰基甘油酯油。

如本文所用，术语“粗制油”可指未精炼油。例如，在一些实施方案中，输入到本发明的方法的步骤(a)或(d)中的三酰基甘油酯油尚未被精炼、脱胶、漂白和/或分提。在优选的实施方案中，三酰基甘油酯油在步骤(a)或(d)之前未被脱臭。

在一些实施方案中，原三酰基甘油酯油在步骤(a)或(d)之前经受初步加工，诸如初步清洁。然而，在步骤(a)或(d)之前对原三酰基甘油酯油进行的任何过程优选地不涉及将三酰基甘油酯油加热至例如高于100℃、150℃、200℃或250℃的温度。在一些实施方案中，原三酰基甘油酯油在步骤(a)或(d)之前经受初步精炼、分提、氢化和/或酯交换。

三酰基甘油酯油

术语“三酰基甘油酯”可与“甘油三酯”同义使用。在这些化合物中，甘油的三个羟基基团各自被脂肪酸酯化。

可使用本发明的方法纯化的油包括三酰基甘油酯，并且包括植物油、动物油、鱼油、藻油以及它们的组合。

如本文所用，术语“三酰基甘油酯油”与“原三酰基甘油酯油”同义。原三酰基甘油酯油是待纯化的油。

在优选的实施方案中，原三酰基甘油酯油为植物油。在优选的实施方案中，原三酰基甘油酯油至少部分地被溶剂提取。

例如，植物油包括葵花油、玉米油、卡诺拉油、大豆油、椰子油、棕榈油、棕榈仁油和可可脂。

在一个实施方案中，植物油为棕榈油、其级分，包括但不限于棕榈油酸甘油酯、棕榈硬脂酸甘油酯、中间级分。

极性脂质

如本文所用，极性脂质是与三酰基甘油酯相比极性更大的亲脂性化合物。它们可分为两类：

1)三酰基甘油的水解分解产物：这些分子包括部分甘油酯，诸如单酰基甘油、二酰基甘油和游离脂肪酸。

2)不能通过降解三酰基甘油酯而衍生的具有极性官能团的亲脂性物质。这些包括：甘油磷脂或仅磷脂，包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇和磷脂酸以及鞘脂和各种糖脂。

熔化温度

如本文所用，术语“熔化温度”可指在100kPa的压力处固体从固态变为液态时的温度。例如，熔化温度可为当以2℃/分钟加热时，固体在100kPa的压力处从固态变为液态时的温度。

技术人员能够容易地选择合适的方法来测定三酰基甘油酯油的熔化温度。

例如，用于分析熔化温度的装置可由具有透明窗口的加热块或油浴(例如蒂埃尔均热管)和放大器组成。可将固体样品置于薄玻璃管中并置于加热块中或浸入油浴中，然后将其逐渐加热。可观察固体的熔化并记录相关联的熔化温度。

对于具有高度复杂的三酰基甘油组成的脂肪和油，滑动熔点的方法是常用的参考(AOCS官方方法Cc 3-25)。

进一步精炼

由于氯前体被本发明的方法耗尽，因此在任何后续精炼过程期间的加热将不会引起大量生成不需要的氯化化合物(诸如MCPDE)。

在一个实施方案中，方法还包括继步骤(a)或步骤(d)之后的选自物理或化学精炼、脱胶和漂白的一个或多个过程。

在一个实施方案中，方法还包括继步骤(a)或步骤(d)之后的脱臭，优选地其中脱臭为真空蒸汽脱臭。

在一个实施方案中，方法还包括继步骤(a)或步骤(d)之后的分提。

用于进行精炼、脱胶、漂白、脱臭和分提的方法是本领域熟知的。

以举例的方式，植物油诸如植物油的精炼通常由物理精炼或化学精炼组成。

在旨在提高可持续性的努力中，炼油厂在过去几十年中已经修改了它们的植物油生产线以最大程度降低能量消耗(节约装置)并减少废物。然而，这两种精炼过程的步骤基本上保持相同。

物理精炼基本上是化学精炼的删减形式，并且在1973年作为棕榈油精炼的优选方法引入。它可以是三步连续操作，在三步连续操作中将输入的油用酸预处理(脱胶)，通过使其通过吸附性漂白粘土将其清洁，然后使其经受蒸汽蒸馏。该过程允许棕榈油特有的类胡萝卜素的后续脱酸、脱臭和分解(即，与其他植物油不同，粗制油颜色为深红色)。考虑到在物理精炼中缺少中和步骤，从物理精炼厂生产的精炼漂白(RB)油含有与存在于粗制油中的游离脂肪酸(FFA)含量几乎相同的游离脂肪酸含量。

得自化学精炼厂的中和漂白(NB)油和RB棕榈油在每一方面都是相当的预脱臭。

热漂白单元操作是炼油过程中损失的主要来源，导致过滤后油体积减少20％-40％。该过程通常持续约30分钟-45分钟，并且通常在95℃-110℃的温度处在27毫巴-33毫巴真空下发生。

然后可将热漂白的油在管道中重新输送至除气器，除气器有助于在被送至脱臭塔之前去除溶解的气体以及水分。

漂白步骤可包括加热油并通过使油通过吸附性漂白粘土来清洁油。

脱臭步骤可包括蒸汽蒸馏。

技术人员将理解，在不脱离所公开的本发明范围的前提下，他们可以组合本文所公开的本发明的所有特征。

现将通过非限制性实施例来描述本发明的优选特征和实施方案。

除非另外指明，本发明的实践将采用常规化学、生物化学、分子生物学、微生物学和免疫学技术，这些技术均在本领域普通技术人员的能力范围内。此类技术在文献中有所阐述。参见：例如Sambrook,J.,Fritsch,E.F.和Maniatis,T.，1989年，《MolecularCloning：A Laboratory Manual》，第二版，冷泉港实验室出版社；Ausubel,F.M.等人，(1995年和定期补充)，《Current Protocols in Molecular Biology》，第9、13和16章，JohnWiley&Sons；Roe,B.、Crabtree,J.和Kahn,A.，1996年，《DNA Isolation and Sequencing:Essential Techniques》，John Wiley&Sons；Polak,J.M.和McGee,J.O’D.，1990年，《InSitu Hybridization:Principles and Practice》，牛津大学出版社；Gait,M.J.，1984年，《Oligonucleotide Synthesis:A Practical Approach》，IRL出版社；以及Lilley,D.M.AndDahlberg,J.E.，1992年，《Methods in Enzymology:DNA Structures Part A:Synthesisand Physical Analysis of DNA》，学术出版社。这些一般性文本中的每一个以引用的方式并入本文。

实施例

实施例1

材料和方法

溶剂提取的粗制棕榈油的制备

将1.8kg整个冷冻的完整棕榈果实在室温处解冻。使用手术刀手动从果实中去除果仁。通过将2L 2-丙醇和2L正己烷混合来制备4L提取溶液。使用商业浸入式混料机(BamixGastro 200)将1.4kg包括果肉和果皮的棕榈浆与2L提取溶液混合、制浆并均质化。使用polytron(Kinematica Polytron PT 10 35GT)将所得浆料与剩余2L提取溶液混合并进一步均质化。将所得浆料溶液等分到1L聚丙烯管(Sorvall 1000mL)中并在Eppendorf 5804R离心机中在30℃处以4000g离心15分钟。将有机相过滤通过滤纸(Whatman 595 1/2)并合并。然后在60℃处使用Büchi Rotavapor R-300系统(B-300加热浴、I-300真空控制器、V-300泵和在4℃处操作的P-314再循环冷却器)从油中蒸发有机溶剂。逐步调节真空直至其达到10毫巴以避免样品沸腾。

压制的粗制葵花油的制备

在Rommelsbacher OP-700厨房压榨机上压制培养用于产油的2kg可商购获得的向日葵种子。将粗制油加热至30℃，以15,000g离心15分钟，并且通过Whatman 595 ¹/₂滤纸过滤，并且在6℃下静置7天。然后取出不含沉淀的澄清上层相，并且在6℃下以15,000g离心15分钟。在实验中使用所得的澄清上层相(90体积％)。

工业生产的粗制棕榈油

工业生产的粗制棕榈油购自植物油供应商并按原样使用。

粗制棕榈硬脂酸甘油酯的制备

将粗制棕榈油在室温处保持48h。然后通过在23℃处以15000g离心15分钟来分离固相和液相。将所得液相标记为粗制棕榈硬脂酸甘油酯。

消减试验

用辅助性油洗涤粗制油

将原三酰基甘油酯油和辅助性油以1:1w/w混合。将该混合物加热至90℃以允许完全熔化。然后通过涡旋10秒使样品均质化，然后在室温约22℃处温育7小时。通过在室温约22℃处以15000g离心15分钟来分离结晶的固相和液相。

用捕集助剂单硬脂酸甘油酯去除氯化前体

将10％w/w的可商购获得的单硬脂酸甘油酯(Dimodan HS K-A，得自Danisco)添加到粗制油中。将该混合物加热至90℃以允许完全熔化。然后将样品在40℃处温育7h。通过在40℃处以15000g离心15分钟来分离结晶的固相和液相。

具有极性干扰的剂量响应实验

在室温下将原三酰基甘油酯油(在洗涤之前或之后)与少量(0-3％w/w范围)的极性干扰物混合，该极性干扰物为诸如游离脂肪酸(亚油酸，LA；亚麻酸，Ln)或单酰基甘油(单亚油酸甘油酯，mLA；单亚麻酸甘油酯，mLn)液体。混合后，将样品加热至90℃以允许完全熔化，并且涡旋以允许均质化。

样品的安瓿内热处理

在Eppendorf 5804R离心机中，在氮气下在密封的玻璃安瓿中于230℃处进行粗制油样品的热处理，持续2h。通过用氮气冲洗玻璃巴斯德吸管并使用本生灯密封玻璃巴斯德吸管，玻璃安瓿由玻璃巴斯德吸管制造。选择这些条件以便模拟在可食用油脱臭期间使用的热条件。

液相色谱-质谱分析

样品制备

在注射之前逐步稀释油和自制粗制油。首先，将100μL的每种样品转移到小瓶中，并添加900μL的正己烷:丙酮(1:1v/v)的混合物。将样品涡旋5-10s。在第二步骤中，通过将50μL等分试样与950μL丙酮混合来进一步稀释该溶液。将所获得的溶液涡旋5-10s。最终稀释步骤由混合以下溶液组成：

在第二稀释步骤之后获得的100μL溶液；

10μL 0.2ng/μL内标溶液(1-油酰基-2-亚油酰基3-氯丙二醇-²H₅)；以及

90μL甲醇

LC条件

使用配备有基于二氧化硅的十八烷基相(Waters Acquity HSS C18，1.7μm；2.1mm×150mm)的ThermoFisher Accela系统进行超高效液相色谱分析。所施加的溶剂梯度汇总于表1中。

表1所施加的LC梯度的细节(溶剂A为1mM甲酸铵的甲醇溶液；并且溶剂B为100μM甲 酸铵的异丙醇溶液)。

MS条件

使用Thermo Fisher Lumos Orbitrap质谱仪进行一氯丙二醇(MCPD)酯及其有机前体的监测。该平台允许以高达240,000半极大处全宽度质量分辨率和2ppm的常规质量精度进行分析。以负离子模式电喷雾电离(ESI^-)检测MCPD酯的前体，而以ESI正离子模式(ESI⁺)监测MCPD酯。在这些条件下，所观察到的MCPD前体离子为[M-H]^-，而所监测的MCPD酯离子为[M+NH₄]⁺和[M+Na]⁺加合物。就数据阐释而言，在10ppm窗口中提取m/z信号。本文研究的氯化前体的汇总列表在表1中列出。

表2

结果与讨论

去除氯化前体

实施例1

如上所述，基于单硬脂酸甘油酯的捕集和氯化前体的去除在溶剂提取的粗制棕榈油上重复进行三次。首先，如上所述监测具有m/z 718.61357(《Food Additives andContaminants》，第28卷，第11期，2011年11月，第1492-1500页)的最显著物质的信号。在10ppm m/z窗口下提取所记录的该前体的峰面积，然后通过将原料(未消减，无单硬脂酸甘油酯)中的平均峰面积定义为100％来将它们归一化。获得的结果显示，在这种情况下，基于单硬脂酸甘油酯的捕集可去除约50％的718前体。

还使相同粗制棕榈油样品经受压制的葵花油的洗涤和随后的基于单硬脂酸甘油酯的纯化步骤。如数据所示，去除718前体的功效改善并达到90％的去除速率，参见图1。

这些结果表明，在基于单硬脂酸甘油酯的捕集和洗涤步骤之间存在协同纯化效应。

实施例2

基于单硬脂酸甘油酯的捕集和洗涤步骤之间的协同纯化效应可由存在于起始油中的微量极性物质引起。这在另一个实施例中得到证实，其中首先在工业生产的粗制棕榈油中测量基于单硬脂酸甘油酯的捕集的消减功效，参见图2。

然后如上所述用粗制葵花油作为洗涤剂洗涤相同粗制棕榈油，其富含3％w/w量的极性干扰物，诸如游离亚油酸(LA)、游离亚麻酸(Ln)、单亚油酸甘油酯(mLA)和单亚麻酸甘油酯(mLn)。

一方面，通过在m/z 642.52273、716.59653、700.60161、850.64170处显示出对前体的改善消减，再次观察到了改善的消减功效以及洗涤和单硬脂酸甘油酯捕集之间的协同作用。

另一方面，结果证实，通过添加游离脂肪酸或单甘油酯干扰物两者，消减功效大大降低。

为了验证消减对油的MCPDE水平的积极影响，也使相同样品经受热处理并分析了它们的MPCDE含量，如上所述。虽然基于单硬脂酸甘油酯的捕集纯化对MCPDE水平具有强的积极效果，但所添加的游离脂肪酸和单甘油酯的负面效果也被确认，参见图4。(二棕榈酰-MCPD＝PP-MCPD，棕榈酰-油基-MCPD＝PO-MCPD，二油基-MCPD＝OO-MCPD，油基-亚油基-MCPD＝OL-MCPD)

实施例3

如上所述，研究了已用粗制葵花油洗涤的工业生产的粗制棕榈油的硬脂酸甘油酯级分中的更详细剂量-效应关系。在不同的实验方案中富集了洗涤过的油，其各自具有0％、0.1％、0.5％、1％、2％、3％w/w量的单亚油酸甘油酯(mLA)和单亚麻酸甘油酯(mLn)的极性干扰。然后将已经掺杂有干扰物的所得样品分成两份等分试样，并且如上所述用10％单硬脂酸甘油酯消减一份等分试样。提取各种氯化前体的峰面积，并将其与“具有与不具有”单硬脂酸甘油酯的消减进行比较。根据干扰剂量(mLA和mLn)绘制在未消减(0％单硬脂酸甘油酯)和消减(10％单硬脂酸甘油酯)样品之间观察到的峰面积差值。图5的结果示出了高于0.5％添加的mLA和0.5％mLn显著损害消减功效，从而证实这些极性干扰物在消减氯化前体中的作用。

实施例4

在工业上生产的粗制棕榈油中研究了洗涤和单硬脂酸甘油酯的逐步消减的总体效果以及它们对所得的油MCPDE含量的协同效应。首先仅通过基于单硬脂酸甘油酯的捕集消减粗制棕榈油，导致PP、PO和OO MCPDE减少约30％，参见图6。

在单独的实验中，首先用粗制葵花油洗涤相同的油，从而导致MCPDE减少约70％。然后，使经洗涤的油经受基于单硬脂酸甘油酯的捕集纯化，从而产生所研究的MPCDE水平的总体90％减少。

总体上数据显示，与未对粗制棕榈油和粗制棕榈硬脂酸甘油酯的研究中的每一者进行处理时观察到的氯化前体和一氯丙二醇酯(MCPDE)水平相比，消减后两者的水平显著降低。

本发明的有益效果包括但不限于去除质量介于600-1000道尔顿之间并且极性比三酰基甘油更大的任何极性范围内的氯化物质，例如保留时间为24.5分钟的三棕榈酸甘油酯。这在表1中示出，记录了反映所研究物质的极性的m/z值和对应的色谱保留时间。

实施例5

低熔点单亚油酸甘油酯和单油酸甘油酯可通过洗涤来降低。

如上所述制备粗制棕榈油硬脂酸甘油酯和压制的粗制葵花油。如下用压制的粗制葵花油洗涤粗制棕榈硬脂酸甘油酯：

将粗制棕榈硬脂酸甘油酯和压制的粗制葵花油以1:1w/w混合。将该混合物加热至90℃以允许完全熔化。然后通过涡旋10秒使样品均质化，然后在室温约22℃处温育7小时。通过在室温约22℃处以15000g离心15分钟来分离结晶的固相和液相。将经洗涤的固相用于进一步的工作。

使洗涤之前和之后的粗制棕榈硬脂酸甘油酯经受如上所述的热处理和LC-MS分析。

主要单酰基甘油的信号被监测为它们的[M+Na]+加合物，参见表3。就数据阐释而言，在10ppm窗口中提取m/z信号。

表3：监测到的单酰基甘油酯的名称、准确质量和保留时间。

洗涤对单油酸甘油酯和单亚油酸甘油酯丰度的影响示于图7中。结果显示，在粗制棕榈硬脂酸甘油酯和压制的粗制葵花油的混合物结晶之后，单油酸甘油酯和单亚油酸甘油酯富含液相，因此固体粗制棕榈硬脂酸甘油酯减少。

实施例6

在粗制棕榈油中展示洗涤和捕集。

如上所述获得并制备粗制棕榈油和压制的粗制葵花油。

粗制棕榈油的洗涤如下进行：将粗制棕榈油和压制的粗制葵花油以1:1w/w混合。将该混合物加热至90℃以允许完全熔化。然后通过涡旋10秒使样品均质化，然后在室温约22℃处温育7小时。通过在室温约22℃处以15000g离心15分钟来分离结晶的固相和液相。将经洗涤的固相用于进一步的工作。

对于基于单硬脂酸甘油酯的捕集，将5％w/w的可商购获得的单硬脂酸甘油酯(Dimodan HS K-A，得自Danisco)添加到洗涤过的棕榈油中。将该混合物加热至90℃以允许完全熔化。然后将样品在50℃处温育7h。通过在40℃处以15000g离心15分钟来分离结晶的固相和液相。

如上所述，使在洗涤之前和之后以及在基于单硬脂酸甘油酯的捕集之后的棕榈油经受热处理和LC-MS分析。在10ppm窗口中提取如上所述的单油酸甘油酯、单亚油酸甘油酯和MPCDE的信号。

洗涤对单油酸甘油酯和单亚油酸甘油酯丰度的影响示于图8中。结果显示，在粗制棕榈油的洗涤程序之后，其单油酸甘油酯和单亚油酸甘油酯含量两者均降低，从而使它们对后续的基于单硬脂酸甘油酯的捕集步骤的干扰最小化。

基于单硬脂酸酯甘油酯的捕集步骤的结果示于图9中，其示出了在洗涤和捕集步骤之后MCPD含量的增量降低和在原料和最终油之间跨降低8倍因子的降低。

实施例7

在脱胶棕榈油中展示洗涤和捕集。

如上所述获得并制备粗制棕榈油和压制的粗制葵花油。

粗制棕榈油如下脱胶：

首先将粗制油在80℃处加热，并且然后在40℃处以15'000g离心15分钟。立即将上层90％v/v液相与沉淀分离，并进一步用于脱胶。通过首先将该油加热至80℃并添加0.02％磷酸85％(v/v)来进行该油的脱胶。然后用剪切搅拌器(Silverson L5M-A)将该混合物以1500rpm剪切15分钟，同时将粗制油保持在80℃处。然后添加2％MilliQ水(v/v)，并且将该混合物以1500rpm进一步剪切15分钟，同时将温度保持在80℃处。将所得脱胶油在40℃处以3'000g离心2分钟，并将上层80％的纯化油用于进一步工作。

如下用压制的粗制葵花油洗涤脱胶棕榈油：

将脱胶棕榈油和压制的粗制葵花油以1:1w/w混合。将该混合物加热至90℃以允许完全熔化。然后通过涡旋10秒使样品均质化，然后在室温约22℃处温育7小时。通过在室温约22℃处以15000g离心15分钟来分离结晶的固相和液相。将经洗涤的固相用于进一步的工作。

对于基于单硬脂酸甘油酯的捕集，将5％w/w的可商购获得的单硬脂酸甘油酯(Dimodan HS K-A，得自Danisco)添加到脱胶并洗涤过的棕榈油中。将该混合物加热至90℃以允许完全熔化。然后将样品在50℃处温育7h。通过在40℃处以15000g离心15分钟来分离结晶的固相和液相。

如上所述，使在洗涤之前和之后以及在基于单硬脂酸甘油酯的捕集之后的脱胶的棕榈油经受热处理和LC-MS分析。在10ppm窗口中提取如上所述的MPCDE的信号。

图10中所示的结果证实，同样在脱胶棕榈油的情况下，在洗涤和捕集步骤之后，在原料和最终油之间实现了跨降低10倍因子的MCPD水平的增量降低。

在上述说明书中提到的所有出版物均以引用方式并入本文。本发明所公开的方法、用途和产物的各种修改和变型在不脱离本发明范围和实质的情况下对技术人员将是显而易见的。虽然已结合具体优选的实施方案对本发明进行了公开，但是应当理解，受权利要求书保护的本发明不应不当地受限于此类具体实施方案。实际上，对技术人员显而易见的对用于实践本发明所公开的模式的各种修改旨在落在以下权利要求书的范围内。