具体实施方式

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下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：

一种适用于驴精液的抑菌子宫角输精稀释液，包括A溶液和B溶液，其中：

A溶液由以下成分组成：氯化钠1.52g、磷酸二氢钾0.68g、七水硫酸镁0.12g、碳酸氢钠0.35g、HEPES 4.76g、葡萄糖50g、丙酮酸钠0.08g、乳酸钠3.6mg、脱脂奶粉24g、牛磺酸3.75g、亚牛磺酸8.72mg以及纯水800ml。

B溶液由以下成分组成：牛血清白蛋白1g、肝素钠20mg、孕酮3.14mg、头孢西丁钠24mg、两性霉素25mg、多粘菌素100mg以及纯水100ml。

本实施例中各成分的作用如下：

氯化钠是主要是控制精子细胞内电解质平衡；

磷酸二氢钾主要用于维持渗透压；

七水硫酸镁中的镁离子有助于精子运动；

HEPES是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围，在pH7.2-7.4之间有很强的缓冲能力。由于精液呈弱碱性，PH值为7.2～7.8；因此，HEPES对维持精子PH具有较好的效果。

乳酸钠可以提高抗氧化作用，用于调节PH；

脱脂奶粉，由于奶是一种天然的缓冲剂，具有较好的缓冲作用；但乳脂会限制精子运动，其中的酪蛋白可以维持精子活力。因而，脱脂乳粉较脱脂乳使用方便。

葡萄糖是精子获能和维持超激活运动的主要能源物质，有助于驴精子获能；

丙酮酸钠在此配方中主要起到强力的抗氧化作用，提高精子在缺氧情况的耐受能力，它全身碱化作用使其无论在缺氧或是有氧条件下都能消耗，保护精子细胞的基本功能。

碳酸氢钠在维持渗透压也起着很重要的作用，精子在体内处在等渗的精清中，如果精清部分的盐浓度较高，则渗透压高，精子易脱水；反之,渗透压低，易使精子膨胀，适量使用碳酸氢钠可有效维持驴精液稀释液的渗透压。

孕酮能诱发驴精子发生顶体反应，而顶体反应标志着精子获能的完成；

牛血清白蛋白既可提高精子活力和活率，又可促进精子获能；

牛磺酸、亚牛磺酸、肝素钠在精子体外获能及维持精子活力方面也均具有积极的效果。

同时，由于一般引起子宫炎的菌主要包括：大肠杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、芽孢杆菌、念珠菌。而头孢西丁钠对革兰阳性菌中金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌或其他链球菌(除了肠球菌)的敏感菌株均有较强的抗菌作用；两性霉素用于隐球菌、球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、芽生菌、孢子丝菌、念珠菌、毛霉、曲菌等引起的内脏或全身感染；多黏菌素(polymyxin)对绿脓杆菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌具有抗菌作用。因此，头孢西丁钠、两性霉素以及多粘菌素，对深角输精抗感染有积极作用。

实施例2：

一种适用于驴精液的抑菌子宫角输精稀释液的制备方法，包括以下步骤：

(1)分别按配比取A溶液、B溶液的各成分进行混匀，分别制得A溶液和B溶液；

(2)将步骤(1)中制得的A溶液在压力103.4kPa、温度121.3℃的条件下，维持15～30分钟，进行灭菌处理；

(3)在无菌环境下，将步骤(1)中制得的B溶液用22μm无菌滤器过滤除菌后与步骤(2)中得到的灭菌后的A溶液进行混合并通过添加无菌纯水定容至1L，即得抑菌子宫角输精稀释液。

由于B溶液中的牛血清白蛋白、头孢西丁钠、两性霉素、多粘菌素为活性物质，高温会破坏其功能，因此，本实施例中B溶液仅通过无菌滤器进行过滤除菌。

对比例1：

为了验证本发明提出的适用于驴精液的抑菌子宫角输精稀释液可提高精子的活力，本对比例对利用通过实施例2制备的抑菌子宫角输精稀释液稀释后的精液中精子的活力进行了检测，具体检测方法如下：

对10头公驴采集精液，并将采集好的精液混匀后平均分为两组，分别作为实验组1和对照组1。将实验组1的精液中按照1:1(原精：稀释液)的体积比例加入本发明的抑菌子宫角输精稀释液进行稀释，将对照组1的精液中按照1:1(原精：稀释液)的体积比例加入INRA82稀释液进行稀释；之后，将实验组1和对照组1均置于在37℃避光水浴条件下，分别在0h、3h、6h、9h、24h用精子活力检测仪检测实验组1和对照组1中精子的活力，检测结果如表1；

表1实验组1和对照组1的精子活力检测结果

从表1中可以看出，随着时间的延长，实验组1的精子活力明显高于对照组1，可见，本发明提出的适用于驴精液的抑菌子宫角输精稀释液可有效提高精子的活力。

对比例2：

为了验证本发明提出的适用于驴精液的抑菌子宫角输精稀释液具有良好的抑菌效果，本对比例对利用通过实施例2制备的抑菌子宫角输精稀释液稀释后的精液的抑菌效果进行了检测，具体检测方法如下：

对10头公驴采集精液，并将采集好的精液混匀后，各取5ml精液，分别与由本发明的抑菌子宫角输精稀释液和INRA82稀释液(其包含抗生素：青霉素100000IU/L，链霉素双氢150mg/L)等体积混合后，分别作为实验组2和对照组2。将实验组2和对照组2分别用PBS以1:10、1:100、1:1000的体积比进行稀释。并将5ml的由本发明制备的抑菌子宫角输精稀释液作为空白实验组，将5ml的INRA82稀释液作为空白对照组；之后，将实验组2、对照组2、空白实验组以及空白对照组均置于37℃避光水浴条件下，按照菌落总数测定(GB4789.2-2016)测定方法，测定实验组2、对照组2、空白实验组以及空白对照组中，三个稀释梯度在不同时间对应的菌落生长情况，经过多次实验，检测结果如表2所示，实验组2在不同稀释梯度下均表现出较强的抑菌效果，尤其在24h内抑菌效果最佳。表2中，“--”表示菌落长满，无法计数。

表2实验组2和对照组2的抑菌效果检测结果

由于实验过程中可能会带入菌，为了保证实验数据的可靠性，本对比例对空白实验组和空白对照组分别对同一样品进行了三组实验。

由表2可以看出，通过实验组2和对照组2进行比较可以看出，在不同的稀释梯度下，在相同时间，实验组2的菌落数均明显少于对照组2的菌落数；同时，空白实验组和空白对照组中的菌落数极少，可见，通过实施例2制备的抑菌子宫角输精稀释液和INRA82稀释液本身无菌，所以，实验组2和对照组2中的细菌并不是由两种稀释液带入的。可见，实验组2所采用的实施例2制备的抑菌子宫角输精稀释液较对照组2所采用的INRA82稀释液而言，抑菌效果显著。

对比例3：

为了验证本发明提出的适用于驴精液的抑菌子宫角输精稀释液在提高母驴受胎率和降低子宫炎发病率方面具有良好的效果，本对比例在项目合作示范驴场用通过本发明制备的抑菌子宫角输精稀释液对原精进行稀释后，共计输精1280头次母驴，并作为实验组3；用INRA82稀释液对原精进行稀释后，共计输精5400头次母驴，并作为对照组3；且实验组3和对照组3的原精相同，稀释比例相同，输精位置相同，均是将稀释后的精液输至母驴的子宫角处。

输精并排卵后的18天后通过孕检统计受胎情况，实验组3中，受胎母驴为764头，受胎率为59.7％，母驴子宫炎发病率为4.3％。对照组3中，受胎母驴为2432头，受胎率为45％，母驴子宫炎发病率为10.8％。

可见，实验组3相对于对照组3，受胎率大大提高，而母驴子宫炎发病率大大降低，由此可见，本发明提出的适用于驴精液的抑菌子宫角输精稀释液在提高母驴受胎率和降低子宫炎发病率方面具有突出的效果，促进养殖规模的不断扩大，也对母驴的子宫健康更有保障。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。