一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法
阅读说明：本技术 一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法 (Preparation method of stem cell exosome freeze-dried powder solvent ) 是由 武丽芳 马小梅 邢梦洁 张红钢 于 2021-08-19 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法,其技术方案要点是：包括以下步骤：步骤一、准备原料,按照质量份数取神经酰胺10-15份、甘油2-5份、维生素4-7份、皮肤促渗剂2-5份、抗氧化剂2-5份、植物提取物4-7份、保湿剂2-5份、寡肽4-7份、苯乙酮3-6份、丙二醇4-7份和去离子水；步骤二、一次材料混合,将神经酰胺、甘油、植物提取物、维生素和去离子水按照重量份数投入到混合桶内,通过搅拌器进行搅拌,使得各给原料之间充分混合,有利于提高原料之间的充分融合效率,流程明确以及清晰,通过制备方法中加入的皮肤促渗剂有利于提高原料成分透过表皮到达真皮层的速度,提高护肤的效果,保持溶媒中的各个材料的优良性能。(The invention discloses a preparation method of a stem cell exosome freeze-dried powder solvent, which has the technical scheme key points that: the method comprises the following steps: preparing raw materials, namely taking 10-15 parts of ceramide, 2-5 parts of glycerol, 4-7 parts of vitamin, 2-5 parts of skin penetration enhancer, 2-5 parts of antioxidant, 4-7 parts of plant extract, 2-5 parts of humectant, 4-7 parts of oligopeptide, 3-6 parts of acetophenone, 4-7 parts of propylene glycol and deionized water according to parts by mass; and step two, mixing the materials once, namely putting ceramide, glycerol, the plant extract, vitamins and deionized water into a mixing barrel according to parts by weight, stirring by a stirrer to ensure that the raw materials are fully mixed, so that the full fusion efficiency of the raw materials is improved, the process is clear and clear, and the skin penetration enhancer added in the preparation method is favorable for improving the speed of the raw material components penetrating through the epidermis to reach the dermis layer, the skin care effect is improved, and the excellent performance of each material in the solvent is kept.)
技术领域
本发明涉及冻干粉溶媒技术领域，具体涉及一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法。
背景技术
冻干粉是在无菌环境下将药液冷冻成固态，抽成真空将水分升华干燥而成的无菌粉注射剂。有效地防止了制品理化及生物特性的改变，对生物组织和细胞结构和特征的损伤较小，使其快速进入休眠状态，有效保护了许多热敏性药物生物制品有效成份的稳定性。如蛋白质、微生物类不会发生变性和丢失其生物活性；其次，冻干制品在干燥后形态疏松、颜色基本不发生改变，加水后能够快速溶解并恢复原有水溶液的理化特性和生物活性。第三，由于干燥在真空条件下进行，对于一些易氧化的物质具有很好的保护作用。第四，制品经过冻干后水份含量非常低，使制品的稳定性提高，受污染的机会减小，这不仅方便了运输还延长了制品保存期限，溶媒是一种用于溶解冻干粉的溶剂。
如授权公告号为CN111388394A的中国专利，其公开了一种双相冻干粉溶媒及其制备方法和应用。所述双相冻干粉溶媒包括油相组分和水相组分，所述油相组分包括神经酰胺、植物甾醇油酸酯、野大豆油、抗氧化剂和基础油。
上述的这种冻干粉溶媒具有增强皮肤锁水能力和修复能力的优点；但是上述的这种冻干粉溶媒依旧存在着一些缺点，如：制备过程简单粗陋，以及溶媒的对皮肤的渗透能力差。
发明内容
本发明的目的在于提供一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法，包括以下步骤：
步骤一、准备原料，按照质量份数取神经酰胺10-15份、甘油2-5份、维生素4-7份、皮肤促渗剂2-5份、抗氧化剂2-5份、植物提取物4-7份、保湿剂2-5份、寡肽4-7份、苯乙酮3-6份、丙二醇4-7份和去离子水；
步骤二、一次材料混合，将神经酰胺、甘油、植物提取物、维生素和去离子水按照重量份数投入到混合桶内，通过搅拌器进行搅拌，使得各给原料之间充分混合；
步骤三、加热搅拌，将步骤中充分混合的原料投入到反应皮肤促渗剂釜中进行加热以及通过搅拌机进行搅拌，加热时间为20-40分钟，直至反应釜中的原材料充分溶解，得到反应物A；
步骤四、水浴加热，将寡肽、苯乙酮和丙二醇按照重量份数投入水浴容器内进行混合水浴加热，通过搅拌器进行均匀搅拌以及进行加热，直至充分溶解得到混合物B；
步骤五、二次材料混合，反应釜中的温度降至50-65摄氏度，并将步骤四中得到的混合物B投入到反应釜中与反应物A进行充分搅拌，充分融合，得到混合物C；
步骤六、三次材料混合，将皮肤促渗剂、抗氧化剂和保湿剂按照重量份数加入到反应釜中内与混合物C充分搅拌，搅拌时间为16-24分钟，得到溶媒液体；
步骤七、降温处理，将溶媒液体通过降温设备进行降温，并通过滤网进行过滤处理。
优选的，所述抗氧化剂为生育酚抗氧化剂、丁基羟基茴香醚抗氧化剂、二丁基羟基甲苯抗氧化剂和叔丁基对苯二酚其中的一种或多种。
优选的，所述植物提取物为海藻提取物、茶叶提取物、番红花提取物和积雪草提取物中的一种或者多种。
优选的，所述保湿剂为PCA钠保湿剂、乳酸钠保湿剂和羟乙基尿素保湿剂中的一种或者多种。
优选的，所述寡肽为寡肽-1、寡肽-3、寡肽-5和寡肽-6中的一种或者多种。
优选的，所述维生素为维生素A、维生素D、维生素E和维生素K中的一种或者多种。
优选的，所述步骤二中搅拌器的搅拌速度为300-400转/分钟，搅拌时间为10-25分钟。
优选的，所述步骤三中反应釜加热至75-90摄氏度，搅拌机搅拌时间为20-25分钟。
优选的，所述步骤四中水浴温度为50-65摄氏度，加热时间为30-40分钟。
优选的，所述步骤七中溶媒液体的温度降至21-27摄氏度，降温时长为4-5小时，所述滤网为孔径为0.5-1.5μm的滤网。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
该干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法中通过一次材料混合、二次材料混合、三次材料混合等步骤有利于提高原料之间的充分融合效率，流程明确以及清晰，通过制备方法中加入的皮肤促渗剂有利于提高原料成分透过表皮到达真皮层的速度，提高护肤的效果，通过抗氧化剂有利于延长溶媒储存时间，还可以保持溶媒中的各个材料的优良性能，延长溶媒的使用寿命，通过设有的保湿剂有利于提高溶媒的保湿效果以及保湿时间，通过寡肽有利于迅速补充胶原蛋白，促进新陈代谢，原蛋白的再生能力。
附图说明
图1为本发明的流程框图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法，包括以下步骤：
步骤一、准备原料，按照质量份数取神经酰胺10份、甘油2份、维生素4份、皮肤促渗剂2份、抗氧化剂2份、植物提取物4份、保湿剂2份、寡肽4份、苯乙酮3份、丙二醇4份和去离子水；
步骤二、一次材料混合，将神经酰胺、甘油、植物提取物、维生素和去离子水按照重量份数投入到混合桶内，通过搅拌器进行搅拌，使得各给原料之间充分混合；
步骤三、加热搅拌，将步骤中充分混合的原料投入到反应皮肤促渗剂釜中进行加热以及通过搅拌机进行搅拌，加热时间为20分钟，直至反应釜中的原材料充分溶解，得到反应物A；
步骤四、水浴加热，将寡肽、苯乙酮和丙二醇按照重量份数投入水浴容器内进行混合水浴加热，通过搅拌器进行均匀搅拌以及进行加热，直至充分溶解得到混合物B；
步骤五、二次材料混合，反应釜中的温度降至50摄氏度，并将步骤四中得到的混合物B投入到反应釜中与反应物A进行充分搅拌，充分融合，得到混合物C；
步骤六、三次材料混合，将皮肤促渗剂、抗氧化剂和保湿剂按照重量份数加入到反应釜中内与混合物C充分搅拌，搅拌时间为16分钟，得到溶媒液体；
步骤七、降温处理，将溶媒液体通过降温设备进行降温，并通过滤网进行过滤处理。
本实施例中，优选的，抗氧化剂为生育酚抗氧化剂与丁基羟基茴香醚抗氧化剂。
本实施例中，优选的，植物提取物为海藻提取物与茶叶提取物。
本实施例中，优选的，保湿剂为PCA钠保湿剂与乳酸钠保湿剂。
本实施例中，优选的，寡肽为寡肽-1与寡肽-3。
本实施例中，优选的，维生素为维生素A与维生素D。
本实施例中，优选的，步骤二中搅拌器的搅拌速度为300转/分钟，搅拌时间为10分钟。
本实施例中，优选的，步骤三中反应釜加热至75摄氏度，搅拌机搅拌时间为20分钟。
本实施例中，优选的，步骤四中水浴温度为50摄氏度，加热时间为30分钟。
本实施例中，优选的，步骤七中溶媒液体的温度降至21摄氏度，降温时长为4小时，滤网为孔径为0.5μm的滤网。
实施例2
一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法，包括以下步骤：
步骤一、准备原料，按照质量份数取神经酰胺12份、甘油3份、维生素6份、皮肤促渗剂4份、抗氧化剂3份、植物提取物6份、保湿剂4份、寡肽6份、苯乙酮4份、丙二醇5份和去离子水；
步骤二、一次材料混合，将神经酰胺、甘油、植物提取物、维生素和去离子水按照重量份数投入到混合桶内，通过搅拌器进行搅拌，使得各给原料之间充分混合；
步骤三、加热搅拌，将步骤中充分混合的原料投入到反应皮肤促渗剂釜中进行加热以及通过搅拌机进行搅拌，加热时间为30分钟，直至反应釜中的原材料充分溶解，得到反应物A；
步骤四、水浴加热，将寡肽、苯乙酮和丙二醇按照重量份数投入水浴容器内进行混合水浴加热，通过搅拌器进行均匀搅拌以及进行加热，直至充分溶解得到混合物B；
步骤五、二次材料混合，反应釜中的温度降至60摄氏度，并将步骤四中得到的混合物B投入到反应釜中与反应物A进行充分搅拌，充分融合，得到混合物C；
步骤六、三次材料混合，将皮肤促渗剂、抗氧化剂和保湿剂按照重量份数加入到反应釜中内与混合物C充分搅拌，搅拌时间为20分钟，得到溶媒液体；
步骤七、降温处理，将溶媒液体通过降温设备进行降温，并通过滤网进行过滤处理。
本实施例中，优选的，抗氧化剂为叔丁基对苯二酚。
本实施例中，优选的，植物提取物为积雪草提取物。
本实施例中，优选的，保湿剂为羟乙基尿素保湿剂。
本实施例中，优选的，寡肽为寡肽-6。
本实施例中，优选的，维生素为维生素E与维生素K。
本实施例中，优选的，步骤二中搅拌器的搅拌速度为350转/分钟，搅拌时间为15分钟。
本实施例中，优选的，步骤三中反应釜加热至85摄氏度，搅拌机搅拌时间为24分钟。
本实施例中，优选的，步骤四中水浴温度为60摄氏度，加热时间为35分钟。
本实施例中，优选的，步骤七中溶媒液体的温度降至25摄氏度，降温时长为4.5小时，滤网为孔径为1μm的滤网。
实施例3
一种干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法，包括以下步骤：
步骤一、准备原料，按照质量份数取神经酰胺15份、甘油5份、维生素7份、皮肤促渗剂5份、抗氧化剂5份、植物提取物7份、保湿剂5份、寡肽7份、苯乙酮6份、丙二醇7份和去离子水；
步骤二、一次材料混合，将神经酰胺、甘油、植物提取物、维生素和去离子水按照重量份数投入到混合桶内，通过搅拌器进行搅拌，使得各给原料之间充分混合；
步骤三、加热搅拌，将步骤中充分混合的原料投入到反应皮肤促渗剂釜中进行加热以及通过搅拌机进行搅拌，加热时间为40分钟，直至反应釜中的原材料充分溶解，得到反应物A；
步骤四、水浴加热，将寡肽、苯乙酮和丙二醇按照重量份数投入水浴容器内进行混合水浴加热，通过搅拌器进行均匀搅拌以及进行加热，直至充分溶解得到混合物B；
步骤五、二次材料混合，反应釜中的温度降至65摄氏度，并将步骤四中得到的混合物B投入到反应釜中与反应物A进行充分搅拌，充分融合，得到混合物C；
步骤六、三次材料混合，将皮肤促渗剂、抗氧化剂和保湿剂按照重量份数加入到反应釜中内与混合物C充分搅拌，搅拌时间为24分钟，得到溶媒液体；
步骤七、降温处理，将溶媒液体通过降温设备进行降温，并通过滤网进行过滤处理。
本实施例中，优选的，抗氧化剂为生育酚抗氧化剂与二丁基羟基甲苯抗氧化剂。
本实施例中，优选的，植物提取物为番红花提取物与积雪草提取物。
本实施例中，优选的，保湿剂为乳酸钠保湿剂和羟乙基尿素保湿剂。
本实施例中，优选的，寡肽为寡肽-3与寡肽-5。
本实施例中，优选的，维生素为维生素A。
本实施例中，优选的，步骤二中搅拌器的搅拌速度为400转/分钟，搅拌时间为5分钟。
本实施例中，优选的，步骤三中反应釜加热至90摄氏度，搅拌机搅拌时间为25分钟。
本实施例中，优选的，步骤四中水浴温度为65摄氏度，加热时间为40分钟。
本实施例中，优选的，步骤七中溶媒液体的温度降至27摄氏度，降温时长为5小时，滤网为孔径为1.5μm的滤网。
肤感试验；
挑选40名受试者，随机分为4组，每组10人，对实施例1、实施例2和实施例3与对比例1以及对比例2的样品进行测试。
具体方法为：用清水清洗手臂表面，取适量样品均匀点涂在手臂的皮肤表面，根据使用过程中和使用后30分钟的感受，评价冻干粉的吸收速度、清爽度、保湿效果、滋润效果、柔软度和嫩滑度。评分结果如表1所示，各项评分范围为1-10分，评分越高代表样品的效果越好。
由表可知实施例3中的吸收速度、清爽度、保湿效果、滋润效果、柔软度和嫩滑度评分较高。
本发明的工作原理及使用流程：
该干细胞外泌体冻干粉溶媒制备方法中通过一次材料混合、二次材料混合、三次材料混合等步骤有利于提高原料之间的充分融合效率，流程明确以及清晰，通过制备方法中加入的皮肤促渗剂有利于提高原料成分透过表皮到达真皮层的速度，提高护肤的效果，通过抗氧化剂有利于延长溶媒储存时间，还可以保持溶媒中的各个材料的优良性能，延长溶媒的使用寿命，通过设有的保湿剂有利于提高溶媒的保湿效果以及保湿时间，通过寡肽有利于迅速补充胶原蛋白，促进新陈代谢，原蛋白的再生能力。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
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