具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。

正如背景技术部分介绍的，神经根颈椎病伴随的肢体麻木等症状缓解速度较慢，对患者的日常生活造成了较为严重的影响。为了解决如上的技术问题，本发明提供了一种甲钴胺与明仁颈痛产品的联用的药物组合物形式。

本发明第一方面，提供一种药物组合物，所述药物组合物中包括中药提取物，还包括B族维生素；

所述中药提取物的原料及配比如下：三七1-15份、川穹3-20份、延胡索2-15份、白芍3-20份、威灵仙4-25份、葛根3-20份、羌活4-25份；

所述B族维生素包括但不限于维生素B1(硫铵)、维生素B2(核黄素)、维生素B3(烟酸)、维生素B5(泛酸)、维生素B6(吡哆醇)、维生素B7(生物素)、维生素B9(叶酸)、维生素B12(钴胺素)以及上述维生素的衍生物。

本发明一种效果较好的实施方式中，所述B组维生素为甲钴胺。

本发明第二方面，提供第一方面所述药物组合物在制备抗神经根颈椎病药物中的应用。

优选的，所述药物组合物的制备方法中，所述中药提取物中的挥发油部分包合甲钴胺。

进一步的，所述包合还采用低聚糖化合物对挥发油部分及甲钴胺进行包裹。

本发明一种具体的实施方式中，所述药物组合物的制备方法如下：

(1)将三七粉碎成100-120目细粉；

(2)提取羌活、威灵仙其中的挥发油部分，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣加水煎煮1～3h，滤液备用；

(3)分别取步骤(2)中制备得到的羌活、威灵仙挥发油8-10倍体积的β-环糊精，加入最少量体积的水加热使其完全溶解成为水溶液，继续加入甲钴胺混均后放凉，分别加入羌活、威灵仙挥发油搅拌，冷藏过夜后抽滤得到包合物粉末；若抽滤后的固体团聚现象较为严重，可在35～40℃烘干后研细；

(4)葛根、白芍加水煎煮，将煎煮的水溶液及步骤(1)中得到的滤液合并，浓缩、醇沉，去除醇沉部分中的乙醇，并将剩余药液浓缩成清膏；

(5)川芎、延胡索加入乙醇溶液回流提取，回收提取液中的乙醇并通过减压浓缩将提取液制成清膏；

(6)将上述步骤(4)、(5)中的清膏合并，粉碎成细粉，并加入三七粉、包合物粉末后混合均匀得到所述药物组合物。

优选的方案中，上述步骤(3)中，所述β-环糊精加水后在50～60℃下加热溶解。

优选的方案中，上述步骤(3)中，所述羌活、威灵仙挥发油加入β-环糊精溶液后搅拌150～250r/min，搅拌时间为1～3h。

优选的方案中，上述步骤(5)中，所述乙醇溶液的浓度为75～85％。

优选的方案中，上述步骤(4)或(5)中，所述清膏的相对密度为1.25-1.30。

本发明第三方面，提供一种神经根颈椎病的治疗药物，所述治疗药物包括第一方面药物组合物。

优选的，所述治疗药物为口服制剂，进一步的，为口服固体制剂或液体制剂；所述口服固体制剂包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、散剂；所述口服液体制剂包括但不限于混悬剂、糖浆剂、合剂、酊剂、乳剂。

本发明第四方面，提供一种用于改善神经根颈椎病上肢麻木的药剂，所述药剂中包括第一方面所述组合物，或第三方面所述神经根颈椎病的治疗药物。

本发明第五方面，提供一种用于改善神经根颈椎病视觉障碍的药物，所述药剂中包括第一方面所述组合物，或第三方面所述神经根颈椎病的治疗药物。

为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例与对比例详细说明本发明的技术方案。

实施例1

本实施例中，提供一种用于治疗神经根颈椎病的药物，所述药物制备方法包括以下步骤：

所述药物中各原料及配比如下：三七15份、川穹20份、延胡索15份、白芍20份、威灵仙25份、葛根20份、羌活25份，甲钴胺0.05份(购自Sigma)。

所述药物的制备方法如下：

(1)将三七粉碎成100-120目细粉；

(2)羌活、威灵仙采用水蒸气提取法提取其中的挥发油部分，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣加水煎煮1小时，滤液备用；

(3)分别取步骤(2)中制备得到的羌活、威灵仙挥发油8倍体积的β-环糊精，加入最少量体积的水加热至55℃使其完全溶解成为水溶液，继续加入甲钴胺混均后放凉，分别加入羌活、威灵仙挥发油以200r/min搅拌2小时，冷藏过夜后抽滤得到包合物粉末。若抽滤后的固体团聚现象较为严重，可在35～40℃烘干后研细。

(4)葛根、白芍加入药材3倍体积的水煎煮，第一次煎煮2h，第二次煎煮1h，将两次煎煮的水溶液及步骤(1)中得到的滤液合并，浓缩、醇沉，去除醇沉部分中的乙醇，并将剩余药液浓缩成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；

(5)川芎、延胡索加入80％的乙醇回流提取，回收提取液中的乙醇并通过减压浓缩将提取液制成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；

(6)将上述步骤(4)、(5)中的清膏合并，粉碎成细粉，并加入三七粉、包合物粉末后混合均匀得到活性药物粉末，将所述活性药物加入硬脂酸镁、淀粉后压片得到一种片剂。

实施例2

本实施例中，提供一种用于治疗神经根颈椎病的药物，所述药物制备方法包括以下步骤：

所述药物中各原料及配比如下：三七12份、川穹18份、延胡索13份、白芍18份、威灵仙22份、葛根18份、羌活22份，甲钴胺0.053份(购自Sigma)。

所述药物的制备方法如下：

(1)将三七粉碎成100-120目细粉；

(2)羌活、威灵仙采用水蒸气提取法提取其中的挥发油部分，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣加水煎煮1.5小时，滤液备用；

(3)分别取步骤(2)中制备得到的羌活、威灵仙挥发油10倍体积的β-环糊精，加入最少量体积的水加热至60℃使其完全溶解成为溶液状态，继续加入甲钴胺混均后，待温度降至室温，分别加入羌活、威灵仙挥发油以150r/min搅拌3小时，冷藏过夜后抽滤得到包合物粉末。若抽滤后的固体团聚现象较为严重，可在35～40℃烘干后研细。

(4)葛根、白芍加入药材2倍体积的水煎煮，第一次煎煮1.5h，第二次煎煮1h，将两次煎煮的水溶液及步骤(1)中得到的滤液合并，浓缩、醇沉，去除醇沉部分中的乙醇，并将剩余药液浓缩成为在55℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；

(5)川芎、延胡索加入75％的乙醇回流提取，回收提取液中的乙醇并通过减压浓缩将提取液制成55℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；

(6)将上述步骤(4)、(5)中的清膏合并，粉碎成细粉，并加入三七粉、包合物粉末后混合均匀得到活性药物粉末，将所述活性药物加入硬脂酸镁、淀粉或微晶纤维素制备得到一种颗粒剂。

实施例3

本实施例中，提供一种用于治疗神经根颈椎病的药物，所述药物制备方法包括以下步骤：

所述药物中各原料及配比如下：三七17份、川穹23份、延胡索17份、白芍23份、威灵仙28份、葛根22份、羌活27份，甲钴胺0.07份(购自Sigma)。

所述药物的制备方法如下：

(1)将三七粉碎成100-120目细粉；

(2)羌活、威灵仙采用水蒸气蒸馏法提取其中的挥发油部分，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣加水煎煮1.5小时，滤液备用；

(3)分别取步骤(2)中制备得到的羌活、威灵仙挥发油10倍体积的β-环糊精，加入最少量体积的水加热至50℃使其完全溶解成为水溶液，继续加入甲钴胺混均后放凉，分别加入羌活、威灵仙挥发油以200r/min搅拌2小时，冷藏过夜后抽滤得到包合物粉末。若抽滤后的固体团聚现象较为严重，可在35～40℃烘干后研细。

(4)葛根、白芍加入药材3倍体积的水煎煮，第一次煎煮2h，第二次煎煮1h，将两次煎煮的水溶液及步骤(1)中得到的滤液合并，浓缩、醇沉，去除醇沉部分中的乙醇，并将剩余药液浓缩成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；

(5)川芎、延胡索加入85％的乙醇回流提取，回收提取液中的乙醇并通过减压浓缩将提取液制成45℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；

(6)将上述步骤(4)、(5)中的清膏合并，粉碎成细粉，并加入三七粉、包合物粉末后混合均匀得到活性药物粉末，将所述活性药物加入硬脂酸镁、淀粉后压片得到一种片剂。

对比例1

本发明研究过程中，还提供了一种将甲钴胺直接与明仁颈痛活性成分混合的药物，所述药物制备方法与实施例1不同之处在于：

(1)将三七粉碎成100-120目细粉；

(2)羌活、威灵仙采用水蒸气提取法提取其中的挥发油部分，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣加水煎煮1小时，滤液备用；

(3)葛根、白芍加入药材2倍体积的水煎煮，第一次煎煮2h，第二次煎煮1h，将两次煎煮的水溶液及步骤(2)中得到的滤液合并，浓缩、醇沉，去除醇沉部分中的乙醇，并将剩余药液浓缩成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；

(4)川芎、延胡索加入75％的乙醇回流提取，弃去残渣，回收提取液中的乙醇并通过减压浓缩将提取液制成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；

(5)将上述步骤(3)、(4)中的清膏合并，加入三七粉、甲钴胺混合均匀后粉成细粉，将羌活、威灵仙挥发油喷洒至上述粉体表面，即得。

有效性验证

1、药物释放效果验证

将甲钴胺对照品采用0.1mol/L生理盐水配成0.1g/L的标准工作液，将标准工作液进行稀释成一系列浓度，建立甲钴胺浓度-吸光度的标准曲线。

将实施例1-3及对比例1中的活性药物粉末，过五号筛。取筛下粉末20mg以甲醇作为溶解介质，配制成浓度10μg/mL的溶液，通过高效液相检测(乙腈-磷酸缓冲液(20：80)作为流动相)药物粉末中甲钴胺的含量，并计算药物粉末中甲钴胺的实际载药量。

另取上述筛下粉末20mg压片后，置于pH6.8的磷酸缓冲液中，转速50r/min，分别于1，2，3，4，5，6，8，12h取样1ml(取样后补足)，通过微孔滤膜过滤并检测甲钴胺累积释放量，计算药物的释放率；所述药物释放率＝药物累积释放量/药物粉末中甲钴胺的实际载药量×100％。

实施例1-3及对比例1中甲钴胺释放率结果如下表1所示：

表1药物粉末中甲钴胺释放率(％)

上述药物体外释放实验中可以看出，实施例1-3中所述甲钴胺药物量释放一半的时间约为6h，而对比例1中所述甲钴胺释放一半的时间约为3h，这与甲钴胺的半衰期数据相近，这可能表明直接将甲钴胺粉末与中药提取物混合对甲钴胺的代谢性质没有产生明显的影响。另外，从药物的释放率结果来看，对比例中所述甲钴胺在8h左右已经达到药物最大释放效果，最终药物的释放率为85％左右，实施例1-3中所述甲钴胺约在12h达到药物的最大释放效果，最终释放量达到了90％以上。

上述研究结果表明，实施例1-3中所述甲钴胺的联合使用方式，能够有效的延长甲钴胺在体内停留的时间，优化甲钴胺释放效果。通过延长甲钴胺在体内的停留时间，并采用脂质基质包覆甲钴胺，有利于增加甲钴胺在肌肉和神经等组织处的分布。

2、药物安全性验证

(1)急性毒性实验：

以临床用剂量2.2g药物粉末/天计算(70kg成人日剂量2.2g)，取体重200gSD大鼠按含500mg药物粉末/mL的浓度，将6mL混悬液12h内分三次灌胃给药(大约相当于临床治疗剂量的60倍)，每次间隔4h。连续给药一周时间，给药期间观察大鼠饮食行为变化及皮毛、饮食、体重、粪便等有无异常改变，并观察有无中毒症状及死亡。一周后称重并处死动物进行体解剖和病理组织学检查，取心、肺、肝、肾、脾、胃、肠、膀胱、肾上腺、胸腺、胰腺、甲状腺、淋巴结、子宫、卵巢、睾丸、前列腺、脑等做组织学观察，未发现异常病理性改变，提示本发明的中药组合物临床应用剂量安全。

(2)长期毒性实验：

将SD大鼠随机分为高(300mg药物粉末/mL)、中(100mg药物粉末/mL)、低(25mg药物粉末/mL)剂量三个剂量组，每组雌雄各半，每日上午8时、下午4时进行灌胃2mL给药，连续给药两个月。给药期间，观察大鼠进食、体重、外观及行为活性，两个月后处死大鼠并进行定血液学及生化相关指标并行系统解剖及组织病理学检查。检查结果表明大鼠情况良好，脏器及血液指标未见明显变化，表明本发明中分散体的安全性能良好。

3、有效性验证

本实施例通过药物代谢动力学实验对大鼠肌肉组织中甲钴胺的分布含量进行了测定，将SD大鼠随机分为甲钴胺组(0.2mg/mL，为实施例1及对比例1中甲钴胺的两倍剂量)、实施例1组(100mg药物粉末/mL)、对比例1组(100mg药物粉末/mL)，每组雌雄各半，每日上午8时、下午4时进行灌胃2mL给药，连续给药一周时间。一周后采用心脏灌注方式处死大鼠，分别取颈部肌肉1.0g，加入二倍体积的Tris缓冲液匀浆并经HPLC进行检测。检测结果如下表2所示：

表2

从上述数据可以看出，虽然甲钴胺组的给药剂量显著高于对比例及实施例，但药物实际在肌肉中的积累量不高。对比例1中将甲钴胺药物粉末与明仁颈痛产品直接混合，甲钴胺在颈部肌肉的药物积累量反而高于甲钴胺给药组，这说明了明仁颈痛与甲钴胺联用可以促进甲钴胺成分向肌肉组织分布。实施例1优化了甲钴胺的包覆形式，进一步提高了甲钴胺在肌肉中的累积量，促进药物更充分的作用于神经组织，这意味着本发明提供的药物联用制剂有助于甲钴胺更好发挥神经修复作用。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。