类芽孢杆菌属(Paenibacillus)菌株及其使用方法

文档序号:1942333 发布日期:2021-12-07 浏览:8次 >En<

阅读说明:本技术 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)菌株及其使用方法 (Paenibacillus (Paenibacillus) strains and methods of use thereof ) 是由 J·博 A·格尔茨 A·纽曼 P·施温特克 C·S·泰勒 田东兰 B·A·塔格 于 2020-03-05 设计创作,主要内容包括:本发明提供了一种包含含有杀镰孢菌素和十三肽菌素的类芽孢杆菌属种菌株的生物纯的培养物或其无细胞制品的组合物;其中所述杀镰孢菌素用由显示出与SEQ ID NO:3至少90.5%序列同一性的DNA序列编码的fusA的杀镰孢菌素合成酶基因产生;和所述十三肽菌素用由显示出与SEQ ID NO:7至少90.0%序列同一性的DNA序列编码的triE的非核糖体肽合成酶(NRPS)基因产生。还提供了处理农业植物以防治病害的方法和用所公开的组合物增加农业植物的活力和/或作物产量的方法。(The present invention provides a composition comprising a biologically pure culture or cell-free preparation thereof of a strain of a Paenibacillus species comprising a fusaricidin and a tridecapeptide; wherein the fusaricidin is produced with a fusaricidin synthase gene encoding fusasa that is encoded by a DNA sequence exhibiting at least 90.5% sequence identity to SEQ ID No. 3; and said tridecapeptide is produced with the non-ribosomal peptide synthetase (NRPS) gene of triE encoded by a DNA sequence showing at least 90.0% sequence identity with SEQ ID NO 7. Also provided are methods of treating agricultural plants to control diseases and methods of increasing vigor and/or crop yield of agricultural plants using the disclosed compositions.)

类芽孢杆菌属(Paenibacillus)菌株及其使用方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年3月7日提交的美国临时专利申请号62/815,069的优先权,其全部内容通过引用的方式全文纳入本文。

技术领域

本发明涉及细菌菌株及其防治植物病害和增加植物活力和作物产量的能力的领域。具体而言,本发明涉及产生杀镰孢菌素和十三肽菌素(tridecaptin)的类芽孢杆菌属种(Paenibacillus sp.)菌株及其维持植物健康和改善植物生长的用途。

引用以电子方式提交的序列表

序列表的正式副本通过EFS-Web、作为ASCII格式的序列表以电子方式提交,其文件名为“BCS189006WO_ST25.txt”,创建于2020年2月25日,大小为185千字节,并与说明书一同提交。该ASCII格式文件中包含的序列表是说明书的一部分,其全部内容通过引用的方式纳入本文。

背景技术

杀真菌剂有多种用途,包括用于作物保护;作为食品、饲料和化妆品防腐剂;以及作为用于人和兽医应用的治疗剂。在发达国家和发展中国家均存在作物减产、食物传播的疾病以及人和动物的真菌感染的问题。

合成杀虫剂或杀真菌剂通常是非特异性的,因此可作用于靶生物体以外的生物体,包括其他天然存在的有益生物体。由于其化学性质,它们也可能是有毒的和非生物可降解的。全世界的消费者越来越意识到与化学品残留相关的潜在环境问题和健康问题,特别是在食品产品中。这已经导致针对减少化学(即合成)农药的使用或至少减少其数量的不断增加的消费者压力。因此,需要管理食物链需求,同时仍允许有效的害虫防治。

另一个随着合成杀虫剂或杀真菌剂的使用而出现的问题是,重复和单独施用杀虫剂或杀真菌剂通常导致对抗性病原微生物的选择。通常,这样的菌株还对其他具有相同作用模式的活性成分具有交叉抗性。之后,使用所述活性化合物来有效防治病原体将不再可能。然而,具有新作用机制的活性成分难以开发并且开发成本高。

病原体种群中抗性发展的风险以及对环境和人健康的担忧促进了对鉴定用于管理植物病害的合成杀虫剂和杀真菌剂的替代方案的兴趣。生物防治剂的使用是一种替代方案。

类芽孢杆菌属是一种GC含量低、形成内生孢子、革兰氏阳性细菌属(厚壁菌门(Firmicutes))。属于该属的细菌是工业相关胞外酶和抗微生物物质(包括非核糖体肽类)的高产生产者。类芽孢杆菌属内的物种和菌株之间存在相当大的可变性,其中只有某些菌株在防治植物病原体和促进植物生长方面表现出功效。

需要具有增强的杀真菌活性和改善植物生长和活力的能力的类芽孢杆菌属种菌株。非常需要提高现有杀真菌剂的功效,并开发不易产生真菌抗性的替代品。

发明内容

本发明涉及包含含有杀镰孢菌素和十三肽菌素的类芽孢杆菌属种菌株的生物纯的培养物或其无细胞制品的组合物;其中所述类芽孢杆菌属种菌株包含由显示出与SEQ IDNO:3至少90.5%序列同一性的DNA序列编码的fusA的杀镰孢菌素合成酶基因;和所述类芽孢杆菌属种菌株包含由显示出与SEQ ID NO:7至少90.0%序列同一性的DNA序列编码的triE的非核糖体肽合成酶(NRPS)基因。

在某些方面,fusA的杀镰孢菌素合成酶基因由包含SEQ ID NO:3的DNA序列编码或由编码相同氨基酸序列的其简并核苷酸序列编码。在其他方面,triE的NRPS基因由包含SEQID NO:7的DNA序列编码或由编码相同氨基酸序列的其简并核苷酸序列编码。

在一些实施方案中,所述组合物包含杀镰孢菌素A、杀镰孢菌素B、杀镰孢菌素C、杀镰孢菌素D、LiF05a、LiF05b、LiF06a、LiF06b、LiF07a和/或LiF07b。

在其他实施方案中,所述组合物有效防治由选自灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、黄瓜白粉菌(Sphaerotheca fuliginea)和小麦叶锈菌(Puccinia triticina)的真菌引起的植物病害。

在某些方面,所述类芽孢杆菌属种菌株为类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724或其杀真菌的突变菌株。

在其他方面,所述组合物包含类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724或其杀真菌的突变菌株的发酵产物。

在一个方面,所述杀真菌的突变菌株的基因组序列与类芽孢杆菌属种菌株NRRLB-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724具有大于约90%的序列同一性,以及/或者所述杀真菌的突变菌株具有与类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724相当或更好的杀真菌活性和/或杀镰孢菌素水平。

在一些实施方案中,所述类芽孢杆菌属种菌株还包含固氮基因簇;并且所述固氮基因簇包含由显示出与SEQ ID NO:10至少96.9%序列同一性的DNA序列编码的nifB的固氮基因。

在一个实施方案中,所述固氮基因簇包含由包含SEQ ID NO:10的DNA序列编码或由编码相同氨基酸序列的其简并核苷酸序列编码的nifB的固氮基因。

在其他实施方案中,所述固氮基因簇的表达有助于增强植物生长、植物活力和/或作物产量。在又其他实施方案中,所述类芽孢杆菌属种菌株包含由显示出与SEQ ID NO:1至少97.3%序列同一性的DNA序列编码的fusA的杀镰孢菌素合成酶基因和所述类芽孢杆菌属种菌株包含由显示出与SEQ ID NO:5至少97.5%序列同一性的DNA序列编码的triE的NRPS基因。

在一个方面,fusA的杀镰孢菌素合成酶基因由包含SEQ ID NO:1的DNA序列编码或由编码相同氨基酸序列的其简并核苷酸序列编码。在另一个方面,triE的NRPS基因由包含SEQ ID NO:5的DNA序列编码或由编码相同氨基酸序列的其简并核苷酸序列编码。

在某些方面,所述类芽孢杆菌属种菌株为类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724或其杀真菌的突变菌株。

在其他方面,所述组合物包含类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724或其杀真菌的突变菌株的发酵产物。

在一些实施方案中,所述杀真菌的突变菌株的基因组序列与类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724具有大于约90%的序列同一性,以及/或者所述杀真菌的突变菌株具有与类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724相当或更好的杀真菌活性和/或杀镰孢菌素水平。

在某些方面,本发明提供了处理农业植物以防治病害的方法,其中所述方法包括将有效量的本文公开的组合物施用于所述植物、所述植物的部分和/或所述植物的位置(locus)。

在一个方面,所述方法包括将组合物施用于叶片植物部分。在另一个方面,将组合物以每公顷约1×1010至约1×1012菌落形成单位(CFU)的类芽孢杆菌属种菌株或以每公顷约0.5kg至约5kg发酵固体施用。在又另一个方面,所述病害是真菌病害或细菌病害。

在其他实施方案中,本发明提供了增加农业植物的活力和/或作物产量的方法,其中用有效量的本文公开的组合物处理植物、植物繁殖体、植物的种子和/或植物正在生长或打算生长的位置。

在一个实施方案中,所述处理作为沟内处理、种子处理和/或叶片处理进行。

在另一个实施方案中,农业植物选自大豆、玉米、小麦、黑小麦、大麦、燕麦、黑麦、油菜、粟、稻、向日葵、棉花、糖用甜菜、仁果、核果、柑橘、香蕉、草莓、蓝莓、扁桃、葡萄、芒果、木瓜、花生、马铃薯、番茄、胡椒、葫芦、黄瓜、甜瓜、西瓜、大蒜、洋葱、西兰花、胡萝卜、卷心菜、菜豆、干豆、油菜籽、豌豆、小扁豆、苜蓿、车轴草(trefoil)、三叶草(clover)、亚麻、象草、牧草、莴苣、甘蔗、茶、烟草和咖啡;每一种都为其天然或遗传修饰的形式。

在又另一个实施方案中,本发明涉及用本文公开的组合物处理的种子。

附图说明

图1描绘了与其他几种类芽孢杆菌属种菌株相比,使用类芽孢杆菌属种菌株NRRLB-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724实现的对黄瓜白粉菌(PODOXA)的防治。

图2描绘了通过用类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRLB-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724的全肉汤培养物进行浸透处理而在番茄植物中产生的植物生长促进作用。

具体实施方式

本文所述的微生物和特定菌株,除非另外特别说明,均从自然界分离并在人工条件下生长,例如在摇瓶培养中或通过放大制造过程(例如在生物反应器中)以例如使生物活性代谢物的产生最大化。在这样的条件下的生长导致菌株“驯化”。通常,这样的“驯化”菌株与其天然存在的对应菌株的区别在于,“驯化”菌株被培养为均质种群(homogenouspopulation),其不经受自然环境中存在的选择压力,但是经受人工选择压力。

如本文所使用的,本说明书和权利要求书中所使用的动词“包含”及其变化形式以其非限制性的意义用于表示包括该词之后的项目,但不排除未具体提及的项目。此外,不定冠词“一(a)”或“一个(an)”对一个要素的引用并不排除存在一个以上要素的可能性,除非上下文明确要求存在一个且仅存在一个要素。因此,不定冠词“一(a)”或“一个(an)”通常表示“至少一个”。

在某些方面,本发明的类芽孢杆菌属种菌株选自以下任一种:土地类芽孢杆菌(P.terrae)、巴西类芽孢杆菌(P.brasilensis)、多粘类芽孢杆菌(P.polymyxa)或皮奥利亚类芽孢杆菌(P.peoriae)。在一个方面,本发明的类芽孢杆菌属种菌株是土地类芽孢杆菌。在另一个方面,本发明的类芽孢杆菌属种菌株是巴西类芽孢杆菌。在另一个方面,本发明的类芽孢杆菌属种菌株是皮奥利亚类芽孢杆菌。在另一个方面,本发明的类芽孢杆菌属种菌株是多粘类芽孢杆菌。

在一个实施方案中,提供了类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724的突变菌株。术语“突变的”是指衍生自类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRLB-67724的遗传变体。在一个实施方案中,所述突变体具有类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724的一个或多个或全部识别(功能性)特征。在一个特定的实例中,突变体或其发酵产物至少与亲代类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724一样防治真菌、卵菌和/或细菌(作为识别功能性特征)。这种突变体是这样的遗传变体,即其基因组序列与类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724具有大于约85%、大于约90%、大于约95%、大于约98%或大于约99%的序列同一性。突变体可以通过使用化学品或辐照处理类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724的细胞获得;或通过从类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724细胞种群选择自发突变体(如噬菌体抗性或抗生素抗性突变体)获得;通过基因组重排获得,如下所述;或通过本领域技术人员熟知的其他方法获得。

通过使用称为原生质体融合的方法,可以促进类芽孢杆菌属菌株之间的基因组重排。该方法始于营养杆状细菌细胞(bacillary cell)形成原生质体。肽聚糖细胞壁的去除(通常使用溶菌酶和渗透稳定剂)导致原生质体的形成。该过程在光学显微镜下可见,呈球形细胞。然后加入PEG(聚乙二醇)诱导原生质体融合,使两个或多个细胞的遗传内容物接触,从而促进重组和基因组重排。然后重新分配融合的细胞,并在固体生长培养基上回收。在恢复过程中,原生质体重建肽聚糖细胞壁,转变回杆状细菌形状。参见Schaeffer,et.al.,(1976)PNAS USA,vol.73,6:2151-2155)。

在某些方面,本发明涉及产生杀镰孢菌素的类芽孢杆菌属种菌株。杀镰孢菌素是具有15-胍基-3-羟基十五酸(GHPD)尾的缩酚酸肽(depsipeptide)家族,以及它们的线性对应物。杀镰孢菌素的特定的保守特征是该GHPD尾,以及序列中六个氨基酸中的三个:(1)苏氨酸,(4)苏氨酸和(6)丙氨酸。

Nakajima等人(J.Antibiot.1972,25,243-247)在70年代中期首次发现杀镰孢菌素但是未对其进行表征,Kurusu等人(J.Antibiot.,1987,40,1506-1514)在20世纪80年代末描述了杀镰孢菌素。Kajimura等人(J.Antibiot.,1996,49,129-135;J.Antibiot.,199750,220-228)、Kuroda等人(Heterocycles,2000,53,1533-1549;J.Mass Spectrom.,2001,36,30-37)和Beatty等人(Can.J.Microbiol.,2002,48,159-169)在20世纪90年代中期到21世纪早期进一步研究了杀镰孢菌素。在这个阶段的大量研究中,这些化合物根据作者被命名若干次(杀镰孢菌素A还称为LiF04a、Gatavalin或KT-6291A)。尽管关于这个主题有许多公开出版物,每次记载了来自24种已知杀镰孢菌素的相同组的经选择的化合物。

在关于所述主题的一段平静期之后,Vater等人(J.Am.Soc.Mass Spectrom.,2015,26,1130-1141)描述了通过质谱对杀镰孢菌素的结构阐释,并描述了该家族的若干类似物。Vater等人鉴定了一类新的具有7个氨基酸的杀镰孢菌素样化合物(即在肽序列中,额外的丙氨酸连接至(4)苏氨酸残基)。本文使用的术语“非环状类似物”指对应于杀镰孢菌素或杀镰孢菌素样化合物,但是缺少酯键而产生线性结构的化合物。

杀镰孢菌素的氨基酸链连接在一起并且由非核糖体肽合成酶(NRPS)修饰。多结构域NRPS由最高达15,000个氨基酸组成,因此被认为是自然界中最长的蛋白质之一(Schwarzer et al.,(2003)Nonribosomal Peptides:From Genes toProducts.Nat.Prod.Rep.20,275-287)。NRPS掺入不限于由核糖体翻译的21种标准氨基酸,这种混杂性促成了非核糖体肽的巨大的结构多样性和生物活性(Li and Jensen,(2008).Nonribosomal biosynthesis of fusaricidins by Paenibacillus polymyxa PKB1involves direct activation of a d-amino acid.Chem.Biol.15,118-127)。

在多粘类芽孢杆菌E68中,已表征杀镰孢菌素生物合成基因簇(fusGFEDCBA),并观察到NRPS编码序列(该基因簇中的最大编码DNA序列(CDS))编码6个模块的肽(Choi etal.,Identification and Functional Analysis of the Fusaricidin BiosyntheticGene of Paenibacillus polymyxa E681.Biochem.Biophys.Res.Commun.365,89-95;Liand Jensen,Identification and Functional Analysis of the FusaricidinBiosynthetic Gene of Paenibacillus polymyxa E681.Biochem.Biophys.Res.Commun.365,89-95;Li et al.,(2013).Promoter Analysis and Transcription Regulation offus Gene Cluster Responsible for Fusaricidin Synthesis of Paenibacilluspolymyxa SQR-21.Appl.Microbiol.Biotechnol.97,9479-9489)。所述生物合成簇包括其他负责脂质部分的生物合成的CDS,但是不包含转运蛋白基因(Li and Jensen,(2008).Nonribosomal biosynthesis of fusaricidins by Paenibacillus polymyxa PKB1involves direct activation of a d-amino acid.Chem.Biol.15,118-127)。在多粘类芽孢杆菌中,鉴定了fus操纵子的启动子,并且证明该启动子与转录抑制因子(AbrB)结合,之前的研究暗示所述转录抑制因子是孢子形成的调控因子;这是重要的,因为观察到杀镰孢菌素在孢子形成过程中被合成,因此协调微生物的次级代谢与其生命周期(Li et al.,(2013).Promoter Analysis and Transcription Regulation of fus Gene ClusterResponsible for Fusaricidin Synthesis of Paenibacillus polymyxa SQR-21.Appl.Microbiol.Biotechnol.97,9479-9489)。

在其他方面,本发明涉及产生十三肽菌素的类芽孢杆菌属种菌株。十三肽菌素是一组类似于多粘菌素的线性阳离子脂肽。酰基十三肽于1978年首次分离,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有抗微生物活性。Shoji,Junichi et al.,Journal of Antibiotics(1978),31(7),646-51。最近,十三肽菌素A1已被表征为土地类芽孢杆菌的菌株。Lohans,Christopher T.et al.,ChemBioChem(2014),15(2),243-249。

等位基因多样性通常被认为是产生化学多样性的原因。然而,fus簇的有趣特征在于,杀镰孢菌素的多样性(区别为它们掺入的氨基酸(Tyr、Val、Ile、allo-Ile、Phe))可通过fusA的单个等位基因产生;潜在的机制在于,负责氨基酸识别的NRPS A结构域放宽了底物特异性(Han et al.,(2012).Site-Directed Modification of the Adenylation Domainof the Fusaricidin Nonribosomal Peptide Synthetase for Enhanced Production ofFusaricidin Analogs.Biotechnol.Lett.34,1327-1334;Mousa et al.,(2015)Biodiversity of Genes Encoding Anti-Microbial Traits within Plant AssociatedMicrobes,Front Plant Sci.2015;6:231)。

在某些实施方案中,所述组合物包含类芽孢杆菌属种菌株的生物纯的培养物,所述类芽孢杆菌属种菌株包含:由显示出与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:1至少90.5%序列同一性的DNA序列编码的fusA的杀镰孢菌素合成酶基因,由显示出与SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:5至少90.0%序列同一性的DNA序列编码的triE的非核糖体肽合成酶(NRPS)基因,和/或由显示出与SEQ ID NO:10至少96.9%序列同一性的DNA序列编码的nifB的固氮基因。在一些方面,类芽孢杆菌属种菌株的fusA、triE或nifB与各自的序列(即,fusA的SEQ ID NO:1或3;triE的SEQ ID NO:5或7;nifB的SEQ ID NO:10)之间的序列同一性为至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%。在其他方面,类芽孢杆菌属种菌株的fusA、triE或nifB与各自的序列(即,fusA的SEQ ID NO:1或3;triE的SEQ ID NO:5或7;nifB的SEQ ID NO:10)之间的序列同一性为约80%至100%、约85%至100%、约90%至100%或约95%至100%。

由于遗传密码的简并性,不同的核苷酸密码子可用于编码特定的氨基酸。宿主细胞经常表现出密码子使用的优选模式。优选构建结构核酸序列以利用特定宿主细胞的密码子使用模式。这通常增强了结构核酸序列在转化的宿主细胞中的表达。本文公开的任何核酸序列可以被修饰以反映包含它们的宿主细胞或生物体的优选密码子使用。

本文所述核酸序列中的其他变异可编码与它们被工程化的蛋白质相比具有等同或优越特性的蛋白质。突变可以包括缺失、插入、截短、置换、融合、基序序列的重排等。

核酸序列的突变可以以特定或随机的方式引入,这两种方式都是分子生物学领域技术人员熟知的方式。存在多种定点突变技术,通常使用寡核苷酸在核酸序列的特定位置引入突变。实例包括单链拯救(rescue)(Kunkel et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,82:488-492,1985)、独特位点消除(Deng and Nickloff,Anal.Biochem.200:81,1992)、缺口保护(Vandeyar,et al.Gene 65:129-133,1988)和PCR(Costa et al.,MethodsMol.Biol.57:31-44,1996)。随机或非特异性突变可能由化学试剂产生(一般综述参见Singer and Kusmierek,Ann.Rev.Biochem.52:655-693,1982),如亚硝基胍(Cerda-Olmedoet al.,J.Mol.Biol.33:705-719,1968;Guerola,et al.Nature New Biol.230:122-125,1971)和2-氨基嘌呤(Rogan and Bessman,J.Bacteriol.103:622-633,1970);或通过生物学方法产生,如通过致突变菌株(Greener,et al.Mol.Biotechnol.7:189-195,1997)。

这些修饰可能导致氨基酸序列的保守性或非保守性改变。保守性改变是由结构核酸序列中的添加、缺失、置换等引起,其不改变蛋白质的最终氨基酸序列。在一个优选的实施方案中,编码的蛋白具有20至500个保守性改变,更优选15至300个保守性改变,甚至更优选10至150个保守性改变,最优选5至75个保守性改变。

非保守性改变包括导致氨基酸序列改变的添加、缺失和置换。在一个优选的实施方案中,编码的蛋白具有10至250个非保守性氨基酸改变,更优选5至100个非保守性氨基酸改变,甚至更优选2至50个非保守性氨基酸改变,最优选1至30个非保守性氨基酸改变。

进行上述改变的其他方法记载于Ausubel et al.,Current Protocols inMolecular Biology,John Wiley and Sons,Inc.,1995,Bauer et al.,Gene,37:73,1985;Craik,BioTechniques,3:12-19,1985;Frits Eckstein et al.,Nucleic AcidsResearch,10:6487-6497,1982;Sambrook,et al.,Molecular Cloning:A LaboratoryManual,Second Edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.,1989,Smith,et al,In:Genetic Engineering:Principles and Methods,Setlow etal.,Eds.,Plenum Press,N.Y.,1-32,1981,and Osuna,et al.,Critical Reviews InMicrobiology,20:107-116,1994中。

可以对本发明的蛋白质序列和编码它们的核酸片段进行修饰,以保持分子的所需性质。以下是基于改变蛋白质的氨基酸序列以产生等同物或可能改进的分子的讨论。

蛋白质序列中的某些氨基酸可以被置换为其他氨基酸,而不会明显损失所需的活性。

因此,预期可在所公开的蛋白质序列的肽序列或其相应的核酸序列中进行各种改变,而不明显损失生物活性。

进行此类改变时,可考虑氨基酸的亲水性指数。亲水性氨基酸指数在赋予蛋白质相互作用的生物学功能中的重要性在本领域中是众所周知的(yte and Doolittle,J.Mol.Biol.,157:105-132,1982)。公认的是,氨基酸的相对亲水性特性有助于所得蛋白质的二级结构,这反过来又定义了蛋白质与其他分子的相互作用,例如酶、底物、受体、DNA、抗体、抗原等。

根据每个氨基酸的疏水性和电荷特性,为其指定了亲水性指数。它们是:异亮氨酸(+4.5);缬氨酸(+4.2);亮氨酸(+3.8);苯丙氨酸(+2.8);半胱氨酸/半胱氨酸(+2.5);蛋氨酸(+1.9);丙氨酸(+1.8);甘氨酸(-0.4);苏氨酸(-0.7);丝氨酸(-0.8);色氨酸(-0.9);酪氨酸(-1.3);脯氨酸(-1.6);组氨酸(-3.2);谷氨酸/谷氨酰胺/天冬氨酸/天冬酰胺(-3.5);赖氨酸(-3.9);和精氨酸(-4.5)。

本领域已知某些氨基酸可以被具有相似的亲水性指数或评分的其他氨基酸置换,并且仍然产生具有相似的生物活性的蛋白质,即仍然获得生物功能性蛋白质。在进行这种改变时,优选置换其亲水性指数在±2以内的氨基酸,更优选在±1以内的氨基酸,最优选在±0.5以内的氨基酸。

本领域还理解,可以基于亲水性有效地进行类似氨基酸的置换。美国专利号4,554,101(Hopp)指出,蛋白质的最大局部平均亲水性由其相邻氨基酸的亲水性决定,与蛋白质的生物性质相关。以下为指定给氨基酸的亲水性值:精氨酸/赖氨酸(+3.0);天冬氨酸/谷氨酸(+3.0±1);丝氨酸(+0.3);天冬酰胺/谷氨酰胺(+0.2);甘氨酸(0);苏氨酸(-0.4);脯氨酸(-0.5±1);丙氨酸/组氨酸(-0.5);半胱氨酸(-1.0);蛋氨酸(-1.3);缬氨酸(-1.5);亮氨酸/异亮氨酸(-1.8);酪氨酸(-2.3);苯丙氨酸(-2.5);和色氨酸(-3.4)。

应当理解,氨基酸可以被另一个具有相似亲水性评分的氨基酸置换,并且仍然得到具有相似生物活性的蛋白质,即仍然得到生物功能性蛋白质。在进行这种改变时,优选置换其亲水性指数在±2以内的氨基酸,更优选在±1以内的氨基酸,最优选在±0.5以内的氨基酸。

如上所述,因此,氨基酸取代基于氨基酸侧链取代基的相对相似性,例如它们的疏水性、亲水性、电荷、大小等。考虑各种前述特征的示例性置换是本领域技术人员熟知的,并包括:精氨酸和赖氨酸;谷氨酸和天冬氨酸;丝氨酸和苏氨酸;谷氨酰胺和天冬酰胺;以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。

本发明还涵盖了通过将所公开的类芽孢杆菌属种菌株或其突变体或其无细胞制品或其代谢物给予至植物或植物部分(如叶、茎(stem)、花、果实、根或种子)或通过施用到植物或植物部分生长的位置(如土壤)来处理植物以防治植物病害的方法。

在根据本发明的方法中,可将含有所公开的类芽孢杆菌属种菌株或其杀真菌的突变体的组合物施用于生长在用于生长植物的任何类型的介质(例如土壤、蛭石、碎纸板和水)中的任何植物或任何植物的任何部分,或施用到气生生长的植物或植物的部分,例如兰花或鹿角蕨。所述组合物可以例如通过喷洒(spraying)、雾化(atomizing)、蒸发(vaporizing)、散播(scattering)、粉化(dusting)、添水(watering)、喷射(squirting)、喷洒(sprinkling)、倾注(pouring)或熏蒸(fumigating)来施用。如上文已经说明,可在目的植物所在的任何需要的场所进行施用,例如农业、园艺、森林、种植园、果园、苗圃、有机种植作物、草皮草和城市环境。

根据本领域公知的方法,包括通过使用培养基和下文实施例中所述的其他方法,通过培养所公开的类芽孢杆菌属种菌株或从其衍生的杀真菌的突变体(菌株)来获得本发明的组合物。常规的大规模微生物培养方法包括深层发酵、固态发酵或液体表面培养。接近发酵结束时,随着营养物的消耗,细胞开始从生长期转变为孢子形成期,因此最终发酵产物主要是孢子、代谢物和残留的发酵培养基。孢子形成是类芽孢杆菌属的天然生命周期的一部分,并且通常由细胞响应于营养物限制而开始。设置发酵以获得高水平的菌落形成单位并促进孢子形成。发酵产生的培养基中的细菌细胞、孢子和代谢物可直接使用,或通过常规工业方法(例如离心、正切流动过滤、深层过滤和蒸发)浓缩。

本发明的组合物包括发酵产物。在一些实施方案中,清洗浓缩发酵液(例如通过渗滤方法)以除去残留发酵液和代谢物。本文使用的术语“肉汤浓缩物”指已如上文所述由常规工业方法浓缩,但是以液体形式保留的全肉汤(发酵液)。本文使用的术语“发酵固体”指发酵液干燥之后保留的固体材料。本文使用的术语“发酵产物”指全肉汤、肉汤浓缩物和/或发酵固体。本发明的组合物包括发酵产物。

使用常规干燥过程或方法(例如喷雾干燥、冷冻干燥、盘干燥、流化床干燥、转鼓干燥或蒸发),添加或不添加载体,可干燥发酵液或肉汤浓缩物。

所产生的干燥产物可进一步加工,例如通过制粉(milling)或制粒(granulation),以达到特定的颗粒大小或物理形式。还可在干燥后添加下文所述的载体。

本发明菌株的发酵液的无细胞制品可通过本领域已知的任何方法(例如发酵液的提取、离心和/或过滤)获得。本领域技术人员将了解,所谓的无细胞制品可能无法不包含细胞,而是在很大程度上没有细胞或基本上没有细胞,这取决于除去细胞所使用的技术(例如离心速度)。所得的无细胞制品可被干燥和/或用有助于将其施用到植物或植物生长培养基的组分来配制。上文所述的发酵液的浓缩方法和干燥技术也适用于无细胞制品。

在一个实施方案中,发酵产物包含至少约1×104菌落形成单位(CFU)的微生物(例如类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723或类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724或其杀真菌的突变菌株)/mL发酵液。在另一个实施方案中,发酵产物包含至少约1×105菌落形成单位(CFU)微生物/mL发酵液。在另一个实施方案中,发酵产物包含至少约1×106CFU微生物/mL发酵液。在又另一个实施方案中,发酵产物包含至少约1×107CFU微生物/mL发酵液。在另一个实施方案中,发酵产物包含至少约1×108CFU微生物/mL发酵液。在另一个实施方案中,发酵产物包含至少约1×109CFU微生物/mL发酵液。在另一个实施方案中,发酵产物包含至少约1×1010CFU微生物/mL发酵液。在另一个实施方案中,发酵产物包含至少约1×1011CFU微生物/mL发酵液。

本发明的组合物可以本身的形式来使用,或根据它们特定的物理和/或化学性质,以它们的制剂形式或从其制备的使用形式来使用,例如气雾剂、胶囊悬剂、冷雾化浓缩物、热雾化浓缩物、胶囊颗粒剂、微粒剂(fine granules)、用于处理种子的流动浓缩物、即用型溶液剂、粉剂(dustable powder)、乳化浓缩物、水包油乳剂、油包水乳剂、大颗粒剂、小颗粒剂、油分散粉剂、油混溶性流动浓缩物、油混溶性液剂、气体(压力下)、产气产品、发泡剂、糊剂、农药包被的种子、悬浮浓缩物、油分散液、悬乳剂浓缩物、可溶性浓缩物、悬浮剂、可湿性粉剂、可溶性粉剂、粉剂和颗粒剂(dusts and granules)、水溶性和水分散颗粒剂或片剂、用于处理种子的水溶性和水分散粉剂(powder)、可湿性粉剂、浸透活性成分的天然产物和合成物质,以及用于种子的聚合物质中和包被材料中的微囊剂,以及ULV冷雾化和热雾化制剂。

在一些实施方案中,本发明的组合物是液体制剂。液体制剂的非限制性实例包括悬浮浓缩物和油分散液。在其他实施方案中,本发明的组合物是固体制剂。液体制剂的非限制性实例包括冻干粉末和喷雾干燥的粉末。

根据本发明可处理所有的植物和植物部分。在本发明上下文中,植物可理解为意指全部植物和植物种群,例如需要的和不需要的野生植物或作物植物(包括天然存在的作物植物)。作物植物可以是通过传统育种和优化方法或通过生物技术和重组方法,或这些方法的组合而获得的植物,包括转基因植物,并且包括受到或不受植物育种者权利保护的植物品种。植物部分可理解为意指植物的所有地上和地下部分以及器官,例如嫩枝(shoot)、叶、花和根,可提及的实例为叶、针叶、秆、茎、花、子实体、果实和种子、以及根、块茎和根茎。植物部分还包括作物材料以及营养繁殖和有性繁殖材料,例如插条、块茎、根茎、接枝(slip)和种子。

如上文已经提及的,可根据本发明处理所有植物及其部分。在一个优选的实施方案中,处理野生的或通过传统生物育种法(例如杂交或原生质体融合)获得的植物物种和植物品种以及它们的部分。在另一个优选的实施方案中,处理通过重组方法(如果适合,与传统方法结合)获得的转基因植物和植物品种(遗传修饰的生物体)以及它们的部分。术语“部分”或“植物的部分”或“植物部分”已在上文中解释。特别优选地根据本发明处理在每种情况下均是市售的或使用中的植物品种的植物。植物品种理解为意指具有新性状的植物,其通过传统育种、通过诱变或通过重组DNA技术培育。植物品种可表现为品种、小种(race)、生物型和基因型的形式。

使用本发明的组合物进行的对植物和植物部分的处理可直接进行,或通过使用常规处理方法作用于环境、生境或贮存空间,例如通过浸渍(dipping)、喷洒、雾化、成雾(misting)、蒸发(evaporating)、粉化、成雾(fogging)、散播、起泡(foaming)、涂抹(painting on)、散播(spreading)、注射(injecting)、浸透(drenching)、滴灌溉(trickleirrigation),以及在繁殖材料的情况下,特别是在种子的情况下,还通过干种子处理法、湿种子处理法、浆处理法、通过形成外壳、通过用一种或多种包衣来包被等。还可以通过超低容积法施用活性物质,或将活性物质制剂或活性物质本身注射到土壤中。

优选的植物的直接处理为叶施用处理,即,将根据本发明的组合物施用到叶片上,可使处理频率和施用率与所讨论的病原体的感染压力相匹配。

优选的植物为那些有用的植物、观赏植物、草皮,通常使用的在公共场合和家庭中被用作观赏植物的树木,以及林业树木。林业树木包括用于产生木材、纤维素、纸的树木,以及从树木部分产生的产品。

本申请上下文中使用的术语“农业植物”是指这样的作物植物,即用作用于获得食品、饲料、燃料或用于工业目的的植物。

术语“植物繁殖材料”和“植物繁殖体”应理解为表示植物的所有生殖部分,例如种子和营养植物材料,例如插条和块茎(例如马铃薯),其可用于植物的增殖。这包括种子、根、果实、块茎、鳞茎、根茎、嫩枝、芽和植物的其他部分。还可提及发芽后或从土壤中出苗后待移植的幼苗和幼株。移植前,还可通过浸泡或灌注对这些幼株进行全部或部分处理。

术语“位置”应理解为正在生长或打算生长植物的任何类型的环境、土壤、区域或材料,以及对植物和/或其繁殖体的生长和发育有影响的环境条件(如温度、水的可用性、辐射)。此外,术语“位置”应理解为正在生长或可能生长害虫的植物、种子、土壤、区域、材料或环境。

“作物产量”是植物状况的指标,而“作物”应理解为收获后进一步利用的任何植物或植物产物,例如,适当意义上的果实、蔬菜、坚果、谷物、种子、木材(例如,在造林植物的情况下)、花(例如,在园艺植物、观赏植物的情况下)等,即植物所产生的任何具有经济价值的东西。

根据本发明,植物,特别是农业、造林和/或观赏植物的“增加的产量”是指与在相同条件下但不施用本发明的组合物所产生的植物的相同产物的产量相比,相应植物的产物的产量增加了可测量的量。

术语“种子”包括所有种类的种子和植物繁殖体,包括但不限于真种子、种子片(seed pieces)、吸根(sucker)、球茎、鳞茎、果实、块茎、谷粒、插条、切枝等,并且在优选实施方案中为真种子。

术语“种子处理”包括本领域已知的所有合适的种子处理技术,例如拌种、种子包衣、种子粉化、种子浸泡、种子浸渍和种子造粒。

可以用本发明的组合物和方法处理和/或改善的农业植物包括例如以下植物类型:草皮、藤本植物、谷类,例如小麦、大麦、黑麦、燕麦、稻、玉米和粟/高粱;甜菜,例如糖用甜菜和饲用甜菜;水果,例如仁果、核果和软果,例如苹果、梨、李子、桃、扁桃、樱桃和浆果,例如草莓、覆盆子、黑莓;豆科植物,例如菜豆、小扁豆、豌豆和大豆;油料作物,例如油菜、芥菜、罂粟、橄榄、向日葵、椰子、蓖麻油植物、可可和花生;葫芦(cucurbit),例如南瓜(pumpkin/squash)、黄瓜和甜瓜;纤维植物,例如棉花、亚麻、大麻和黄麻;柑橘类水果,例如橙子、柠檬、葡萄柚和橘子;蔬菜,例如菠菜、莴苣、芦笋、卷心菜物种、胡萝卜、洋葱、番茄、马铃薯和甜椒;樟科(Lauraceae),例如鳄梨、樟属(Cinnamomum)、樟脑,或其他植物,例如烟草、坚果、咖啡、茄子、甘蔗、茶、胡椒、葡萄藤、啤酒花、香蕉、乳胶植物以及观赏植物,例如花、灌木、落叶树和针叶树。该列举是非限制性的。

以下植物被认为是本发明的组合物和方法特别适用的靶作物:棉花、茄子、草皮、仁果、核果、软果、玉米、小麦、大麦、黄瓜、烟草、藤本植物、稻、谷类、梨、豆、大豆、油菜、番茄、甜椒、甜瓜、卷心菜、马铃薯和苹果。

另外特别感兴趣的农业植物包括例如谷类,例如小麦、黑麦、大麦、黑小麦、燕麦或稻;甜菜,例如糖用甜菜或饲用甜菜;水果,例如仁果、核果或软果,例如苹果、梨、李子、桃、扁桃、樱桃、草莓、覆盆子、黑莓或醋栗;豆科植物,如小扁豆、豌豆、苜蓿或大豆;油料植物,如油菜、芥菜、橄榄、向日葵、椰子、可可豆、蓖麻油植物、油棕、碎坚果或大豆;葫芦,如南瓜、黄瓜或甜瓜;纤维植物,如棉花、亚麻、大麻或黄麻;柑橘类水果,如橙子、柠檬、葡萄柚或柑橘;蔬菜,如西兰花、菠菜、莴苣、芦笋、卷心菜、胡萝卜、洋葱、番茄、马铃薯、葫芦或红辣椒;樟科植物,如鳄梨、樟属或樟脑;能源和原材料植物,如玉米、大豆、油菜、甘蔗或油棕;玉米;烟草,坚果;咖啡;茶;香蕉;葡萄藤(鲜食葡萄和葡萄汁葡萄藤);啤酒花;草皮;天然橡胶植物或观赏植物和林业植物,例如花、灌木、阔叶树或常青树,例如针叶树;以及植物繁殖材料如种子和这些植物的作物材料。

可根据本发明的方法改善的树木的实例为:冷杉属种(Abies sp.)、桉属种(Eucalyptus sp.)、云杉属种(Picea sp.)、松属种(Pinus sp.)、七叶树属种(Aesculussp.)、悬铃木属种(Platanus sp.)、椴树属种(Tilia sp.)、槭树属种(Acer sp.)、铁杉属种(Tsuga sp.)、梣属种(Fraxinus sp.)、花楸属种(Sorbus sp.)、桦木属种(Betula sp.)、山楂属种(Crataegus sp.)、榆属种(Ulmus sp.)、栎属种(Quercus sp.)、山毛榉属种(Fagussp.)、柳属种(Salix sp.)、杨属种(Populus sp.)。

可根据本发明的方法来改善的优选的树木为:来自七叶树属树木物种:欧洲七叶树(A.hippocastanum)、小花七叶树(A.pariflora)、红花七叶树(A.carnea);来自悬铃木属树木物种:二球悬铃木(P.aceriflora)、一球悬铃木(P.occidentalis)、加利福尼亚悬铃木(P.racemosa);来自云杉属树木物种:欧洲云杉(P.abies);来自松属树木物种:辐射松(P.radiata)、西黄松(P.ponderosa)、扭叶松(P.contorta)、欧洲赤松(P.sylvestre)、湿地松(P.elliottii)、白松(P.montecola)、美国白皮松(P.albicaulis)、多脂松(P.resinosa)、长叶松(P.palustris)、火炬松(P.taeda)、柔枝松(P.flexilis)、黑材松(P.jeffregi)、北美短叶松(P.baksiana)、北美乔松(P.strobus);来自桉属树木物种:巨桉(E.grandis)、蓝桉(E.globulus)、赤桉(E.camadentis)、亮果桉(E.nitens)、斜叶桉(E.obliqua)、王桉(E.regnans)、弹丸桉(E.pilularus)。

可根据本发明的方法来改善的特别优选的树木为:来自松属物种的树木:辐射松、西黄松、扭叶松、欧洲赤松、北美乔松;来自桉属物种的树木:巨桉、蓝桉、赤桉。

可根据本发明的方法来改善的非常特别优选的树木为:七叶树、悬铃木科(Platanaceae)、椴树、枫树。

本发明也可应用于任何草皮草,包括冷季型草皮草和暖季型草皮草。冷季型草皮草的实例为早熟禾(早熟禾属种(Poa spp.)),例如肯塔基早熟禾(草地早熟禾(Poapratensis L.)),粗茎早熟禾(Poa trivialis L.),加拿大早熟禾(Poa compressa L.),一年生早熟禾(Poa annua L.),高地早熟禾(Poa glaucantha Gaudin),林地早熟禾(Poanemoralis L.)和鳞茎早熟禾(Poa bulbosa L.);剪股颖(剪股颖属种(Agrostis spp.))例如匍匐剪股颖(Agrostis palustris Huds.),细弱剪股颖(Agrostis tenuis Sibth.),绒毛剪股颖(Agrostis canina L.),德国南部混合剪股颖(剪股颖属种,包括细弱剪股颖、绒毛剪股颖和匍匐剪股颖),以及小糠草(Agrostis alba L.);

羊茅(羊茅属种(Festuca spp.)),例如紫羊茅(Festuca rubra L.spp.rubra)、匍匐羊茅(Festuca rubra L.)、紫羊茅(Festuca rubra commutata Gaud.)、羊茅(Festucaovina L.)、硬羊茅(Festuca longifolia Thuill.)、细叶羊茅(Festucu capillataLam.)、高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)和牛尾草(Festuca elanor L.);

黑麦草(黑麦草属种(Lolium spp.)),例如一年生黑麦草(多花黑麦草(Loliummultiflorum Lam.))、多年生黑麦草(Lolium perenne L.)和意大利黑麦草(Loliummultiflorum Lam.);

以及冰草(冰草属种(Agropyron spp.)),例如扁穗冰草(Agropyron cristatum(L.)Gaertn.)、扁穗冰草(Agropyron desertorum(Fisch.)Schult.)和蓝茎冰草(Agropyron smithii Rydb.)。

其他冷季型草皮草的实例为:喜沙草(美洲沙茅草(Ammophila breviligulataFern.))、无芒雀麦(Bromus inermis Leyss.)、香蒲如梯牧草(Phleum pratense L.)、沙香蒲(Phleum subulatum L.)、鸭茅(Dactylis glomerata L.)、碱茅(Puccinellia distans(L.)Pari.)和洋狗尾草(Cynosurus cristatus L.)。

暖季型草皮草的实例为:狗牙根(狗牙根属种(Cynodon spp.L.C.Rich))、结缕草(结缕草属种(Zoysia spp.Willd.))、偏序钝叶草(Stenotaphrum secundatum WaltKuntze)、假俭草(Eremochloa ophiuroides Munro Hack.)、地毯草(Axonopus affinisChase)、百喜草(Paspalum notatum Flugge)、狼尾草(Pennisetum clandestinumHochst.ex Chiov.)、野牛草(Buchloe dactyloids(Nutt.)Engelm.)、格兰马草(Boutelouagracilis(H.B.K.)Lag.ex Griffiths)、海滨雀稗(Paspalum vaginatum Swartz)和sideoats grama(Bouteloua curtipendula(Michx.Torr.)。冷季型草皮草通常优选地用于根据本发明的用途。特别优选早熟禾、剪股颖和小糠草、羊茅和黑麦草。尤其优选剪股颖。

本发明的组合物具有有效的杀微生物活性,并且可用于在作物保护中和在材料保护中防治不想要的微生物,例如真菌和细菌。

本发明还涉及用于防治不需要的微生物的方法,其特征在于将本发明的组合物施用于植物病原真菌、植物病原细菌和/或其生境。

杀真菌剂可用于在作物保护中防治植物病原真菌。杀真菌剂的特征在于具有对抗广谱植物病原真菌的显著功效,所述植物病原真菌包括土壤传播的病原体,特别是根肿菌纲(Plasmodiophoromycetes)、卵菌纲(Peronosporomycetes)(同义词:卵菌纲(Oomycetes))、壶菌纲(Chytridiomycetes)、接合菌纲(Zygomycetes)、子囊菌纲(Ascomycetes)、担子菌纲(Basidiomycetes)和半知菌纲(Deuteromycetes)(同义词:半知菌纲(Fungi imperfecti))的成员。一些杀真菌剂具有系统活性且可作为叶片、种子拌种或土壤杀真菌剂用于植物保护中。此外,它们适合用于防治真菌,特别是侵扰植物的木材或根部的真菌。

杀细菌剂可用于在作物保护中防治假单胞菌科(Pseudomonadaceae)、根瘤菌科(Rhizobiaceae)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、棒状杆菌科(Corynebacteriaceae)和链霉菌科(Streptomycetaceae)。

可根据本发明处理的真菌病害的病原体的非限制性实例包括:

由白粉病病原体引起的病害,所述白粉病病原体例如,布氏白粉菌属(Blumeria)种,例如禾本科布氏白粉菌(Blumeria graminis);叉丝单囊壳属(Podosphaera)种,例如苹果白粉菌(Podosphaera leucotricha);单丝壳属(Sphaerotheca)种,例如黄瓜白粉菌(Sphaerotheca fuliginea);钩丝壳属(Uncinula)种,例如葡萄白粉菌(Uncinulanecator);

由锈病病原体引发的病害,所述锈病病原体例如,裸孢子囊菌属(Gymnosporangium)种,例如梨锈菌(Gymnosporangium sabinae);驼孢锈菌属(Hemileia)种,例如咖啡锈菌(Hemileia vastatrix);层锈菌属(Phakopsora)种,例如豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi)和山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae);柄锈菌属(Puccinia)种,例如小麦隐匿柄锈菌(Puccinia recondite)、小麦叶锈菌(P.triticina)、禾柄锈菌(P.graminis)或小麦条锈病菌(P.striiformis);单孢锈菌属(Uromyces)种,例如疣顶单孢锈菌(Uromyces appendiculatus);

由卵菌纲(Oomycetes)的病原体引起的病害,所述病原体例如白锈菌属(Albugo)种,例如白锈病菌(Albugo candida);盘梗霉属(Bremia)种,例如莴苣盘梗霉菌(Bremialactcae);斜尖状孢子菌属(Peronospora)种,例如豌豆霜霉(Peronospora pisi)或芸苔霜霉(P.brassicae);疫霉属(Phytophthora)种,例如马铃薯晚疫病菌(Phytophthorainfestans);单轴霉属(Plasmopara)种,例如葡萄单轴霉(Plasmopara viticola);假霜霉属(Pseudoperonospora)种,例如葎草假霜霉(Pseudoperonospora humuli)或黄瓜霜霉病菌(Pseudoperonospora cubensis);腐霉菌属(Pythium)种,例如终极腐霉菌(Pythiumultimum);

由例如以下病原体引起的叶斑病和叶萎蔫病:链格孢属(Alternaria)种,例如索兰尼链格孢(Alternaria solani);尾孢属(Cercospora)种,例如病原菌甜菜尾孢菌(Cercospora beticola);枝孢属(Cladiosporium)种,例如黄瓜叶霉病菌(Cladiosporiumcucumerinum);旋孢腔菌属(Cochliobolus)种,例如禾旋孢腔菌(Cochliobolus sativus)(分生孢子形式:德氏霉属(Drechslera),同义词:长蠕孢属(Helminthosporium))、水稻旋孢腔菌(Cochliobolus miyabeanus);毛盘孢属(Colletotrichum)种,例如豆刺盘孢菌(Colletotrichum lindemuthanium);环黑星霉属(Cycloconium)种,例如油橄榄孔雀斑菌(Cycloconium oleaginum);间座壳属(Diaporthe)种,例如柑橘褐色蒂腐病菌(Diaporthe citri);痂囊腔菌属(Elsinoe)种,例如疮痂病的柑桔痂囊腔菌(Elsinoe fawcettii);盘长孢属(Gloeosporium)种,例如桃树腐烂病菌(Gloeosporium laeticolor);小丛壳属(Glomerella)种,例如炭疽病菌(Glomerellacingulata);球座菌属(Guignardia)种,例如葡萄球座菌(Guignardia bidwelli);小球腔菌属(Leptosphaeria)种,例如十字花科小球腔菌(Leptosphaeria maculans)、颖枯壳小球腔菌(Leptosphaeria nodorum);间座壳属(Magnaporthe)种,例如稻瘟病菌(Magnaporthegrisea);盘二孢属(Marssonia)种,例如苹果盘二孢(Marssonia coronaria);微结节菌属(Microdochium)种,例如雪霉叶枯菌(Microdochium nivale);球腔菌属(Mycosphaerella)种,例如禾生球腔菌(Mycosphaerella graminicola)、花生球腔菌(M.arachidicola)和斐济球腔菌(M.fijiensis);球腔菌属(Phaeosphaeria)种,例如小麦叶枯病菌(Phaeosphaeria nodorum);核腔菌属(Pyrenophora)种,例如圆核腔菌(Pyrenophorateres)、偃麦草核腔菌(Pyrenophora tritici repentis);柱隔孢属(Ramularia)种,例如柱隔孢叶斑病菌(Ramularia collo-cygni)、白斑柱隔孢(Ramularia areola);喙孢属(Rhynchosporium)种,例如大麦云纹病菌(Rhynchosporium secalis);壳针孢属(Septoria)种,例如芹菜壳针孢菌(Septoria apii)、番茄壳针孢菌(Septorialycopersii);核瑚菌属(Typhula)种,例如肉孢核瑚菌(Typhula incarnata);黑星菌属(Venturia)种,例如苹果黑星菌(Venturia inaequalis);

由例如以下病原体引起的根和茎的病害:伏革菌属(Corticium)种,例如禾伏革菌(Corticium graminearum);镰刀菌属(Fusarium)种,例如尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum);禾顶囊壳属(Gaeumannomyces)种,例如小麦全蚀病菌(Gaeumannomycesgraminis);丝核菌属(Rhizoctonia)种,诸如,例如立枯丝核菌(Rhizoctonia solani);例如由稻帚枝霉(Sarocladium oryzae)引起的帚枝霉属(Sarocladium)病害;例如由小球菌核菌(Sclerotium oryzae)引起的小核菌属(Sclerotium)病害;Tapesia属种,例如Tapesiaacuformis;根串珠霉属(Thielaviopsis)种,例如烟草根黑腐病菌(Thielaviopsisbasicola);

由例如以下病原体引起的肉穗花序和圆锥花序病害(包括玉米穗轴):链格孢属(Alternaria)种,例如链格孢属种(Alternaria spp.);曲霉菌属(Aspergillus)种,例如黄曲霉菌(Aspergillus flavus);分枝孢子菌属(Cladosporium)种,例如支孢样支孢霉(Cladosporium cladosporioides);麦角菌属(Claviceps)种,例如紫色麦角菌(Clavicepspurpurea);镰刀菌属(Fusarium)种,例如大刀镰刀菌(Fusariumculmorum);赤霉菌(Gibberella)种,例如玉米赤霉(Gibberella zeae);小画线壳属(Monographella)种,例如雪腐小画线壳(Monographella nivalis);壳针孢属(Septoria)种,例如小麦颖枯壳针孢菌(Septoria nodorum);

由黑粉菌引起的病害,所述黑粉菌例如轴黑粉菌属(Sphacelotheca)种,例如玉米丝黑穗病菌(Sphacelotheca reiliana);腥黑粉菌属(Tilletia)种,例如小麦腥黑穗病菌(Tilletia caries)、小麦矮腥黑穗病菌(T.controversa);条黑粉菌属(Urocystis)种,例如黑麦杆黑穗病菌(Urocystis occulta);黑粉菌属(Ustilago)种,例如裸黑粉菌(Ustilago nuda)、散黑穗病菌(U.nuda tritici);

由例如以下病原体引起的果实腐烂:曲霉菌属(Aspergillus)种,例如黄曲霉菌(Aspergillus flavus);葡萄孢属(Botrytis)种,例如灰葡萄孢(Botrytis cinerea);青霉属(Penicillium)种,例如扩展青霉菌(Penicillium expansum)、产紫青霉(P.purpurogenum);核盘菌属(Sclerotinia)种,例如核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum);轮枝孢属(Verticilium)种,例如黑白轮枝孢(Verticilium alboatrum);

由例如以下病原体引起的种传的和土传的腐败、发霉、萎蔫、腐烂和猝倒病害:链格孢属(Alternaria)种,例如由甘蓝链格孢菌(Alternaria brassicicola)引起的;丝囊霉属(Aphanomyces)种,例如由根腐丝囊霉(Aphanomyces euteiches)引起的;壳二孢属(Ascochyta)种,例如由晶状体壳二孢(Ascochyta lentis)引起的;曲霉菌属(Aspergillus)种,例如由黄曲霉菌(Aspergillus flavus)引起的;分枝孢子菌属(Cladosporium)种,例如由分支胞子菌(Cladosporium herbarum)引起的;旋孢腔菌(Cochliobolus)种,例如由禾旋孢腔菌(Cochliobolus sativus)引起的;(分生孢子形式:德氏霉属(Drechslera)、双极霉属(Bipolaris),同义词:长蠕孢属(Helminthosporium));毛盘孢属(Colletotrichum)种,例如由球炭疽菌(Colletotrichum coccodes)引起的;镰刀菌属(Fusarium)种,例如由镰刀菌属(Fusarium culmorum)引起的;赤霉菌(Gibberella)属种,例如由玉米赤霉(Gibberella zeae)引起的;亚大茎点霉属(Macrophomina)种,例如由菜豆壳球孢菌(Macrophomina phaseolina)引起的;小画线壳属(Monographella)种,例如由雪腐小画线壳(Monographella nivalis)引起的;青霉属(Penicillium)种,例如由扩展青霉菌(Penicillium expansum)引起的;茎点霉属(Phoma)种,例如由病原黑胫茎点霉(Phoma lingam)引起的;拟茎点霉属(Phomopsis)种,例如由大豆拟茎点霉(Phomopsissojae)引起的;疫霉属(Phytophthora)种,例如由恶疫霉(Phytophthora cactorum)引起的;核腔菌属(Pyrenophora)种,例如由麦类核腔菌(Pyrenophora graminea)引起的;梨孢属(Pyricularia)种,例如由稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)引起的;腐霉菌属(Pythium)种,例如由终极腐霉(Pythium ultimum)引起的;丝核菌属(Rhizoctonia)种,例如由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的;根霉菌属(Rhizopus)种,例如由稻根霉菌(Rhizopusoryzae)引起的;小菌核属(Sclerotium)种,例如由齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)引起的;壳针孢属(Septoria)种,例如由小麦颖枯壳针孢菌(Septoria nodorum)引起的;核瑚菌属(Typhula)种,例如由肉孢核瑚菌(Typhula incarnata)引起的;轮枝孢属(Verticillium)种,例如由棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)引起的;

由例如以下病原体引起的癌症(cancer)、虫瘿和扫帚病(witches’broom)病害:丛赤壳属(Nectria)种,例如仁果干癌丛赤壳菌(Nectria galligena);

由例如以下病原体引起的萎蔫病害:链核盘菌属(Monilinia)种,例如核果链核盘菌(Monilinia laxa);

由例如以下病原体引起的叶疱病或卷叶病病害,外担子菌属(Exobasidium)种,例如坏损外担菌(Exobasidium vexans);

外囊菌属(Taphrina)种,例如畸形外囊菌(Taphrina deformans);

木本植物的退行性病害:由例如根霉格孢菌(Phaemoniella clamydospora)、Phaeoacremonium aleophilium和Fomitiporia mediterranea引起的埃斯卡(Esca)病害;由例如侧弯孢壳属(Eutypa lata)引起的葡萄顶枯病(Eutypa dyeback);由例如岛灵芝(Ganoderma boninense)引起的灵芝属(Ganoderma)病害;由例如木硬孔菌(Rigidoporuslignosus)引起的硬孔菌属(Rigidoporus)病害;

由例如以下病原体引起的花和种子的病害:葡萄孢属(Botrytis)种,例如灰葡萄孢(Botrytis cinerea);

由例如以下病原体引起的植物块茎病害:丝核菌属(Rhizoctonia)种,例如立枯丝核菌(Rhizoctonia solani);长蠕孢菌属(Helminthosporium)种,例如茄病长蠕孢(Helminthosporium solani);

由例如以下病原体引起的根肿病病害:根肿菌属(Plasmodiophora)种,例如芸薹根肿菌(Plamodiophora brassicae);

由细菌性病原体引起的病害,所述细菌性病原体例如,黄单胞菌属(Xanthomonas)种,例如稻黄单胞菌白叶枯致病变种(Xanthomonas campestris pv.oryzae);假单胞菌属(Pseudomonas)种,例如丁香假单胞菌黄瓜致病变种(pseudomonas syringaepv.lachrymans);欧文氏(Erwinia)种,例如噬淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora)。

优选地可防治大豆的以下病害:

由例如以下病原体引起的位于叶、茎、荚和种子上的真菌病害,如链格孢属叶斑病(Alternaria leaf spot)(Alternaria spec.atrans tenuissima)、炭疽病(Colletotrichum gloeosporoides dematium var.truncatum)、褐斑病(大豆壳针孢(Septoria glycines))、尾孢属叶斑病和叶枯病(Cercospora leaf spot and blight)(菊池尾孢(Cercospora kikuchii))、笄霉属(Choanephora)叶枯病(漏斗笄霉(Choanephorainfundibulifera trispora(同义词))、dactuliophora叶斑病(Dactuliophoraglycines)、霜霉病(downy mildew)(东北霜霉(Peronospora manshurica))、德氏霉属(drechslera)枯萎病(Drechslera glycini)、蛙眼病叶斑病(大豆尾孢(Cercosporasojina))、小光壳属(leptosphaerulina)叶斑病(三叶草小光壳(Leptosphaerulinatrifolii))、叶点霉属(phyllostica)叶斑病(大豆生叶点霉(Phyllosticta sojaecola))、荚和茎枯萎病(大豆拟茎点霉(Phomopsis sojae));白粉病(扩散叉丝壳(Microsphaeradiffusa))、棘壳孢属(pyrenochaeta)叶斑病(Pyrenochaeta glycines)、丝核菌属地上部分、叶枯病和立枯病(立枯丝核菌(Rhizoctonia solani))、锈病(豆薯层锈菌(Phakopsorapachyrhizi)、山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae))、痂病(大豆痂圆孢(Sphacelomaglycines))、匍柄霉属(stemphylium)叶枯病(匍柄霉(Stemphylium botryosum))、靶斑病(target spot)(山扁豆生棒孢(Corynespora cassiicola))。

由例如以下病原体引起的根部和茎基部的真菌病害,如黑根腐病(black rootrot)(Calonectria crotalariae)、炭腐病(菜豆生壳球孢(Macrophomina phaseolina))、镰孢属枯萎病或萎蔫、根腐病以及荚和根颈腐烂((尖镰孢(Fusarium oxysporum)、直喙镰孢(Fusarium orthoceras)、半裸镰孢(Fusarium semitectum)、木贼镰孢(Fusariumequiseti))、mycoleptodiscus根腐病(Mycoleptodiscus terrestris)、新赤壳属(neocosmospora)(侵菅新赤壳(Neocosmopspora vasinfecta))、荚和茎枯病(菜豆间座壳(Diaporthe phaseolorum))、茎溃疡(大豆北方茎溃疡病菌(Diaporthe phaseolorumvar.caulivora))、疫霉属腐病(大雄疫霉(Phytophthora megasperma))、褐茎腐病(大豆茎褐腐病菌(Phialophora gregata))、腐霉菌属腐病(瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、畸雌腐霉(Pythium irregulare)、德巴利腐霉(Pythium debaryanum)、群结腐霉(Pythiummyriotylum)、终极腐霉(Pythium ultimum))、丝核菌属根腐病、茎腐和猝倒病(立枯丝核菌(Rhizoctonia solani))、核盘菌茎腐病(核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum))、核盘菌白绢病(Sclerotinia rolfsii)、根串珠霉属根腐病(根串珠霉(Thielaviopsis basicola))。

本发明的杀真菌组合物可用于治疗性或保护性/预防性地防治植物病原真菌。因此,本发明还涉及通过使用本发明的组合物而防治植物病原真菌的治疗性和保护性方法,其中将本发明的组合物施用于种子、植物或植物部分、果实或植物生长的土壤。

所述组合物在防治植物病害所需的浓度下可被植物良好的耐受,这一事实使得其能够处理植物的地上部分、繁殖的根状茎和种子以及土壤。

根据本发明可处理所有的植物和植物部分,包括栽培种和植物品种(无论是否受植物品种或植物育种者权利的保护)。栽培种和植物品种可以是通过常规的繁殖和育种方法而获得的植物,所述常规的繁殖和育种方法可通过一种或多种生物技术方法来辅助或补充,例如通过使用双单倍体、原生质体融合、随机和定向诱变、分子或遗传标记物,或通过生物工程和基因工程方法。

在一些实施方案中,本文公开的组合物用于增强植物生长、植物活力和/或作物产量。“产量”应理解为由植物产生的任何具有经济价值的植物产物,例如谷粒、适当意义上的果实、蔬菜、坚果、谷粒、种子、木材(例如,在造林植物的情况下)或甚至花(例如,在园艺植物、观赏植物的情况下)。此外,植物产物可以在收获后进一步被利用和/或加工。

根据本发明,植物,特别是农业、造林和/或观赏植物的“增加的产量”是指与在相同条件下但不施用本发明的组合物所产生的植物的相同产物的产量相比,相应植物的产物的产量增加了可测量的量。增加的产量尤其可以通过以下植物的改善特性来表征:

·植物重量增加,

·株高增加,

·生物量增加,如鲜重和/或干重增加,

·谷粒产量更高,

·更多分蘖,

·叶子更大,

·嫩枝生长增加,

·蛋白质含量增加,

·油含量增加,

·淀粉含量增加。

·色素含量增加

根据本发明的一个实施方案,产量增加至少5%。根据本发明的另一个实施方案,产量增加至少10%。根据本发明的另一个实施方案,产量增加至少15%。根据本发明的另一个实施方案,产量增加至少30%。根据本发明的另一个实施方案,产量增加至少40%。

植物状况的另一个指标是“植物活力”。植物活力体现在几个方面,如一般的视觉外观。改善的植物活力尤其可以通过以下植物的改善特性来表征:

·改善的植物生命力,

·改善的植物生长,

·改善的植物发育,

·改善的视觉外观,

·改善的植物直立性(减少植物节数/倒伏),

·改善的出苗,

·根系生长增强和/或根系更加发达,

·结瘤,特别是根瘤菌结瘤增强,

·更大的叶片,

·植物大小增加,

·植物重量增加,

·株高增加,

·分蘖数增加,

·嫩枝生长增加,

·根系生长增加(延伸根系),

·根质量大小增加(延伸根系),

·当生长在贫瘠的土壤或不利的气候条件下时,产量增加,

·光合活性增强,

·颜色变化(如色素含量(如叶绿素含量)增加),

·开花更早,

·结果更早,

·发芽更早和更好,

·谷粒成熟更早(提前),

·改善的自我防卫机制,

·非生产性分蘖更少,

·死基生叶更少,

·所需投入更少(如肥料或水),

·叶子更绿和绿叶面积增加,

·在缩短的植被期下完全成熟,

·所需肥料更少,

·所需种子更少,

·更容易收获,

·更快和更均匀的成熟,

·更长的保质期,

·更长的圆锥花序,

·延缓衰老,

·更强壮和/或更高产的分蘖,

·成分的可提取性更好,

·种子质量提高(用于在接下来的种子生产季节播种),

·乙烯产量降低和/或植物对乙烯接收的抑制,

·叶子细长,

·穗数/m2增加。

根据本发明的植物活力的改善特别意指任何一种或几种或所有上述植物特性的改善独立于组合物或活性成分的杀虫作用而得到改善。提高的活力可以例如导致更高百分数的可移植到田地的植物或增加数量的可销售的植物(例如番茄)。

在某些方面,本发明的组合物以每公顷约1×104至约1×1014菌落形成单位(CFU)、每公顷约1×104至约1×1012菌落形成单位(CFU)、每公顷约1×104至约1×1010菌落形成单位(CFU)、每公顷约1×104至约1×108菌落形成单位(CFU),每公顷约1×106至约1×1014菌落形成单位(CFU),每公顷约1×106至约1×1012菌落形成单位(CFU),每公顷约1×106至约1×1010菌落形成单位(CFU),每公顷约1×106至约1×108菌落形成单位(CFU),每公顷约1×108至约1×1014菌落形成单位(CFU),每公顷约1×108至约1×1012菌落形成单位(CFU),或每公顷约1×108至约1×1010菌落形成单位(CFU)施用。

在其他方面,本发明的组合物以每公顷约1×106至约1×1014菌落形成单位(CFU)、每公顷约1×106至约1×1012菌落形成单位(CFU)、每公顷约1×106至约1×1010菌落形成单位(CFU)、每公顷约1×106至约1×108菌落形成单位(CFU)施用。在又其他方面,本发明的组合物以每公顷约1×109至约1×1013菌落形成单位(CFU)施用。在一个方面,本发明的组合物以每公顷约1×1010至约1×1012菌落形成单位(CFU)施用。

在某些实施方案中,本发明的组合物以每公顷约0.1kg至约20kg发酵固体施用。在一些实施方案中,本发明的组合物以每公顷约0.1kg至约10kg发酵固体施用。在其他实施方案中,本发明的组合物以每公顷约0.25kg至约7.5kg发酵固体施用。在又一些实施方案中,本发明的组合物以每公顷约0.5kg至约5kg发酵固体施用。本发明的组合物还可以以每公顷约1kg或约2kg发酵固体施用。

当被植物良好的耐受性时,本发明的组合物具有有利的恒温动物毒性且可被环境良好的耐受,适用于保护植物和植物器官,用于提高采收产量,改善采收材料的品质。优选地将它们用作作物保护组合物。它们对一般敏感且具有抗性的物种具有活性,并且对所有的或一些发育阶段具有活性。

可根据本发明进行处理的植物包括以下主要作物植物:玉米、大豆、苜蓿、棉花、向日葵、芸苔属(Brassica)油料种子如甘蓝型油菜(Brassica napus)(例如加拿大油菜(canola)、油菜籽)、芜青(Brassica rapa)、芥菜型油菜(B.juncea)(例如(田)芥菜)和埃塞俄比亚芥(Brassica carinata))、槟榔科种(Arecaceae sp.)(例如油棕、椰子)、稻、小麦、糖用甜菜、甘蔗、燕麦、黑麦、大麦、粟和高粱、黑小麦、亚麻、坚果、葡萄和藤本植物以及各种植物分类单位的各种水果和蔬菜,例如蔷薇科种(Rosaceae sp.)(例如仁果类水果如苹果和梨,还有核果类水果如杏、樱桃、扁桃、李子和桃,以及浆果类水果如草莓、覆盆子、红加仑和黑加仑以及醋粟)、茶藨子科种(Ribesioidae sp.)、胡桃科种(Juglandaceae sp.)、桦木科种(Betulaceae sp.)、漆树科种(Anacardiaceae sp.)、壳斗科种(Fagaceae sp.)、桑科种(Moraceae sp.)、木犀科种(Oleaceae sp.)(例如橄榄树)、猕猴桃科种(Actinidaceaesp.)、樟科种(Lauraceae sp.)(例如鳄梨、樟属、樟脑)、芭蕉科种(Musaceae sp.)(例如香蕉树和香蕉种植园)、茜草科种(Rubiaceae sp.)(例如咖啡)、山茶科种(Theaceae sp.)(例如茶)、梧桐科种(Sterculiceae sp.)、芸香科种(Rutaceae sp.)(例如柠檬、橙子、柑橘和葡萄柚);茄科种(Solanaceae sp.)(例如番茄、马铃薯、胡椒、辣椒、茄子、烟草)、百合科种(Liliaceae sp.)、菊科种(Compositae sp.)(例如莴苣、朝鲜蓟和菊苣——包括根菊苣、菊苣(endive)或普通菊苣)、伞形科种(Umbelliferae sp.)(例如胡萝卜、欧芹、芹菜和块根芹)、葫芦科种(Cucurbitaceae sp.)(例如黄瓜——包括腌食用小黄瓜、南瓜、西瓜、葫芦和甜瓜)、葱科种(Alliaceae sp.)(例如韭和洋葱)、十字花科种(Cruciferae sp.)(例如白球甘蓝、红球甘蓝、西兰花(broccoli)、花椰菜(cauliflower)、抱子甘蓝、小白菜、球茎甘蓝、小萝卜、辣根、水芹和大白菜)、豆科种(Leguminosae sp.)(例如花生、豌豆、扁豆和菜豆——例如刀豆和蚕豆)、藜科种(Chenopodiaceae sp.)(例如唐莴苣、饲用甜菜、菠菜、甜菜根)、亚麻科种(Linaceae sp.)(例如大麻(hemp))、大麻科种(Cannabeacea sp.)(例如印度大麻(cannabis))、锦葵科种(Malvaceae sp.)(例如秋葵、可可)、罂粟科(Papaveraceae)(例如罂粟)、天门冬科(Asparagaceae)(例如芦笋);园艺和森林中的有用植物和观赏植物,包括草皮、草坪、牧草和甜叶菊(Stevia rebaudiana);以及在每种情况下,这些植物的基因修饰型。

在某些方面,发酵产物还包括制剂成分。所述制剂成分可以为润湿剂、填充剂、溶剂、自发性促进剂、乳化剂、分散剂、防冻剂、增稠剂和/或佐剂。在一个实施方案中,所述制剂成分是润湿剂。在其他方面,发酵产物是冻干粉末或喷雾干燥的粉末。

本发明的组合物可包括制剂成分,其被添加到本发明的组合物中以改善回收、功效或物理性质和/或帮助加工、包装和施用。这样的制剂成分可单独添加或组合添加。

所述制剂成分可被添加到包括细胞、无细胞制品、分离的化合物和/或代谢物的组合物中以改善功效、稳定性、物理性质、可用性和/或促进加工、包装和终端使用应用。这样的制剂成分可包括农业上可接受的载体、惰性物质、稳定剂、防腐剂、营养物或物理性质改良剂,其可被单独地添加或组合添加。在一些实施方案中,载体可包括液体材料,例如水、油和其他有机或无机溶剂,以及固体材料,例如矿物质、聚合物或通过生物方法或通过化学合成获得的聚合物复合物。在一些实施方案中,制剂成分为促进组合物与植物部分(例如叶、种子或根)粘附的粘合剂、佐剂或胶黏剂。参见例如Taylor,A.G.,et al.,“Concepts andTechnologies of Selected Seed Treatments,”Annu.Rev.Phytopathol.,28:321-339(1990)。稳定剂可包括抗结块剂、抗氧化剂、抗沉降剂、消泡剂、干燥剂、防护剂或防腐剂。营养物可包括碳、氮和磷源,例如糖、多糖、油、蛋白质、氨基酸、脂肪酸和磷酸盐。物理性质改良剂可包括填充剂、润湿剂、增稠剂、pH修饰剂、流变改性剂、分散剂、佐剂、表面活性剂、成膜剂、助水溶剂、增洁剂(builder)、抗冻剂或着色剂。在一些实施方案中,可使用水作为稀释剂或不使用水,在没有任何其他制剂制品的情况下直接使用包括由发酵产生的细胞、无细胞制品或代谢物的组合物。在一个特定的实施方案中,将润湿剂、分散剂添加到发酵固体,例如冻干粉末或喷雾干燥粉末。在一些实施方案中,在浓缩发酵液之后和/或在干燥期间和/或之后加入制剂惰性成分。当被施用到表面时,润湿剂增加活性成分的扩散和透过性质,或分散剂增加活性成分的分散性和溶解性(一旦被稀释)。示例性的润湿剂是本领域技术人员已知的并且包括磺基琥珀酸酯及其衍生物,例如MULTIWETTM MO-70R(Croda Inc.,Edison,NJ);硅氧烷,例如(Evonik,德国);非离子型化合物,例如ATLOXTM 4894(Croda Inc.,Edison,NJ);烷基多聚葡萄糖苷,如3001(Huntsman International LLC,The Woodlands,Texas);C12-C14醇乙氧基化物,例如15-S-15(The Dow Chemical Company,Midland,Michigan);磷酸酯,例如BG-510(Rhodia,Inc.);和烷基醚羧酸酯,例如EMULSOGENTM LS(ClariantCorporation,North Carolina)。

保藏信息

本发明的类芽孢杆菌属种菌株的样品已根据布达佩斯条约保藏于农业研究机构培养物保藏中心(Agricultural Research Service Culture Collection),其位于美国伊利诺伊州,皮奥里亚市,北部大学街1815号,美国农业部农业研究服务局,农业应用研究国家中心(NRRL),邮编61604。类芽孢杆菌属种NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种NRRL B-67724各自于2018年12月4日保藏。类芽孢杆菌属种NRRL B-50374于2010年5月18日保藏。

类芽孢杆菌属种菌株被保藏在这样的条件下,即确保在该专利申请的在审期间,由专利和商标专员根据37C.F.R.§1.14和35U.S.C.§122确定的有资格的人能够获得培养物。然而,应当理解,可获得保藏物并非许可在违背政府授予的专利权的情况下实施本发明。

以下给出的实施例仅用于本发明的说明性和非限制性目的。

实施例

实施例1.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724对黄瓜白粉菌的抗真菌活性

将类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724以及若干其他类芽孢杆菌属种菌株在基于大豆的培养基中培养,以产生全肉汤。将全肉汤在水和有机溶剂的混合物中稀释至20%的浓度。将稀释的全肉汤施用于幼株,随后将幼株暴露于黄瓜白粉菌(PODOXA)(也称为黄瓜白粉病)的接种物。

暴露于植物病原体接种物几天后,相对于未处理的对照植物,对每株植物的病原体防治百分数进行评分。每个处理重复评估三次,并报告平均防治百分数。

之前已在几轮初始筛选中对所有菌株的抗真菌活性进行了评估,结果均优于其他类芽孢杆菌属种菌株。本分析代表了后续一轮筛选,以进一步缩小具有优异抗真菌活性的候选菌株列表。在该后续分析中,类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724属于具有最大抗真菌活性的类芽孢杆菌属菌株(参见图1)。

实施例2.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724对灰葡萄孢的抗真菌活性

将类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRLB-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724在基于大豆的培养基中培养,以产生全肉汤,将全肉汤在水和有机溶剂的混合物中稀释至20%和5%的浓度。将稀释的全肉汤施用于幼株,随后将幼株暴露于灰葡萄孢(BOTRCI)(也称为灰霉病)接种物。

暴露于植物病原体的接种物几天后,相对于未处理的对照植物,对每株植物的病原体防治百分数进行评分。每个处理重复评估三次,并报告平均防治百分数。重复几次该分析,代表性结果参见表1。类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724对灰葡萄孢(BOTRCI)表现出一致的高抗真菌活性。

表1.用稀释率为20%和5%的类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724实现的对灰葡萄孢(BOTRCI)的防治。

处理 施用率 平均防治百分数
类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374 20% 98
5% 85
类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721 20% 88
5% 0
类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723 20% 98
5% 68
类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724 20% 60
5% 50

实施例3.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724对小麦叶锈菌的抗真菌活性

将类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724在基于大豆的培养基中培养,以产生全肉汤,将全肉汤在水和有机溶剂的混合物中稀释至20%和5%的浓度。将稀释的全肉汤施用于幼株,随后将幼株暴露于小麦叶锈菌(PUCCRT)(也称为小麦叶锈病)接种物。

暴露于植物病原体接种物几天后,相对于未处理的对照植物,对每株植物的病原体防治百分数进行评分。每个处理重复评估三次,并报告平均防治百分数。重复几次该分析,代表性结果参见表2。类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724对灰葡萄孢(BOTRCI)表现出一致的高抗真菌活性。

表2.用稀释率为20%和5%的类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724实现的对小麦叶锈菌(PUCCRT)的防治。

处理 施用率 平均防治百分数
类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374 20% 77
5% 17
类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721 20% 80
5% 17
类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723 20% 65
5% 25
类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724 20% 80
5% 50

实施例4.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724中杀镰孢菌素和十三肽菌素生物合成基因簇的分析

对类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724的基因组进行测序,并分析了是否存在编码负责抗微生物化合物生物合成的蛋白质的已知基因簇。该分析显示,四种菌株中的每一种都具有杀镰孢菌素合成酶(fusA),其与其他菌株中发现的杀镰孢菌素合成酶具有至少90.5%序列同一性(参见表3)。此外,所有四种菌株都具有十三肽菌素基因簇。之前曾有报告称,在土地类芽胞杆菌的实验室菌株中鉴定出十三肽菌素基因簇。Lohans CT,van Belkum MJ,Cochrane SA,Huang Z,Sit CS,McMullen LM,and Vederas JC.(2014)Biochemical,Structural,and GeneticCharacterization of Tridecaptin A1,an Antagonist of Campylobacterjejuni.ChemBioChem 15:243-249。十三肽菌素生物合成基因簇包含triA、triB、triC、triD和triE。在四种菌株中的每一种中,编码非核糖体肽合成酶(NRPS)TriE的基因与在其他菌株中发现的基因具有至少90.0%的序列同一性(参见表4)。表5和表6分别列出了四种菌株的fusA和triE基因的核苷酸序列。不希望受任何理论的束缚,在这些菌株中的杀镰孢菌素和十三肽菌素的表达可能有助于它们有效地定殖植物和预防植物病害的能力。

表3.使用快速傅立叶变换(MAFFT)通过多重比对为来自类芽孢杆菌属种菌株NRRLB-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724的fusA基因创建的同一性百分数矩阵。

表4.使用MAFFT为来自类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRLB-67723和NRRL B-67724的triE基因创建的同一性百分数矩阵。

表5.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724中编码杀镰孢菌素合成酶(fusA)的基因的核苷酸序列。

表6.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724中编码参与十三肽菌素生物合成的NRPS(triE)基因的核苷酸序列。

实施例5.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724中杀镰孢菌素的特征

类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724的全肉汤培养物通过如实施例1-3中在基于大豆的培养基中培养每种菌株来制备。制备了全肉汤培养物的细胞提取物,并在每种细胞提取物中定量了杀镰孢菌素样化合物。

使用超高效液相色谱/质谱三重飞行时间(UPLC/MS三重TOF)的的色谱方法对细胞提取物中的杀镰孢菌素样分子进行片段化和定量:柱子:YMC-Triart C8,4.6x 50mm,12nm;水(0.1%甲酸)和乙腈(0.1%甲酸);梯度(%B):0-5min 10-70%;洗涤。分析从AB SCIEXTRIPLE质谱仪获得的质量碎片模式,以确认每种杀镰孢菌素样化合物的同一性。分析的杀镰孢菌素样化合物包括杀镰孢菌素A(“Fus A”)、杀镰孢菌素B(“Fus B”)、杀镰孢菌素C(“Fus C”)、杀镰孢菌素D(“Fus D”)、LiF05a、LiF05b、LiF06a、LiF06b、LiF07a和LiF07b。这些化合物描述于WO2016/154297,图3、4和12中列出了它们的结构。用于定量杀镰孢菌素样化合物的分析方法无法区分LiF05a和LiF06a或LiF05b和LiF06b。因此,这两组化合物产生的信号在本文中分别称为LiF05/6a和LiF05/6b。

使用已知浓度的杀镰孢菌素样化合物生成的标准曲线进行定量。根据使用杀镰孢菌素C生成的标准曲线来测定LiF05/6a、LiF05/6b、LiF07a和LiF07b的定量。使用的最低化学标准品的浓度为0.5μg/g。当从细胞提取物中的分析物检测到信号但信号强度低于使用最低标准品产生的信号强度时,确定分析物的量低于定量水平(BLOQ)。每种类芽孢杆菌属种菌株中杀镰孢菌素样化合物的定量结果列于表7中。

表7.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724中杀镰孢菌素样化合物的定量。

实施例6.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721和NRRL B-67724中固氮基因簇的分析

类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721和NRRL B-67724的基因组的额外分析揭示了这些菌株也具有固氮基因簇。以前在实验室菌株类芽孢杆菌属种WLY78中报告过固氮基因簇的存在。Wang L,Zhang L,Liu Z,Zhao D,Liu X,et al.(2013)A MinimalNitrogen Fixation Gene Cluster from Paenibacillus sp.WLY78 Enables Expressionof Active Nitrogenase in Escherichia coli.PLoS Genet9(10):e1003865。在类芽孢杆菌属种WLY78中,固氮基因簇包含nifB、nifH、nifD、nifK、nifE、nifN、nifX、hesA和nifV。类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721和NRRL B-67724中发现了类似的基因簇结构。

不希望受任何理论的束缚,在类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721和NRRL B-67724的基因组中存在固氮基因簇可能有助于这些菌株促进植物有效氮吸收和刺激植物生长的能力。

编码固氮蛋白的nifB基因组序列比较表明,各菌株的nifB序列与其他菌株的nifB序列有至少96.9%的序列同一性(参见表8)。三种菌株的nifB序列的核苷酸序列参见表9。

表8.使用MAFFT为来自类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721和NRRLB-67724的nifB基因创建的同一性百分数矩阵。

表9.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721和NRRL B-67724中编码固氮蛋白的基因(nifB)的核苷酸序列。

实施例7.类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、NRRL B-67721、NRRL B-67723和NRRL B-67724的促植物生长特性

将类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721、类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724在基于大豆的培养基中培养,以产生全肉汤,将全肉汤在水中稀释至20%浓度。在种植时,将稀释的全肉汤作为浇灌液施用于番茄植物。几天后,当番茄幼苗长成幼株时,测量每个处理组中40株完整番茄植物的平均重量和标准偏差。将未处理对照组(“UTC”)和仅用基于大豆的培养基(“培养基”)处理的组纳入分析以进行比较。

有趣的是,类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-50374,类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67721和类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67724(其中每一个都具有固氮基因簇),与UTC和培养基对照相比,在番茄植物生长中产生了显著的增加(参见图2)。相比之下,类芽孢杆菌属种菌株NRRL B-67723(其不具有固氮基因簇)与UTC和培养基对照相比,没有增加番茄植物生长。

除非另有定义,本文的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。出于所有目的,引用的所有出版物、专利和专利出版物均通过引用的方式全文纳入本文。

应当理解,所公开的发明不限于所描述的特定方法、方案和材料,因为这些可以变化。还应当理解,本文使用的术语仅仅是为了描述特定的实施方案,而不是为了限制本发明的范围,本发明的范围将仅由所附的权利要求来限制。

本领域技术人员仅使用常规实验方法,就将了解或能够确定本文所述的本发明的特定实施方案的许多等价物。这样的等价物意欲被以下权利要求所涵盖。

序列表

<110> Bayer CropScience LP

<120> 类芽孢杆菌属菌株及其使用方法

<130> BCS189006 WO

<150> 62815069

<151> 2019-03-07

<160> 11

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 23727

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

<400> 1

atgaatgaca tgcagttata tgatttaaca aatgcgcaga agcgtatatg gtataccgaa 60

ttactctacc cagatacgtc agtgtcacag ctttccggta cagctaagat gaaggggcat 120

atcaatattg ctgcctttat gcagtccatt aatttgatta tcaaacagta tgatgcgttc 180

cgcatccgta ttacctcagt ggatggagtg cctcagcagt acgtcgttcc ttatgaagag 240

agacagctgg agtgcctgga tcttagccac tatgaaagtg tatctgaggt ggaagcctta 300

cttgagcaac acaaaagcaa acctttgccc ctgctggatt ctgagctctt ccagttttta 360

attgtgaaga ttagcgagga agagtattgg attaatatca agatgcacca tattatttct 420

gacggaatat caatggtggt ctatggcaat cagctgacaa cattttacat ggagttaatt 480

caaggaaatg aaccgaagct gggcgacgat tgctcgtata ttcaatatat tgcagatgag 540

aatgcatacg aactttctga cagataccaa aaggataagg cttactggct ggataaattt 600

tctgatttgc ctgagcttac gggttggaag tcatataatc cgttatcttt aagcacccac 660

gccgttcggg agcattttac cgtaccagaa gtgctatatc acgagctgca agcattttgc 720

caacagaaca ggatttcttt gttccagttc ttcatgggtg cgatgtatat ctacatacac 780

aaaatgacga atcagccgga tgtggtgatt ggcacttcgt tcgctaaccg ggggaacaaa 840

aaagagaagc aaaagatagg tatgtttgtc agcaccgctg ctgccagaac atacgtcaaa 900

aaggatatgg atgtgttgag cttcctgcag gatgtagcca gagatcagat gtcagtcctg 960

cggcatcaga agtatccgta caatcagtta attcaggatc ttagagaaat gcatggtaac 1020

aaggatattc agcggctttt tggcgtttca atggaatatc gtcttatcaa ttgggttgat 1080

ttggatgatg tgcgcatttt gacggattat gatttctgcg gggacgaagt gaacgatttc 1140

gtgcttcata tcgtggagat cctggatgaa ggcgaactgg tactggatgt cgattatcgg 1200

acggagctgt ttgaacgcag tgaagttaag gacatggttt cccagttgct tacgatcgcc 1260

gagcagatca ttcattcacc tcagctttct atcgcagagg taaacttatt gggtgaacca 1320

gaagagcagt ccattttggc tctttcggaa ggcgctgcag tcgattatcc acgtgagaag 1380

accatccatg gcttattcga ggaacaagcc gagcgcacgc cagatcacgt agccgttcag 1440

atggacgaac agagcattac atacctagct ctaaacgagc aggctaacca gcttgcgaga 1500

tatttgcgct ccgagggagt agttgcagat acgctcgtag ggattatggc tgaccgttcc 1560

ttggagatgg tcattgggat gttggccatt ttgaaagcag gtggtgccta tgtaccgatt 1620

gaccccgatt atcccgagga acgtatccat tatatgctgg aggattcagg ggtccgtctg 1680

ttgctcaccc aaagtcatct atgggagagc accacttttg acggaaagct tgtgagtttg 1740

gacgaagcta caacgtatac aggagatgct tccaatctgg agagtatttc gggaccaagc 1800

catctagcct atgttatcta cacgtcgggt acgaccggca agccgaaggg cacgctgatt 1860

gaacacaaaa atgtggttcg actgctcttt aacgataaaa atctatttga tttcagctct 1920

caggatacgt ggacgctatt ccattcgttc tgcttcgatt tctccgtttg ggagatgtac 1980

ggagcgcttc tttacggagg gaaattggtg attgttccat ctctcacagc caagagccca 2040

gcagctttcc tggagttgtt gaaagacaac caagtcacca ttttaaatca gacgccgacg 2100

tatttttatc aggtgctaca ggaagagtta acgcactctt cgacagagct tggccttaga 2160

aaaatcattt ttggtggaga ggccttaagt ccatctcttc tgagaaactg gcgggtcaag 2220

tatcctgatg tgcagctgat taatatgtac ggaattacgg aaacaacggt ccatgtcacc 2280

tacaaggaaa tcacggaaca tgagattgaa gcggggaaaa gcaatattgg cagaacgatc 2340

cccacactta gcgcttatat tctcgatgag caaagacggc tgcagcctgt tggggttccg 2400

ggagagctat acattgcagg ggacggtctt gcccgtgggt atttgaatcg gccggatttg 2460

acgtctgaga aattcgttga gcatccgtat cgggcgggag agcggctgta ccgaactggg 2520

gatcttgctc gttggttgcc tgatggcaat attgaatatt tgggacggat cgaccatcag 2580

gtcaaaattc gcggctaccg aattgagctt ggcgaggtag aagcccaaat tctcaaggct 2640

ccgaacgtac gagaaacgat tgtcctcgca cgggatgacg aacagggcca aaaattgctg 2700

tgcgcctact atgtagcctc cagtgatctt tcgccggggg aattgcggtc tcagctggca 2760

gcggaactcc ccgcttacat gattccttct tattttgtcc ggctggagca aatgccgctt 2820

acgccaaatg gcaaactgga tcgccgtgcg ttgccggctc ctgaaagcag cgtacaatcc 2880

ggcgaggctt atttggctcc gagaactgct gtggaagctc agatggtact catctggcaa 2940

gatatcttgg gagttgcccg cgtcggtgtc agagataatt tctttgaaat tggtggtcac 3000

tctttgcggg caacagtgct cgtttcacgg attcacaaag aattgggatg tagcatttcg 3060

ctgcgtgagg tgtttcagtc acctacggtc gaatccttgg cgcaacttgt gaaaaaacac 3120

attccgaccc tgtacgaatc catcccacag gcaacggaaa gcgaagctta cccagtgtcc 3180

tcagcgcaaa agcggttata cgtgctgaga cagatggatg ggggagagct tagctacaat 3240

atgccagggg ccttcacagt ggatggaccg ttggatcgca cgcggctgga gtccgcgttc 3300

cagggactga tccagcgtca tgaatcccta agaaccggct tttatatgca ggatggagag 3360

cttgttcagc gtgtgcatag gaatgtgccg ttcgcgttga actatacaga ggcttcggtg 3420

gaggagacgg atacgctcat tcacaacttt attcgtgcct ttgatctgag ccaggctcca 3480

ttactgcgtg ttagcttggt gaagctccag gaggagcgtc atctgttgct gtttgatatg 3540

catcacatca tttcagatgg ggtttctatt caaatattga tacaggaact tactcatttg 3600

tatcaaggag aacagctacc agaactgcac atccaataca aggattatgc cgtatggcaa 3660

cgagaacagt cagagaacca atggcaagat cttgagaaat attggctgca atcctttgaa 3720

ggagagttgc cggtattgga tttgcctaca gacttccaac gaccttcagt tcggagcttc 3780

gagggtagcc gaattgattt tacattggat gagtctggaa ataaggcgat acaagagctt 3840

gcatcccgta caggtactac actgtatatg gtattgctgg ccgcttattc ggtactactg 3900

cacaaatata caggacagga ggacatcgtc gtaggttctc cagtagccgg aagaccgcag 3960

gctgagcttg agggcatcat cggaatgttt gtcaacacac tggccttgcg cagctacccg 4020

gcaggagata aaacctttca ggattatctt ctggaaatca aggaaacggc gctcaaggcg 4080

tttgagcatc aggattaccc ttttgaaaaa ttggtcgaaa agctgggcgt aggacgtgat 4140

gtcagccgca atccgctctt tgacacctta ttggtattac aaaataccga gcaggaagag 4200

caggatatgg acggagtgca ctttactcct tacttgatgg acaccgtcac agccaaattt 4260

gacctgtccc tcaatgtaga ggagaaggga tcaaaattag cctttggcct cgagtatagt 4320

acggctttat atcggcgtga aagtgtagag cgacttgcaa cgcacttgct ccgggttctg 4380

catgcagtct cggccaatcc tcagttgcaa ctggccgaga ttgaaatgat cacaccggag 4440

gagaaagtac agatcgttga agtatttaac gcgacatcgg ccccttatcc aagggacaag 4500

accattcatg atctgttcgc ggaacaagtc aagcgtacac cggagcagac ggcgcttgta 4560

ttcggcgatg tccagctaac gtaccttgaa ttggaagaca aggcgagccg actggcccaa 4620

acactgcgtc gtttgggaac gttgagggag cagcctgtgg ccgtgatggg cggacgaagc 4680

attgagatgg tcattggtat gctcgcggtg cttcaggcag gtggagccta tgtgccgatt 4740

gatcctgatt acccggaaga tcgggttcgt tatatgcttg atgattccga cgccaagcta 4800

ttattggtgc aaaagggcga gcttataagt gtagactacg gtataccgat tgtcgatctt 4860

agcagtgaag aggcttatgc tgctgagcct gcccagccgg agacggctca gggatcgcag 4920

gggcttgctt atgtcatcta tacatcgggt acgacgggta gaccgaaggg cgttatggtt 4980

gaacaccgga acgtggtccg tctggtcaaa gagaccaact atgtggagct gaatgaatcc 5040

acacgaattt tgcaaacagg agccgtggcc tttgatgctt ctacatttga gatatgggga 5100

gcgttgctta acggtgggca gctctatttt gtagagaatg acgacattct gattgctgat 5160

aggctcaaag cggctattgc caagtacggg attacaacat tgtggcttac ttcacccctt 5220

ttcaatcagc tttctctgca ggatgagtac ctgttcagag ggctaaaagc attgttagtc 5280

ggcggtgacg tactgtctct atctcatatg aatcgtgtaa tcgaggctaa tcctgatctt 5340

gtccctatca attgctatgg tccgacagag aatacgacct tctccaccac ctacaagatt 5400

ccaggttgtg ccgaaggggg tgtgccgatt ggtcgcccaa ttagtaattc gaccgcttat 5460

gtggtcaatg gatcgctgca attacagcct attggtgctt ggggtgaact cattgtcggc 5520

ggtgaaggtg tagcacgcgg atatctcaat cgtcctgatc tcacagcaga gaaatttgtt 5580

cctagtcctg tgaaggacgg agaaccctgc taccgaactg gggatttggt acgctggctt 5640

ccagatggga atttggagtt taaaggaaga attgatgagc aggtcaaaat acgtggttac 5700

cgcatcgaac tccctgaaat cgaggcccaa ctggccaagg tggagtcggt aatcgacgcc 5760

gtagtggtcg ttcgcgcgga cgagcttggc gagaagcagc tttgcgctta ttatgtggcg 5820

gatcgtacgc tcacggcagg cgaagtacgt ctttccctat cgcaggtact tccaggctat 5880

atgattccat cctactttat ccagatggat cgtatgccat taacatcaaa cggaaaggtg 5940

gaccgcaggt ctctgccggc tcctcaagta ggcgcgcata caggacggaa gtatacagct 6000

cctcgtacac cggctgagga agctttggca tctgtctggc aaggggtgct gggtgccgaa 6060

caggtgggta tccatgataa tttctttgaa ttgggtggag actccataaa agctatccag 6120

gtgtcgtcac ggttactaca ggccggctat cggttagaga tgaagcagct gttcaaatcg 6180

ccaaccattg ccgagctagg agcggaaata caaacggctg tgcatatggc tgaacaggga 6240

gttgtgcgtg gagcgactcg cttgactcca gtccaacagt ggttctttgg acggaagcag 6300

gcagagcctc atcacttcaa tcaagcggtt atgctgtatc gtgaacaggg atttgaggaa 6360

aaggccttgc atcaggtgct aagaaaactc gctgagcatc atgacgccct tcgcatggtt 6420

ttccgtcaga cagagcatgg ttacgaagct tggaatcgtg atcttgaaga aggagagctt 6480

tatagcctgt tcaccgctga tttacggaat gaatccgatc cggctgcagc cattacatcg 6540

ctgtcggatg acattcagcg cagtatcaat ctggcagaag gcccgctgct gaagttagga 6600

cttttccatt gtcaggatgg agaccacctt ctgatcgtga tccaccattt ggtggtggac 6660

ggagtatcct ggcggatttt gttcgaggat attgcagcag gctatgagca ggtgattcaa 6720

ggacaagcgc tgacattccc gcagaagacg aattccttcc gtgactgggg agacgccctt 6780

gctcgttatt cggaaggtcc tgaaatggag actcatcggg cgtattggag ggagctggag 6840

aatcagccac tcgaacagtt gccgaaggat gaggctgtgg aaagccttct tttacaggat 6900

agcaaagtaa taacagcaca atggactata gaagaaaccg accaattgtt gagaaaagcc 6960

catcgtgctt atcaaacaga gacgaatgat ctgctattga ctgctctggg catggcggta 7020

tccaaatggt ctggcatcgg aaaggttgct gtgaatctgg aaggacacgg tcgtgagccg 7080

attataccga atatcgacat cacccgtacc gtcggctggt ttacaagtca atacccggtg 7140

attttagact tgggggatga cccagaagtg gcctccttga tcaagtctgt gaaagaaggg 7200

ctgcgccgaa ttccgaacaa aggtattggc tacgggttgc ttaaaacgat ggcaagtcag 7260

ttggatgaag acagcttcag cttgcagcct gagatttctt ttaactattt ggggcaattt 7320

gatcaggatt tgcaaggcag ctcgttgcag atttctcctt atccgaccgg aagcgcccaa 7380

agcttgttgg aggaaccagc ctatacgcta gatatcaatg gcatggtgac ggacggagcc 7440

ctgactctga cgattactta taacggaaaa cagtataagt tatctacgat ggaacagctc 7500

gctggatata ttgaagaaag cctgcgagag cttctccagc attgcgtaac ccaagaaaaa 7560

accgtattga caccaagcga cgtgcttgcg aagggtctaa gcattgccga tctggaggag 7620

ctttctaagc agatcagcca cataggcgat attgagaatg tatatagtct gacgccgatg 7680

cagaagggca tgctgttcca tgatatgttt gagccgcata caggtgctta ttttgagcag 7740

gctgcctttg actttaaggg tagctttgat ccgactgcat tcggacacag tctggatgcc 7800

gtggtggagc gtcatgccat cctgcgcacg aacttttaca gcggatgggg cagcgagcct 7860

ttgcaggttg tatttcgaca cagaggcgct aaattggtgt acgaagacct gcgtgagatg 7920

aatgcatcgc agcgcgaagc ttacctgaag acatttggtg ctaaggacaa agcacagggc 7980

ttcaacctag ctgaagacga gcttctccgt gtatcaattt tacaaacaga tgaagagagc 8040

ttccgactct tatggagctt tcaccacatc gtcatggatg gctggtgtgt tccgttaatt 8100

acgcaggagg tatttgaaca ctattttgcc ctcctggaag gaagagagcc gcagctggca 8160

gaggtccatc cgtacagtcg atatatcgaa tggctggaac agcaggatga agcagttgcg 8220

tccaactatt ggagccgata tctggccggt tacgagcagc agacgctttt acctcaagtc 8280

ggtggagcaa gtaagggaga aggctatgta gcagaaaagc tgaattatcc tctcagcagg 8340

gaattgactg agcgccttga aaaggtggcc agggatgctc atgtcacgat gaatatattg 8400

ctgcagtccc tctggggcat tgcgcttcaa cgctacaacg gtagccggga tgtcgtgtac 8460

ggaagtgtag tatcaggccg accagcagaa attccgggca ttgaccggat gatcggtttg 8520

ttcatcaata cgattcccgt tcgtgtgaag acagaggaga atctcccctt caccgttctg 8580

atgaagcagc agcaggaaca atatatggct tctcatatgt atgacaccta cccgttgttt 8640

gagattcagg ctcagacgga tcagaagcag gatctaatct cccatattat ggtgtttgag 8700

aactatcctg tggaggagga ggtagagcgt ctgggtggtg gcgaggctgc ctttgagatt 8760

gaggaagcgg agcttcttga gcaaacgaat tatgatttta atttaattgt cctccctggc 8820

gaagagatga gattgctgtt ccagtacaat gcacttgttt atgaccaagt gacaattggg 8880

caaatcaagg gccatctggt tcaccttatg gaacaaattg tagagaaccc tgctatttcc 8940

gtggatgctc tagaattagt cacgccgcag gagagagaac agattctgaa cgtatgggga 9000

aatatgaaag gcatttacga gcactgtaac acgttccacg ggctattgga ggaacaggcg 9060

ggacgaacgc cggatgcgac tgccatttgg ttcgaggacg agagtctgac ctatgccgag 9120

cttaatgcaa aagccaatgg actggccaga aggctccgta ctcagggaat caagacggga 9180

gatctggtgg gactgattgc tgaacggtcg ctcgaaatga tcgttgggat ctacggcatt 9240

atgaaagccg ggggtgccta tgttccaatc gacccagagt atccgaaaga acgaatcagt 9300

tatatgcttg aagattccgg agcgaagctg atccttacac aggcccatct cttggaacat 9360

ctcggatgga cggaaaatgt tttgctgctg gatgaatcat cgacctatga tgccgacacc 9420

tcgaatttgg aggatactgc tggcccggat gatctggctt acgtgatcta tacttcaggt 9480

acgaccggtc agcctaaggg cgtattagtc gagcatcggg gactaccaaa tctttcaaac 9540

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tcgtttgatg catcggtttc ggaaatttta acggcgctga gccatggggg tgttctgtgc 9660

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gggtacgagc aggcatggaa tggacaagca atcgtccttc cacaaaagac cgattcgtat 14400

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catgttctcc atctgggtgt atctttgaca ggtaaaatgg atgttgtcgc gaagcgcaat 16020

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gtttacgagc aagaaagcat tgcacgaatc ggaggacact tgttgcagat gctcgaccag 16560

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caactttcgg tcagctataa ccgtcatcag ttccacgggg agtctgtggc taagtttgtt 19680

gacattctga agaaccgtct cagcgaagtc attggacatt gcgtaagtaa gaaaagaaca 19740

gaacttacac caagcgatgt actcctcaaa gatatcagct tggaaaaaat cgaggagtta 19800

gaagagcaga cacggcatat cggcagtatt gaaaatatgt ataaactgac gccgatgcaa 19860

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atccaaagga tctcgtccgg tatgggcgtc cagctcccac tccaagtcgt gtttaatctg 22920

ccgactgtgg aagaaatggc gcatgaaatt tccaagctgc aggcaacaac tgctgctaat 22980

gaagaggaaa tggaaattat ccgcttccca gggaaaggaa cgctcaaagt gttttgcttc 23040

cctccacggg tgggccactc tctgggatac tatgagatgg ccaaggagct ggaagggctt 23100

tgcgaggtgt acgggatgga atttatcggc gatcgtttcc agggtcaaga tatgctggat 23160

cgatacatcg atgccatcgt ggatattcaa gcagagggtc cgtatatatt cctgggatac 23220

tcacttggag gaaacctcgc cttcgaggta gctaaagcca tggaaagccg aggtcaccat 23280

gttagcgacc ttattatggt agatgctatg agaaagatgt ccaaggatga atcgacaccg 23340

gaggagcttg aagagattgt cgagatggta ctggacagca ttagggacca gtacaaagcg 23400

ttccttgccg atccagtgga cagggagcga gtcatggaca aaatgttggt ttactccgtc 23460

taccgcgatg agcttattaa ctcaggtgaa gttcatgcga atatccatgc tctaattgca 23520

gaggatgata gtattggtcc ggatacatca ttagataaat tgttatggca acaggcgaca 23580

cttggtcaat acaaagaata cgaagtcatc ggaacgcatg atgtgctgct tgattccggt 23640

tttattgggg aaaatgctaa agtactgaga cagatacttg gcaaggtcac agaggcctca 23700

tctaaaaaca agcccatttt gtcctaa 23727

<210> 2

<211> 23727

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

<400> 2

atgaatgaca tgcagttata tgatttaaca aatgcgcaga agcgtatatg gtataccgaa 60

ttactctacc cagatacgtc agtgtcacag ctttccggta cagctaagat gaaggggcac 120

atcaatattg ctgcctttat gcagtccatt aatttgatta tcaaacagta tgatgcgttc 180

cgcatccgta ttacctcagt ggatggagtg cctcagcagt acgtcgtccc ttatgaagag 240

agacagctgg agtgcctgga tcttagccac tatgaaagtg tatctgaggt ggaagcctta 300

cttgagcaac acaaaagcaa gcccttgccc ctgttggatt ctgagctctt ccagttttta 360

attgtgaaga ttagcgagga agagtattgg attaatatca agatgcacca tattatttct 420

gacggaatat caatggtggt ctatggcaat cagctgacag cattttacat ggagttaatt 480

caaggaaatg aaccgaagct gggcgacgat tgctcgtata ttcaatatat tgctgatgag 540

aatgcatacg aactttctga cagataccaa aaggataagg cttactggct ggataaattt 600

tctgatttgc ctgagcttac gggttggaag tcatataatc cgttatcttt aagcacccac 660

gccgttcggg agcattttac cgtaccagaa gtgctatatc acgagctgca agcattttgc 720

caacagaaca gaatttcttt gttccagttc ttcatgggtg cgatgtatat ctacatacac 780

aaaatgacga atcagccgga tgtggtgatt ggaacttcgt tcgctaaccg ggggaacaaa 840

aaagagaagc aaaagatagg tatgttcgtc agcaccgctg ctgccagaac atacgtcaaa 900

aaggatatag atgtattgag cttcctgcag gatgtagcca gagatcagat gtcagtcctg 960

cggcatcaga aatatccata caatcagtta attcaggatc ttagagaaat gcatgggaac 1020

aaggatattc agcggctttt tggcgtttcc atggaatatc gtcttatcaa ttgggttgat 1080

ttggatgatg tgcgtatttt gacagattat gatttctgcg gggacgaagt gaacgatttc 1140

gtgcttcata tcgtggagat tctggatgaa ggcgaactgg tactggatgt cgattatcgg 1200

acagagctgt ttgaacgcag tgaagttaag gacatggttt cccagttgct tacgatcgcc 1260

gagcagatca ttcattcacc tcagctttct attgcagagg taaacttatt gggtgaacca 1320

gaagagcaat ccattttggc tctttcggaa ggcgccgcag tcgattatcc acgtgagaag 1380

accattcatg gcttattcga ggaacaagcc gagcgcacac cagatcacgt agccgttcag 1440

atggacgagc agagcattac ataccaagct ctaaacgagc aggctaacca gcttgcgaga 1500

tatttgcgct ccgagggagt aggagcagat acgctcgtag ggattatggc tgaccgttcc 1560

ttggagatgg tcatcgggat gttggccatt ttgaaagcag gtggtgccta tgtaccgatt 1620

gaccccgatt atcccgaaga acgtatccat tatatgctgg aggattcagg tgtccgtctg 1680

ttgctcaccc aaagtcatct atgggagagc accacttttg acggaaagct tgtgagtctg 1740

gacgaagcta caacgtatac aggggatgct tccaatctgg agagtatttc gggaccaagc 1800

catctggcct atgttatcta cacgtcgggt acgaccggca agccgaaggg cacgctgatt 1860

gaacacaaaa acgtagttcg actgctcttt aacgataaaa atctatttga tttcagctct 1920

caggatacgt ggacgctatt ccattcgttc tgcttcgatt tctccgtttg ggagatgtac 1980

ggagcgcttc tttacggagg gaaattggtg attgttccat ctctcacagc caagagccca 2040

gcagctttcc tggagttgtt gaaagacaac caagtcacca ttttaaatca gacgccgacg 2100

tatttttatc aggtgctaca ggaagagtta acgcactctt cgacagagct tggccttaga 2160

aaaatcattt ttggtggaga ggccttaagt ccatctcttc tgagaaactg gcgggtcaag 2220

tatcctgatg tgcagctgat taatatgtac ggaattacgg aaacaacagt ccatgtcacc 2280

tacaaggaaa tcacggaaca tgagattgaa gcggggaaaa gcaatattgg cagaacgatc 2340

cccacactta gcgcttatat tctcgatgag caaagacggc tgcagcctgt tggggttccg 2400

ggagagctat acattgcagg ggacggtctt gcccgtgggt atttgaatcg gccggatttg 2460

acgtctgaga aattcgttga gcatccgtat cgggcgggag agcggctgta ccgaactggg 2520

gatcttgctc gttggttgcc tgatggcaat attgaatatt tgggacggat cgaccatcag 2580

gtcaaaattc gcggctaccg aattgagctt ggcgaggtag aagcccaaat tctcaaggct 2640

ccgaacgtac gagaaacgat tgtcctcgca cgggatgacg aacagggcca aaaattgctg 2700

tgcgcctact atgtagcctc cagtgatctt tcgccggggg aattgcggtc tcagctggca 2760

gcggaactcc ccgcttacat gattccttct tattttgtcc ggctggagca aatgccgctt 2820

acgccaaatg gcaaactgga tcgccgtgcg ttgccggctc ctgaaagcag cgtacaatcc 2880

ggcgaggctt atttggctcc gagaactgct gtggaagctc agatggtact catctggcaa 2940

gatatcttgg gagttgcccg cgtcggtgtc agagataatt tctttgaaat tggtggtcac 3000

tctttgcggg caacagtgct cgtttcacgg attcacaaag aattgggatg tagcatttcg 3060

ctgcgtgagg tgtttcagtc acctacggtc gaatccttgg cgcaacttgt gaaaaaacac 3120

attccgaccc tgtacgaatc catcccgcgg gcagcggaaa gcgaagctta cccagtgtcc 3180

tcagcgcaaa agcggttata cgtgctgaga cagatggacg ggggagagct tagctacaat 3240

atgccagggg tcttcacagt ggatggacca ttggatcgca cgcggctgga gtccgcgttc 3300

caggcactga tccagcgtca tgaatcccta agaaccggct tttatatgca ggatggagag 3360

cttgttcagc gtgtgcatag gaatgtgccg ttcgcgttga actatacaga ggcttcggtg 3420

gaggagacgg atacgctcat tcacaacttt attcgtgcct ttgatctgag ccaggctcca 3480

ttactgcgtg ttagcttggt gaagctccag gaggagcgtc atctgttgct gtttgatatg 3540

catcacatca tttcagatgg ggtttctatt caaatattga tacaggaact tactcatttg 3600

tatcaaggag aacagctacc agaactgcac atccaataca aggattatgc cgtatggcaa 3660

cgagaacagt cagagaatca atggcaagat cttgagaaat attggctgca atcctttgaa 3720

ggagagttgc cggtattgga tttgcctaca gacttccaac gaccttcggt tcggagcttc 3780

gagggtagcc gaattgattt tacattggat gagtctggaa ataaggcgat acaagagctt 3840

gcatcccgta caggtactac actgtatatg gtattgctgg ccgcttattc ggtactactg 3900

cacaaatata caggacaaga ggacatcgtc gtaggttctc cagtagccgg aagaccgcag 3960

gctgagcttg agggcatcat cggaatgttt gtcaacacac tggccttgcg cagctacccg 4020

acaggagata aaacctttca ggattacctt cttgaaatca aggaaacggc gctcaaggcg 4080

tttgagcatc aggattaccc ttttgaaaaa ttggtagaaa agctgggcgt aggacgtgat 4140

gtcagccgca atccgctctt tgacacctta ttggtattac aaaataccga gcaggaagag 4200

caggatatgg acggagtgca ctttactcct tacttgatgg acaccgtcac agccaaattt 4260

gatctgtccc tcaatgtaga ggagaagggg tcaaaattag cctttggcct cgagtatagt 4320

acggctttat atcggcgtga aaccgtagag cgacttgcaa cgcacttgct ccgggttctg 4380

cacgcagtct cggccaatcc tcagttgcaa ctggccgaga tagaaatgat cacaccggag 4440

gagaaagtac agatcgttga agtatttaac gcgacatcgg ctccttatcc aagggacaag 4500

accattcatg agctgttcgt agaacaagtc aagcgtacac cagagcagac ggcgcttgta 4560

ttcggcgatg tccagctaac gtaccttgaa ttgcaagaca aggcgagccg actggcccaa 4620

acactgcgtc gtttgggaac gttgagggag cagcctgtgg ccgtgatggg cggacgaagc 4680

atcgagatgg tcattggtat gctcgcggtg cttcaagcgg gtggagccta tgtgccgatt 4740

gatcctgatt acccggaaga tcgggttcgt tatatgcttg atgattccga cgccaagtta 4800

ttattggtgc aaaagggcga gcttataagt gtagactacg gtataccaat tgtcgatctt 4860

agcagtgaag aggcttatgc tgctgagcct gcccagccgg agacggctca gggatcgcag 4920

gggcttgctt atgtcatcta tacatcgggt acgacgggta gaccgaaggg cgttatggtt 4980

gaacaccgga acgtggtccg tctggtcaaa gagaccaact atgtggagct gaatgaatcc 5040

acacgaattt tgcaaacagg agccgtggcc tttgatgctt ctacatttga gatatgggga 5100

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aggctcaaag cggctattgc caagtacggg attacaatat tgtggcttac ttcacccctt 5220

ttcaatcagc tttctctgca ggatgagtac ctgttcagag ggctaaaagc attgttagtc 5280

ggcggtgacg tactgtccat atctcatatg aaccgtgtaa tggaggctaa tcctgatctt 5340

gtccctatca atggctatgg tccgacagag aatacgacct tctccaccac ctacaagatt 5400

ctgggtcgtg ccgaaggggt cgtgccgatt ggccgcccaa ttagtaattc taccgcttat 5460

gtggtcaatg gatcgctgca attacagcct attggtgctt ggggtgaact cattgtcggc 5520

ggtgaaggtg tagcgcgcgg atatctcaat cgtcctgatc tcacagcaga gaaatttgtt 5580

cctagtcctg ttaaggacgg agaaccctgc tacagaactg gggatttggt acgctggctt 5640

ccagatggca atttggagtt taaaggaaga attgatgagc aggtcaaaat acgtggttac 5700

cgcatcgaac tccctgaaat cgaggcccaa ctggccaagg tggagtcagt aatcgacgcc 5760

gtagtggtcg ttcgcgcgga tgagcttggc gagaagcagc tttgcgctta ttatgtggcg 5820

gatcgtacgc tcacggcagg cgaagtacgt ctttccctat cgcaggtact tccaggctat 5880

atgattccat cctactttat ccagatggat cgtatgccat taacgtcaaa cggaaaagtg 5940

gaccgcaggt ctctgccggc tcctcaagta ggcgcgcata caggacggaa gtatacagct 6000

cctcgtacac cggctgagga agctttggca tctgtctggc aaggggtgct gggtgccgaa 6060

caggtgggta tccatgacaa tttctttgaa ttgggtggag actccataaa agctattcaa 6120

gtgtcgtcac ggttactgca ggccggctat cggttagaga tgaagcagct gttcaaatcg 6180

ccaaccattg ccgagctagg cgcggaaatt caaacggctg tgcatatggc tgaacaggga 6240

gttgtgcgtg gaacgactcg cttgactcca gtccaacagt ggttctttgg acggaagcag 6300

gcagagcctc atcacttcaa tcaagcggtt atgctgtatc gtgaacaggg atttgaggaa 6360

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tatagcctat tcaccgctga tttacggaat gaatccgatc cggctgcagc cattacatcg 6540

ctgtcggatg acattcagcg cagtatcaat ctggcagaag gtccgctgct gaagttagga 6600

cttttccatt gtcaggatgg agaccacctt ctaatcgtga tccaccattt ggtggtggac 6660

ggagtatcct ggcggatttt gttcgaggat attgcagcag gctatgagca ggtgattcaa 6720

ggacaagcgc tgacattccc gcagaagacg gattccttcc gtgactgggg agacgccctt 6780

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gatcagccac tcgaacagtt accgaaggat gaggctgtgg aaagccttct tttacaggat 6900

agcaaagtag taacagcaca atggactcta gaagaaaccg accaattgtt gagaaaagcc 6960

catcgtgctt atcaaacaga gacgaatgat ctgctattga ctgctctggg catggcggta 7020

tccaaatggt ctggcatcgg aaaggttgct gtgaatctgg aaggacacgg tcgtgagccg 7080

attataccga atatcgacat cacccgtacc gtaggctggt ttacaagtca atatccggtg 7140

attttagact tgggggataa cccggaagtg gcctccttga tcaagtctgt gaaagaaggg 7200

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ttggataaag acagcttcag cttgcagcct gagatttctt ttaactattt ggggcaattt 7320

gatcaggatt tgcaaggaag ctcgttgcag atttctcctt atccgaccgg aagcgcccaa 7380

agcttgttgg aggaaccggc ctatacgcta gatatcaatg gcatggtgac ggacggagcc 7440

ctgactctga cgattactta taacggaaaa cagtataagt catctacgat ggaacagctc 7500

gctggatata ttgaaaaaag cctgcgggag cttctccagc attgcgtaac ccaagaaaaa 7560

accgtattga caccaagcga cgtgcttgcg aagggtctaa gcattgccga tctggaggag 7620

ctttctaagc agaccagcca cataggcgat attgagaatg tatatagtct gacgccgatg 7680

cagaagggca tgctgttcca tgatatgttt gagccgcata caggtgctta ttttgagcag 7740

gctgcctttg actttaaggg tagctttgat ccgaccgcct tcggacacag tctggatgca 7800

gtggtggagc gtcatgccat cctgcgcacg aacttttaca gcggatgggg cagcgagcct 7860

ttgcaggttg tatttcggca cagaggcgct aaattggtgt acgaagacct gcgtgagatg 7920

aatgcatcgc agcgcgaagc ttacctgaag acatttggtg ctaaggacaa agcacagggc 7980

ttcaacctag ctgaagacga gcttctccgt gtatcaattt tacaaacaga tgaagagagc 8040

ttccgcctct tatggagctt tcaccacatc gtcatggatg gctggtgtgt tccgttaatt 8100

acgcaggagg tatttgaaca ctattttgcc ctcctggaag gaagagagcc gcagctggca 8160

gaggttcatc cgtacagtcg atatatcgaa tggctggaac agcaggatga agcagttgcg 8220

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ggtggagcaa gtaagggaga aggctatgta gcagaaaagc tgaattatcc tctcagcagg 8340

gaattgactg agcgccttga aaaggtggcc agggatgctc atgtcacgat gaatatattg 8400

ctgcagtccc tctggggcat tgcgcttcaa cgctacaacg gtagccggga tgtcgtgtac 8460

ggaagtgtag tatcaggccg accagcagaa attccgggca ttgaccggat gatcggtttg 8520

ttcatcaata cgattcccgt tcgtgtgaag acagaggaga atctcccctt cacagttctg 8580

atgaagcagc agcaggaaca atatatggct tctcatatgt atgacaccta cccgctgttt 8640

gagattcagg ctcagacgga tcagaagcag gatctaatct cccatattat ggtgtttgaa 8700

aactatcctg tggaagagga ggtagagcgt ctgggtggtg gcgaggctgc ctttgagatt 8760

gaggaagcgg agcttcttga gcaaacgaat tatgatttta atttaattgt cctccctggc 8820

gaagaaatga gattgctgtt ccagtacaat gcacttgttt atgacccagt gacaattgag 8880

caaatcaagg gccatctggt tcacctcatg gaacaaattg tagagaaccc tgccatttcc 8940

gtggatgcac tagaattagt cacgccgcag gagagagaac agattctgaa cgtatgggga 9000

aatacaaaag gcatttacga gcactgtaac acgttccacg ggctgttgga ggaacaggcg 9060

ggacgaacgc cggatgcgac tgccatttgg ttcgaggacg agagtctgac ctatgccgag 9120

ctcaatgcaa aagccaatgg actggcgaga aggctccgta ctcagggaat caagacggga 9180

gatctggtgg gactgattgc tgaacggtcg ctcgaaatga tcgttgggat ctacggcatt 9240

atgaaagccg ggggtgccta tgttccaatc gatccagagt atccgaaaga acgaatcagt 9300

tacatgcttg aagattccgg ggcgaagcta atccttacac aggcccattt cttggagcat 9360

ctcggatgga cggaaaatgt tttgctgctg gatgaatcat cgacctatga tgccgacacc 9420

tcgaatttgg aggatactgc tggcccggat gatctggctt acgtgatcta tacttcaggt 9480

acgaccggtc agcctaaggg cgtattagtc gagcatcggg gactaccaaa tctttcagac 9540

gtatatgggg cacacttcga agttacaccg caggatcgga tcgttcagtt tgcaagcctg 9600

tcgtttgatg catcggtttc ggaaatttta acggcgctga gccatggggg tgttctgtgc 9660

atcccttcta cagaagatat tttagatcat gccctgttcg agcagttcat gaacgataag 9720

ggggttacgg tagcgacttt gccacccgct tacgctatcc accttgatcc agagcgtttg 9780

ccaacactgc ggtgcctgct aaccgctgga tcggccgcat cggtcgagtt gatcgaagag 9840

tggaggaagc atgtacgtta ctctaatggc tatggcccaa cggaggactc cgtatgcacc 9900

acaatctggt ctgtcccgga cagtgaggaa gcaacggata ttgtatctat tggacgtcct 9960

attgctaacc atagtgtgta catcttggat gaccatttta gattgcaacc tgtcggtgta 10020

gctggagagc tatgcatttc gagtatcgga ttagcacggg ggtatcataa ccagcctgag 10080

ttaatggatg agaaattcgt agacaatccg tttgctccag gagagcgtat gtatcggacg 10140

ggtgacctgg ttcgctggtt accgaatgga accatcgagt acttaggcag aatagatcac 10200

caagtcaaaa tccgcggcta ccgtatcgag ctaggcgagg tagaagcaca aatgctcaga 10260

gtgccgtccg ttcaggaagt cgtagccatg gctgcagagg gcgaagacgg ctacaaagat 10320

ctagtcgctt atttcgtagc tgctcagaaa cttgaggtat ccgagcttcg ggccgtcctg 10380

tcggagatgt tacctggata tatgatccct tcccgcttca tacaactgga ggatatgcct 10440

ctgacgtcga acggaaaaat cgatcgaaaa gcgctgcagg gcgagcgtgg atgggcagcg 10500

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gtgctgggtg tagagagcgc gggagtgaag gatgatttct tccattttgg aggtcattcc 10620

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agagcagtgt tcgagtctcc tactattgaa ggattggctc gtgccattga gggctataca 10740

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ccgggtatcc ttaccgttga gggagctttg gatcgggaac ggctagagca ggcattccgt 10920

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caagaggagg acgtattccc tgaactacag atccagtaca cagactatgc tgtatggcag 11280

caagagcagc tcggaagcga gcgtcttaag gcccaggaag cttactggct ggatgctttc 11340

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ttacacaagt acacaggtca ggaagatgtc attgtcggtt cacctgtggc aggaagatcc 11580

catgcgacac tcgaaggcct catcggtatg ttcgtcggca cagtggcact tcgtacttat 11640

ccagaaggag agaagccttt cgaggcttat ctgcaggaag tgaaggaaac agcgctgcgg 11700

gcctatgaaa accaggatta cccgttcgag gagctggtag acaagctgga gcttcagcgt 11760

gatttgagcc gtaacccgct atttgatacc atgtttgtcc tgcaaaatat tgagcaggga 11820

gaacaagaaa tagaaggatt gcgcttcact ccttacgata atgtacatcc ggctgccaag 11880

ttcgatctca cgctgaccgt gagtgaagca gacggggtat tgaactgcac gcttgagtac 11940

gcgactgcga tctacaaaca agagactgcc cagcggatgg caggccactt tgtacagctt 12000

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caggaaaaat caaggctgat gaaagcgccg gacgaagcca aggcagatta tcctcgtgac 12120

aagacgatcc atgcgctgtt cgaggaacag gctgcacgta ctccgaatgc agtggcagtc 12180

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agaacgctaa gggaacgtgg tttgcaacca gacggtttgg ctggaatcat ggcggatcgt 12300

tcccttgaaa tggtggtcgg gattttagcc atcttgaagg caggcggagc ctatgtccct 12360

gtagaccctg aatatccaga ggaccgcatt cgctttatgc ttgaggattc gggagccaag 12420

ctactgctga cacaagcgca tctggagcaa cgtgtctcct tcgctgggga catcgtgagt 12480

ctggataaaa tggcttccta taaggaagat gtctcaaacc tgcagcctgc agccggaccg 12540

gagcatcttg cctacgtcat ctacacatca ggtacgacag gcaagccaaa gggaacgctg 12600

atcgagcata aaaatgtagt tcgcttgctc tttaatgata aaaatatgtt tgactttggt 12660

cctcaggata cgtggacact gttccattca ttctgttttg acttctctgt atgggaaatg 12720

tacggagcat tgctgaacgg aggacggttg gtcatcgttc catcgcttac cgcgaagagt 12780

ccagatcgtt tcttgcaatt gcttaaggat cagaaggtca ccgttttgaa ccagacaccg 12840

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aagtatccgc aagtgcagct cattaacatg tacggcatta ccgaaacgac cgtgcatgta 13020

acatacaagg aaattacaga gttggaaatt gaacagggcc gcagcaatat cggcaccacg 13080

attccaacgc tgcgagcgta cattttggat gaacaacgcc gtccacagcc gattggcatt 13140

ccaggtgaac tttatgtggc gggcgtaggt ctggcgcgag gctatctgaa ccgaccggaa 13200

ttgacggaag agaagtttgt cgctcatccg tttgaagcgg gcgagcgcat gtaccgctcg 13260

ggtgacttgg cacgctggtt gccggatggc agcatggagt atttgggacg gattgaccat 13320

caggttaaaa tccgtggtta ccgtattgag ctgggcgaag tggaagcgaa gctgctccat 13380

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cttgtcggct atttcactgc cgatcagatg ctgacggtag gcgagttgag aaaagccttg 13500

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gactccatca aggcgatcca agtgtcctcg agattgttcc aagctggata taaattagag 13800

atgaaggatc tcttcaaata tccgacaatt gccgagctaa gcccgtatct tcaggcagct 13860

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tggttctttg aacgccatac agcggagccg caccattata atcatgccgt catgctctat 13980

cggaaagacg gctttgatga ggctgcactc cggttgacaa tggaccaaat tgcgatccat 14040

catgacgcgc tgcgcatggt tttccggcct acagaagctg gatacgcagc ttggaatcgg 14100

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gggtacgagc aggcatggaa tggacaagca atcgtccttc cacaaaagac cgattcgtat 14400

cttgtatggt ctgagcaagc gacgaagtat gcagcagggc ctgctctgga caaggagcgt 14460

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aattatcttg ggcagtttga tcaggatttg gagggtaatg cccttagctt atccacacat 15000

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cacgtaaccg tcaatacact catgcagaca gcttggggac tgattcttca acgttataat 16080

gccagctcgg atgtcgtttt cggcggcgtt gtgtcgggta gacccgctga gattgcaggg 16140

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aaagatatga ccatcccggc agaaagtcgc attcagcagc ttattgtggg tggagagaat 17460

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attgagcttg gtgagattga ggccaagttg ctggatatgc cacttgtcga ggaagctctc 17940

gttgttgcgt gggcagacgc caatggacag aagtctctgt gtgcttactt tgtagcggat 18000

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attccgtctt acttcgtcca actggacgtg atgcctctga caccgaatgg caagctggat 18120

cgcaaggcac tgcctgaacc gaactcgggt ataaaggcgg gagcagactt taccgctccg 18180

cggacggatg tggagaacat tttggcttca atctggcaag gtgtacttgg cgtgccgctg 18240

gtcggcatac atgataattt ctttgaactt ggaggtgact cgatcaaatc cattcaagta 18300

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acaattgcag agttggcgca gcgcgttagt gtggtcagcc gaattgcgga ccaaagcgag 18420

gtacacggag cggtaagact gggacctgct cagcacagat tcttcgatga acagtcaatg 18480

gatctgcatc actttaatca gtcggtcatg ttgtaccgac gggatggctt caataccgat 18540

gcgctcgccg aggttgttcg gaaaattgca gagcatcatg atgctttacg actggtgttc 18600

cgccaaggag agcagggatt tgaggcctgg aaccggagca tgggtgaggg tgagctctat 18660

agcctccaaa tccacgacct gcgggatgag acagacccgg cttcagcaat agaagcaggt 18720

gcggaagcca ttcagcgcag catctctctg gaggatggac ctctctttag actgggtctg 18780

ttccgctgtg cggaaggcga acatctgttg atcgttattc atcatctggc tgtggatggc 18840

gtatcctggc gtattctttt tgaggacctg caggatggct acgagcaggc agcacgtgga 18900

gaagcggtca agcttccaca gaagacggat tcgtaccgtg catgggttga gggaatcaca 18960

caatttgcga atagtctggc ggctgaacaa gaacgcagct attgggtaga ggtagaggga 19020

gatggctttg tccctcttcc caaagacaag gtagacggcg ctcttctcat caaagacagt 19080

gaggctgtca cggtgagatg gtcaccagaa gagacagagc agttcctgaa agaagcgaac 19140

cgcacttaca atacggaggt caacgatctg ctcctgacgg ctctgggtat ggctgttcac 19200

gagtggacag gaatcgaacg tgtaggcatc cttctggagg gacatggacg ggagcctgtt 19260

gtgccggaac tggatattac tcgcacaata ggctggttta caagtcaata ccctgtcgcc 19320

cttgagatgg gaggggaatt ggagatcggc gccagaatca agcacgtcaa ggaaggcttg 19380

cgtcgtatcc cgaacaaagg tgtcggatat ggtattttga aatatttaag cgacggttcc 19440

gacgtctcct ccttctcggc tgaacctgag attaccttca actacttggg acagttcgac 19500

caggatcttg caggagggat gatggaagta tcgtcttatt cagtaggacc tgaggtcagt 19560

gagcagatgg tgcagcatca ggcattgaac attaatggac tgattgccga aggacagctt 19620

caactttcgg tcagctataa ccgtcatcag ctcgacgggg agtccgtgac taagtttgtt 19680

ggcattctga agaaccgtct cagcgaagtc attggacatt gcgtaagtaa ggaaagaaca 19740

gaacttacac caagcgatgt actcctcaaa gatatcagct tagaaaagat tgaggagcta 19800

gaagagcaga cacggcatat cggcagtatt gaaaatatgt ataaactaac accgatgcaa 19860

aaaggaatgt tgttccacag cttgctggaa cctcattcgg aagtctactt tgagcaggcc 19920

aaatttgaaa ttcagggagc attctatcct gaggatttca aacgcagctt aaaatatctg 19980

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ggagaacttc atcagcaggc gaaccgcctt gcacgtacgc tgcgtgccca agggatcaga 21360

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cgtacgcaga cagaagtaga gctcgctcag atttggtccg aggtgctcgg cgtacaggaa 22800

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cgatacatcg atgccatcgt ggatattcaa gcagagggtc cgtatatatt cctgggatac 23220

tcacttggag gaaatctcgc cttcgaggta gctaaagcca tggaaagccg aggtcaccat 23280

gttagcgacc ttattatggt agatgctatg agaaagatgt ccaaggatga atcgacaccg 23340

gaggagcttg aagagattgt cgagatggta ctggacagca ttagggacca gtacaaagca 23400

ttcctcgccg atccagtgga cagggagcga gtcatggaca aaatgttggt gtactccacc 23460

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gaggatgata gtattggtcc ggatacatca ttagataaat tgttatggca acaggcgaca 23580

cttggtcaat acaaagaata cgaagtcatc ggaacgcatg atgtgctgct tgattccggt 23640

tttattgggg agaatgctaa agtactgaga cagatacttg gcaaggtcac agaggcttca 23700

tctaataaca agcccatttt gtcctaa 23727

<210> 3

<211> 23724

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

<400> 3

atgaatgaca tgcagttata tgatttaaca aatgcgcaga aacgtatatg gtataccgaa 60

ttactctatc cagatacgtc agtgtcacag ctttccggta cagccaagat gaagggccgt 120

atccatatcg ctgccttcat gcagtccatt aatttgatta tcaaacagta tgatgcgttc 180

cgcattcgta tcacctcagt ggatggagtg cctcagcagt atgtcgttcc ttatgaagag 240

agacagttgg agtatctgga ccttacccac tatgaaagta tctctgaggt ggaagcctta 300

cttgagcaac acaaaagcaa acccttgcaa ctgctggatt ctgagctatt ccagtttttg 360

attgtgaaga ttagcgagga tgagtattgg attaatacca agatgcacca tattatttct 420

gacgggatct caatggtgat ctatggcaat caattgacgg aattttacat gcagatcatt 480

caaggaaatg aaccgacgct gaatgacgat tgctcctata ttcaatatat tgcagaagag 540

aacgcatacg agctttctga cagatatcaa aaggacaaga catactggct caataaattt 600

tctgatttac ctgaacttac gggttggaag tcatacaatc cgttatctct gagcacccac 660

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aaagagaagc aaaagatcgg tatgttcgtt agtacggctg cagccagaac atacgtcgaa 900

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cggcatcaga agtatccata taatcagtta attcaggatc ttagagaaat gcatggtaac 1020

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gatcccgatt atcccgaaga acgtattcgt tacatgctag aggattcagg agtccgtctg 1680

ttgctcaccc aaagccatct atgggagagt accacatttg acggaaagct tgtgaatctg 1740

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caggatacgt ggacgctatt ccattcgttc tgctttgact tctccgtttg ggagatgtat 1980

ggagcccttc tctacggagg aaaattggtg attgttccgt ctcttacagc caagagtcca 2040

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ccgaatgtaa gggaaacgat tgtcctcgca cgggacgacg aacagggcca aaaattgctt 2700

tgcgcctact acgtggcctc caccgacctt tcgccgggcg aattgagatc tcagctggca 2760

gtggaactac cagcctacat gatcccctct tattttgtcc ggctggagca aatgccgctt 2820

acgccaaatg gtaagctgga tcgtcgcgcg ctgccagatc ctgaaggcag tgtacaatcc 2880

agcgaggttt atctggctcc gagaactgct gcggaagcgc agatggtgct aatctggcaa 2940

gatatcctgg gagttgcccg cgtcggtgtc agagataatt tctttgaaat tggtggtcac 3000

tctttgcggg caacattgct cgtttcgcgg attcacaaag agttgggatg tagcatttcg 3060

ctgcgcgaag tgtttcagtc gcctacggtt gagtctttgg cgcaactggt caaaaagcac 3120

attccgacag tgtatgaatc catcccacag gcggaggaaa gcgcatctta cccagtgtcc 3180

tcagcgcaaa agcggttata cgtgttgaga caaatggacg gaggagagct cagctacaat 3240

atgcctgggg cattcacagt ggatgggccg ttggatcgcg tacggctgga gtctgcgttc 3300

caggcactga tccagcgtca cgaatcgctg agaacgggct tctatatgaa ggatggagag 3360

cttgttcagc gtgtgcataa ggaagtgccg tttgcgttgg actgcacaga agcttcggtg 3420

gaggagacgg atacgctcat acgcagcttt atccgtgcct ttgatctcag ccaggcccca 3480

ttactgcgtg ttggcttggt gaagctgaaa gaggaacgtc atctgttgct gtttgatatg 3540

caccatatca tttcggatgg ggtttccatt caaatactgg tggaagaact cacctcattg 3600

tatcagggag aacagctgcc agaactgcac atccagtaca aggattatgc tgtatggcaa 3660

cgggagcatt cagagaacca gtggaaagag cttgaagcat actggctgca ggcttttgaa 3720

ggggaactgc ctgtacttga tttgcctacg gattatcaaa gaccttctgt tcgcagcttc 3780

gagggtagcc gaattgattt tacattggat gcatccggca ataaggcaat acaggaactc 3840

gcatcccgta caggtactac gctgtatatg gtattgctgg ctgcttattc ggtcctgttg 3900

cacaaatata cggggcagga ggacatcatc gtaggttctc cggtggccgg aagaccgcaa 3960

acggagcttg agagcatcat cgggatgttt gtcaatacac tggctatgcg cagctatccg 4020

gcaggagata agacatttca ggattatctt ctcgaaatca aggaaacggc gctcaaggcg 4080

ttcgagcatc aggactatcc tttggaaaaa ctgattgaga agctgggtgt aggacgtgat 4140

gtcagccgca atccactctt tgatactctg ttggtattgc aaaatacgga gcaggcagag 4200

caggacatgg gcgggctgcg ctttactcct tacccgctgg agactgttac agccaaattt 4260

gacctgtcac tcaatgtaga ggagcagggg gcagagctag cttttggttt ggagtatagc 4320

acggctttat atcagcgaga gagtgtagag cgactggcta tgcacttgct tcgggttctg 4380

catgcggttg ctgtcaatcc ccagttaaag ctggcggaga ttgagatgat cacaccggag 4440

gagaaggtgc agatcattga agaattcaat gcgacatcgg ctccttatcc aagtgagaag 4500

actattcatg agctgttcgc agagcaagta aagcgtacac cggagcagac ggcgcttgta 4560

ttcggcaacg tccagctaac ctacctcgaa ttggaagaga aggcggggcg gctggcccaa 4620

acactgcgtc gcttgggaac gttgagggag cagcctgtag ccgtgatggg cggacgaagc 4680

atcgagatgg tcattggtat gctcgcgata ctacaggcgg gtggagccta tgtgcctatt 4740

gatcccgaat acccggaaga ccgggttcgt tatatgctca atgattccgg cgccaagcta 4800

ctactggtgc aaaagggtga gtttgtaagt gtagactacg gtttaccgat tgtcgacctc 4860

agcagtgaag aggcttatgc agccgaacct gcccagctgg agactgccca ggggtcacag 4920

gggcttgctt atgtcattta tacatcggga accacaggta ggccgaaggg cgttatggtt 4980

gaacaccgga acgtggtccg tctggtcaaa gagactaact atgtggagtt gaatgaatcc 5040

acacgaattt tgcagacagg agccgtggcc ttcgatgctt ctactttcga gatatggggg 5100

gcgttgctta acggcggaca gctctatttc gtagagaatg acgacattct gattgctgat 5160

aggctcaaag ctgccatcgc caagtacagg attacgacgt tgtggctcac ttcaccgctt 5220

ttcaatcagc tttcattgca ggatgagtac ctgttcagag ggctaaaaac attgctcgtc 5280

ggcggtgacg tactgtccat atctcatatg aaccgtgtga tcgatgctaa tcctgatctt 5340

gttcctgtca attgctatgg tccgacagag aatactacct tctccaccac ctacaagatt 5400

ccgggtcgat ttgaaggggg agtaccgatt ggtcgcccga ttagcaactc gaccgcttat 5460

gtagtcaatg gatcgcttca attacaaccc attggtgctt ggggtgaact gattgtcggc 5520

ggtgaaggtg tagcgcgcgg atatctcaat cggcctgatc tcacggcaga aaaatttgtc 5580

cctagtcccg tgaaggacgg agaatcctgc taccgaactg gtgatctggt acgctggctt 5640

ccagatggca atctggaatt taaaggaaga atcgatgaac aggttaaaat acgtggctac 5700

cgcattgagc tccccgaaat cgaggctcag ttggccaagg tggagacggt catcgacgcc 5760

gtagtagtcg ttcgcgcgga tgagcttgga gagaagcagc tttgcgctta ttatgtggcg 5820

gatcgcatgc tcaccgcagg agaagtgcgt cttgctctat cgcaggtact tccgggttat 5880

atgatcccgt cctattttgt gcagctggat cgtatgccat taacgtcgaa cggaaaagtg 5940

gaccgcagat ctctgccggc tccccaagtg ggtgcgcata cgggacggaa ttatacggct 6000

cctcgtacac cggcggaaga agccttggcg tctgtttggc aaggggtgct gggtgccgat 6060

caggtgggta tccatgacaa tttctttgaa ctgggaggag actccattaa ggcgattcag 6120

gtttcgtcac ggctactaca ggctggttat cgcttagaga tgaaggagct gttcaaatcc 6180

ccaaccattg cggagctagg cgcggaaata caaaccgctg tgcgcatggc cgaacaggga 6240

gctgtgcgtg gagcgacttg cttgactcca gtccaacagt ggttctttgg acggaagcag 6300

gcagagccgc atcacttcaa tcaagcggtc atgctgtacc gtgaacaggg atttgaggaa 6360

aaggctttgc accgtgtgct aagaaaactc gctaagcatc atgacgccct tcgcatggtt 6420

ttccgtcaga cagagcatgg ctacgaagct tggaatcgtg atcttgaaga aggagagctt 6480

tataacctgc ttaccgctga tttacggaat gaatccgatc cggctgcagc tattacaacg 6540

ctgtcggatg acattcagcg cagtatcaat ctggcagaag gtccgctgct gaagttagga 6600

cttttccatt gtcaggatgg agaccatctc ctgatcgtga tccaccattt ggtggtggac 6660

ggagtatcct ggcggatttt gtttgaggat atcgcagcag gctatgaaca ggtgactcaa 6720

ggacaagcgc tggtattccc gcagaagacg gactccttcc gtgactgggg cgatgcgctt 6780

tcccgttatt ccgaaagcca ggaaatcgaa attcatcagg cgtattggag agaactggaa 6840

ggtcagcaac ttgagcagtt gccgaaggat gaggctgtag agagccttct tttacgggat 6900

agcaaagtgg taacagcaca atggactata gaagaaaccg accaattgct gagaaaagct 6960

caccgtgctt accaaacgga gacgaacgat ctgttattga ccgctctggg catggccata 7020

tccaagtggt ccggcattgg aaagattgct gtgaatcttg aaggccatgg tcgtgaaccg 7080

attataccga atatcgacat cacccgtact gttggctggt ttacaagcca atatccggtg 7140

attttagact tgggcgataa cctggaagtg gcagccttga tcaagtctgt gaaagaagga 7200

ctgcgccaaa ttccgaacaa gggtatcgga tacgggttgc tcaaaaccat ggcaagtcag 7260

gtggatgcag acagcttcag cttgcagcct gagatttctt ttaactatct ggggcaattt 7320

gatcaggatt tgcaaggaag ctcgttgcag atttcgcctt atccgaccgg aaacgcccaa 7380

agcttgttgg gggaaccagc ctacacgcta gatatcaatg gcatggtgac ggacggagcc 7440

ctgactctga cgatgactta taacggaaaa cagtataagt catctacgat ggaacagctc 7500

gctggatata ttgaagaaag cttgcgaatg cttctccatc attgcgtagc ccaggaaaga 7560

accgttttga caccaagtga cgtgcttgcg aagggtctaa gcattgccga tctggaagag 7620

ctctccaagc aaaccagcca cataggcgat attgagaatg tatacagtct gacaccgatg 7680

cagaagggca tgctgtttca tgatatgttt gagccgcata caggtgctta ttttgagcag 7740

gctgcctttg attttaaggg tagctttgat ccggccgtct ttggacaaag tctcgatgcc 7800

ttagtggagc gtcatgccat cctccggacg aacttttata acggatgggg cagcgagcct 7860

ttacaggttg tttttcggca cagaggcgcc aagctggtgt acgaagacct gcgggagatg 7920

gacgaaacgc agcgcgaagc ttatttgaag acatttgctg caaaggacaa ggcacagggc 7980

ttcaacttat ctgaggatga gcttctacgt gtttcgattt tgtgtacagg tgaggagagc 8040

ttccgtctct tgtggagctt tcaccacatc gtcatggatg gatggtgtgt tccgttaatt 8100

acgcaggagg tatttgaaca ttattttgcc ctcctggaag gaagagagcc tcagttggca 8160

gaggttcagc cgtacagtcg atatattgaa tggctggaac agcaggatga agcagctgcg 8220

tccaactatt ggagtcgata tctggccggt tacgagcagc agacgctttt acctcaagtc 8280

ggggaagcaa gtaaaggaga agggtacgta tcagaaaagc agaattacat cctcggcagg 8340

gaattaactg gacgtctgga gaaggtagcc agagatgctc atgtcacgat gaatatattg 8400

ctgcaatcca tatggggcat tgcacttcaa cgctataacg gtagccggga tgtcgtatac 8460

ggaagtgtag tatcaggcag accagcagaa attccgggca ttgatcggat gatcggtttg 8520

ttcatcaata cgattccagt ccgtgtgaag acggaggaaa atctcccctt ctcagttttg 8580

atgaagcagc agcaggaaca atttatggct tcccatatgt atgacaccta cccgctgttt 8640

gagattcagg ctcagaccga tcagaaacag gacttaatct cacatattat ggtgtttgag 8700

aactatcctg ttgaggagga ggtagaacgt ctgggtggtg gcgaggctga ctttgagatt 8760

gaggacgccg agcttctgga gcaaacgaat tacgatttta acttaattat cctgcctggc 8820

aaagagatga gattgctatt ccagtacaat gcacttgtgt atgatcaagt gacgattgag 8880

caaatcaagg gacatctggt tcacctcatg gaacaaattg tggagaatcc tgcaatttcc 8940

gtggatgctc tggaattggt cacgccgcag gagagagagc tgattctgga cgtatggggt 9000

aacacgaaag tcagttacga gcactgtaac acgttccacg ggctgttgga ggaacaggcg 9060

ggacgaacgc cggaggcgac tgccattgtg ttcgaggatg agatgctgac ctatgccgag 9120

ctcaatgcaa aagccaacgg actggcaaga aaactgcgta atcagggaat ccagacggga 9180

gatctggtgg ggctgattgc tgaccgttcg tccgaaatga tcgttggaat ctacggcatt 9240

atgaaagccg gaggtgccta tgttccaatt gatccagagt atccgaaaga acggatcagt 9300

tacatgcttg aagattccgg agcaaagctg gtccttacac aggcccgcct cttggagcat 9360

cttggatgga cggaaaatgt tttgttgctg gatgaaccat cgacatatga tgccgatacc 9420

tcgaatttga aggatactgt tggcccggat aatctggctt atgtgatcta tacttcaggt 9480

acgacgggtc agcctaaggg cgtattagtc gaacatcggg gactacaaaa tctttcggac 9540

gtatacggga catacttcga agttacaccg caggaccgaa tcgttcagtt tgcaagtctg 9600

tcatttgatg catcggtttc ggaagtttta acggcactaa gccatggggc tgctctgtgc 9660

atcccttcta cacaagacat tttagattat gccttgttcg aacagttcat aaacgacaag 9720

ggaattacga tagcgactct gccaccagct tacgctatcc accttgagcc tgagcgcctg 9780

ccagcactgc gatgtctgct taccgccgga tcagccgcat ctgtcgagtt gatcgaaaag 9840

tggaggaagc atgtacgcta ctccaatggc tacggcccaa cggaggactc tatttgcacc 9900

acaatctggt ctgttccgga tagcgaggaa acgctggaga cagtatccat tggccgacct 9960

attgctaacc atagtgtgta cgtgttggat gagcatctca gattgcagcc tgtcggcgta 10020

gttggagagc tatgcatttc aggtatcggg ttagcacggg ggtatcataa ccgacctgca 10080

ttaatggacg agaagttcgt cgaaaatccg ttcactccag gggagcgtat gtatcggaca 10140

ggtgacttgg ttcgctggtt accgaacggt accatcgaat acgtgggccg aatagatcat 10200

caagtcaaaa ttcgcggcta tcggatcgag ctgggtgagg tagaagcaca aatgctcaga 10260

gtgcagtccg ttcaggaagt cgtggccatg gctgtggaag gcgatgacgg tcagaaggat 10320

ctggtcgctt atttcgtagc cgcccgggag ctggaggtat ccgagctcca gacagttctg 10380

tcggagatgt tacctggata tatgatccct tcccgcttca tacaactgga ggatatgcct 10440

ctgacgtcga acgggaaaat caatcgaaaa gcgttgcagg gagagcgcgg atgggcagtt 10500

gcttcatctg tagctccgaa gacacctttg gaaattcaat tagctgaaat ttggcaagaa 10560

gtgttgggtg tagagaatgc gggagtgaag gataatttct tccattttgg aggtcactcc 10620

ctgcgtgcag ctctgctagt ctcacgaatt cgcaaggaaa tgaaccgcga tattagtctg 10680

agagaagtgt tcgattctcc tacaattgaa ggattggctc gcgccattga gggctataca 10740

ccgctcaatt ttgaagaaat tcctacggcg ggagtgcgtg agcactaccc actgtcctca 10800

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ccgggaatcc ttacggttga gggagccttg gatcgggaac ggctggaaca ggcattccgt 10920

cgtctgattc atcgccatgg ttcgctgcgt acccgttttg tgactgttaa cggtgaaccc 10980

gtacagcaga ccctgcctga tgtgcagttt actgtggaat atgcggagtt gagcgagaag 11040

gaggcagaag cttcccttca gcaatttgtc cgcccttttg atcttggcga ggttccattg 11100

ctgcgggtcg gcctcatccg gattgcgcat gaccgccatt tactgttgtt tgacatgcat 11160

catattgtct cggatggtgt ttctatgaat attctcatag aagagtttct ccgcttctac 11220

caagaggagg acttattacc tgcactacag atccagtaca cagactatgc ggtatggcag 11280

caggagcaac tcggaagcga acgtctcaaa gcccaggaag cttactggct ggatgcattc 11340

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tttgcggggg atcggatcga cttctgtatt gattcttctc tgagcggttc actccagcag 11460

ctggctaccc gaacgggttc tacgctattc atggtactgc tggcagccta tacagcgctc 11520

ttgcacaagt acacgggtca ggaagatgtc attgtcggtt cacctgtggc tgggagatcc 11580

catacgacac tcgaaggcct catcggtatg ttcgttggca cactggcact gcgtacttat 11640

ccggaagggg agaagtcttt cgagacttat ttgcaggaag tgaaggaaac agcgctgcgg 11700

gcctatgaaa accaggatta tccgttcgag gagctggtag aaaagctgga gcttcagcgt 11760

gacctgagcc gcaacccgtt atttgatacc atgtttgtcc tgcaaaatat cgagcaggga 11820

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tcgactgcga tctacaagcg agagactgct gaacgaatgg caggccactt tgtacagctt 12000

attcgggaag caaccgccaa tccggcaatg ccgttgtcat cccttgatat cgtgacacct 12060

caggaaaaat caaagctgat gcaggagtcg gccgaagcca gagcagatta tcctcgtgac 12120

aagacgattc atgcgttgtt cgaggaacag gctgctcgta ctccgaatgc aatagcagtc 12180

gtatgtgaag aggcaaccct gtcctacagc gagctgaacg aacgggcaaa cagacttgcc 12240

agaacgctcc gcgagcgtgg cctccaacca gatggtttgg ctggaatcat ggcggatcgt 12300

tccctcgaaa tggtcgtcgg gattttggcc attttgaagg cgggcggagc ttacgtccct 12360

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ctactgctga cacaagcgca tctggagaaa catgtctcct tcgccgggga catcgtcaat 12480

ctggacgaga cggcttccta caaggaagat atctcaaacc tgaagtctac aaccggaccg 12540

gagcatcttg cctacgtcat ctacacatcg ggtacgacag gcaagccaaa gggaacactg 12600

atcgagcaca aaaatgtagt tcgcttgctc tttaatgata aaaatatgtt tgatttcggt 12660

cctcaggata cgtggacgct gttccattca ttctgctttg acttctccgt atgggagatg 12720

tatggggcat tgctgaatgg aggtcgtctg gtcatcgttc catcgcttac cgcgaagagt 12780

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acatacttct accagttact acaggaagag cttggtcatc acgcggcaga actgagtctc 12900

cgtatgatta tcttcggtgg cgaggcatta agcccggcct tgctcaagga ctggagaacg 12960

aagtacccac aagtgcagct catcaacatg tacggcatta ccgaaacaac cgtgcatgta 13020

acatacaagg aaattacaga tctggaaatt gaacagggcc gcagcaatat cggtaccacg 13080

attccgacgc tgcgtgcata cattctggat gaacaacgtc gtccacagcc gattggcatt 13140

ccaggtgaac tctacgtggc gggcgaagga ctggcgcgcg gctacctgaa ccgaccggaa 13200

ttgacggaag agaagtttgt cgctcatccg tttgcagcgg gcgagcgtat gtaccgctcg 13260

ggtgacctgg cacgctggct gcctgatgga agcatggagt atttgggacg gattgaccac 13320

caggttaaaa tccggggtta ccgcatcgag ctgggcgaag tggacgcgaa gctgctccat 13380

gctccgtctg taagggaggc tgtagtgctc gctcaggagg atggaagtgg acaaaaggtg 13440

cttgtcggct attttacagc cgatcagata ctgacggtag gcgaattgag aaaagccttg 13500

gccgcagagc tgccagctta tatgattccg tcttacttca tgcaattgga acagatgcca 13560

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acaggagcgg tttatgaacc gccaaggacg aaggctgagg aagctctggc gtccgtatgg 13680

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gactccatca aggcgatcca ggtatcctca agattgttcc aagccgggta taagctagag 13800

atgaaggatc tcttcaaata tccgacaatt gctgagctaa gcccgtatct tcaagtagcc 13860

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atccatcacc ttctagttga cggggtatcc tggcgcatcc tgtttgagga catcgcaacg 14340

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cttgtatggt ctgaacaagc ggcgaagtat gcagcagggc ctgcactgga caaggagcgt 14460

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aactatcttg gacagtttga tcaggatttg gaggggaatg cactcagcct atccacacat 15000

tcagtcggta aggcgctcag cgaccacaca ccacagcagt atgctctgga tgtgaatggc 15060

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gagacggtga atcattttgc cgaattatta cagtccagcc ttagcgaggt tatccggcat 15180

tgcgtggcgc aggagcgctc acagcttacg ccaagtgatg ttttgttcca gggattagcg 15240

ctggagcagc ttgatcgact tacggagcag acggcccaca ttggagagat tgaagatgtg 15300

tacaagctta cgccaatgca gaaggggatg ctgtttcaca gcctgctgga gccagactcc 15360

tcttcatact tcgagcaggc tacgttcgag ctgcgaggca gcttcgatgt agagaccttc 15420

ttcgagagct tccaagcttt ggtgcaaaga catgccatac tgcgtaccaa cttttacaac 15480

aacattggtg atttaccgct gcaagtcgtc tttaagcaac ggccaatccc attgcactac 15540

gtagatctgc gtgccgcaac tttgcaagag caagaagccc agatcaaggc ttacactgct 15600

gaggatatgg ctaaggggtt cagcttgtcg gaagatccgc tgatgcgggt aagcgtcttg 15660

caaacagaac aaagctctct ggtattatgg agcttccatc atattgtcat ggatggctgg 15720

tgcatcccga tcattacaca ggagctattc gattattatt ctgctctgcg ccagcaagta 15780

cagcctgtgc tgccgccagc tcagccctat agccgttata ttgagtggct tgatgcacag 15840

gatgatgagg aagcttccac gtattggagc caatacctca aggactatga tgggaatacc 15900

gtattgccgg aaggcaaaac gaaatctcaa gctaaagaag cgggctatgt tctgaatgag 15960

catgttctcc atctgggtgc atccttgacc ggtaaaatgg atactgtcgc taagcgaaac 16020

cacgtgaccg tcaacacact catgcagaca gcctggggac tgattcttca acgttacaat 16080

gccagctcgg atgtggtttt cggcggcgtt gtatcgggca gaccggctga gattgcaggg 16140

atcgaaaata tggtgggtct gttcattaat acagtaccta tccgtgtaca gtcctccaaa 16200

gacgaagcct ttgtcgaggt gatgaaacgt acacaggcac agtcattggc tagtcgtgcc 16260

tacgacacct atccactgta tgagattcag gggaaaacaa cccaaaagca ggacctgatt 16320

tctcatatta tgatctttga aaattatccg ctcgacgagc aggtggagca atcgggtaat 16380

caaaatgagg acaatctcga agtcgcgaac ttcaccatgt ttgaacaaac gaactatgac 16440

tttaacctgg ttgtgattcc aggcgaggat atcaaggttt gcattcgtta caatgctttg 16500

gtctacgaac aagaaagcat tgcacgaatc ggtggacact tgatgcaaat gctcgatcag 16560

gtagctaccc gtccgcaggc agtcataaag gaactggagc ttgtaacctc tgatgaacga 16620

atgcaattgc tagactgggg cggcaaggcc tacacctatc caagtgatca gggtctgcat 16680

accttgtttg aagaacaggt tgtccgtacg ccagataaga ttgcagctgt taacggcgat 16740

attcaggtca cgtatcggga gctgaacgag caggcgaaca gattggcctc caccttgatc 16800

gcccaggaac ttcggagtga acaagtggtc ggtctgttgg cggatcggtc tgtggaactg 16860

cttgtcgcca ttatgggtgt gctcaaagcg ggcgggtcct atgtacctat tgatcctgaa 16920

tatccgcagg aacggattca gtatattcta aaggattccg gcgctgagat tttgctcaca 16980

cagagccact tgacggagct ggcctccttt gagggaacgg ttatggaatt ggattccccg 17040

cacatctacg gagacggggg ggataaccct aatctacctg tgagaggaaa cgatctggtg 17100

tatttaatct atacatcggg tacaacagga aatccgaagg gaaccatgat taaccataaa 17160

gggatcgtga actacatctg gtgggccaat aaggtctact gtgcagggaa accaacagat 17220

tttccgctgt actcgtccat ttcatttgac ctgacgctga catcaatttt cactccatta 17280

attaacggag gattagtacg gatttacgat ggtatagata aggcggaggt tgttcagcat 17340

attttgcgcg aaaatgcggt ggacattctc aagctgacgc caactcatct cagtctgatt 17400

aaagatatga ccatcccggc ggaaagtcgc attcagcagc tcattgtggg tggagagaat 17460

ttgaccacac atttgtcgca aaccatcaca gatctctttg gcggcaagat caaaatctac 17520

aatgaatacg gtcctaccga aacggtcgtc ggctgcatga ttcaccttta tgatcctgtg 17580

aaggatacac gtgaatccgt acctattgga ttgccggcag acaacatata catccatatc 17640

ctggatgacc agcttcgtct cgtaccatta ggcgtggagg gcgaaatgta catcgccggg 17700

gacggggtag cccgcggata cctgaaccgt cctgagctta ccgcagaaaa attcattaga 17760

gacccgttcg cctcggaagg aaatatgtat cgaaccgggg atttggcccg tcgtcttcct 17820

aatggagaca ttgagtacat tggacgtatt gaccatcaag ttaaaatacg gggctatcgt 17880

atagagcttg gtgagattga ggccaagctg ctggatattc cacttatcga ggaagctctc 17940

gttgttgcgt gggcagatgc ccatggacag aagtctctgt gtgcctactt cgtagctgat 18000

cgggaaatgt ctgtcagcga gctgcggaac gaactttctg gactgcctgc atatatgatc 18060

ccgtcctact tcgtccaact ggacgtgatg cctttgacac cgaatggcaa gctggaccgt 18120

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acggatgtgg agaacatttt ggcttcgatc tggcagggtg tgctaggtgt tccgcttgtc 18240

ggcatacatg acaatttctt tgagctcgga ggcgactcga tcaaatccat tcaagtctca 18300

tcaaggctgc tccaagcagg ctataaactt gagatgaagg atttgttcag ctatccgacc 18360

attgcagagc tggcccagcg tgttagggcg gtcagccgaa ttgcggatca gagcgaggta 18420

cacggagcgg taagactggg acctgcccag tgcagatttt tcgacgagca gtcgacggac 18480

ctgcaccact ttaatcagtc ggtcatgttg taccgtcggg aaggcttcga taccgatgcg 18540

ctcgccaagg ttgttcggaa aattgcagaa catcatgatg cgctgcgact ggtgttccgc 18600

caaggagagc ggggatttga agcctggaac cgcagcttag gtgagggtga gctttatagc 18660

ctccagatcc acgatctgca ggatgaaaca gacccggctt cggcaataga agcaggtgtg 18720

gaagccattc agcgcagcat ctctctcggt gatggacctc tcttaagatt gggcctgttc 18780

cgctgcgcgg aaggcgaaca tctgctaatc gttattcatc atctggctgt tgatggcgta 18840

tcctggcgca tcctctttga ggacctgcag gaaggctacg agcaggcagc acgcggagaa 18900

gctgtcaagc ttccgcagaa gacggattcg taccgtgcat gggcccaggg aatcacacaa 18960

tatgcgaaca gtccggcggc tgaacaagaa cgcagctatt gggcagaggt agaaggggat 19020

ggcttcgccc ctcttccaaa agacaaggta gacgacgctc ttctcatcaa agacagcggg 19080

acggttacgg tgagatggtc accagaagag acagagcagt tcctgaaaga ggcgaaccgc 19140

acttacaaca cggaagttaa cgatttgctc ctgacggccc tcggcatggc tgttcacgag 19200

tggaccggga tcgaacgtgt aggcatcctt ctggaaggac atggacggga gcctgttgta 19260

cctgaactgg atatcactcg cactataggc tggtttacaa gtcaataccc tgtcgccctt 19320

gagatgaaag aggaactgga gatcggcgct agaatcaagc gtgtcaagga aggcttgcgt 19380

cacattccta acaaaggtgt cggatatggt attttgaaat atttgagcga cgtatccgat 19440

gtctcctcct tctctgctga accggagatt atcttcaact acctgggaca gttcgaccag 19500

gatcttgcag gggggatgat ggaggtatcg ccttactcag taggatctga ggtcagtgag 19560

cagatggtac agcatcaggc attgaacatt aatggactga ttgccgaagg acgacttcag 19620

ctttcggtca gctataaccg tcagcagttc cacacagagt cggtagagaa gtttgtcggc 19680

atcctgaaga accgtctcag cgaagtcatt ggacattgtg tacgcaagga aagaacggaa 19740

cttacaccaa gcgatgtact cctcaaagat atcagcctgg aaaaaatcga ggagctggaa 19800

gagcagacac ggcatatcgg cagtattgaa aatatttata aactgacacc gatgcaaaag 19860

ggcatgttgt tccacagctt gctggagcct cattcggaag tctactttga gcaggctaaa 19920

tttgaaattc acggagcatt ctatcctgag gatttcaaac gcagcataaa gcatctgatg 19980

aaacggcatg ccatattgag aacgaatttc catgccggat ggggcgattt ccctatacag 20040

attgtgttca aagaaagagc gtgtgacttc gtatacgagg acctgcacga gctggaatcc 20100

ggtgaaattg aagtgcgtct ttcagcttat actgctcagg acaaagcaag aggctttgat 20160

cttgctgaag gagcattgct gcgtgttgct attctacgga cagcagatga ggcttaccat 20220

ctgctgtgga gctctcatca catcattttg gatggctggt gtatgcctct tgtgcttcag 20280

gaagtgtttg aaacgtacgg ggttctgcgt gagcagaggg agcctgaact tcctgctgct 20340

gtatcgtaca gccagtatat tcaatggctg gaggagcaag gtgaggaaga ggcatcctct 20400

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cagccattgg caaaagcaga agcctacgta tcagagaagc ttgtattcac gttggatgcg 20520

gagctgaccg agcggctgga acaagtggcc aagcagaacc aggtaacgat gaacacgctg 20580

atgcaagcag cctggggaat cgtgttgcag cgctacaata gaagtcagga tgtcgtcttc 20640

ggaagtgtgg tatcgggaag acctgccgag attcccggta tcgaaagcat gatcggtctc 20700

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atgaaaagac agcaggaatt atatttggca ggacatgctt atgattccta tccgctctat 20820

gagattcaag cacagagcga acagaagcaa gatttaattt ctcatattat ggtattcgag 20880

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attacggatg ttcagatgtt tgaacagacg aattatgatt ttaacctcat tgtgctgcca 21000

ggccgtaatc tggagttctt gtaccgttac aatgccagcg tctatgatcg ggagagcgtg 21060

gaacggattc aagggcactt gatgaaaatt ctgggaaatg tatctattca tcctgccatt 21120

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ggcgatacag cagctcctta tccgcgtgag aagacccttc acggcatatt tgaggaaaaa 21240

gcggcgctca caccggatcg tacagcactt atctatggcg aaacgaagct tacctacgga 21300

gaacttcatc agcaggcgaa ccgcctcgca cgtacgttgc gtgcccaagg ggtcagaccg 21360

gaccagccgg tcggcatcat ggttgaacgt tcgcttgaga tgatcatcgg catccatgcc 21420

attctaaaag cgggcggggc ctatgtaccg attgatccgg aattcccgga agatcgtatt 21480

cgccacatgc tggaggattc gggagcgaag cttctgctga cgaagaacca tctcaaagat 21540

cgctttccgt tcactggcac gatcctggca ctcgatgacc cgcaggcgta tcatgctgat 21600

gactcgaatc tggagccaat cgcggggccg gagcatctgg cgtatatcat ttacacgtca 21660

ggttcaactg gcaagccgaa aggtgtaatg attgagcatc gctctgccgt ccatacgctg 21720

agccagttgg aagctgaata tccgatgatg gcgggtgacc gattcctgct caaaacgaca 21780

ttcacctttg acttctccgt tccggagcta ttctgctggt tctttgggca gggaactctc 21840

gtgatcttgc cgcagggcgc ggacaaagat ccggtggcac tgttggaggc cgtggatacg 21900

agccgtatca cgcatctcaa tctggtgccg tcgatgctca gtgttcttgt tcaatatttg 21960

aaagaaggcg gcagccaagg attccttact ttgaaatacc tgtttgcctg cggcgagacg 22020

ctgcccgcca aacttgtgga agagtactat aaagtatctc catgcgcagt gctggagaac 22080

atctatggtc ctacggaggc ggccgtatat gcgacccgat atacaacgag ccttgagact 22140

gctgcgctaa cgcatgtacc tatcggtaaa ccgtacgcta atgtccaagt atggatgatg 22200

gacagtgctt ctcaggtatc acctgtaggt gtaccgggag aactctgcat tgcaggcgaa 22260

ggggtagcgc gagggtactt caaccagccg gacctgacgg cagagaagtt cattcctcac 22320

ccgtacaaac cgggagcgcg gatttaccgg acgggcgatt tggcccgatg gctgccagac 22380

gggaatattg agtatttggg acggatcgat caccaggtaa aaatccgggg ttaccgcatt 22440

gagctggggg aagtggaagc acaaattttg aaagtgccat ctgtgcagga aacggttgtt 22500

cttgcactgg ctgattccac tggaagtact cagctttgtg catactttgt ggccgaagag 22560

gggcttgcag cgggcgtact acgcgaggca ctggccagcg agctgccaag ctacatgatt 22620

ccgactgctt tcgtacagct ggcacaaatg ccgctgaatc caaatggaaa attggatcgc 22680

aaagcgctgc cggcaccgga agcacttctg cggagcacag cggagtacat cccgccgcgt 22740

acgccgacag aagtagagct agcgcagatc tggtccgagg tactcggcgt gcaggaaatc 22800

ggggtcaaag atcatttctt cgaacttggg ggccattccc tgaaagtatt gggattgatc 22860

caaaagatct caaccggcat gggtgttcag cttccgctcc aactcgtgtt taatcttccg 22920

actgttgagc aaatggccca tgaaatatcc aagctgcggg caacagctgc tcctgatgaa 22980

gaagaaatgg aaattatcca cttcccaggg aaaggaacgc ttaaagtgtt ttgcttccct 23040

cctcgggtag gttactctct ggggtactat gagatggcca atgagctgga aggacattgc 23100

gaggtgttcg ggctggaatt tatcggcgat cgtttccagg gccaagacat gctggatcga 23160

tacatggatg ccatcgtgga tattcaagct gagggcccat atgtcttcct gggatactcc 23220

ctcggaggaa atctggcctt cgaggtggcc aaagccatgg aaagccgagg tcaccatgtc 23280

agcgacctta ttatggtgga tgctatgaga aagatgtcca aggatgaatc gacaccggag 23340

cagcttgagg agattgtcga gacggtgctg gacagcattg gggaccagta caaatcattt 23400

ctcgccgatc cagctgacag agcgcgagtc aaagacaaaa tgttgatcta ctccatctac 23460

cgcaatgagc ttattaacgt aggtggggtt caggcgaata tccatgcctt ggttgcagag 23520

gacgatagta ttggtccggt gacatcatcg gataaactgc tatggcaaca ggcaacgctt 23580

ggtcaatacg aagagtatgg agtcatcggt acgcacgatg tgctgcttga ttccggttat 23640

atcggggaaa atgctaaagt gctgagacag atacttggca aggtcgcaga gacctcatct 23700

aaaaacaagc ccattttgtc ctaa 23724

<210> 4

<211> 23727

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

<400> 4

atgaatgaca tgcagttata tgatttaaca aatgcgcaga agcgtatatg gtataccgaa 60

ttactctacc cagatacgtc agtgtcacag ctttccggta cagctaagat gaaggggcat 120

atcaatattg ctgcctttat gcagtccatt aatttgatta tcaaacagta tgatgcgttc 180

cgcatccgta ttacctcagt ggatggagtg cctcagcagt acgtcgttcc ttatgaagag 240

agacagttgg agtgcctgga tcttagtcac tatgaaagtg tatctgaggt ggaagcttta 300

cttgagcaac acaaaagaaa acccttgccc ctgctggatt ctgagctctt ccagttttta 360

attgtgaaga ttagcgagga agagtattgg attaatatca agatgcacca tattatttct 420

gacgggatct caatggtggt ctatggcaat cagctgacag cattttacat ggagttaatt 480

caaggaaatg aaccggagct gggcgacgat tgctcgtata ttcaatatat tgcagatgag 540

aatgcatacg aactttctga cagataccaa aaggataagg cttactggct agataaattt 600

tccgatttgc ctgagcttac gggttggaag tcatataatc cgttatcttt aagcacccac 660

gccgttcggg agcattttac cgtaccagaa gtgctatatc acgagctgca agcattttgc 720

caacagaata ggatttcttt gttccagttc ttcatgggtg cgatgtatat ctacatacac 780

aaaatgacga atcagccgga tgtggtgatt ggcacttcgt tcgctaaccg ggggaacaaa 840

aaagagaagc aaaagatagg tatgttcgtc agcaccgctg ctgccagaac atacgtcaaa 900

aaggatatag atgtgttgag cttcctgcag gatgtagcca gagatcagat gtcagtcctg 960

cggcatcaga aatatccata caatcagtta attcaggatc ttagagaaat gcatgggaac 1020

aaggatattc agcggctttt tggcgtttca atggaatatc gtcttatcaa ttgggttgat 1080

ttggatgatg tgcgtatttt gacagattat gatttctgcg gggacgaagt gaacgatttc 1140

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gagcagatca ttcattcacc tcagctttct atcgcagagg taagcttatt aggtgaacca 1320

gaagagcaat ccattttggc tctttcggaa ggcgccgcag tcgattatcc acgagagaag 1380

accattcatg gcttattcga ggaacaagcc gagcacacgc cagatcacgt agccgttcag 1440

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tatttgcgct ccgagggagt aggggcagat acgctcgtag ggattatggc tgaccgttcc 1560

ttggagatgg tcatcgggat gttggccatt ttgaaagcag gtggtgccta tgtaccaatt 1620

gaccccgatt atcccgaaga gcgtatccac tatatgctgg aggattcagg tgtaagtctg 1680

ttgctcaccc aaagtcatct atgggagagc accacttttg acggaaagct tgtgagtctg 1740

gacgaagctg caacgtatac aggagatgct tccaatctgg agagtatttc gggaccaagc 1800

catctggcct atgttatcta cacgtcgggt acgactggca agccgaaggg cacgctgatt 1860

gaacacaaaa atgtagttcg actgctcttt aacgataaaa atttatttga cttcaactct 1920

caggatacgt ggacgctgtt ccattcgttc tgcttcgatt tctccgtttg ggagatgtac 1980

ggagcgcttc tttacggagg gaaattggtg attgttccat ctctcacagc caagagccca 2040

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tatttttatc aggtgctaca ggaagagtta atgcactctt cgacagagct tggccttaga 2160

aaaatcattt ttggtggaga ggctttaagt ccatctcttc tgagaaactg gcgggtcaag 2220

tatcctgatg tgcagctgat taatatgtac ggaattacgg aaacaacggt tcatgtcacc 2280

tataaggaaa tcacggaaca tgagattgaa gcggggaaaa gcaatattgg cagaacgatc 2340

cccacactta gcgcttacat tctcgatgag caaagacgcc tgcagcctgt tggggttcca 2400

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gtcaaaattc gcggctaccg aattgagctt ggcgaggtag aagcccaaat tctcaaggct 2640

ccaagcgtac gagaaacgat tgtcctcgca cgggaagacg aacagggcca aaaattgctg 2700

tgcgcctact atgtagcctc cagtgacctt tcgccggggg aattgcggtc tcagctggcg 2760

gcggaactcc ccgcttacat gattccttct tattttgtcc ggctggagca aatgccgctt 2820

acaccaaatg gcaaactgga tcgccgtgcg ttgccggctc ctgaaagcag cgtacaatcc 2880

ggtgaggctt atttggctcc gagaactgct gtggaagctc agatggtact catctggcaa 2940

gatatcttgg gcgttgctcg tgtcggtgtc agagataatt tctttgaaat tggtggtcac 3000

tctttgcggg caacagtgct cgtttcacgg attcacaaag aattgggatg tagcatttcg 3060

ctgcgtgagg tgtttcagtc acctacggtc gaatccttgg cgcaacttgt gaaaaaacac 3120

attccgacca tgtacgaatc catcccacag gcaacggaaa gcgaggctta cccagtgtcc 3180

tcagcgcaaa agcggttata cgtgctgaga cagatggacg ggggagagct cagctacaat 3240

atgccagggg tcttcacagt ggatggaccg ttggatcgca cgcggctgga gtctgcgttc 3300

caggcactga tccagcgtca tgaatccctg agaaccggct tttatatgca ggatggagag 3360

cttgttcagc gtgtgcatag gaatgtgccg tttgcgttga actacacaga ggctttggtg 3420

gaggagacgg atacgctcat tcacaacttt attcgtgcct ttgatctgag ccaggctcca 3480

ttactgcgtg ttagcttggt gaagctccag gaggagcgtc atctgttgct gtttgatatg 3540

catcacatca tttcagatgg ggtttctatt caaatattga tagaggaact tactcatttg 3600

tatcaaggag aacagctccc agagctgcac atccagtaca aggattatgc cgtatggcaa 3660

cgggaacagt cagagaacca atggcaagat cttgagaaat attggctgca atcctttgaa 3720

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gagggtagcc gaattgattt tacattggat gagtctggca ataaggcgat acaagagctt 3840

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cacaaatata caggacagga ggacatcgtc gtaggttctc cagtagccgg aagaccgcag 3960

gctgagcttg agggcatcat cgggatgttt gtcaacacac tggccttgcg cagctacccg 4020

gcaggagata aaacctttca ggattatctt ctggaaatca aggaaacggc gctcaaggcg 4080

tttgagcatc aggattaccc ttttgaaaaa ttggtcgaaa agctgggcgt aggacgtgat 4140

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acggctttat atcggcgtga aaccgtagag cgacttgcaa cgcacttgct ccgggttctg 4380

catgcagtct cggccaatcc tcagttgcaa ctggccgaga tagaaatgat cacaccggag 4440

gagaaagtac agatcgttga agtatttaac gcgacatcgg ctccttatcc aagggacaag 4500

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acactgcgtc gtttgggaac gttgagggag cagcctgtgg ccgtgatggg cggacgaagc 4680

attgagatgg tcattggtat gctcgcggtg cttcaagcgg gtggagccta tgtgccgatt 4740

gatcctgatt acccggaaga tcgggttcgt tatatgctta atgattccga cgccaagcta 4800

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agcagtgaag aggcctatgc agctgaacct gcccagccgg agactgctca gggatcgcag 4920

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ttcaatcagc tttccctgca ggatgagtac ctgttcagag ggctaaaaac attgctggtc 5280

ggcggagacg tactgtccat atctcatatg aaccgtgtaa tcgaggctaa tcctgatctt 5340

gtccctatca atggctatgg tccgacagag aatacgacct tctccaccac ctacaagatt 5400

ctgggtcgtg ccgaaggggt cgtgccgatt ggccgcccaa ttagtaattc taccgcttat 5460

gtggtcaatg gatcgctgca attacagcct attggtgctt ggggtgaact cattgtcggc 5520

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cctagtcctg tgaaggacgg agaaccctgc tacagaactg gggatttggt acgctggctt 5640

ccagatggga atttggagtt taaaggaaga attgatgagc aggtcaaaat acgtggttac 5700

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gtagtggtcg ttcgcgcgga tgagcttggc gagaagcaac tttgcgctta ttatgtggcg 5820

gatcgtacgc tcacggcagg cgaagtacgt ctttccctat cgcaggtact tccaggctat 5880

atgattccat cctactttat ccagatggat cgtatgccat taacgtcaaa cggaaaagtg 5940

gaccggaggt ctctgccggc tcctcaagta ggcgcgcata caggacggaa gtatacagct 6000

cctcgtacac cggctgagga agctttggca tctgtctggc aaggggtgct gggtgccgaa 6060

caggtgggta tccatgacaa tttctttgaa ttgggcggag actccataaa agctattcag 6120

gtgtcgtcac ggttactgca ggccggctat cggttagaga tgaagcagct gttcaaatcg 6180

ccaaccattg ccgagctagg cgcggaaatt caaacggctg tgcatatggc tgaacaggga 6240

gttgtgcgtg gaacgactcg cttgactcca gtccaacagt ggttctttgg acggaagcag 6300

gcagagcctc atcacttcaa tcaagcggtt atgctgtatc gtgaacaggg atttgaggaa 6360

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ggagtatcct ggcggatttt gttcgaggat attgcagcag gttatgagca ggtgattcaa 6720

ggacaagcgc tgacattccc gcagaagacg gattccttcc gtgattgggg agacgccctt 6780

gctcgttatt cggaaggtcc agaaatggag actcatcggg cgtattggag agagctggag 6840

gatcagccac tcgaacagtt gccgaaggat gaggctgtgg aaagccttct tgtacaggat 6900

agcaaagtag taacagcaca atggactcta gaagaaaccg accaattatt gagaaaagcc 6960

catcgtgctt atcaaacaga gacgaatgat ctgctattga ctgctctggg catggcggta 7020

tccaaatggt ctggcatcgg aaaggttgct gtgaatctgg aaggacacgg tcgtgagccg 7080

attataccga atatcgacat cacccgtacc gtaggctggt ttacaagtca atatccggtg 7140

attttagact tggggaataa cccggaagtg gcctccttga tcaagtctgt gaaagaaggg 7200

ctgcgccgaa ttccgaacaa aggtattggc tacgggttgc tcaaaacgat ggcaagtcag 7260

ttggatgaag gcagcttcag cttgcagcct gagatttctt ttaactatct ggggcaattt 7320

gatcaggatt tgcaaggaag ctcgttgcag atttctcctt atccgaccgg aagcgcgcaa 7380

agcttgttgg aggaaccggc ctatacgcta gatatcaatg gcatggtgac ggacggagcc 7440

ctgactctga cgattactta taacggaaaa cagtataagt catctacgat ggaacagctc 7500

gctggatata ttgaagaaag cctgcgggaa cttctccagc attgcgtaac ccaagaaaaa 7560

accgtattga caccaagcga cgtgcttgcg aagggtctga gcattgccga tctggaggag 7620

ctttctaagc agacgagtca cattggcgat attgagaatg tatatagtct gacgccaatg 7680

cagaagggca tgctgttcca tgatatgttt gagccgcata caggtgctta ttttgagcag 7740

gccgcttttg attttaaggg tagctttgat ccgatcgcct tcgggcacag tctggatgca 7800

gtagtggagc gtcatgctat cctgcgcacg aacttttaca gcggatgggg cagcgagcct 7860

ttgcaggttg tatttcggca cagaggcgct aaattggtgt acgaagacct gcgggagatg 7920

aatgcatcgc agcgcgaagc ttacctgaag acatttggtg ctaaggacaa agcactgggc 7980

ttcaacctag ctgaagacga gcttctccgt gtatccattt tacaaacaga tgaagagagc 8040

ttccgtctct tatggagttt tcaccacatc gtcatggatg ggtggtgtgt tccgttaatt 8100

acgcaggagg tatttgaaca ctattttgcc ctcctggaag gtagagagcc gcagttggca 8160

gaggttcatc cgtacagtcg atatatcgaa tggctcgaac agcaggatga agcaattgcg 8220

tccaactatt ggagccgata tctggccggt tacgagcagc agacgctttt acctcaagtc 8280

ggtggagcaa gtaagggaga aggctatgta gcagaaaagc tgaattatcc tctcagcagg 8340

gaattgactg agcgccttga aaaggtggcc agggatgctc atgtcacgat gaatatattg 8400

ctgcagtccc tctggggcat tgcgcttcaa cgctataacg gtagccgaga tgtcgtgtac 8460

ggaagtgtag tatcaggcag accagcagaa attccgggca ttgatcggat gatcggtttg 8520

ttcatcaata cgattcccgt tcgtgtgaag acagaggaga atctcccctt cacagttctg 8580

atgaagcagc agcaggaaca atatatggct tctcatatgt atgacaccta cccgttgttt 8640

gagattcagg ctcagacgga tcagaagcag gatctaatct cccacattat ggtgtttgag 8700

aactatcctg tggaggagga ggtagagcgt ctgggtggtg gcgaggctgc ctttgagatt 8760

gaggaagcgg agcttcttga gcaaacgaat tatgatttta atttaattgt cctccctggc 8820

gaagaaatga gattgctgtt ccagtacaat gcacttgttt atgacccagt gacaattgag 8880

caaatcaagg gccatctggt ttacctcatg gaacaaattg tagagaaccc tgccatttcc 8940

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ctcaatgcaa aagccaacgg actggcgaga aggctccgta ctcagggaat caagacggga 9180

gatctggtgg gactgattgc tgaacggtcg ctcgaaatga tcgttgggat ctacggcatt 9240

atgaaagccg ggggtgccta tgttccaatc gatccagagt atccgaaaga acgaatcagt 9300

tacatgcttg aagattccgg ggcgaagctg atccttacac aggcccatct cttggagcat 9360

ctcggatgga cggaaaatgt tttgctgctg gatgaatcat cgacctatga tgccgacacc 9420

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gtatacggga cacacttcga agttacaccg caggatcgga tcgttcagtt tgcaagtctg 9600

tcgtttgatg catcggtttc ggaaatttta acggcgctga gccacggggc tgctctgtgc 9660

atcccttcta cacaagatat tttagatcat gccctgttcg agcagttcat gaacgataag 9720

gggattacgg tagcgacttt gccacccgct tacgctatcc accttgatcc agagcgtttg 9780

ccaacactgc ggtgcctgct aaccgctgga tcggccgcat ccgtcgagtt gatcgatgag 9840

tggaggaagc atgtacgtta ctctaatggc tatggcccaa cagaggactc cgtatgcacc 9900

acaatctggt ctgtcccgga cagtgaggaa gcaacggata ttgtatctat tgggcgacct 9960

attgctaacc acagtgtgta catcttggat gaccatttta gattgcagcc tgtcggtgta 10020

gctggagagc tatgcatttc gagtatcggg ttagcacggg ggtatcataa tcggcctgag 10080

ttaatggatg agaagttcgt ggacaatccg tttgctccag gagagcgcat gtatcggacg 10140

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caagtcaaaa tccgcggtta ccgtatcgag ctgggcgagg tagaagcaca aatgctcaga 10260

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ctagtagctt acttcgtagc cgctcagaaa cttgaggtgt ccgaacttcg gactgttctg 10380

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ttgacgtcga acggaaaaat cgaccgaaaa gcgctgcagg gcgagcgtgg atgggcagtg 10500

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gtgctgggtg tagagagcgc gggagtgaag gataatttct tccattttgg aggtcattca 10620

ctgcgtgcag ccctgctagt ctcacgaatt cgcaaggaaa tgaatcgcga gattagtctg 10680

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ccgctgaatt tcgaagaaat tcctacagcg ggagcgagag agcattatcc attgtcctcg 10800

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catattgtct cagatggggt ttctatgaat attctcatag aagagtttct ccgcttctac 11220

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caagagcagc tcgaaagcga gcgtcttaag gcccaggagg cttactggct ggatgctttc 11340

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catgcgacac tcgaaggcct catcggtatg ttcgtcggca cagtggcact tcgtacttat 11640

ccagaaggag agaagccttt cgaggcttat ctgcaggaag tgaaggaaac agcgctgcgg 11700

gcctatgaaa accaggatta cccgttcgag gagctggtag aaaagctgga gcttcagcgt 11760

gatttgagcc gtaacccact atttgatacc atgtttgtcc tgcaaaatat cgagcaggga 11820

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ttcgatctta cgctgaccgt gagtgaagca gacggggcat tgaattgcac gcttgagtat 11940

gcgactgcga tctacaagca agagactgct gagcggatgg caggccactt tgtacagctt 12000

attcgggaag ccatcgccaa tcccgcactg ccgttgtcat cccttgatat cgtgacacct 12060

caggaaaaat caaggctgat gaaagcgccg gacgaagcca aggcagatta tcctcgtgac 12120

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gtatgtgaag atgcgaccct gtcctacagc gagctgaacg agcgggccaa tggacttgcc 12240

cgaacgctga gggaacgtgg tttgcaacca gacggtttgg ctggaattat ggcggatcgt 12300

tcccttgaaa tggtggtcgg aattttagcc atcttgaagg caggcggggc ctatgtccct 12360

gtagaccctg aatatccaga ggaccgcatt cgctttatgc ttgaggattc gggagccaag 12420

ctactgctga cacaagcgca tctggagcaa cgggtctcct tcgccgggga tatcgtaagt 12480

ctggacaaaa cggcttccta caaggaggat gtctcaaacc tgcagcctgc agctggaccg 12540

gagcatcttg cctacgtcat ctacacatcg ggtacgacag gcaagccaaa gggaacactg 12600

attgagcata aaaatgtagt tcgcttgctc tttaatgata aaaatatgtt tgactttggt 12660

cctcaggata cgtggacact gttccattca ttctgttttg acttctctgt atgggaaatg 12720

tacggagcat tgctaaacgg aggacggttg gtcatcgttc catcgcttac cgcgaagagt 12780

ccagatcgtt tcttgcaatt gcttaaggat cagaaggtca ccgttttgaa ccagacaccg 12840

acgtatttct accagttgct acaggaagag ctcggtcatc aagcggcaga actgagcctc 12900

cgcatgatta tcttcggtgg agaggcatta gccccggccc tgctcaagga ctggagaacg 12960

aagtatccgc aagtgcagct cattaacatg tacggcatta ccgaaacgac cgtgcatgta 13020

acctacaagg aaattacaga gttggaaatt gaacagggcc gtagcaatat cggcaccacg 13080

attccgacgc tgcgagcgta cattttggat gaacaacgcc gtccacagcc gattggcatt 13140

ccaggtgaac tctatgtggc gggcgtaggt ctggcgcgag gttatctgaa ccgaccggaa 13200

ttgacggaag agaagtttgt cgctcatccg tttgaagcgg gcgagcgcat gtaccgctcg 13260

ggtgacttgg cacgctggtt gccggatggc agcatggagt atttgggacg gattgaccat 13320

caggtaaaaa tccgtggtta ccgtatcgag ctgggcgaag tggaagcgaa gctgctccat 13380

gctccgtctg taagggaggc cgttgtgctc gcccgagagg atggaagtgg acaaaaagtg 13440

cttgtcggct atttcactgc cgatcagatg ctgacggtag gcgagttgag aaaagccttg 13500

gctgccgaac tgccgactta tatgattcca tcttacttta tgcaattgga acagatgcct 13560

ttgacgccaa atggcaagct ggatcgcaaa gcgcttccgg ctccagaggc caatgtgcag 13620

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gattccatca aggcgatcca agtgtcctcg agattgttcc aagccggata taaattagag 13800

atgaaggatc tcttcaaata tccgacaatt gccgagctaa gcccgtatct tcaggcagcc 13860

ggacgtacag cggaacaggg cgaaattaaa ggtgcagcag agttaatgcc aattcagcgt 13920

tggttctttg aacgccatac agcggagccg caccattata atcatgccgt catgctctat 13980

cggaaagacg gctttgatga agctgcactc cggttgacaa tggaccaaat tgcgatccat 14040

catgatgcgc tgcgtatggt tttccggtct acagaagctg ggtatgtagc ttggaatcgg 14100

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attcatcacc tcttggttga cggcgtatcc tggcgcatcc tgtttgagga cattgcagcg 14340

gggtacgagc aggcattgaa tggacaagca atcgtccttc cacaaaagac cgattcgtat 14400

cttgtatggt ctgagcaagc gacgaagtat gcagcagggc ctgctctgga caaggagcgt 14460

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ttggagcagc ttgatcgact cacggcgcag acggctcaca tcggagagat tgaggatgtg 15300

tacaagctga cgccaatgca gaagggaatg ctgtttcaca gcctgctgga gccggactcc 15360

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gaagatatgg ttaaggggtt cagcttgtca gaagatccgc tgatgcgagt gaccgtcttg 15660

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gtattaccgg aaggtaaaac gaaatctcaa gcaaaagaag cgggctatgt tctaaaagag 15960

catgttctcc atctgggtgc atctttgaca ggtaaaatgg atgttgtcgc gaagcgcaat 16020

cacgtaaccg tcaatacact catgcagaca gcttggggac tgattcttca acgttataat 16080

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tctcatatta tgatctttga aaattacccg ctcgacgagc aggtggagca atcgggtaat 16380

caaacggagg acaatctcga agtttccaac ttcaccatgt ttgaacaaac caactatgac 16440

tttaacctgg ttgtgattcc aggcgaagac atcaaggtct gcattcgcta taatgcttcg 16500

gtttacgagc aagaaagcat tgcacgtatc ggaggacact tgttgcagat gctcgatcag 16560

gtggctgctc gtccgcaggc gacgatacag gaactggaga ttgtaacatc cgaggaacgg 16620

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accttgtttg aagaacaggt tgtccgtacg ccggataaga ttgcggctgt aaatggggac 16740

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cagagccacc taacggagtt ggcctctttt gagggaacgg ttatggaatt ggattccccg 17040

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tacttaatct atacctcggg tacaaccgga aatccgaagg gaaccatgat taaccacaaa 17160

gggatcgtga actacatctg gtgggccaat aaggtctatt gtgctggaaa accaacggat 17220

ttcccgttgt attcatccat ttcgtttgac ttgacgatga catcaatgtt tactccgtta 17280

ataaacggag gaatagtacg gatttatgat ggtatagata aggcagaggt cgttcagcat 17340

attttgcgcg aaaatgcggt cgatattctc aagctgacgc cgacgcatct cagtctcata 17400

aaagacatga ccattccagc agaaagtcgc attcaacagc tcattgtggg tggagagaat 17460

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gagtggacgg gaatcgaacg tgtaggcatc cttctggagg gacatggacg ggagcctgtt 19260

gtgccggaac tggatattac tcgcacaata ggctggttta caagtcaata ccctgtcgcc 19320

cttgagatgg gaggggaatt ggagatcggc gccagaatca agcacgtcaa ggaaggcttg 19380

cgtcgtatcc cgaacaaagg tgtcggatat ggtattttga aatatttaag cgacggttcc 19440

gatatctcct ccttctcggc tgaaccggag attaccttca actacttggg acagttcgac 19500

caggatcttg caggagggat gatggaagta tcgccttact cagtaggacc tgaggtcagt 19560

gagcagatgg tgcagcatca ggcattgaac attaatggac tgattgccga aggacagctt 19620

caactttcgg tcagctataa ccgtcatcag ctcgacgggg agtccgtggc taagtttgtt 19680

ggcattctga agaaccgtct tagcgaagtt attggacatt gcgtaagtaa ggaaagaaca 19740

gaacttacac caagcgatgt actcctcaaa gatatcagct tggaaaagat tgaggagtta 19800

gaagagcaga cacggcatat cggcagtatt gaaaatatgt ataaactgac gccgatgcaa 19860

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acacagccat cagcaaaagc agaagcctat gtgtcggaga agctagtatt cacgttggat 20520

gcggaattga ccgatcgcct ggaacaggtg gccaaacagc atcaggtgac gatgaataca 20580

ttgatgcaag cagcctgggg aatcgtgttg cagcgctaca atagaagcca ggatatcgtc 20640

ttcggaagtg tagtatcggg gagacctgcc gagattccgg gtatcgaaag tatgatcggt 20700

ctctttatca atacagttcc ggttcgggtt caggccgagg gaagtgattc gttctcccat 20760

gtgatgaaaa gacagcagga attatatttg gcaggacatg cttatgattc ctatccgctc 20820

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agaattacgg atgttcagat gtttgaacag acgaattatg attttaacct cattgtgctg 21000

ccgggccgta atctggagtt cttgtaccgt tacaatgccc gcgtctatga tcgggagagc 21060

gtggaacgca ttcaaggaca cttgacgaga attctgacaa gcgttgctgt tcaacctacc 21120

atccgtattg atgagctgga gttgatcacc ccagaagaga aatcgcagat tatagaggtg 21180

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ggagaactcg atcagcaggc gaaccgtctc gcacgtacgc tgcgtgccca aggggtcaga 21360

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gccattctaa aagctggcgg ggcctatgta ccgattgatc cggagttccc agaagatcgt 21480

attcgccaca tgctggagga ttcgggagcg aagcttctgc tgacgaagaa ccatctccaa 21540

gatcgttttc cgttcactgg tacgattctg gcacttgatg atccgcaggc gtatcatgcg 21600

gatagctcga aactggagcc aattgcgggg ccggagcatc tggcgtatat catttacacg 21660

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ctcgtgatcc tgccacaagg cgtggacaaa gacccgatgg cactgctaga ggccgtggat 21900

acgaaccgta tcacgcatct caatttggtg ccgtcgatgc tcagtgtgct cgttcaatac 21960

ttgaaagaaa gcggcaacca aggattcctt actctgaaat acctgtttgc ctgcggcgag 22020

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gaaggggtag cgcgggggta tttcaaccag tcggacctga cggcagagaa gttcattcct 22320

cacccgtaca aaccgggagc acgaatttac cgaacgggcg atttggcccg atggctacca 22380

gacgggaata ttgagtattt ggggcggatc gatcaccagg taaaaatccg cggttaccgc 22440

attgagctgg gagaagtgga agcacaaatt ctgaaggtgc catcggtgca ggaagcggtt 22500

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gaggggcttg cagcgggcgt gctacgcgaa gtactggcca gcgagctgcc aagctacatg 22620

attccgactg ctttcgtaca gttggcacaa atgccgctga atccgaatgg caaattggat 22680

cgcaaagcgc taccggcacc ggaaacactt ctgcggagca cagcggagta tatcgcgccg 22740

cgtacgcaga cagaagtaga gctcgctcag atttggtccg aggtgctcgg cgtacaggaa 22800

atcgggatca gagatcattt cttcgaactt gggggccatt ccctgaaagt attgggcttg 22860

atccaaagga tttcgtccgg tatgggcgtc cagctaccac tccaagtcgt gtttaatctg 22920

ccgactgtgg aagaaatggc gcatgaaata tccaagttgc aggcaacaac tgctgctaat 22980

gaagaggaaa tggaaattat ccgcttccca gggaaaggaa cactcaaagt gttttgcttc 23040

cctccacggg taggccactc tctggggtac tatgagatgg ccaaggagct ggaagggctt 23100

tgcgaggtgt acgggatgga atttatcggc gatcgtttcc agggccaaga tatgctggat 23160

cgatacatcg atgccatcgt ggatattcaa gcagagggcc cgtatatatt cctgggatac 23220

tcacttggag gaaatctcgc cttcgaggta gctaaagcca tggaaagccg aggtcaccat 23280

gttagcgacc ttattatggt agatgctatg agaaagatgt ccaaggatga atcgacaccg 23340

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taccgcgatg agcttattaa cgcaggtgaa gttcatgcga atatccatgc tctgattgca 23520

gaggatgata gtattggtcc ggatacatca ttagataaat tgttatggca acaggcgaca 23580

cttggtcaat acaaagaata cgaagtcatc ggaacgcatg atgtgctgct tgattccggt 23640

tttattgggg aaaatgctaa agtactgaga cagatacttg gcaaggtcac agaggcttca 23700

tctaataaca agcccatttt gtcctaa 23727

<210> 5

<211> 11214

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

<400> 5

ttgaaagcct tatttgagaa ggaaaaaaat tactggagtc ataaactgga atctgaggat 60

catatcatct gcctgccata caccaaccat gtgtccagaa gtacaactgt aacgagttta 120

aattcccata cgtacacact cacatttcca actgaaattt cccaaagaat atcatctata 180

acaggtggcg ctccatgggc cgtgtttatg gtcctgcttg ctggagtaga gagcttattg 240

cataaataca caggtgagga acgtgtgctg ctgggcatcc cggtagccaa gtctggcaac 300

ggtgctacaa agccgatcaa ccatctgctt ttattgaaaa atacgctgga ttccagtaca 360

accttcaaag ctttgctgtc tcaaatcaaa acctctgtcg gcgaagctat tgaacatcaa 420

aacattcctt tttggaacta ttctgaatta cttgacattc aacgtaatga ggatgaaaag 480

cctcttattc acaccacagt atccttgcaa aatattcata tttctgattt tttaaatcac 540

gtacaatctg aactggattt ccagtttcaa tgggaacatg aagcagtctc cctgaacgta 600

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cggctgtaca ctattgtttt gcagcagcca gagttggcga tttccacagc acaagtactg 720

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gaacgctcga tcgagatgat tgtcggtatg ctcggaattc tcaaagcagg tggagcgtat 1020

gtacccattg attctgatta cccggatgag cgtatacgct atttgctgca ggattccggt 1080

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ggagcgtggg gggagctgat cgtcggcggt gacggggtgg ctcgcggata tcgcaaccgc 2040

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aacggtgaac ctgtccagcg agtgcatgac gaggttcctt ttcgcatgga attgacctat 3000

gctcacggag ctgccccaaa ggaaacggat gagctggtac ataactttgt tcagccgttc 3060

gatctggggc aagctccgtt attccgagtt ggtttgattg aaacagaccc agagcatcat 3120

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caggacttca ttcatttata tgcaggcgac acgctgccat cgctgcgcat tcagtataaa 3240

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agtgaaggct taaaaagcat tgcggtgcag acggaatcga cattatatat ggtgctgttg 3480

gctgcctatt cggctttgct tagccactat agcgggcagg aagatattat tgtcggttcg 3540

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attgaaatgg tttcggccca agaaaaagag ctgcttgtgc agagattcaa tgatacggta 4080

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ccgcagcttc gcctggccaa tatttatggg ccgacggaga acaccacctt ttccaccatc 5040

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<210> 6

<211> 11214

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

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gacggggtag cccgtggata ccgcaaccac ccggacctga cggcagaaaa gttcatggac 2040

agtccgttcc gcagtggaga acgttgctat cgcacaggcg acctggtgcg ctggaatgcg 2100

gacgggacgc tgaaatacaa gggacggatc gacgcccagg tgaaaatccg ggggtaccgg 2160

atcgagctgg gcgaggtgga agcacagctg ttgaagctgg aggcggtgcg agaagccgtc 2220

gtgatagcac gagaggatga gcaggggcaa aagcagctct gtgcttatgt ggtgactgat 2280

acggaggtgg cggcaagcga gctgcgcagc gctttgagcc aggagctgcc gggctacatg 2340

gtgccgtcgt attttgtaca gctggagcaa ttgccactca cgcctaacgg caaggtggat 2400

cgccggtcat tgccacagcc ggagggaagt ataagctcag gcacagaata tgtacctcct 2460

caaaatcaat tacaagtaca actggcgagt atctggaaag atgtgctgga gcttgagcgc 2520

atcgggatta aggataactt ttttgaagca ggagggcact ccttgcgggc gacacatgtc 2580

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acaggttcac ttgatcataa ggcactggac aatgcgttcc gccagcttat tgaccgccat 2880

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gagctggtac gcgactttgt ccagccattc gatcttggac aggctccgct attccgagtc 3060

ggtatgattg aaacagatcc agagcatcat attttgctgc tggatatgca tcacatcatt 3120

tcggacggta cctctataaa tgtgctgatt caggacttca tctgtttata tgcaggtgac 3180

acgctgccac cactgcgcat tcagtataag gactacgccg cctggcaaca ggatcagcag 3240

caaagtgaac gctaccggca gcaggaaagc tactggctga ataccttcgc gggagagctg 3300

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aatccgttat ttgataccat gtttgctctg caaaatttgg agcaaaagga gcagcaactg 3780

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tacaaacggg aaaccatcga acgactggct gtacatttgc agcagcttat ccatgcggtg 3960

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cagattgtaa tgcaattcaa cgatacagta gcagactatc cgtatccacg tgatcaagtg 4080

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atcatagaat tgagtgatga acaacgatgg agtagcgaat ctgaacttta cgctcatgtg 4500

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ccggagcaaa acgtcgatac aggcatggat tatgtagcac ccgagacgga tgttcagcaa 5640

gcactggcta ccgcctgggg ggcaattctt gggattcagc gagtgggcat acaggataac 5700

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gctggataca agctggaaat gaaggacttg ttcaaatacc cgacgattgc gggactaagc 5820

aaatttattc agcctgttaa ccgaatagca gagcagggag aggttacagg atctgtttta 5880

cttacaccga ttcagcgctg gttttttgaa cagccaacgg cagagccgca ctattttaac 5940

caatctgtca tgctttatcg acaagaaggc tacgatgaac aggcacttcg gcaggcgctc 6000

aatcagatta catcgcacca tgatgcattg cgtatggttt ttcgttcgtc ggagaacggg 6060

tatacggcgt ggaatcgtgg tataaaggaa ggcgaaccat accatctgga aatctttgat 6120

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tatgccaata gcccagccat ggaacgtgaa cgctcgtact gggaggagct tgcacaagcc 6480

gagttggctc ccttgccgca ggattatggg catcatgagc acgaaaagcc gttgattggt 6540

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gccaatcgtg cctaccacac ggaggttaat gatctgttgc tgacggcagt agggatggca 6660

ttgcaagcgt ggagcggata cgagcgtttc ctgattcatc tggaggggca tggacgcgaa 6720

gctattttac ctgaggtaga cattacccga acaatagggt ggtttacaag ccaatatcct 6780

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gccagcgatt gggcgacgga tttggagcgt gagctgaccc tccgggtgga ggagacggct 8040

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aaatataaca accacagtga tgtcgtattt ggcagtgttg tctcaggtcg tccatcggat 8160

attatcgggg tcgaggatat tatcggcttg ttcattaata ccattcccgt tcgcatccgc 8220

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gatttaatta accatattat ggtgtttgaa aattatccgg tggaggagca ggtcgaggaa 8400

ctgggaattg acgggcagga tacattcccg atttccaacg tggtggctgc agagcagacc 8460

aactacgaac tgaacctcgt cgttatgccg ggagaatgca taaagattcg ttttatgtat 8520

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ctggagcaaa ttttgcttaa cccgaatgtt tgcgtagaag agctggaact ggttacagcg 8640

gcggaaaaac aacagattat aggagagttt aatgacactg cctctgcata tccacggaat 8700

cagacgatcc aaaaactgtt tgaggagcag gctgagcgca cgccggatca tattgccgta 8760

gctttgggtc atcaatcatt gacctatcgg gagctcaatg agacagccaa ccgattagcg 8820

catacgctgc gggatgcagg ggtgaagccc gatgaaccgg ttggcattct gacggagcgc 8880

tcgctggata tgattactgg aacactcgct attttgaagg ctggaggcgc gtatgtgccg 8940

gttgaccctc aatatccaga ggaccgtatc cgttatatgc tggaggactc gggagccaag 9000

ctgctgctgg ctcagcagga tttactggat cgttgctatt ttgacggaca gattgtcaat 9060

ctgaatgatg atatgtccta cagtacggat cattccaatc tggggatgga tggagcgggc 9120

catcatgctg cttatgtcat ttatacctca ggctcaacag gcaagcctaa gggcgtcgtt 9180

gttgagcatc aaagtgtcgt gcgcctggtc cgcaatacgg attatgtccc atttgatgaa 9240

tcggtccgaa tgctgcagac ttgcgcgttt gtattcgatg tatctacgtt tgaaatttgg 9300

ggcgcgctgc tgaacggcgg tcagcttgtt ctcgtgcata aggatgatct tttggacgcg 9360

gccaagctca aggagacgat acgggatcat cgcgtcacca tgatgtggct gaccacaccg 9420

ttatttaatc agctttcgca gcaggacagt aagcttttcg gcgatgtgaa gtatttgctg 9480

gttggtggtg atgttttgtc tgcgccccat attaaccggg tcctgcgtga taatccgaac 9540

atgaacatca ttaatggcta tgggccaacg gaaaatacaa ccttttcgac gacgtaccac 9600

attacggaag agcagttgga ttctgtgccg atcggacgtt ccatccgcaa ttcgacggca 9660

tatgttgtgg attcgtcatt taacctgcag ccggtcggag cctggggtga gctggttgtc 9720

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cttgctaacc cgtggataga tggagatcgc ctgtaccgta cgggagacct ggttcgctgg 9840

cgtgaagatg gcatgctgga atacgctgga cggattgatc aacaggttaa aattcgcggt 9900

taccggattg agctgggcga ggtggaggcg cggctggcaa gtgtaccgtc cgtacgggat 9960

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tatatgattc catccgcatt tgtacagcta gatcggtttc cgctgacgac caacggcaaa 10140

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cctatgcttg gatacgggct gtcgttcgcg gagcttgcga aacaactgga tcaggacgca 10560

gtcgtgtatg gattggagtt cgtagatgat gctgcggatg agcaggaaat gttggcacgg 10620

tatgttgatt tgatcgtcag cactcaagcg caaggtccgt atgtgctgct tggttattcc 10680

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aggggaactg gagacaatcg acttttatgg aaagacgcta cacaaggaag ctatgaagag 11040

catagcttga ttggcaatca ttatgaactg ctggaacccg gatttatcga ggaaaatgta 11100

aaaagtatcc gtgccgcaat acaaaacata acccggaata tggacaaaga catggcacaa 11160

gatttggcac atcataattc ttga 11184

<210> 8

<211> 11214

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

<400> 8

ttgaaagcct tatttgagaa ggaaaaaaat tactggagcc ataaactgga atctgaggat 60

catatcatct gtcttccata tactaacaac gtgtccaaaa gtacaactgc aacgagttta 120

aattcccaca catacacact cacatttcca tctgaaattt cccaaagaat atcatctata 180

acaggtggcg ctccatgggc cgtgtttatg gtcctgcttg ctggagtaga gagcttattg 240

cataaataca catgtgagga acgtgtgctg ctgggcattc cggtagccaa gtctagcaac 300

ggtgctacaa agccgatcaa ccatctgctt ttattgaaaa atacgctgga ttccagcaca 360

accttcaaag ccttgctgtc tcaaatcaaa acctctgtcg gcgaagctat tgaacatcaa 420

aacattcctt tttggaacta ttctgaatta cttgacattc aacgtaatga ggatggaaag 480

cctcttattc acaccacagt atccttgcaa aatattcata tttctgattt tttgaatcac 540

gtacaacctg aactagattt ccagtttcaa tgggaacatg aagcggtctc cctgaacgta 600

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cggctgtaca ctattgtttt gcagcagcca gagttggcga tttccacagc acaagtgctg 720

tcagagcaag aagtagagca gctgctccat accttcaacg atacaaatgt ggattatcca 780

cgtcatgcgt ctattcatga attgttcgag aaacaggtga agcagacacc acagcaggtg 840

gcggtagtgt gtgggcaaga tagcctaacc tatgcagaat tgaatgaaaa ggccaaccga 900

ctggctcatt ctttacgtaa gcagggaatc cgcaccgagc agacggtcgg cattgtagct 960

gaacgctcga ttgagatgat tgtcggtatg ctcggaattc tcaaagcagg tggagcgtat 1020

gtacctattg attctgatta cccggatgag cgtgtacgct atttactgaa ggattccggt 1080

gcggacatac tgctcgtgca gcgaatggaa catcggccca ctgattttaa gggaagggtg 1140

cttgacctta gcgatgctgc aatttatgga acggatgatg ctgatcgtta cgatcccatt 1200

ttgccgaatg atcacggaac gaatactgat ccgggatacg tggactgcct agatccgttc 1260

tactccattt ccgccagtcc cgaacttgct tctacgacaa ccatacaacc agaaaacatg 1320

caacccaaag ctacgcaatc agaacaagca aaacaaatac agcagactta tgcagctaaa 1380

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agtcaggatg ttattttgga cgcgcccaag ctcaaggaag ttgttcgcaa tcacggcatt 1680

accacgatgt ggctgaccgc accactcttt aatcagctat cccagcagga cttggaacta 1740

tttgagggaa tgcaggagct gttggtcggt ggtgatgtgc tgtccgtacc gcatattaac 1800

cgggtattgg aggcccatcc gaatctacat attattaacg gctacggtcc gacggaaaat 1860

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agcccgatcc ataactcgac ggcatatgtt gtggacggtt cgatgcagct ccagcctgtt 1980

ggagcgtggg gagaactgat cgtcggcggt gacggggtgg ctcgcggata ccgcaaccgc 2040

ccagaactga cgaccgaaaa gttcattgac agtccgttcc gtggcggcga acgctgctat 2100

cgaacagggg acctggtgcg ttggaatgcg gacgggacgc tggaatataa gggacgaatc 2160

gacgcgcagg tgaaaattcg aggctaccgg attgagctgg gcgaggtgga agcacagctg 2220

ttgaagctgg aggcagtccg agaagctgtt gtaattgcac atgaagatga gcaggggcaa 2280

aagctgctct gcgcatatgt ggtcacccat gcggaagtag cgacaagtga gctgcgtagt 2340

gctttgagcc aggagctacc gggctacatg gtaccgtcgt attttgtgca gctggagcaa 2400

ttgccactga cgcccaatgg caaggtggat cgccgagcgt tgccacaacc agagggaggt 2460

gtaagctcag gcgcagaata tgtacctcct caaaatcaat tacaagcaca actggctagc 2520

atctggaaag atgtgctgga gcttgagcgc attgggatta aggataactt ttttgaggca 2580

ggaggacatt ccctgcgggc gacacatgtc atatcactca tctataagga attgcataaa 2640

aatgtgcaac taaaggatct gttccagcat ccgacaattg aacagctggc gcaggttatt 2700

gaagcactgg agcaaaccac ctatgaatcc atccctgtta cggagaataa gccattttat 2760

gcggtttctt cagctcaaaa acggatgtat atcctcaatc agcttgatgg agcgggaatt 2820

agctataaca tacctggtgc cctgactctg accggttcac ttgatcacaa ggcactggat 2880

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aacggtgaac ctgtccagcg agtacatgac gaggttcctt tttgcatgga attgacctat 3000

gctcacggag ctgccccaaa ggaaacggat gagctggtac gtaactttgt ccaaccattc 3060

gatctggggc aggccccgtt attccgagtt ggtttgattg aaacagaccc agagcatcat 3120

attttgctca tggacatgca tcatatcatt tcggacggca cctctataaa tgtactaatt 3180

caggacttta ttcatttata tgcaggcgac acactgccat cgctacgcat tcagtataaa 3240

gactacgccg cttggcaaca gaagcagcag caaagtgaac gctaccggga acaggaaaac 3300

tactggctca ataccttcgc aggagagcta cctgtgcttg atctaccgac tgattatcca 3360

cgcccagcgg tgagaagctt tgaaggagat gtgctggaat ttacgcttga ccaacgacaa 3420

agcgaaggct taaaaagcat tgcggtgcag acggaatcga cattatatat ggtgctgttg 3480

gctgcctatt cggctttgct tagccactat agcgggcagg aggaaattat tgtcggttcg 3540

ccaattgcag ggcggcccca tgcggatctt ggcagtctga tcgggatgtt cgtgaataca 3600

ctggcaatcc gtaattatcc agaaggcggg aaaacgttcc gcgattatgt gttggaggtc 3660

aaggaaaacg cgttaaaggc ttttgaacat caggattatc cgtttgaaga gctggtggag 3720

aagctgggcg tggatcgaga tttaagccgt aatccgttat ttgataccat gtttgcactg 3780

caaaacttag agcaaaaaga gcaacagctg gcggggcttc aattggcatc ctatccaagt 3840

gaacaaacga cggccaaatt tgatttgagt ctgttcgcag tggagaatgg agaacaaatt 3900

tcctgtgctc tgcaatacgg aactcggctg tacaaacggg aaaccattga acgactgact 3960

gaacatttgc agcagcttat caatgcggtt atagaacagc cggatatcgt tctttcggct 4020

attgaaatgg tttcggccca agaaaaagag ctgcttgtgc agagattcaa tgatacggta 4080

gcagactatc cgtatccacg agatcaagca ctgcatgtgc tgttcgagga acaggtagcg 4140

caatcaccag atcggctggc cgtcaccttt gcggacatgc agcttaccta ccgcgagctg 4200

aatgaacgtg ccaaccgtct ggcacgcata ctcgcttccc atgggatacg gcgcgggtgc 4260

gagccagaga cacagcgagt agggattatg gctgaacgct ccattgaaat ggtcgtcggt 4320

atgctggcga ttttgaaggt cggaggggct tacgttccca ttgatcccga ttatcctgag 4380

gagcgtatcc gttatttact ggaggattcc agtgcggggc tgttactgtt acagcgacgt 4440

gagcagatgc cttttgaacc cggcattccg gtcattgatt tgagtgatga acaacgatgg 4500

aatagcaaat ctgaatgtga cactcatacc gatggaacaa ttgcgattac aacaggggga 4560

tcttcctcag atcttgcgta tgtgatctac acctctggta cgacaggcaa accgaagggc 4620

gtgatgattg agcaccgtaa tgtcgtgcgg ctagtgaaaa acaaaagcta tgccatgctt 4680

gatgaaaata cacgtatgct gcaattgggc gcagttgtgt tcgatgcctc cacatttgaa 4740

atctggggaa cgctgctgaa cgggggacaa ctgtatgtgg taagccatga cactattctg 4800

gatgcctcca agctcaagca ggcgattgac aagtatcgtg ttaacacgat gttcatgacc 4860

acggctttat tcaatcagta ttcgcagcaa gaaatcggag tgtttgcgtc cttgaaggag 4920

ttgctcgtgg gtggtgatgt gttgtctgta ccacacgtca atcgtgtgtt gaaggagtac 4980

ccgcagcttc gcctggccaa tatttatggg ccgacggaga acaccacctt ttccaccatc 5040

tatgacatta cagaaccgca aaccctggct attcccattg gacgtccaat tgatcactcg 5100

accgcttatg tggtcaatcg ttcgttgaag ctgcaaccta tcggagcctg gggagagttg 5160

atcgtcggtg gcgacggtgt tgggcgagga tatctgaatc ggcccgagct tacggcggaa 5220

aaatttattg aaagtccatt ccggtctgga gaatattgct atcgtacagg agacttagtg 5280

cgttggcgtg ctgatggtgt actggagtac aagggaagaa tggatgaaca ggtcaaaatt 5340

cgcggctacc gcattgaact gggtgaaatt gaaacccgat tgtccacaat tccaggtgtg 5400

aaggaatcgg ttgttaccgt gcggcaggat gatcacggac aaaaacagct gtgtgcctat 5460

tttgcaacag acagtgaatt gagcgccagc gacttacgta acattttgtc gcaggatctg 5520

cctggctata tggtgccgtc ctactttgtg cagctctcca gactgccttt gacgctgaat 5580

ggcaaagtag accgtagggc actgcccgga cctgagcaca atctcgatac aggtatggat 5640

tatgtggcac ccgagacgga tgtccaacag gcactggcta cggcttgggg agccattctt 5700

ggtatcccga aagtcggaat acaggataac tttttccatt tgggtggtga ctccatcaag 5760

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ttcaaatacc cgacaattgc gggactaagc acatatattc agcctgttaa ccgaatagcc 5880

gagcagggcg aggttacagg aaatgtagtg cttacaccga ttcagcgctg gttttttgaa 5940

cagccaacgg aagaaccaca ctattttaac caatctgtca tgctctatcg tcaggaaggc 6000

tatgacgaac aggcactacg gcgggcgctc catcagatta cttcgcacca tgatgcattg 6060

cgtatggttt ttagtttgtc ggagaacgga tgtacagcat ggaaccgcag tgtagaggaa 6120

ggcgaaccgt accatctgga atgctttgac tataatgaca gcgatgtaaa caagcaagat 6180

ttggcgaaga taattgaagc gaaatgtaat gaaattcaat ctggtatttc cctaagcgaa 6240

ggtccgctga tgagactggg gctgttccgt tgcccggatg gagatcatct gctggtcgtg 6300

attcatcatt tggcggtgga cggagtatcc tggcgcatat tattcgagga tttggcgact 6360

gcctatgatc aagcctccaa gggtgaacag gtgattcagc tgcctcataa aacagattcg 6420

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cgagcgtatt gggggaaact tgcacaagcg gatccggctc ctttgccgca ggattacggg 6540

cataacgagc acgaaaagcc attgattggc gatagtgagt cggttactgc tttgtggaca 6600

catgcagaga cagagcagct gctcaagcag gccaatcgtg cctaccgtac agaaattaat 6660

gacctgttgt tgacggcggt aggaatggca ttgcaagcat ggagtggaaa tgatcgtttc 6720

ctgataaatc tagagggaca tggacgtgaa gccattttac cagaggtgga cattactcga 6780

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ctttcgcaac ggattaagcg tgtgaaggaa ggactgcgcg gcattccgca aaaagggatt 6900

ggctacggtg tactgaaata tttatccgac cgtcagacac aggcaccaga ggcatctcca 6960

accatattta cgacagatcc cgaaatcagc tttaactatt tgggacagtt cgatcaggat 7020

atgaaaggga acgacttgca atcatcctca tatgagggtg ggatgccgct gagcccgacc 7080

atggctcgaa cgtatacgct tgattttggc ggcatcattt cgggaggcca actgggtctg 7140

acgattagct atagccgtac cagctataaa ccggagacca tcgagcgatt ggcgaaattc 7200

ctggaatcaa gcctacgtga aattttggcg cattgcatcc ataaagaaca cccggagctt 7260

accccaagtg atatttctta taaaggaatg agtgtggagg gcttggacag cctcttatct 7320

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atgctgtttc acagccagct agatagtcaa gcagctgcga atgacgcata ttttgagcag 7440

gtttcttatg atatgcgagg tcagatggac attcgggctt ttgcagaaag cctgaatatt 7500

ctggttcggc gacatgaggc gctgcgtaca catttttatt ttggcagaga tacggaaccg 7560

ttgcaggtgg tgtatcgaaa tcgggattgc ggctttcaat atgaagattt acaccatctg 7620

gatgaggatg aaatagatac ctgggtgaaa aatttcaagc tacaagataa agcacggggc 7680

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tatcattttg tatggagctt ccatcatatc gtcatggacg gctggtgtct ctcccttata 7800

aataaagaag tgtttgaaag ctatgcagca cttcaggagg gcagagtacc agagctggca 7860

ccggcagtgc cgtacagccg ctttattgaa tggctggaag cacaggatcg caaggcggca 7920

accgactact ggagcagcta tttatccgga tatgagcagc aaacagcgtt accagctgta 7980

aaatccggtc gcaagagtga aggcaacacg gctagtgatt gggtgacggt tttggaacgt 8040

gagttgaccc tccgggtgga ggagacggct aagcgatatc aagtgaccat gaatacgtta 8100

ttacaaaccg catgggggat tgtgctgcaa aaatataaca accacagtga tgtcgtattt 8160

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ttcattaata ccattcccgt tcgcattctt agtaaggcag gggaatcttt tgcagaagtt 8280

atgaagaaaa cgcaggagca ggcgctggct tctcatgcat atgatacgta tccactgttt 8340

gagattcagg cattgaccga ccagaaacag gatttaatta accatattat ggtgtttgaa 8400

aattatccgg tagatgagca ggtcgaagaa ctgggaagtg ccgggcagga tacattcccg 8460

atttccaacg tggtggctgc agagcagact aactatgatc tgagcttagt cgttatgccg 8520

ggagaatgca tcaagattcg ttttatgtat aatgcgttaa gttatgatca aacaggcatt 8580

gagcgtctgc atgggcattt tgtgaatctg ttggagcaag ttttgcttaa cccgaatgtt 8640

tgcgtagaag agctggaact cgttacagcg gcggaaaaac aacaaattac aggagagttt 8700

aatgacactg cctctgcata tccaagccat cacacgatcc aaaaactgtt tgaggagcag 8760

gcagagcgca cgccggatca tattgctgta gctttgggtc atcaatcatt gacctatcgg 8820

gaactcaatg agacagccaa ccgtttagcg catacgctac gtgatgcagg ggtgaaatcc 8880

gatgaacctg tgggcatttt gacggagcgc tcactggata tgattacggg aacactcgct 8940

attttgaagg ctggaggcgc gtatgtgccg gtagaccctc aatatccgga ggaccgtatc 9000

cgttatatgc tggaggactc gggagctaag ctgctgctgg ctcagcagga tttactggat 9060

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ggttcaacag gtaagcctaa gggtgtcgta gttgagcatc aaagtgtcgt gcgccttgtc 9240

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gtatttgatg tatctacgtt tgaaatttgg ggtgcgctac tgaatggtgg tcagcttgtt 9360

cttgtgcata aggatgatct attggacgcg gccaagctta aagagacgat acgggatcat 9420

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aatcgtcctg agctgacggc tgagagattt cttgctaacc cgtggaggga cggagatcgc 9840

ctgtactgta cgggagacct tgttcgctgg cgtgaagacg gcatactgga atacgctgga 9900

cggattgatc aacaggttaa aattcgcggt taccggattg agctgggtga ggtggaggcg 9960

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gagctggcga aacaactgga tcaggacgca gtcgtgtatg gattagagtt cgtggatgat 10620

gctgcggatg agcaggccat gctggcacgt tacgttgatt tgatcgtcag cacgcaagcg 10680

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ctggaacccg gatttatcga ggaaaatgta aaaagtatcc gtgccgcaat acaaaagata 11160

actcggaaca cggacaaaga catgacacaa gatttggcac atcataaatc ttga 11214

<210> 9

<211> 1500

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

<400> 9

atggactctt tagctgatct ctcggaaacc cccttagcat tggaaaccct cagacgacat 60

ccctgttata acgaagaggc acatcgctat tttgcgcgca ttcatcttcc agtagccccg 120

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tatggatggg tctacgatga aggaaaacgc tatgcaggag aggaggccgc gcggctgttg 540

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tgtgctgaag cgggggctgt cattatgcgc cattgccgtc agtgcagggc ggatgcgatt 840

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tccatggtgc atgactgtgc attgctgctg tcgtccggca taggcgaagc ccccaaagag 1320

gcattgcagg aagctggcgt gctgcctatt gtatgcggcg gggatattga ggaatcggtt 1380

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cgcaataagg gagttaaggg caatcattcg gatttaccca ttaaacattt tggaggctga 1500

<210> 10

<211> 1500

<212> DNA

<213> 类芽孢杆菌属(Paenibacillus)

<400> 10

atggactctt tagctgatct ctcggaaacc cccttagtat tggaaaccct cagacgacat 60

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ccctgttata acgaagaggc acatcgctat tttgcgcgca ttcatcttcc agtagccccg 120

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cccggcgttg ttagtgaact gctcacgccg gagcaggcgg cgagcaagac ctatggcgta 240

gcggcacagc tgatgcaact gtccgttgtc ggcattgcgg gacctggaga tccgctggcc 300

aatgcggagg caaccttcga taccttccgc cgggtccgtg agacagttaa ggatgtcata 360

ttctgtctca gcacgaatgg ccttaccttg atcaggcata tcgacaggat tgtagagttg 420

ggtatttcgc atgtcacgat cacgatcaat gctgtagatc cagtggtggg gagccgcatt 480

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aactcggtgc tgattcccga agtcaatgat gcccatctgc cagaggtagc cagggtggtc 660

aaggagcacg gcgcggtact gcacaacatt atgccgctca tcatcgcacc cggcagtcgg 720

tatgagcatg aagggatgcg ggccccccgt ccccgtctgg tccggcagct gcaggagcaa 780

tgtgctgagg cgggagctgt cattatgcgc cattgccgtc agtgcagggc ggatgcgatt 840

ggactgctgg gcgaggatcg caatcaggat tttacatggg agaacattgg ggctgctcct 900

cccatggatg aagaggcaag ggcacaattt cagaaagaac tggatgagaa ggtgagagtg 960

agaatggaac gcaaggaggg acaatcgcac cacaaaaaaa cgtcaaccgg ggttggatgt 1020

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tactgccatg ggaaagccga ttgcaatgga gacaaggtcg agacgatgaa ggagatcctt 1260

tccatggtgc atgactgtgc attgctgctg tcgtccggca taggcgaagc ccccaaagag 1320

gcattgcagg atgctggcgt gctgcctatt gtatgcggcg gggatattga ggaatccgtt 1380

ctggaatatg taaaatttct gcgttatatg tatcctgtgc agagcaataa gggaagtaag 1440

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