瓯柑果蔬茶及其制备方法
阅读说明：本技术 瓯柑果蔬茶及其制备方法 (Mandarin orange fruit and vegetable tea and preparation method thereof ) 是由 吴铮 于 2021-08-17 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种瓯柑果蔬茶及制备方法,采用甜味剂、酶制剂、发酵液对瓯柑果肉进行处理,同时采用甜味剂、脱苦剂对瓯柑皮进行处理,然后加入矿物质水进行均质处理,再加入刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精,最后进行均质、脱气、杀菌处理,制备得到瓯柑果蔬茶。本发明的瓯柑果蔬茶清凉透彻、营养丰富、口感纯正、香气浓郁、酸甜可口,同时有效保留了果肉、果皮中的营养成分,并且几乎不产生果皮、果渣等污染环境的固体废料。(The invention discloses tangerine fruit and vegetable tea and a preparation method thereof. The tangerine fruit and vegetable tea disclosed by the invention is cool and thorough, rich in nutrition, pure in taste, rich in fragrance, sour, sweet and delicious, effectively retains nutritional ingredients in pulp and peel, and hardly generates solid wastes such as peel and pomace which pollute the environment.)
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种瓯柑果蔬茶及其制备方法。
背景技术
瓯柑是柑橘的一个栽培变种，瓯柑果实金黄鲜艳，清甜多汁，略带苦味，瓯柑不仅含有多种维生素而且含有大量的抗氧化类物质，且具有祛热生津、化痰止咳、清凉解毒等药效，对高血压和发高烧患者也有一定疗效，并有增加冠状动脉流量的作用。
瓯柑中含有多种维生素，还含有丰富的过氧化氢氧化酶，与扛衰老的歧化酶，以及P、K、Ca、Fe、纤维素等人体需要的有机物和无机物，故将其加工成可供人们饮用的瓯柑果汁、瓯柑果蔬茶具有良好的市场前景。
中国专利201210337007.3公开了一种瓯柑果茶及其制备方法，包括如下重量百分比的原料：50-72.5％的瓯柑果实、3-5％的蜂蜜、1-3％的卡拉胶、10-20％的糖化水、13-20％的蔗糖和0.5-2％的柠檬酸。制备方法，包括如下步骤：(1)剥取果皮；(2)将果皮放入真空锅中；(3)在真空锅中加入果肉，继续微沸加热；(4)测量糖度；(5)开启真空泵加热(6)将步骤(5)获得的物质进行脱气处理后灌装后灭菌获得成品饮料。本发明制备的瓯柑果茶，味道酸甜可口，颜色浅黄透明，具有良好的市场前景。但苦味物质含量较高，造成适口性不足，同时营养物质含量受到影响。
发明内容
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种瓯柑果蔬茶及其制备方法。
一种瓯柑果蔬茶的制备方法，包括以下步骤：
S1将新鲜瓯柑清洗干净，将果皮和果肉分开，将果肉表面的白色薄膜剥离并去除果籽，分别得到瓯柑果肉、瓯柑果皮；
S2将瓯柑果肉经过粉碎打浆，得到瓯柑果肉浆；再加入瓯柑果肉浆重量2-5％的甜味剂，搅拌均匀，静置24-48h，得到腌制的瓯柑果肉浆；再加入腌制的瓯柑果肉浆重量的0.2-0.5％的酶制剂，在40-55℃酶解1-2h，得到瓯柑果肉浆酶解料；
S3将瓯柑皮经过粉碎打浆，得到瓯柑果皮浆；向瓯柑果皮浆中加入瓯柑果皮浆重量2-5％的甜味剂，搅拌均匀，静置24-48h，得到腌制的瓯柑果皮浆；
S4将步骤S2得到的瓯柑果肉浆酶解料、步骤S3得到的腌制的瓯柑果皮浆、矿物质水混合均匀并进行常温均质处理，其中所述瓯柑果肉浆酶解料、腌制的瓯柑果皮浆、矿物质水的质量比为(70-90)：(20-30)：(1-8)，均质压力为7-10MPa，均质时间为4-6s，得到均质液；将刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精加入均质液中混合均匀，得到混合物料，所述均质液、刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精的质量比为(85-100)：(0.3-2)：(0.5-2.5)：(0.2-1)：(0.2-1)：(0.2-1)：(0.1-0.5)；
S5将步骤S4得到的混合物料在80-95℃、7-12MPa均质处理4-8s，脱气、杀菌处理后得到瓯柑果蔬茶。
瓯柑为柑橘属的一种，果肉柔软多汁、清甜可口，略带苦味，营养价值高，瓯柑具有祛热生津、化痰、止咳，清凉解毒等功效；瓯柑不但含有丰富的多种维生素，还含有丰富的过氧化氢氧化酶，与扛衰老的歧化酶，以及P、K、Ca、Fe、纤维素等人体需要的有机物和无机物等营养物质，同时含有大量的黄酮类物质和类胡萝卜素等抗氧化活性功能成分。
进一步的，一种瓯柑果蔬茶的制备方法，包括以下步骤：
S1将新鲜瓯柑清洗干净，将果皮和果肉分开，将果肉表面的白色薄膜剥离并去除果籽，分别得到瓯柑果肉、瓯柑果皮；
S2将瓯柑果肉经过粉碎打浆，得到瓯柑果肉浆，再加入瓯柑果肉浆重量2-5％的甜味剂，搅拌均匀，静置24-48h，得到腌制的瓯柑果肉浆；再加入腌制的瓯柑果肉浆重量的0.2-0.5％的酶制剂，在40-55℃酶解1-2h，得到瓯柑果肉浆酶解料；向瓯柑果肉浆酶解料中加入瓯柑果肉浆酶解料重量2-4％的冬虫夏草茶叶发酵原液，在30-37℃发酵5-8天，得到瓯柑果肉浆发酵料；
S3将瓯柑皮经过粉碎打浆，得到瓯柑果皮浆，再加入瓯柑果皮浆重量2-5％的甜味剂，搅拌均匀，静置24-48h，得到腌制的瓯柑果皮浆；再加入腌制的瓯柑果皮浆重量0.5-2％的脱苦剂搅拌均匀，浸渍4-5h，过滤，取上清液，得到脱苦的瓯柑果皮浆预处理物；
S4将步骤S2得到的瓯柑果肉浆发酵料、步骤S3得到的瓯柑果皮浆预处理物、矿物质水混合均匀并进行常温均质处理，其中所述瓯柑果肉浆发酵料、瓯柑果皮浆预处理物、矿物质水的质量比为(70-90)：(20-30)：(1-8)，均质压力为7-10MPa，均质时间为4-6s，得到均质液；将刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精加入均质液中混合均匀，得到混合物料，所述均质液、刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精的质量比为(85-100)：(0.3-2)：(0.5-2.5)：(0.2-1)：(0.2-1)：(0.2-1)：(0.1-0.5)；
S5将步骤S4得到的混合物料在80-95℃、7-12MPa均质处理4-8s，脱气、杀菌处理后得到瓯柑果蔬茶。
所述酶制剂为果胶酶、纤维素酶、碱性蛋白酶中的一种或两种以上混合物；优选的，所述酶制剂为果胶酶、纤维素酶、碱性蛋白酶按质量比(1-3)：(1-3)：(1-3)混合而成。
所述甜味剂为葡萄糖、蔗糖、葡聚糖、果葡糖浆、麦芽糖中至少一种。
所述植物提取物为桂花提取物、柠檬提取物、郁金香提取物中的一种或两种以上混合物；优选的，所述植物提取物为桂花提取物、柠檬提取物、郁金香提取物按质量比(1-6)：(1-6)：(1-6)的混合物。
所述矿物质水为含有锌、铁、硒、钙四种元素的矿物质水，所述矿物质水中锌、铁、硒、钙四种元素的含量分别为锌1-2mg/L、铁4-8mg/L、硒0.01-0.05mg/L、钙5-8mg/L。
所述冬虫夏草茶叶发酵原液；所述冬虫夏草茶叶发酵原液的制备方法，包括以下步骤：
(1)从冬虫夏草母种上切取1-2块1cm2大小的菌块接种到普通培养基上，于24-26℃恒温培养7-9天，得到活化冬虫夏草菌种；所述普通培养基的成分为1-2重量份玉米粉、2-4重量份蛋白胨、0.1-0.5重量份碳酸钙、3-8重量份麦芽糖、1-1.5重量份琼脂、0.1-0.3重量份磷酸二氢钾、100重量份水，将上述成分混合，调节pH至7-7.2，115-120℃灭菌15-20min。
(2)在无菌条件下将1-3块3mm2的活化冬虫夏草菌种转接入含种子培养基的摇瓶中，在27-28℃、120-150转/分钟条件下培养4-6天，得到冬虫夏草种子液；所述种子培养基成分为1-2重量份大米粉、2-4重量份蛋白胨、0.1-0.5重量份氯化镁、3-5重量份葡萄糖、1-1.5重量份琼脂、0.1-0.3重量份磷酸二氢钾、100重量份水，将上述成分混合，调节pH至7-7.2，115-120℃灭菌15-20min。
(3)在无菌条件下将接种量为2-3wt％的冬虫夏草种子液转接到发酵培养基，在27-28℃、120-150转/分钟条件下培养4-6天，得到冬虫夏草茶叶发酵液；将冬虫夏草茶叶发酵液在5000-15000转/分钟进行离心20-30min，取上清液，得到冬虫夏草茶叶发酵原液；所述发酵培养基成分为1-5重量份茶叶、1-3重量份发芽糙米粉、0.1-0.5重量份氯化钠、0.1-0.2重量份MgSO4、0.1-0.2重量份磷酸二氢钾、100重量份水，将上述成分混合，调节pH至7-7.2，115-120℃灭菌15-20min。
所述脱苦剂为改性硅藻土、改性壳聚糖季铵盐中的一种或两种混合物；优选的，所述脱苦剂由改性硅藻土、改性壳聚糖季铵盐按质量比(1-3)：(1-3)混合而成；
所述改性硅藻土的制备方法，包括以下步骤：将硅藻土、3-氯丙基三甲氧基硅烷加入甲苯中搅拌均匀进行超声处理10-20min，其中超声波功率为500-700W，超声频率为20-40kHz，然后加热至90-100℃反应12-15h，离心，取沉淀、干燥，得到预处理硅藻土，所述硅藻土、3-氯丙基三甲氧基硅烷、甲苯的质量比为1：(2-3)：(60-90)；将预处理硅藻土、羟丙基-β-环糊精加入水中搅拌均匀，加热至70-80℃反应5-10h，离心、取沉淀、干燥，得到改性硅藻土，所述预处理硅藻土、羟丙基-β-环糊精、水的质量比为1：(0.1-0.6)：(80-100)。
所述改性壳聚糖季铵盐的制备方法，包括以下步骤：将壳聚糖季铵盐加入固定化酶液中搅拌均匀，在30-35℃、100-120r/min恒温振荡反应30-60min后，加入转谷氨酰胺酶溶液，在30-35℃、100-120r/min恒温振荡反应10-12h，过滤、洗涤，得到改性壳聚糖季铵盐；所述壳聚糖季铵盐、固定化酶液、转谷氨酰胺酶溶液的质量比为(1-3)：(10-15)：(1-2)；所述转谷氨酰胺酶溶液为将0.2-0.5g转谷氨酰胺酶加入10-20mL水中混合均匀；所述固定化酶液为将0.5-1g固定化酶加入pH＝3-4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中混合均匀。
所述固定化酶为柚苷酶、β-葡萄糖苷酶中的一种或两种以上混合物；优选的，所述固定化酶由柚苷酶、β-葡萄糖苷酶按质量比(1-3)：(1-3)混合而成；
采用果胶酶、纤维素酶、碱性蛋白酶结合起来对瓯柑果肉进行酶解，提高出汁率，并增加果汁稳定性；利用采用冬虫夏草茶叶发酵原液对瓯柑果肉进行发酵，制备得到的瓯柑果蔬茶富含虫草多糖、茶多酚、γ-氨基丁酸，营养丰富，增强人体免疫力；添加六偏磷酸钠，阻碍多酚氧化酶催化发生酶促褐变，有效抑制了维生素C被氧化。引入了矿物质元素，增加了其营养成分，促进了人体的消化和吸收。
在脱苦过程中，采用改性硅藻土与改性壳聚糖季铵盐联合进行脱苦处理，先采用改性硅藻土对果蔬茶中的苦味物质和一些不利于果蔬茶的物质进行吸附与同时采用β-环糊精包埋结合进行脱苦，显著改善脱苦率，再采用转谷氨酰胺酶作为交联剂，将柚苷酶、β-葡萄糖苷酶固定在壳聚糖季铵盐制备改性壳聚糖季铵盐，柚苷酶、β-葡萄糖苷酶协同作用对果蔬茶中的苦味物质进行降解转化，柚苷酶将瓯柑果皮中的柚皮苷降解转化为柚皮素，更有利于人体的吸收并改善果蔬茶的口味，β-葡萄糖苷酶将瓯柑果皮中的芳香物质释放出来添加芳香同时将柚皮苷进行降解为柚皮素和葡萄糖，同时采用壳聚糖季铵盐对柚皮苷进行吸附，改善脱苦率；其可能的原因是壳聚糖季铵盐分子结构位阻大，改善壳聚糖的水溶性，壳聚糖季铵盐中含有季铵盐阳离子，可以进一步提高了对柚皮苷的吸附能力；转谷氨酰胺酶安全高效和生物相容性好的优点，转谷氨酰胺酶可以在酶蛋白的谷氨酰胺残基的γ-羧基与赖氨酸的ε-氨基之间形成肽键；
本发明的有益效果：本发明瓯柑果蔬茶的制备方法为采用甜味剂、酶制剂、发酵液对瓯柑果肉进行处理，同时采用甜味剂、脱苦剂对瓯柑皮进行处理，然后加入矿物质水进行均质处理，进一步加入刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精，最后进行均质、脱气、杀菌处理，制备得到瓯柑果蔬茶。本发明采用的植物提取物作为食品防腐剂，能够有效地抑制微生物的生长，延长瓯柑果蔬茶的保质期。利用采用冬虫夏草茶叶发酵原液对瓯柑果肉进行发酵，制备得到的瓯柑果蔬茶富含虫草多糖、茶多酚、γ-氨基丁酸，营养丰富，增强人体免疫力；本发明制备得到的瓯柑果蔬茶清凉透彻、营养丰富、口感纯正、香气浓郁、酸甜可口，具有较高的饮用价值；同时有效保留了果肉、果皮中的营养成分，并且几乎不产生果皮、果渣等污染环境的固体废料。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步的详细描述，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。
瓯柑，为芸香科柑橘属瓯柑Citrus reticulata Blanco cv.Suavissima的成熟果实，品种三垟瓯柑，温州市韩杰斯衬布有限公司。
果胶酶，CAS号：9032-75-1，酶活力10000U/g，山东苏柯汉生物工程股份有限公司。
纤维素酶，CAS号：9042-54-8，酶活力20000U/g，山东苏柯汉生物工程股份有限公司。
香精，类型为桔子香精，粉末状，食品级，深圳拓建生物科技有限公司。
刺槐豆胶，食品级，刺槐豆胶有效物质含量为99％，江苏采薇生物科技有限公司。
异麦芽酮糖，CAS：13718-94-0，食品级，异麦芽酮糖有效物质含量为99％，深圳金富源生物科技有限公司。
D-酒石酸，CAS：147-71-7，食品级，D-酒石酸有效物质含量为99％，河南香多实业有限公司。
六偏磷酸钠，CAS：10124-56-8，食品级，六偏磷酸钠有效物质含量为99％，深圳金富源生物科技有限公司。
碱性蛋白酶，CAS：9001-92-7，食品级，酶活力：10万/g，河北科隆多生物科技有限公司。
麦芽糖，CAS：69-79-4，食品级，纯度：99％，南京松冠生物科技有限公司。
冬虫夏草，拉丁学名：Cordyceps sinensis，保藏编号：CICC14016，购买自中国工业微生物菌种保藏中心。
实施例中茶叶为西湖龙井茶，购买自仙享(杭州)茶叶有限公司。
发芽糙米，遂平县魏家五谷养生磨坊。
硅藻土，CAS：61790-53-2，食品级，粒径：800-1000目，灵寿县万众矿产品加工厂。
3-氯丙基三甲氧基硅烷，CAS：2530-87-2，纯度：98％，上海易恩化学技术有限公司。
羟丙基-β-环糊精，CAS：128446-35-5，羟丙基-β-环糊精有效物质含量为99％，西安拉维亚生物科技有限公司。
实施例中壳聚糖季铵盐的制备方法：将壳聚糖加入N-甲基吡咯烷酮中，在30℃下以350r/min的转速搅拌10h，加入碘化钠、1mol/L氢氧化钠水溶液、碘甲烷，保持转速不变，60℃下继续反应16h，所述壳聚糖、N-甲基吡咯烷酮、碘化钠、氢氧化钠水溶液、碘甲烷的质量比为1：50：2：8：11，然后加入壳聚糖质量150倍的丙酮进行沉淀，抽滤，所得滤饼置于50℃下干燥50h，得到壳聚糖季铵盐。
转谷氨酰胺酶，CAS：300711-04-0，纯度：99％，酶活力：200U/g，北京灵宝科技有限公司。
柚苷酶，CAS：9068-31-9，食品级，柚苷酶有效物质含量为99％，酶活力：10万/g，山西鸿祥生物技术有限公司。
β-葡萄糖苷酶，CAS：9001-22-3，食品级，β-葡萄糖苷酶有效物质含量为99％，酶活力：10万/g，江苏奥福生物科技有限公司。
桂花提取物，食品级，西安金萃坊植物技术开发有限公司。
柠檬提取物，食品级，重庆婷逸生物科技有限公司。
郁金香提取物，食品级，扶风斯诺特生物科技有限公司。
实施例1
一种瓯柑果蔬茶的制备方法，包括以下步骤：
S1将新鲜瓯柑清洗干净，将果皮和果肉分开，将果肉表面的白色薄膜剥离并去除果籽，分别得到瓯柑果肉、瓯柑果皮；
S2将瓯柑果肉经过粉碎打浆，得到瓯柑果肉浆，再加入瓯柑果肉浆重量2％的甜味剂，搅拌均匀，静置24h，得到腌制的瓯柑果肉浆；再加入腌制的瓯柑果肉浆重量的0.3％的酶制剂，在50℃酶解2h，得到瓯柑果肉浆酶解料；再加入瓯柑果肉浆酶解料重量2％的冬虫夏草茶叶发酵原液，在37℃发酵8天，得到瓯柑果肉浆发酵料；
S3将瓯柑皮经过粉碎打浆，得到瓯柑果皮浆，再加入瓯柑果皮浆重量2％的甜味剂，搅拌均匀，静置24h，得到腌制的瓯柑果皮浆；再加入腌制的瓯柑果皮浆重量0.5％的脱苦剂搅拌均匀，浸渍4h，过滤，取上清液，得到瓯柑果皮浆预处理物；
S4将步骤S2得到的瓯柑果肉浆发酵料、步骤S3得到的瓯柑果皮浆预处理物、矿物质水混合均匀并进行常温均质处理，其中所述瓯柑果肉浆发酵料、瓯柑果皮浆预处理物、矿物质水的质量比为70：25：3，均质压力为7MPa，均质时间为6s，得到均质液；将刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精加入均质液中混合均匀，得到混合物料，所述均质液、刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精的质量比为85：0.5：0.5：0.2：0.2：0.2：0.1；
S5将步骤S4得到的混合物料在95℃、10MPa均质处理5s，脱气、杀菌处理后得到瓯柑果蔬茶。
所述酶制剂为果胶酶、纤维素酶、碱性蛋白酶按质量比1：1：1混合而成。
所述甜味剂为麦芽糖；
所述植物提取物为桂花提取物、柠檬提取物、郁金香提取物按质量比1：1：1的混合物。
所述矿物质水为含有锌、铁、硒、钙四种元素的水，所述矿物质水中锌、铁、硒、钙四种元素的含量分别为锌1mg/L、铁4mg/L、硒0.02mg/L、钙5mg/L。
所述冬虫夏草茶叶发酵原液的制备方法，包括以下步骤：
(1)从冬虫夏草母种上切取2块1cm2大小的菌块接种到普通培养基上，于25℃恒温培养8天，得到活化冬虫夏草菌种；所述普通培养基的成分为2重量份玉米粉、2重量份蛋白胨、0.1重量份碳酸钙、5重量份麦芽糖、1.5重量份琼脂、0.3重量份磷酸二氢钾、100重量份水，将上述成分混合，调节pH至7，115℃灭菌15min。
(2)在无菌条件下将2块3mm2的活化冬虫夏草菌种转接入含种子培养基的摇瓶中，在27℃、150转/分钟条件下培养6天，得到冬虫夏草种子液；所述种子培养基成分为2重量份大米粉、2重量份蛋白胨、0.1重量份氯化镁、5重量份葡萄糖、1.5重量份琼脂、0.3重量份磷酸二氢钾、100重量份水，将上述成分混合，调节pH至7，115℃灭菌15min。
(3)在无菌条件下将接种量为2wt％的冬虫夏草种子液转接到发酵培养基，在28℃、150转/分钟条件下培养6天，得到冬虫夏草茶叶发酵液；将冬虫夏草茶叶发酵液在15000转/分钟进行离心20min，取上清液，得到冬虫夏草茶叶发酵原液；所述发酵培养基成分为5重量份茶叶、3重量份发芽糙米粉、0.1重量份氯化钠、0.2重量份MgSO4、0.1重量份磷酸二氢钾、100重量份水，将上述成分混合，调节pH至7，115℃灭菌15min。
所述脱苦剂由改性硅藻土、改性壳聚糖季铵盐按质量比1：2混合而成；
所述改性硅藻土的制备方法，包括以下步骤：将硅藻土、3-氯丙基三甲氧基硅烷加入甲苯中搅拌均匀进行超声处理20min，其中超声波功率为500W，超声频率为20kHz，然后加热至95℃反应12h，离心，取沉淀、干燥，得到预处理硅藻土，所述硅藻土、3-氯丙基三甲氧基硅烷、甲苯的质量比为1：3：65；将预处理硅藻土、羟丙基-β-环糊精加入水中搅拌均匀，加热至80℃反应6h，离心、取沉淀干燥，得到改性硅藻土，所述预处理硅藻土、羟丙基-β-环糊精、水的质量比为1：0.6：80；
所述改性壳聚糖季铵盐的制备方法，包括以下步骤：将壳聚糖季铵盐加入固定化酶液中搅拌均匀，在32℃、120r/min恒温振荡反应45min后，加入转谷氨酰胺酶溶液，在30℃、120r/min恒温振荡反应12h，过滤、洗涤，得到改性壳聚糖季铵盐，4℃下存储备用；所述壳聚糖季铵盐、固定化酶液、转谷氨酰胺酶溶液的质量比为1：10：2；所述转谷氨酰胺酶溶液为将0.2g转谷氨酰胺酶加入20mL水中混合均匀；所述固定化酶液为将0.5g固定化酶加入pH＝3.4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中混合均匀。
所述固定化酶由柚苷酶、β-葡萄糖苷酶按质量比1：1混合而成。
实施例2
与实施例1基本相同，区别仅仅在于：所述脱苦剂为改性硅藻土。
所述改性硅藻土的制备方法，包括以下步骤：将硅藻土、3-氯丙基三甲氧基硅烷加入甲苯中搅拌均匀进行超声处理20min，其中超声波功率为500W，超声频率为20kHz，然后加热至95℃反应12h，离心，取沉淀、干燥，得到预处理硅藻土，所述硅藻土、3-氯丙基三甲氧基硅烷、甲苯的质量比为1：3：65；将预处理硅藻土、羟丙基-β-环糊精加入水中搅拌均匀，加热至80℃反应6h，离心、取沉淀干燥，得到改性硅藻土，所述预处理硅藻土、羟丙基-β-环糊精、水的质量比为1：0.6：80。
实施例3
与实施例1基本相同，区别仅仅在于：所述脱苦剂为改性壳聚糖季铵盐。
所述改性壳聚糖季铵盐的制备方法，包括以下步骤：将壳聚糖季铵盐加入固定化酶液中搅拌均匀，在32℃、120r/min恒温振荡反应45min后，加入转谷氨酰胺酶溶液，在30℃、120r/min恒温振荡反应12h，过滤、洗涤，得到改性壳聚糖季铵盐，4℃下存储备用；所述壳聚糖季铵盐、固定化酶液、转谷氨酰胺酶溶液的质量比为1：10：2；所述转谷氨酰胺酶溶液为将0.2g转谷氨酰胺酶加入20mL水中混合均匀；所述固定化酶液为将0.5g固定化酶加入pH＝3.4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中混合均匀。所述固定化酶由柚苷酶、β-葡萄糖苷酶按质量比1：1混合而成。
实施例4
与实施例3基本相同，区别仅仅在于：所述脱苦剂为改性壳聚糖季铵盐。
所述改性壳聚糖季铵盐的制备方法，包括以下步骤：将壳聚糖季铵盐加入固定化酶液中搅拌均匀，在32℃、120r/min恒温振荡反应45min后，加入转谷氨酰胺酶溶液，在30℃、120r/min恒温振荡反应12h，过滤、洗涤，得到改性壳聚糖季铵盐，4℃下存储备用；所述壳聚糖季铵盐、固定化酶液、转谷氨酰胺酶溶液的质量比为1：10：2；所述转谷氨酰胺酶溶液为将0.2g转谷氨酰胺酶加入20mL水中混合均匀；所述固定化酶液为将0.5g固定化酶加入pH＝3.4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中混合均匀。所述固定化酶为柚苷酶。
实施例5
与实施例3基本相同，区别仅仅在于：所述脱苦剂为改性壳聚糖季铵盐。
所述改性壳聚糖季铵盐的制备方法，包括以下步骤：将壳聚糖季铵盐加入固定化酶液中搅拌均匀，在32℃、120r/min恒温振荡反应45min后，加入转谷氨酰胺酶溶液，在30℃、120r/min恒温振荡反应12h，过滤、洗涤，得到改性壳聚糖季铵盐，4℃下存储备用；所述壳聚糖季铵盐、固定化酶液、转谷氨酰胺酶溶液的质量比为1：10：2；所述转谷氨酰胺酶溶液为将0.2g转谷氨酰胺酶加入20mL水中混合均匀；所述固定化酶液为将0.5g固定化酶加入pH＝3.4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中混合均匀。所述固定化酶为β-葡萄糖苷酶。
实施例6
一种瓯柑果蔬茶的制备方法，包括以下步骤：
S1将新鲜瓯柑清洗干净，将果皮和果肉分开，将果肉表面的白色薄膜剥离并去除果籽，分别得到瓯柑果肉、瓯柑果皮；
S2将瓯柑果肉经过粉碎打浆，得到瓯柑果肉浆；再加入瓯柑果肉浆重量2％的甜味剂，搅拌均匀，静置24h，得到腌制的瓯柑果肉浆；再腌制的瓯柑果肉浆中加入腌制的瓯柑果肉浆重量的0.3％的酶制剂，在50℃酶解2h，得到瓯柑果肉浆酶解料；
S3将瓯柑皮经过粉碎打浆，得到瓯柑果皮浆；再加入瓯柑果皮浆重量2％的甜味剂，搅拌均匀，静置24h，得到腌制的瓯柑果皮浆；再加入腌制的瓯柑果皮浆重量0.5％的脱苦剂搅拌均匀，浸渍4h，过滤，取上清液，得到瓯柑果皮浆预处理物；
S4将步骤S2得到的瓯柑果肉浆酶解料、步骤S3得到的瓯柑果皮浆预处理物、矿物质水混合均匀并进行常温均质处理，其中所述瓯柑果肉浆酶解料、瓯柑果皮浆预处理物、矿物质水的质量比为70：25：3，均质压力为7MPa，均质时间为6s，得到均质液；将刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精加入均质液中混合均匀，得到混合物料，所述均质液、刺槐豆胶、异麦芽酮糖、D-酒石酸、六偏磷酸钠、植物提取物、香精的质量比为85：0.5：0.5：0.2：0.2：0.2：0.1；
S5将步骤S4得到的混合物料在95℃、10MPa均质处理5s，脱气、杀菌处理后得到瓯柑果蔬茶。
所述酶制剂为果胶酶、纤维素酶、碱性蛋白酶按质量比1：1：1混合而成。
所述甜味剂为麦芽糖；
所述植物提取物为桂花提取物、柠檬提取物、郁金香提取物按质量比1：1：1的混合物。
所述矿物质水为含有锌、铁、硒、钙四种元素的矿物质水，所述矿物质水中锌、铁、硒、钙四种元素的含量分别为锌1mg/L、铁4mg/L、硒0.02mg/L、钙5mg/L。
所述脱苦剂由改性硅藻土、改性壳聚糖季铵盐按质量比1：2混合而成；
所述改性硅藻土的制备方法，包括以下步骤：将硅藻土、3-氯丙基三甲氧基硅烷加入甲苯中搅拌均匀进行超声处理20min，其中超声波功率为500W，超声频率为20kHz，然后加热至95℃反应12h，离心，取沉淀、干燥，得到预处理硅藻土，所述硅藻土、3-氯丙基三甲氧基硅烷、甲苯的质量比为1：3：65；将预处理硅藻土、羟丙基-β-环糊精加入水中搅拌均匀，加热至80℃反应6h，离心、取沉淀干燥，得到改性硅藻土，所述预处理硅藻土、羟丙基-β-环糊精、水的质量比为1：0.6：80；
所述改性壳聚糖季铵盐的制备方法，包括以下步骤：将壳聚糖季铵盐加入固定化酶液中搅拌均匀，在32℃、120r/min恒温振荡反应45min后，加入转谷氨酰胺酶溶液，在30℃、120r/min恒温振荡反应12h，过滤、洗涤，得到改性壳聚糖季铵盐，4℃下存储备用；所述壳聚糖季铵盐、固定化酶液、转谷氨酰胺酶溶液的质量比为1：10：2；所述转谷氨酰胺酶溶液为将0.2g转谷氨酰胺酶加入20mL水中混合均匀；所述固定化酶液为将0.5g固定化酶加入pH＝3.4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中混合均匀。
所述固定化酶由柚苷酶、β-葡萄糖苷酶按质量比1：1混合而成。
测试例1
脱苦效果测试：本测试例根据邬应龙的期刊文献《几种柑橘类果汁中主要苦味物在加工过程中含量变化的研究》1.3节的方法，采用高效液相色谱法对实施例1-6中的柚皮苷含量、柠檬苦素类物质含量进行测定。
表1瓯柑果蔬茶中柚皮苷含量、柠檬苦素类物质含量的测试结果
柚皮苷含量/μg·kg-1
柠檬苦素类物质含量/μg·kg-1
实施例1
99.73
15.39
实施例2
113.69
23.68
实施例3
103.58
17.89
实施例4
105.11
18.21
实施例5
107.35
19.57
实施例6
132.47
31.25
通过表1可知，实施例1的脱苦性能最好。实施例1采用冬虫夏草茶叶发酵原液与脱苦剂(改性硅藻土、改性壳聚糖季铵盐)相结合，显著改善瓯柑果蔬茶的脱苦效果。利用采用冬虫夏草茶叶发酵原液对瓯柑果肉进行发酵，制备得到的瓯柑果蔬茶富含虫草多糖、茶多酚、γ-氨基丁酸，营养丰富，增强人体免疫力同时进一步提高瓯柑的出汁率，进一步与改性硅藻土与改性壳聚糖季铵盐联合进行脱苦处理，降解苦味物质，更利于人体吸收，改善口感。
实施例1与实施例2-3对比发现，实施例1脱苦性能显著优于实施例2-3。实施例3与实施例4-5对比发现，实施例3的脱苦性能显著优于实施例4-5。采用柚苷酶、β-葡萄糖苷酶固定在壳聚糖季铵盐制备改性壳聚糖季铵盐，柚苷酶、β-葡萄糖苷酶协同作用对果蔬茶中的苦味物质进行降解转化，柚苷酶将瓯柑果皮中的柚皮苷降解转化为柚皮素，更有利于人体的吸收并改善果蔬茶的口味，β-葡萄糖苷酶将瓯柑果皮中的芳香物质释放出来添加芳香同时将柚皮苷进行降解为柚皮素和葡萄糖，同时采用壳聚糖季铵盐对柚皮苷进行吸附，改善脱苦率；其可能的原因是壳聚糖季铵盐分子结构位阻大，改善壳聚糖的水溶性，壳聚糖季铵盐中含有季铵盐阳离子，可以进一步提高了对柚皮苷的吸附能力；转谷氨酰胺酶安全高效和生物相容性好的优点，转谷氨酰胺酶可以在酶蛋白的谷氨酰胺残基的γ-羧基与赖氨酸的ε-氨基之间形成肽键。
测试例2
DPPH自由基清除率的测定：移取1mL实施例1-6制备的瓯柑果蔬茶加入含有6mL80％甲醇溶液的离心管中，于10000r.min-1、4℃冷冻离心15min，弃残渣，将提取液转移至10mL容量瓶中，用80％的甲醇溶液定容，取0.2mL提取液加入2.8mL、0.1mmol LDPPH的无水乙醇溶液中，置于30℃水浴中避光反应30min，在517nm处测其吸光度。以0.2mL 80％甲醇溶液代替样品加入到2.8mL DPPH中作为空白对照，DPPH自由基清除率(％)＝(A1-A2)/A2×100其中，A1为空白样品在517nm处的吸光值；A2为试验样品在517nm处的吸光值。
表2瓯柑果蔬茶中DPPH自由基清除率的测试结果
DPPH自由基清除率/％
实施例1
48.39
实施例2
38.87
实施例3
45.24
实施例4
44.68
实施例5
42.26
实施例6
35.45
测试例3
保健效果测试：根据李红军的期刊文章《血脂康对高脂饲料喂养大鼠主动脉结构的影响》中1.3节的测试方法，对实施例2-6中瓯柑果蔬茶的保健效果进行测试。
试样的制备方法：将10g的瓯柑果蔬茶加入至200mL水中，水的温度为95℃，搅拌均匀后过100目滤布，冷却至25℃备用，得到瓯柑果蔬茶试样。
实验方法：选取健康雄性清洁级SD大鼠200只(由河南省动物实验中心提供)，大鼠的体质量在200g左右，随机分成10组，每组20只，饲养于20℃、明暗各12h的清洁级动物实验室。实验为期16周，前4周为造模期，后12周为实验期。在造模期中，每组小鼠每天灌胃1.0mL/100g高脂饲料(由47.8wt％水、20wt％猪油、5wt％胆固醇、2wt％胆酸盐、0.2wt％丙基硫氧嘧啶、10wt％吐温80、10wt％丙二醇、5wt％蔗糖混合均匀制得)；实验期按1.5g/100g分别灌胃瓯柑果蔬茶试样，空白对照组等量生理盐水。各组灌胃的同时，空白对照组继续给予基础饲料，其他各组给予高脂饲料，连续给药12周，试验结束时，大鼠禁食不禁水，断头取血，按《血脂康对高脂饲料喂养大鼠主动脉结构的影响》中的检测方法测定血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。
比较各组测试结果，通过统计学分析方法得P＜0.05，表明样本均数差别具有统计学意义。
表3瓯柑果蔬茶保健性能测试结果
TG/mmol·L<sup>-1</sup>
TC/mmol·L<sup>-1</sup>
实施例1
2.35
2.14
实施例2
2.74
2.41
实施例3
2.47
2.18
实施例4
2.53
2.25
实施例5
2.66
2.38
实施例6
2.81
2.67
由表3可知，采用冬虫夏草茶叶发酵原液与脱苦剂(改性硅藻土、改性壳聚糖季铵盐)相结合得到的瓯柑果蔬茶对大鼠的总胆固醇、甘油三脂有很大的影响，进一步说明本发明提供的瓯柑果蔬茶具有较好的保健功能。
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