1,2,5-三-o-苯甲酰基-3-二苄基氨基-3-脱氧核糖作为生产3′-氨基-3′-脱氧腺苷和3′-氨基-3′-脱氧鸟苷的中间体及其受保护的衍生物的合成
阅读说明：本技术 1,2,5-三-o-苯甲酰基-3-二苄基氨基-3-脱氧核糖作为生产3′-氨基-3′-脱氧腺苷和3′-氨基-3′-脱氧鸟苷的中间体及其受保护的衍生物的合成 (Synthesis of 1,2, 5-tri-O-benzoyl-3-dibenzylamino-3-deoxyribose as an intermediate for the production of 3 '-amino-3' -deoxyadenosine and 3 '-amino-3' -deoxyguanosine and protected der) 是由 袁昌夏 M·A·施密特 A·奥尔蒂斯 A·J·罗杰斯 朱景生 X·中敏 M·于 E·M 于 2020-02-05 设计创作，主要内容包括：本发明总体上涉及用于制备可用作STING激动剂的环状二核苷酸的中间体的改进方法。(The present invention relates generally to improved processes for preparing intermediates of cyclic dinucleotides useful as STING agonists.)
相关申请的交叉引用
本申请要求于2019年2月5日提交的美国临时申请号62/801251的权益，所述临时申请的公开内容通过引用以其整体并入本文。
技术领域
本发明总体上涉及一种用于制备可用作STING激动剂的环状二核苷酸的中间体的改进方法。
背景技术
公开了一种用于制备中间体化合物的改进方法，所述中间体化合物用于制备下式的化合物I
化合物I、包含化合物I的组合物和制备化合物I的替代方法公开于2018年1月30日提交的USSN 15/748685中，其已转让给本发明受让人并通过引用以其整体并入本文。化合物I可用于与某些抗癌剂组合用于治疗各种类型的癌症。
发明内容
在第一方面，本发明提供了一种用于制备下式的化合物8的方法：
包括以下步骤
a)使化合物1在苯甲酰基保护反应中反应，
得到化合物2；
b)使化合物2在氧化反应中反应，得到化合物3；
c)随后使化合物3在还原胺化中反应，
得到化合物4；
d)使化合物4在保护步骤中使用苄基保护剂和碱在溶剂中在约70℃的温度反应，得到下式的化合物5
e)随后使化合物5在脱保护步骤中与酸在常用有机溶剂中反应，得到下式的化合物6和7
f)使化合物6和7与苯甲酰基保护剂和碱在有机溶剂中反应，得到化合物8。
在第二方面，本发明提供了一种用于制备下式的化合物15的方法
a)其包括使用Vorbrüggen化学法使化合物8反应，得到化合物9
b)随后使化合物9脱保护，得到下式的化合物10
c)然后对化合物10进行保护，得到下式的化合物11和12
d)使化合物11和12与苯甲酰基保护剂反应，得到下式的化合物13
e)然后使化合物13与氨反应，得到下式的化合物14
f)随后使化合物14氢化，得到中间体化合物15或化合物15a
在第三方面，本发明提供了一种用于制备下式的化合物22的方法
其包括
a)使用Vorbrüggen化学法使化合物8反应，得到下式的化合物16
b)将化合物16水解，得到化合物17；
c)随后使化合物17脱保护，得到下式的化合物18
d)然后对化合物18进行保护，得到下式的化合物19，
e)将化合物19使用含异丁酰基的试剂进一步进行保护，得到下式的化合物20，
或者可替代地，使化合物19反应得到化合物23，将化合物23使用含异丁酰基的试剂进一步进行保护，得到化合物20
f)将化合物20在酸性条件下脱保护，得到下式的化合物21
g)然后将化合物21氢化，得到化合物22。
在本发明的另一方面，提供了如下表所示的新型中间体化合物及其盐和非对映异构体。虽然这些化合物示出为具有特定的保护基团，即对于胺取代基为Bn，对于醇取代基为TBS，但可以使用更宽范围的保护基团或根本不使用保护基团。对于胺保护基团(X)，保护基团可以选自酰胺、硫代酰胺、磺酰胺、氨基甲酸酯、亚胺、甲脒、烷基(例如苄基、烯丙基)、磷酸酯和甲硅烷基化合物。对于醇保护基团(Y)，保护基团可以选自甲硅烷基、烷基(例如烯丙基或苄基)、烷氧基甲基醚(例如TOM或MOM)、烷氧基乙基醚(例如氰乙基)和酯。这些保护基团的列表不被认为是限制性的，而是还包括本领域技术人员已知的其他保护基团。
本发明的其他方面和实施方案详述如下。
在本发明第一方面的一个实施方案中，在步骤a)中公开了化合物1中伯醇的苯甲酰保护，其中该保护通过在约0℃的温度使用在DCM中的苯甲酰氯和吡啶来完成。可替代地，可以使用Bz2O代替苯甲酰氯。替代碱包括但不限于三甲胺、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、咪唑、乙胺。替代溶剂包括但不限于MeCN、THF、甲苯、EtOAc和2-MeTHF。
在本发明第一方面的另一个实施方案中，在步骤b)中公开了在23℃使用在MeCN中的TEMPO[(2,2,6,6-四甲基哌啶-1-基)氧基]和NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)对化合物2中仲醇的TEMPO介导的氧化。可替代地，可以使用4-羟基TEMPO。氧化剂PIDA((二乙酰氧基碘)苯)是优选的，但替代氧化剂包括但不限于NaClO、Py·SO3、NCS(N-氯代琥珀酰亚胺)和PIDA。替代溶剂包括DCM、THF、甲苯、EtOAc和2-MeTHF。
在本发明第一方面的另一个实施方案中，在步骤c)中公开了涉及在约10℃使用在TFE/MeCN中的苄胺形成亚胺的还原胺化。将所形成的亚胺溶液添加到STAB-H(NaBH(OAc)3)在MeCN中的悬浮液中以形成加合物。苄胺的替代试剂可以是但不限于如下所示的任何苄胺
其中R是烷基、Cl、Br或NO2，并且n是0、1或2。
TFE的替代溶剂可以是但不限于六氟异丙醇。Ti(OiPr)4可用作添加剂以替代TFE的使用。添加剂可以是路易斯酸或吸水的干燥剂(如MgSO4)。STAB-H的替代还原剂可以是但不限于NaBH4和NaBH(OCOCF3)3。MeCN的替代溶剂可以是但不限于DCM、THF、甲苯、EtOAc和2-MeTHF。
在本发明第一方面的另一个实施方案中，在步骤d)中公开了在约70℃使用在MeCN中的苄基溴和N,N-二异丙基乙胺对化合物4的苄基保护。苄基溴的替代试剂可以是苄基氯。N,N-二异丙基乙胺的替代物可以是但不限于三甲胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶、咪唑或乙胺。MeCN的替代溶剂可以是但不限于DCM、THF、甲苯、EtOAc、2-MeTHF。产物也可使用苯甲酰醛和NaBH4进行还原胺化反应来产生。
在本发明第一方面的另一个实施方案中，在步骤e)中公开了在室温使用在THF和甲苯中的TsOH水合物对化合物5的缩丙酮化合物脱保护。替代酸可以是但不限于TFA、乙酸或氯乙酸、无机酸和常用的有机酸。替代溶剂可以是任何常用的具有水的有机溶剂。
在本发明第一方面的另一个实施方案中，在步骤f)中公开了在室温使用在甲苯中的苯甲酸酐、Et3N和DMAP的苯甲酰基保护反应。苯甲酸酐的替代试剂可以是BzCl和BzOH。可以使用的替代碱包括但不限于N,N-二异丙基乙胺、2,6二甲基吡啶、咪唑和乙胺。可以使用的替代溶剂包括但不限于MeCN、THF、甲苯、EtOAc和2-MeTHF。
在本发明第二方面的一个实施方案中，在步骤a)中公开了在70℃使用在MeCN中的HABz、BSA和TMSOTf的Vorbrüggen化学法。TMSOTf的替代试剂可以是但不限于TBSOTf和SnCl4。可以使用的替代溶剂包括但不限于二甲苯、甲苯和THF。替代添加剂可以是但不限于DBU。
在本发明第二方面的另一个实施方案中，在步骤b)中公开了在约60℃使用KOH和MeOH的苯甲酰基脱保护。KOH的替代物可以是但不限于常用的无机碱，例如NaOH、LiOH、K2CO3、Ba(OH)2等。替代溶剂可以是但不限于EtOH和IPA。
在本发明第二方面的另一个实施方案中，在步骤c)中公开了使用在PhCF3和NMP中的TBSCl和咪唑对化合物10的TBS保护。一种替代条件是使用在DCM中的TBSOTf和2,6-二甲基吡啶。
在本发明第二方面的另一个实施方案中，在步骤d)中公开了使用在甲苯中的BzCl和二甲基吡啶的保护步骤。BzCl的替代试剂可以是Bz2O，并且可以使用任何常用的有机碱。替代溶剂可以是但不限于THF、2-MeTHF、DCM和二甲苯。
在本发明第二方面的另一个实施方案中，在步骤f)中公开了在氢气压力下使用在DMF中的PdCl2和ZnBr2的氢化步骤。PdCl2可以交换为任何可能的Pd/C。ZnBr2的替代物包括但不限于TsOH、LiCl、LiBr、咪唑盐酸盐、ZnI2或ZnCl2、其他过渡金属盐或稀土金属盐。替代溶剂可以是但不限于THF、甲苯、DCM、TFE、AcOH和IPAc。
在本发明第三方面的一个实施方案中，在步骤a)中公开了在70℃使用在MeCN中的HABz、BSA和TMSOTf的Vorbrüggen化学法。TMSOTf的替代试剂可以是但不限于TBSOTf和SnCl4。可以使用的替代溶剂包括但不限于二甲苯、甲苯和THF。替代添加剂可以是但不限于DBU。
在本发明第三方面的另一个实施方案中，在步骤b)中公开了使用在甲苯中的水和TFA的水解反应。替代酸包括任何常用的无机酸，可以使用的替代溶剂包括但不限于MeOH、EtOH、THF、2-MeTHF和MeCN。
在本发明第三方面的另一个实施方案中，在步骤c)中公开了使用在甲苯中的KOH水溶液的脱保护步骤。可以使用的替代碱包括但不限于常用的可溶性无机碱，例如LiOH水溶液、NaOH水溶液、K2CO3和其他碳酸盐碱。
在本发明第三方面的另一个实施方案中，在步骤d)中公开了在约100℃使用在PhCF3和NMP中的TBSCl和咪唑对化合物18的TBS保护。可替代地，保护步骤可以使用在DCM中的TBSOTf和2,6-二甲基吡啶。
在本发明第三方面的另一个实施方案中，在步骤e)中公开了另一个使用iBuCOCl和吡啶的保护步骤。可替代地，该步骤可以使用(iBuCO)2O和三甲胺或N,N-二异丙基乙胺作为碱。
在本发明第三方面的另一个实施方案中，在步骤f)中公开了在约23℃使用在水和DCM中的TFA对化合物20中TBS的脱保护。可替代地，可以使用常用有机酸和常用有机溶剂。最后，在本发明第三方面的另一个实施方案中，在步骤g)中公开了在氢气压力下使用在THF中的Pd/C和TsOH·H2O的氢化反应。可替代地，可以使用任何Pd/C。可以使用的替代溶剂包括但不限于MeOH、EtOH、IPA、甲苯、DCM和IPAc。
具体实施方式
实施例
现在将通过以下一个或多个工作实施例进一步描述本发明，这些工作实施例是本发明的优选实施例。除非另有说明，所有温度均以摄氏度(℃)为单位。这些实施例是说明性的而非限制性的，并且应当理解，可能存在落入由所附权利要求限定的本发明的精神和范围内的其他实施例。
为便于参考，本文中可使用以下缩写。
实验部分
一般：除非另有说明，否则所有反应均使用无水技术在氮气气氛下进行。除非另有说明，否则试剂按从供应商处接收的原样使用。引用的产率是针对分离材料的，并没有针对水分含量进行校正。通过GC或反相HPLC在Shimadzu系统上使用CH3CN/H2O/MeOH作为流动相(含有0.05％TFA或0.1％NH4OAc)来监测反应。NMR谱在Bruker DRX-600或DRX-500仪器上记录，并参考残留的未氘化溶剂。以下缩写用于解释多重性：br＝宽峰，s＝单峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰。高分辨质谱(HRMS)在Thermo Orbi-trap Discovery仪器上记录。熔点使用Thomas Hoover熔点仪记录，并且是未校正的。使用Perkin-Elmer Optima4300DV ICP-AES仪器对残留钯催化剂进行定量分析。
总体方案：
总体合成方案关键中间体8的合成
腺苷氮杂核苷15的合成
鸟苷氮杂核苷22的合成
实施例1
化合物2的合成：
向N2冲洗的50L反应器中添加CH2Cl2(5.0L)。将呋喃木糖1(1.0kg，LR)和吡啶(0.83kg，2.0当量)装入反应器中。在-10℃在1小时内将苯甲酰氯(0.78kg，1.05当量)缓慢添加到反应器中并且淬灭反应直到TLC指示反应完成。向冷溶液中添加水(1kg)。各层分开，并且将有机物流用柠檬酸(3.0L，10％wt，水溶液)、NaHCO3(3.0L，10％wt，水溶液)和盐水(2.0L，15％wt，水溶液)洗涤。粗品将不经进一步纯化用于下一步。
实施例2
化合物3的合成：
将2(1.0kg，LR)在CH2Cl2(4.0L)中的溶液装入反应器中。向反应器中添加CH2Cl2(2.0L)和水(2.0L)。随后向混合物中添加NaHCO3(0.44kg，1.0当量)和TEMPO(0.041kg，0.05当量)并且将混合物冷却至-5℃。在1小时内向混合物中缓慢添加NBS(0.94kg，1.0当量)，保持温度在-5℃至5℃之间。2小时后，用Na2SO3(1.0L)洗涤溶液并且分离各层。将水溶液用CH2Cl2(2.0L)反萃取，并且将有机层合并。将有机相用盐水(2.0L)洗涤并且将溶剂交换为MTBE(6.0L)。在45℃缓慢添加庚烷(4.0L)得到悬浮液，将其缓慢冷却至15℃。将固体过滤并且用MTBE/庚烷(3.0L)洗涤。将固体在烘箱中干燥20小时，得到灰白色固体(0.60kg，61％)。
实施例3
化合物4的合成：
在N2冲洗的反应器中，在10℃以这样的顺序装入MeCN(3.0L)、3(1.0kg，LR)、TFE(1.0L)、BnNH2(0.44kg，1.2当量)。6小时后，HPLC证实溶液中不超过7％的化合物3。立即将溶液冷却至0℃。在单独的反应器中，添加MeCN(5.0L)和STAB(2.17kg，3.0当量)。在大约1小时内将亚胺溶液转移到23℃的悬浮液中。转移后，将反应再搅拌1小时。然后将该溶液用柠檬酸(5.0L，5wt％，水溶液)和盐水(3.0L)洗涤。将所得有机溶液用Na2CO3(3.0L，15wt％，水溶液)洗涤并分离，同时将pH控制在7-8之间。将有机物流用NaHCO3(3.0L，6％wt，水溶液)和20wt％盐水(3.0L)洗涤。将批料蒸馏成MeCN溶液(2.0L)并不经进一步纯化即用于下一步。
用于合成化合物4的替代条件：
向N2冲洗的反应器中装入THF(5.0L)和化合物3(1.0kg，LR)。装入Ti(OiPr)4(0.78kg，0.8当量)，并且将混合物冷却至0℃。装入BnNH2(0.44kg，1.2当量)并将混合物搅拌2小时，或直到HPLC证实不超过2％的化合物3留在混合物中。将THF(5.0L)和STAB(3.63kg，5.0当量)装入另一个N2冲洗的反应器中。在约1小时内向悬浮液中添加亚胺溶液。转移后，将反应再搅拌1小时。然后将该溶液用柠檬酸(5.0L，5wt％，水溶液)和盐水(3.0L)洗涤。将所得有机溶液用Na2CO3(3.0L，15wt％，水溶液)洗涤并分离，同时将pH控制在7-8之间。将有机物流用NaHCO3(3.0L，6％wt，水溶液)和20wt％盐水(3.0L)洗涤。将粗品的溶剂蒸馏成MeCN(2.0L)溶液并且将不经进一步纯化用于下一步。
实施例4
化合物5的合成：
向来自实施例3的溶液中，向反应器中添加MeCN(0.5L)、DIPEA(1.0kg，3.0当量)和BnBr(0.89kg，2.0当量)。将反应器温热至70℃持续7小时。将溶液冷却至20℃并在30分钟内装入Et3N(0.26kg，1.0当量)。12小时后，向溶液中添加甲苯(5.0L)并搅拌30分钟。将溶液用柠檬酸(2.0L/kg，20wt％，水溶液)和20wt％盐水(2.0L)洗涤。将所得有机溶液浓缩并交换为甲苯(2.0L)。该溶液不经进一步纯化即用于下一步。
实施例5
化合物6的合成：
向来自实施例4的粗溶液中，将THF(1.0L)和水(0.5L)装入反应器中。将TsOH·H2O(0.80kg，3.0当量)添加到反应器中，并将溶液在60℃老化8小时。然后将溶液冷却至10℃，并用5％NaHCO3(水溶液)中和直到pH 7-8，并分离有机层。将有机层用20wt％盐水(2.0L)洗涤，溶液不经进一步纯化即用于下一步。
实施例6
化合物8的合成：
向溶液中添加DMAP(0.014kg，0.05当量)、Et3N(0.070kg，3.0当量)和Bz2O(1.14kg，2.0当量)。将粗品在25℃老化6小时。向粗品中装入THF(5.0L)。将溶液用20wt％盐水(5.0L)洗涤并分离。将有机溶液用柠檬酸+NaCl混合溶液(柠檬酸5wt％，NaCl溶液15％wt，水溶液)洗涤并分离。将粗品再次用20wt％盐水洗涤并分离。将粗品的溶剂交换为2-MeTHF(1.5L)。在70℃，在30分钟内滴加庚烷(3.0L)。在2小时内将溶液冷却至25℃。过滤浆液并在烘箱中干燥固体。4个步骤后，分离出棕色固体8(2.58kg，48％)。
实施例7
化合物9的合成：
在反应器中，装入MeCN(8.0kg)和化合物8(1.0kg，LR)以得到溶液。向溶液中添加HABz(0.37kg，2当量)和BSA(0.54kg，1.5当量)。将悬浮液加热至65℃持续2小时，并添加TMSOTf(0.36kg，1.0当量)。将溶液加热至70℃持续6小时。将溶液冷却至25℃并用NaHCO3(5.0L，5％wt，水溶液)淬灭。向混合物中装入i-PrOAc(8.0L)并分离有机溶液。将水层用i-PrOAc(2.0L)萃取，并将合并的有机层用NaHCO3(5.0L，5％wt，水溶液)和盐水洗涤。将有机溶液浓缩至2.0L并将溶剂交换为MeCN。该溶液不经进一步纯化即用于下一步。
实施例8
中间体10的合成：
向来自实施例7的9的溶液中添加MeOH(4.0L)和水(0.5L)以得到均匀溶液。在25℃在10分钟内将KOH溶液(0.35kg固体，溶于0.15L水中，4.0当量)缓慢添加到溶液中。将溶液在60℃老化5小时。接下来，将溶液冷却至0℃，并缓慢引入水(15.0L)以保持内部温度。然后将悬浮液进一步搅拌1小时。将固体过滤并用水(1.0L)洗涤。将固体干燥至KF<5wt％，然后悬浮在MTBE(6.0L)中并温热至45℃持续1小时。将浆液冷却至23℃并过滤。将固体用MTBE(1.0L)洗涤并在烘箱中干燥，得到浅棕色固体(464g，对于两个步骤为64％)。
实施例9
化合物11和12的合成：
在反应器中，将化合物10(1.0kg，LR)溶解在PhCF3(5.0L)中。将咪唑(1.5kg，10.0当量)和TBSCl(1.7kg，5.0当量)装入反应器中。将悬浮液用NMP(1.0L)稀释。将溶液在100℃老化18小时并冷却至23℃。向粗品中添加MeOH(2.5L)并老化1小时。向反应混合物中，将水(1.0L)和庚烷(5.0L)装入反应器中。各层分开并分离。向水层中添加庚烷(2.5L)，各层分开并分离。向合并的有机层中添加硅藻土(1.0kg)和20wt％盐水(5.0L)。过滤两相混合物并分离各层。将有机层溶剂交换为PhCF3并浓缩至2.0L。该材料将不经进一步纯化用于下一步。
实施例10
化合物13的合成：
在反应器中，装入来自实施例9的含有11和12的粗物流。添加额外量的PhCF3(8.0L)，得到稀释溶液。向该溶液中添加2,6-二甲基吡啶(0.96kg，4.0当量)和BzCl(0.96kg，3.0当量)。将溶液在100℃搅拌4小时。将溶液冷却至35℃并装入MTBE(10.0L)。将有机溶液用5wt％NaHCO3水溶液(10.0L)和20wt％盐水洗涤。将所得有机混合物浓缩至2.0L并交换为庚烷。该溶液不经进一步纯化即用于下一步。
实施例11
化合物14的合成：
向来自实施例10的13的粗物流中，向反应器中添加庚烷(6.0L)和MTBE(4.0L)。在0℃向溶液中滴加在MeOH中的氨(0.0132L，6.0当量)。将溶液在0℃再搅拌7小时。然后用硅藻土(1.0kg)和5wt％柠檬酸水溶液(5.0L)悬浮反应混合物。过滤双相悬浮液并分离各层。将有机溶液用20wt％盐水(5.0L)洗涤并浓缩至2.0L并交换为庚烷。该溶液不经进一步纯化即用于下一步。
实施例12
化合物15的合成：
将来自实施例11的14(1.0kg，LR)溶液交换为DMF(8.0L)并转移至氢化反应器中。将PdCl2(0.023kg，0.1当量)和ZnBr2(0.072kg，0.25当量)添加到溶液中，以得到悬浮液。将悬浮液冷却至0℃，并将反应器用DMF(2.0L)冲洗并用H2回填三次。将反应老化6小时。将粗品用N2回填3次。将MTBE(10.0L)添加到溶液中，并将有机溶液用Na2S2O3(5.0L，10wt％，水溶液)和20wt％盐水(5.0L)洗涤。将有机物流浓缩并通过硅胶色谱用CH2Cl2/MeOH(100/0至5/95)纯化，得到呈浅黄色固体的15(0.71kg，78％)。
在放大试验部分包括替代的Bn脱保护条件。
实施例13
化合物16的合成：
将MeCN(8.0kg)和化合物8(1.0kg，LR)装入反应器中以得到溶液。向溶液中添加HGCl(0.26kg，2.0当量)和BSA(0.54kg，1.5当量)。将悬浮液加热至65℃持续2小时。然后，添加TMSOTf(0.36kg，1.0当量)并将溶液加热至70°℃持续7小时。将溶液冷却至25℃并用NaHCO3(5.0L，5％wt，水溶液)淬灭。向混合物中装入甲苯(8.0L)并分离各层。将水层用甲苯(2.0L)反萃取，并将合并的有机层用NaHCO3(5.0L，5％wt，水溶液)和20wt％盐水洗涤。将溶液浓缩至2.0L并溶剂交换为甲苯。该溶液不经进一步纯化即用于下一步。
实施例14
化合物17的合成：
向来自实施例13的16的溶液中，向反应器中装入将H2O(0.6V)。接下来，将TFA(5.0V)装入反应器中。将夹套加热至35℃-45℃，并将溶液在35℃搅拌至少20小时。将反应混合物冷却至15℃，并在25℃将H2O(10.0V)装入混合物中。分离有机相和水相。向水相中装入甲苯(4.0V)并将溶液在15℃搅拌至少30分钟。分离有机相，并将所有有机相合并并用水(10.0V)洗涤。然后用5％(w/w)K3PO4水溶液和15％(w/w)盐水(水溶液4V)洗涤有机相。将有机溶液在NMT 60℃真空浓缩至2.0V。将浓缩的溶液在25℃在2小时内缓慢添加到庚烷(10.0V)中以进行结晶。将固体过滤并用庚烷(2.0V)洗涤，得到浅棕色固体(890g，79％)。
实施例15
化合物18的合成：
向反应中装入MeCN(2.0L/kg，2vol)和MeOH(3.0L/kg，3vol)。搅拌溶液并将化合物17(0.891kg，LR)装入反应器中。接下来，将KOH溶液(0.65L/kg，0.65vol，2.6当量KOH)在25℃-35℃装入反应器中。将溶液加热至55℃-65℃持续2小时。将反应混合物冷却至15℃-25℃，并将1M HCl水溶液(1.0-2.0L/kg，1.0-2.0vol)滴加到反应器中以调节pH至7-8，同时保持内部温度在15℃-25℃之间。在pH调节过程中沉淀出固体，将该固体过滤并用MeCN/MeOH(v/v＝1/1，2.0L/kg，2.0vol)洗涤。将粗固体添加到反应器中，并将5％(w/w)Na2CO3(10.0L/kg，10.0vol)装入反应器中。将所得悬浮液加热至65℃-75℃保持3小时，并将反应混合物冷却至15℃-25℃，然后搅拌不少于1小时。将固体过滤，并将滤饼用水(2.0L/kg，2.0vol)洗涤且在烘箱中干燥，得到浅棕色固体。然后将固体用NMP(4.0L/kg，4.0vol)在60℃-70℃溶解不少于20分钟。将溶液冷却至40℃-50℃，并用AcOH将pH调节至7-8。将溶液冷却至15℃-25℃并搅拌不少于1小时。将MTBE(15L/kg，15.0vol)滴加到反应器中，并将悬浮液在15℃-25℃搅拌不少于2小时。过滤固体，并将滤饼用MTBE(2.0L/kg，2.0vol)洗涤。将固体在烘箱中真空干燥，得到浅棕色固体(0.86kg，87％)。
用于合成化合物18的替代条件：
向反应中装入MeCN(2.0L)和MeOH(3.0L)。搅拌溶液并将化合物17(1.0kg，LR)装入反应器中。接下来，在25℃-35℃将K2CO3(1.65kg，8当量)和水(8.0L)装入反应器中，并将混合物加热至70℃-80℃保持5小时。将均匀的反应混合物冷却至60℃并用1wt％的化合物18(0.01kg)进行种晶。1小时后，将混合物缓慢冷却至40℃-50℃并在该温度保持1小时。然后将混合物缓慢冷却至15℃-25℃保持3小时。在1小时内装入水(10.0L)，并在过滤前搅拌浆液2小时。将所得湿滤饼用水(5.0L×2)洗涤并在真空烘箱中干燥，得到黄色固体(0.59kg，85％)。
实施例16
化合物19的合成：
将NMP(3.0L/kg，3.0vol)装入反应器中并将溶液加热至55℃-65℃。开始搅拌并将化合物18(1.0kg，LR)和咪唑(1.46kg，10.0当量)装入反应器中。接下来，将CF3Ph(1.0L/kg，1.0vol)和TBSCl(1.63kg/kg，5.0当量)装入反应器中。将溶液在100℃搅拌不少于5小时。将反应混合物冷却至15℃-25℃。将MTBE(10.0L/kg，10.0vol)和MeOH(1.0L/kg，1.0vol)装入反应器中并搅拌15分钟。然后将10％(w/w)柠檬酸水溶液(8.0L/kg，8.0vol)装入反应器中不小于30分钟。各层分开并保留有机层。将有机层用水(5.0kg/L，5.0vol)洗涤并在真空下浓缩至2L/kg。向粗品中添加THF(5L/kg，vol)并将批料真空浓缩至2.0L/kg。该溶液不经进一步纯化即用于下一步。
实施例17
化合物21的合成：
在N2下，装入含有来自实施例16的化合物19和吡啶(3L/kg)的THF溶液(2L/kg)并将混合物冷却至0-10℃。在0-10℃将异丁酰氯(0.69kg，3.0当量)滴加到混合物中。将溶液温热至10℃-20℃并将THF(3.0L)装入反应中。将反应混合物冷却至0-10℃。在0-10℃将1L/kg NH3.H2O(10％)滴加到反应混合物中并搅拌反应直到观察不到双保护的中间体。将MTBE(5.0L，5V)和水(10.0L，10V)装入混合物中。各层分开并用MTBE(5.0L，5V)萃取水相。将有机相合并并用30wt％的柠檬酸水溶液洗涤2次(10.0L×2)。然后将有机相用水(10L，10V)洗涤并浓缩至2.0L。
将DCM(8.0L，8V)和水(1.0L，1V)添加到先前的混合物中。将溶液冷却至0-10℃，并将TsOH(4.0当量)装入混合物中并搅拌3小时。在0-10℃将DIPEA滴加到混合物中，以将混合物的pH调节至7-8。添加水(10L，10V)并分离有机相。将有机相浓缩至2V并将iPrOH(5.0L，5V)装入混合物中。将混合物浓缩至3V并过滤浆液。将固体在烘箱中真空干燥，得到浅棕色固体(0.71kg，76％)。
实施例18
化合物22的合成：
将化合物21(1.0kg，LR)溶于THF(10.0L)中并转移到氢化反应器中。将碳载Pd(0.10kg，0.1当量)和TsOH·H2O(0.28kg，1.0当量)添加到溶液中，在23℃得到悬浮液，将反应器用H2回填3次。将反应搅拌6小时。将反应混合物用N2回填3次。将混合物过滤(通过硅藻土1.0w/w)，将滤饼用THF(2*2.0L)洗涤。将TMT-Na和NaCl水溶液(水溶液，5.0L，1％TMTNa，10wt％NaCl，w/w)装入混合物中，并将双相混合物搅拌至少30分钟。各层分开并用THF(2×5.0L)萃取水相。将合并的有机层用0.22um过滤器过滤。在不超过40℃将溶液真空浓缩至5.0L。装入MeCN(5.0L)并将混合物在NMT 40℃浓缩至5.0L。装入额外的MeCN(5.0L)并将混合物在NMT 40℃浓缩至3.0L。将水(10.0L)滴加到溶液中，并将浆液搅拌至少0.5小时。过滤浆液并用MeCN:H2O＝1:3(2.0L)，接着用MTBE(2.0L)洗涤滤饼。将固体在烘箱中真空干燥，得到灰白色固体(0.61kg，87％)。
实施例19-26显示了实施例1-18中所示步骤的大规模合成。
实施例19
化合物3的合成
在氮气保护下向50L反应器中装入DCM(133L，6L/kg)并将温度调节至0℃。将1,2-O-异亚丙基-α-D-呋喃木糖(化合物1)(2.66kg，LR)装入反应器中并搅拌溶解。将溶液进一步冷却至-10℃。向溶液中滴加BzCl(1.56kg，1.05当量)。将反应老化30分钟并用水(6.0L，3.0当量)淬灭。将有机层用20％(w/w)柠檬酸水溶液(8L)洗涤两次，接着用4％(w/w)NaHCO3(8L)和8％NaCl(w/w)溶液(5L)洗涤。向分离的有机层中添加DCM(8L)和水(5L)。将混合物冷却至0-10℃。将固体NaHCO3(1.35kg，1.0当量)装入反应器中，并将TEMPO(0.202kg，0.05当量)装入反应器中。接下来，将NBS(2.54kg，0.9当量)分批添加，同时将温度保持在0-10℃。将混合物搅拌至少2小时。将反应用8％(w/w)Na2SO3(5.0kg，1L/kg)淬灭并将水相用DCM(12.2kg，2L/kg)反萃取一次。将合并的有机层用8％(w/w)NaCl水溶液(10kg，2L/kg)洗涤并溶剂交换为MTBE。在45℃向MTBE溶液中滴加庚烷(12.96kg，4L/kg)。将溶液冷却至20℃并保持3小时。将浆液过滤并干燥，得到灰白色固体(2.96kg，61％)。
化合物3的数据：1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ7.93(d,J＝7.7Hz,2H),7.55(t,J＝7.2Hz,1H),7.42(t,J＝7.7Hz,2H),6.12(d,J＝4.4Hz,1H),4.70-4.65(m,2H),4.48-4.39(m,2H),1.49(s,3H),1.41(s,3H)；
13C NMR(101MHz,CHLOROFORM-d)δ207.6,165.7,133.3,129.4,129.2,128.4,114.3,103.0,76.1,63.3,27.3,26.9；
LCMS[M+H]对于C15H17O6的计算值＝293.1；实测值＝293.0。
实施例20
化合物8的合成
在氮气保护下向20L反应器中装入MeCN(6.97kg，5L/kg)、TFE(2.40kg，1L/kg)和化合物3(2.40kg，1当量)。将温度调节到8℃，并在60分钟内将BnNH2(0.790kg，1.2当量)添加到反应器中。向单独的50L反应器中装入MeCN(7.12kg，5L/kg)和NaBH(OAc)3(3.92kg，3.0当量)并在7℃搅拌以形成用于反向淬灭的白色悬浮液。16小时后，将化合物3的亚胺溶液在60分钟内转移到悬浮液中。1小时后，将溶液用8％(w/w)柠檬酸水溶液和5％(w/w)NaCl水溶液(10.16kg，5L/kg)淬灭。将有机层分离并用15％(w/w)Na2CO3溶液(10kg，5L/kg)、6％(w/w)NaHCO3溶液(4.5kg，3L/kg)和20％(w/w)NaCl溶液(5.4kg，3L/kg)洗涤。将有机层分离并在MeCN中共沸干燥。在50L反应器中，装入化合物4(2.57kg，1当量)在MeCN(5.1L，2.0L/kg)中的溶液并添加DIEA(2.62kg，3.0当量)，接着添加BnBr(2.29kg，2.0当量)。将溶液加热至70℃并老化7小时。将溶液冷却至25℃，添加Et3N(0.67kg，1.0当量)，接着用甲苯(11.1kg，5L/kg)稀释。将溶液用5％(w/w)柠檬酸溶液(5L)和15％(w/w)NaCl溶液(5L)洗涤。将有机溶液转移回到50L反应器中并添加THF(2.6kg，1L/kg)，接着添加水(1.5kg，0.5L/kg)。将TsOHH2O(2.38kg，2.0当量)添加到溶液中，并将溶液加热至60℃持续1小时。冷却溶液并添加甲苯(12.8kg，5L/kg)以产生相分离。将有机层用7％(w/w)NaHCO3溶液(19.5kg，6L/kg)洗涤以达到大于7的pH。将有机相分离，并用20％(w/w)NaCl水溶液(7.5kg，2L/kg)洗涤并分离。向有机溶液中添加DMAP(0.036kg，0.05当量)、Et3N(1.79kg，3.0当量)和Bz2O(2.98kg，2.2当量)。将溶液在45℃搅拌6小时并冷却至室温。向溶液中添加THF(11.0kg，5L/kg)。然后将有机物用20％(w/w)NaCl溶液(7.5kg，2L/kg)洗涤。将溶液溶剂交换为2MeTHF并添加庚烷以开始结晶。将浆液在20℃搅拌3小时，过滤并干燥，得到浅棕色固体(2.55kg，67％)。
化合物8的数据：
1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.20(d,J＝7.6Hz,2H),7.81(d,J＝7.7Hz,2H),7.75-7.53(m,6H),7.48-7.36(m,7H),7.28(t,J＝7.5Hz,4H),7.23-7.10(m,4H),6.50(s,1H),5.92(d,J＝4.2Hz,1H),4.98(brd,J＝9.8Hz,1H),4.76(dd,J＝12.3,2.0Hz,1H),4.49(dd,J＝12.3,3.7Hz,1H),4.22(d,J＝13.6Hz,2H),4.05(dd,J＝9.8,4.1Hz,1H),3.77(d,J＝13.6Hz,2H)；
13C NMR(101MHz,CHLOROFORM-d)δ166.3,165.7,164.5,138.9,133.9,133.4,132.8,130.0,129.9,129.5,129.3,129.3,128.6(t,J＝18.3Hz,1C),128.1,128.5(t,J＝115.5Hz,1C),98.9,74.8,63.4,58.2,55.9；
LCMS[M+H]对于C40H36NO7的计算值为642.7；实测值＝624.8。
实施例21
化合物10的合成
将MeCN(0.8L，8.0L/kg)装入惰性反应器中并开始搅拌。将化合物8(0.10kg，LR)、HABz(39.1g，1.05当量)和BSA(38.1g，1.2当量)装入反应器中。将反应混合物加热至70℃-75℃并搅拌直到获得澄清溶液。在65℃-75℃将TMSOTf(34.6g，1.0当量)滴加到反应器中。将反应混合物在65℃-75℃搅拌4小时，然后冷却至15℃-25℃。将5％(w/w)NaHCO3水溶液(0.2L，2L/kg)和i-PrOAc(1L，10L/kg)装入混合物中，将该混合物在10℃-30℃搅拌至少30分钟。分离有机相和水相。将i-PrOAc(1L，10L/kg)装入水相中并搅拌至少30分钟以进行反萃取。合并有机相，并将5％(w/w)NaHCO3水溶液(0.2L，2L/kg)装入有机相中并在10℃-30℃搅拌。将有机相用15％(w/w)盐水(0.5L/kg)洗涤。将分离的有机相在真空下浓缩并溶剂交换为MeCN。向粗品中，将MeOH(3L/kg)和逐滴的5％(w/w)KOH水溶液(0.1L，1L/kg)装入混合物中。将混合物在55℃-65℃搅拌至少5小时。将反应混合物冷却至0-5℃，然后在0-25℃在至少1小时内将水(1.5L，15L/kg)滴加到混合物中。过滤浆液并用水(0.2L，2L/kg)洗涤滤饼。收集呈灰白色固体的产物饼(47.9g，69％)。
化合物10的数据：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.20(s,1H),8.06(s,1H),7.40(d,J＝7.5Hz,3H),7.35-7.28(m,5H),7.26-7.18(m,2H),6.02(d,J＝4.8Hz,1H),5.88(br s,1H),5.41-5.30(m,1H),4.73(br t,J＝5.6Hz,1H),4.43(br s,1H),4.03(d,J＝14.1Hz,2H),3.89(br d,J＝14.1Hz,2H),3.74(br d,J＝11.6Hz,1H),3.55-3.40(m,2H)；
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ156.6,152.7,149.2,140.6,140.0,128.8,128.6,127.2,119.7,91.0,82.2,75.4,63.0,59.5,55.3；
LCMS[M+H]对于C24H27N6O3的计算值为447.5；实测值＝447.2。
实施例22
化合物15和16的合成
向惰性反应器中装入CF3Ph(750mL，5L/kg)和化合物10(150g)、NMP(150mL，1L/kg)和咪唑(229g，10当量)。将TBSCl(203g，4当量)分批装入溶液中，并将溶液加热至100℃持续16小时。将反应混合物冷却至2℃0-40℃。将MeOH(375mL，2.5L/kg)装入反应器中并在20℃-40℃老化30分钟。将H2O(375mL，2.5L/kg)和正庚烷(750mL，5L/kg)添加到混合物中并老化30分钟。分离各层，并将分离的水相用正庚烷(375mL，2.5L/kg)反萃取，并合并有机相。向有机相中添加硅藻土(kg/kg)和15％(w/w)盐水(750mL，5L/kg)。过滤混合物并分离有机相。将有机相溶剂交换为PhCF3并浓缩至2L/kg。
将CF3Ph(1.2L，8L/kg)装入溶液中。添加2,6-二甲基吡啶(144g，4当量)并将溶液加热至85℃。将BzCl(118g，2.5当量)滴加到溶液中并将反应保持3小时。将反应混合物冷却至25℃，将5％(w/w)NaHCO3水溶液(1.5L，10L/kg)和MTBE(1.5L，10L/kg)装入反应混合物中并搅拌。将有机相分离，并用15％(w/w)盐水(1.5L，10L/kg)洗涤。将分离的有机相浓缩并溶剂交换为5L/kg的庚烷。
向庚烷溶液中装入MTBE(1.2L，8L/kg)和正庚烷(900mL，6L/kg)。在0℃装入7MNH3/MeOH(112g，3当量)并将反应保持7小时。在0℃将10％(w/w)柠檬酸水溶液(1.5L，10L/kg)和硅藻土(1％kg/kg)装入混合物中。过滤混合物并分离有机相。将有机相用15％盐水(1.5L，10L/kg)洗涤。将分离的有机相溶剂交换为5L/kg的TFE。
将TFE(750mL，5L/kg)、Pd/C(Escat 1951，15％w/w，0.13kg/kg)和咪唑HCl(35.1g，1当量)装入浓缩物中。将反应器用2.5巴的H2加压，并在45℃老化16小时。将反应混合物冷却至25℃并添加硅藻土(1kg/kg)。过滤悬浮液并用TFE(300mL，2L/kg)洗涤滤饼。将咪唑HCl(17.5g，0.5当量)装入溶液中并将其浓缩至2L/kg。在0-10℃向浓缩物中装入IPA(1.5L，10L/kg)并将反应混合物在0℃搅拌至少1小时。1小时后过滤浆液，并用IPA(1.5L，10L/kg)和IPA/H2O(900mL，5L/kg，V:V＝1:1)洗涤滤饼。将滤饼转移到反应器中并添加MTBE(1.5L，10L/kg)。在25℃装入5％(w/w)NaHCO3水溶液(3.0L，20L/kg)并老化2小时。向混合物中添加硅藻土(1kg/kg)并在30分钟后过滤。将有机相在25℃用水性15％(w/w)盐水(1.5L，10L/kg)洗涤并分离。将有机相用活性炭(10％kg/kg)在25℃处理18小时。将混合物过滤通过硅藻土(1kg/kg)，并浓缩至5L/kg。在25℃在30分钟内向溶液中添加正庚烷(3.0L，20L/kg)。将浆液老化2小时，将滤饼过滤并用MTBE:正庚烷(300mL，2L/kg，V:V＝1:4)洗涤，得到灰白色固体(147g，69％)，之后进行干燥。
化合物16的数据：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.26(brs,1H),8.90-8.70(m,3H),8.62(s,1H),8.05(d,J＝7.5Hz,2H),7.67–7.63(m,1H),7.57–7.53(m,2H),6.31(d,J＝5.1Hz,1H),5.03(t,J＝5.7Hz,1H),4.41(br d,J＝2.2Hz,1H),4.10-4.00(m,1H),3.99-3.88(m,2H),0.87(s,9H),0.76(s,9H),0.06(s,6H),0.03(s,3H),-0.23(s,3H)；
13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.6,152.1,151.9,150.7,142.1,133.2,132.5,128.5,128.4,125.4,87.6,81.5,74.2,63.0,51.1,25.8,25.6,18.0,17.6,-5.0,-5.4,-5.4；
LCMS[M+H]对于C29H47N6O4Si2(游离形式)的计算值＝599.9；实测值＝600.1。
化合物15的数据：
1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ9.12(s,1H),8.80(s,1H),8.56(s,1H),8.02(d,J＝7.5Hz,2H),7.62-7.49(m,3H),6.11(s,1H),4.40(d,J＝4.3Hz,1H),4.11(dd,J＝11.5,2.1Hz,1H),3.98-3.89(m,2H),3.61(dd,J＝8.3,4.6Hz,1H),1.60(brs,2H),0.95(s,18H),0.79(s,1H),0.22(s,3H),0.15(s,3H),0.14(s,3H),0.13(s,3H)；
13C NMR(101MHz,CHLOROFORM-d)δ164.6,152.6,151.0,149.3,141.6,133.9,132.7,128.8,127.8,123.2,90.0,85.1,77.9,61.9,52.2,26.1,25.8,18.6,18.1,-4.4,-4.9,-5.3,-5.4；
LCMS[M+H]对于C29H47N6O4Si2(游离形式)的计算值＝599.9；实测值＝599.9。
实施例23
化合物17的合成
Vorbruggen反应
将MeCN(8L)和化合物8(1.0kg，LR)装入反应器中并搅拌制成溶液。将2-氨基-6-氯嘌呤(0.26kg，1.0当量)和BSA(0.38kg，1.2当量)装入反应混合物中。在75℃-85℃加热悬浮液。然后，在70℃-75℃将TMSOTf(0.18kg，0.5当量)装入溶液中，并将反应老化4小时直到完成；
将反应冷却至25℃并用NaHCO3(5.0L，5％wt，水溶液)淬灭。向混合物中添加甲苯(2.0L)以萃取产物并分离有机层。将有机层用NaHCO3(5.0L，5％wt)接着用盐水(5L，15％)洗涤。将有机层浓缩并溶剂交换为甲苯至1.5-2.0L/kg的最终体积。该溶液不经分离即用于下一步。
水解
向上述溶液中，向反应器中装入H2O(0.6V)。接下来，将TFA(5.0V)装入反应器中。将夹套加热至35℃-45℃，并且将溶液在40℃搅拌至少20小时。将反应混合物冷却至10℃，并在25℃将H2O(10.0V)装入混合物中。分离有机相和水相。向水相中装入甲苯(4.0V)并将溶液在15℃搅拌至少30分钟。分离有机相，并将所有有机相合并并用水(10.0V)洗涤。然后用15％(w/w)K3PO4(3L)洗涤有机相。将有机相精炼过滤并用15％(w/w)盐水(水溶液4V)洗涤。将有机相在NMT 60℃真空浓缩至2.5-3.0V。将浓缩的溶液然后在35℃-45℃在2-3小时内添加到庚烷(10.0V)中以进行结晶。将固体过滤并用庚烷(2.0V)洗涤；将湿滤饼在35-45℃干燥，得到浅棕色固体。(825g，79％)。
化合物17的数据
1H NMR(600MHz,DMSO-d6,25℃):δ10.84(v br s,1H),8.11(br d,J＝7.8Hz,2H),7.77(br d,J＝7.8Hz,2H),7.72(br t,J＝7.4Hz,1H),7.65(s,1H),7.65(t,J＝7.4Hz,1H),7.59(t,J＝7.7Hz,2H),7.47(t,J＝7.7Hz,2H),7.29(br d,J＝7.6Hz,4H),7.19(br t,J＝7.6Hz,4H),7.13(br t,J＝7.2Hz,2H),6.16(重叠的,2H),5.00(m,1H),4.73(dd,J＝12.2,2.7Hz,1H),4.51(dd,J＝12.2,4.8Hz,1H),4.16(dd,J＝8.3,5.9Hz,1H),4.05(d,J＝14.2Hz,2H),3.86(d,J＝14.2Hz,2H)。
13C NMR(151MHz,DMSO-d6,25℃):δ165.5,165.0,156.7,153.7,150.6,139.1,135.7,133.9,133.4,129.6,129.2,129.2,128.9,128.9,128.6,128.2,128.2,127.0,117.0,87.2,76.3,75.2,63.8,59.2,54.8。
HRMS(ESI)对于[C38H34N6O6+H]+的计算值为671.2613，实测值为671.2597
实施例24
化合物18的合成
向反应中装入MeCN(2.0L/kg，2vol)和MeOH(3.0L/kg，3vol)。搅拌反应混合物并将化合物17(1.0kg，LR)装入反应器中。接下来，在25℃-35℃将KOH溶液(0.65L/kg，4.0当量KOH)装入反应器中。将溶液加热至55℃-65℃持续2小时。
将反应混合物冷却至15℃-25℃，并向反应器中添加1N HCl水溶液(1.0-2.0L/kg，1.0-2.0vol)，以在20℃将pH调节至7-8。将浆液老化30分钟，过滤固体；将滤饼用水(2L)和MeCN/MeOH(v/v＝1/1)洗涤，直到苯甲酸AP小于20％。
将滤饼转移至反应器中并将5％(w/w)Na2CO3(10.0vol)装入反应器中。将浆液在65℃-75℃搅拌3小时，将混合物冷却至15℃-25℃，然后搅拌不少于1小时。将固体过滤，将滤饼用水洗涤直到苯甲酸AP小于4.5％；将滤饼在真空烘箱中在45℃-55℃干燥直到KF小于2％。
将干燥滤饼和NMP(4.0vol)装入另一个反应器中，并将混合物在60℃-70℃加热不少于20分钟。将溶液冷却至40℃-50℃，并将pH用AcOH调至7。将溶液冷却至15℃-25℃并搅拌不少于1小时。将MTBE(15L/kg)缓慢添加到反应器中，并将浆液在15℃-25℃搅拌不少于2小时。过滤固体，并将滤饼用MTBE(2.0L/kg，2.0vol)洗涤。将滤饼在真空烘箱中在45℃-55℃干燥，直到KF<0.5％，得到浅棕色固体(0.6kg，87％)。
化合物18的数据
1H NMR(600MHz,DMSO-d6,25℃):δ7.70(s,1H),7.40(br d,J＝7.6Hz,4H),7.31(brt,J＝7.5Hz,4H),7.22(br t,J＝7.4Hz,2H),5.82(d,J＝5.3Hz,1H),4.61(m,1H),4.36(m,1H),4.01(d,J＝14.1Hz,2H),3.85(d,J＝14.1Hz,2H),3.66(dd,J＝11.5,1.7Hz,1H),3.43(dd,J＝11.6,3.7Hz,1H),3.40(m,1H)。
13C NMR(151MHz,DMSO-d6,25℃):δ158.2,154.9,151.0,140.1,134.8,128.3,128.1,126.8,116.7,89.1,81.3,75.0,62.6,59.2,54.7。
HRMS(ESI)对于[C24H26N6O4+H]+的计算值为463.2088，实测值为463.2070(4.0ppm误差)。
实施例25
化合物21的合成
将NMP(3.0L/kg)、化合物18(1.0kg，LR)和咪唑(1.47kg，10.0当量)装入反应器中并搅拌30分钟。将反应混合物加热至55℃-65℃，并将TBSCl(1.3kg/kg，4.0当量)在CF3Ph(1.0L/kg)中的溶液装入反应器中。将溶液在95℃-105℃搅拌不少于8小时。将反应混合物冷却至15℃-25℃。将MTBE(10.0L/kg，10.0vol)和MeOH(1.0L/kg，1.0vol)装入反应器中并搅拌30分钟。然后将10％(w/w)柠檬酸(8.0L/kg)装入反应器中持续不少于30分钟。分离各相并保留有机相。将有机相用水(5.0kg/L，5.0vol)洗涤，分离水相和有机相；保留有机相。将批料在60℃真空浓缩至3L/kg。向粗物流中添加THF(5L/kg，vol)并将批料在真空下浓缩至2.0L/kg。此物流将在下一步中直接使用。
将上述2L物流、THF(8L/kg)和水(1L/kg)装入反应器中。装入TBAF(1.0当量，基于实际的三TBS中间体量)并将反应在20℃老化2小时。将庚烷(10L/kg)和15％NH4Cl(5L/kg)装入反应中，搅拌混合物并分离水层。将有机层用15％盐水(5L/kg)洗涤；浓缩并在55℃在真空下溶剂交换为THF。最终的THF溶液为2vol，并直接用于下一步。
在N2下，将THF溶液(2V)和吡啶(3V)装入反应器中，将混合物冷却至0-10℃。在0-10℃将2.0当量异丁酰氯装入混合物中。将溶液温热至10℃-20℃并老化1h；反应完成后，将3V THF装入反应体系中。将反应体系冷却至0-10℃。在0-10℃将2-3％NH3.H2O(1.0kg/kg))缓慢装入反应混合物中，并继续反应直到观察不到二异丁基保护的中间体。将MTBE(8.0L)和30％柠檬酸(8.0L)装入混合物中。分离水层，并将有机层用30％柠檬酸(8L/kg)洗涤。分离水层，并将有机层用5％NaHCO3(5L/kg)和20％NaCl(5L/kg)洗涤。分离有机层，浓缩至2vol，直接用于下一步。
将超过2vol的有机物流装入反应器中。将DCM(8.0L)和水(1.0L)添加到反应中。将溶液保持在2℃-8℃，并将TsOH(4.0当量)装入混合物中，将其搅拌8小时。在0-10℃将DIPEA缓慢添加到混合物中，以将pH调节至7-8。将反应温度升高至20℃。添加水(10L)并分离有机相。将有机相用水(10L)洗涤。将有机层浓缩并在45℃溶剂交换为iPrOH至6L的最终体积。将浆液在50℃-60℃老化2-3小时并冷却至2℃-8℃并老化1小时，之后过滤。(1.1kg，76％)。
化合物21的数据
1H NMR(600MHz,DMSO-d6,25℃):δ12.09(br s,1H),11.56(s,1H),8.25(s,1H),7.42(br d,J＝7.7Hz,4H),7.33(br t,J＝7.6Hz,4H),7.25(br t,J＝7.4Hz,2H),6.02(d,J＝6.8Hz,1H),5.14(t,J＝5.0Hz,1H),4.85(br t,J＝7.4Hz,1H),4.53(m,1H),4.33(d,J＝4.2Hz,1H),3.96(d,J＝13.6Hz,2H),3.75(d,J＝13.6Hz,2H),3.66(m,1H),3.50(dt,J＝11.6,4.3Hz,1H),3.44(dd,J＝7.9,3.1Hz,1H),2.74(sept,J＝6.9Hz,1H),1.09(br d,J＝6.9Hz,6H),0.79(s,9H),0.01(s,3H),-0.41(s,3H)。
13C NMR(151MHz,DMSO-d6,25℃):δ180.1,154.7,149.0,148.2,139.4,137.4,128.5,128.2,127.0,119.8,88.8,81.8,77.2,63.0,60.1,54.1,34.7,25.5,18.8,18.7,17.5,-4.8,-5.9。
HRMS(ESI)对于[C34H46N6O5Si+H]+的计算值为647.3372，实测值为647.3347(3.8ppm误差)。
实施例26
化合物22的合成
将反应器用氮气惰性化，并将THF(10L)、化合物21(1.0kg，LR)和10％Pd/C(0.1kg)装入反应器中。将反应冷却至0℃并装入在水(1L)中的TsOH.H2O(0.28kg，1.0当量)。将反应器用H2回填五次。将H2压力调节至1.7至2.0MPa，将反应在5℃-10℃老化6小时，直到化合物21<0.8AP；将温度调至20℃并老化直到起始材料和单-Bn中间体<0.5AP；
将反应器用N2吹扫八次。将混合物过滤(通过硅藻土1.0w/w)，将滤饼用THF(2L)洗涤。将DIPEA(1.1当量)、THF(15L)和TMT-Na溶液(5L 10％NaCl中1％TMTNa，w/w)装入反应溶液中。混合溶液并分离各层。将水层用THF反萃取；将合并的有机层用在20％盐水中的2％L-半胱氨酸(5L)洗涤两次；并且将有机层用25％盐水(5L)洗涤。
将有机层浓缩并溶剂交换为MeCN至5L。将水(10V)装入溶液中并将浆液搅拌至少0.5小时。过滤固体并将滤饼用MeCN:H2O＝1:3(3L)和甲苯(4L)洗涤。将滤饼在60-70℃真空干燥，得到灰白色固体(0.72kg，86％)
化合物22的数据
1H NMR(600MHz,DMSO-d6,25℃):δ8.27(s,1H),5.87(d,J＝4.6Hz,1H),5.00(br m,1H),4.48(t,J＝5.0Hz,1H),3.77(m,1H),3.68(br d,J＝11.8Hz,1H),3.57(br d,J＝11.8Hz,1H),3.50(t,J＝5.2Hz,1H),2.79(sept,J＝6.9Hz,1H),1.12(d,J＝6.9Hz,6H),0.80(s,9H),-0.03(s,3H),-0.13(s,3H)。
13C NMR(151MHz,DMSO-d6,25℃):δ180.1,154.8,148.7,148.1,137.5,120.0,87.1,86.1,76.9,61.4,53.4,34.7,25.5,18.9,18.8,17.7,-5.2,-5.3。
HRMS(ESI)对于[C20H34N6O5Si+H]+的计算值为467.2433，实测值为467.2419(3.0ppm误差)。
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