一种不同部位香薷挥发油的制备及化学成分的检测
阅读说明：本技术 一种不同部位香薷挥发油的制备及化学成分的检测 (Preparation of elsholtzia volatile oil at different parts and detection of chemical components ) 是由 周鸿立 朱孟楠 李雪 于 2021-07-27 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种不同部位香薷挥发油化学成分的检测,包括以下步骤：采用水蒸气蒸馏法提取香薷挥发油,通过GC-MS对香薷挥发油进行定性定量分析,得到其中香薷花成分相对含量较高的有BETA-去氢香薷酮占53.34%、茎中含量较高的为1,1’-[亚乙基双(氧基)]二丁烷69.36%、叶中含量较高的为BETA-去氢香薷酮等物质约占8.11%,且在香薷的花、茎中均有4-蒈烯成分,花和叶中均含有BETA-去氢香薷酮物质。对香薷挥发油进行抑菌试验,得到香薷花挥发油对金黄色葡萄球菌有一定的抑制生长作用,香薷茎挥发油对枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和白色念珠菌均有一定的抑制生长作用,香薷叶挥发油对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和白色念珠菌均有一定的抑制生长作用,对香薷地上部分挥发油进行抗氧化评价,其清除DPPH的IC-(50)为9.72mg/mL。(The invention discloses a detection method of chemical components of elsholtzia volatile oil at different parts, which comprises the following steps: extracting herba Moslae volatile oil by steam distillation, and performing qualitative and quantitative analysis on the volatile oil by GC-MS to obtain herba Moslae with high flower content, BETA-dehydroelsholtzia ketone 53.34%, and stem content of 1,1' - [ ethylene bis (oxy) ]]The content of dibutane 69.36% and BETA-dehydroelsholtzia ketone in the leaves is about 8.11%, and 4-carene component is contained in flower and stem of herba Moslae, and BETA-dehydroelsholtzia ketone is contained in flower and leaf. Performing an antibacterial test on the elsholtzia volatile oil to obtain elsholtzia flower volatile oil which has a certain growth inhibition effect on staphylococcus aureus, elsholtzia stem volatile oil which has a certain growth inhibition effect on bacillus subtilis, bacillus pumilus and candida albicans, elsholtzia leaf volatile oil which has a certain growth inhibition effect on staphylococcus aureus, bacillus subtilis, bacillus pumilus and candida albicans, performing antioxidant evaluation on the volatile oil of overground parts of the elsholtzia, and removing the IC of DPPH 50 It was 9.72 mg/mL.)
技术领域
本发明属于植物资源综合利用技术领域，具体涉及一种不同部位香薷花、茎、叶挥发油化学成分与抑菌、抗氧化活性的比较。
背景技术
香薷是唇形科植物石香薷或江香薷的地上干燥部分，香薷的化学成分很多，以挥发油类、黄酮类、香豆素类等功能性成分为主，其中挥发油类成分已超百种，主要为单萜类、芳樟醇、月桂烯、酮类、杂环类等，也有其他特殊成分。香薷挥发油是由香薷中提出来的具有香气的挥发性油状混合物，为淡黄至褐黄色油状物，清香辛甜，可溶于石油醚、无水乙醇和乙酸乙酯等有机溶剂，难溶于水。挥发油系天然植物抗菌活性成分，具有持久的抗菌活性、药物残留少、与抗生素无配伍禁忌等优点，香薷挥发油具有良好的抗病毒、抑菌、抗氧化、抗炎等作用，用香薷的挥发油进行口腔抑菌试验，发现具有明显抑制菌斑的作用。用香薷挥发油做其它菌株的抑制试验，发现对金色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、绿脓杆菌也有较强抑制作用。衰老是生命过程中的生物化学现象，主要是体内产生的自由基氧化细胞所致，香薷挥发油具有较强的抗氧化性，对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基均有显著的清除效果，是一种天然的抗氧化剂。
吴婷婷、朱冬青等人在GC-MS结合保留指数分析紫花香薷不同部位挥发油的化学成分文章中提到，不同器官(花、茎、叶部)挥发油的主要组分亦有差异，茎和叶的挥发油化学成分组成基本一致，但各成分含量上差别很大，花中挥发油鉴定出 39 种组分，其均由萜类物质所组成，香薷茎中挥发油成分以脂肪族化合物为主，据研究从香薷花、茎、叶部的挥发油中共鉴定了 82 种化合物。茎和叶的油中共同成分有 12 种，叶和花的油中共同成分有 17 种，茎和花的油中相同成分有 9 种，但各成分含量上差别很大，花部与茎和叶中挥发油的组成存在差异，尤以叶的差别最大。茎中芳香成分含量较少，考察不同器官的挥发油成分变化，说明即使是同一种物种的不同器官，可能由于代谢或功能上的差异，挥发油成分亦略有差异。目前对中药香薷花、茎、叶中挥发油有待于更深一步的研究探索。申请专利将对北香薷（Mosla Chinensis Maxim）的花、茎、叶进行挥发油提取，开展化学成分解析及抑菌和抗氧化作用的研究。随着挥发油化学成分和有效部位更详细的研究，将对开发北香薷具有一定的现实意义。
发明内容
本发明在于提供一种不同部位北香薷挥发油化学成分与抑菌、抗氧化活性的比较，以解决上述背景中出现的问题。
为实现上述目的，本实验提供如下技术方案。
具体实施方式
下面的实施例是对本发明的进一步描述。
表格说明
表1为香薷花挥发油GC-MS分析结果；
表2为香薷茎挥发油GC-MS分析结果；
表3为香薷叶挥发油GC-MS分析结果；
表4为香薷花、茎、叶挥发油的抗微生物效果结果。
实施例一香薷挥发油的提取
利用水蒸气蒸馏法提取香薷挥发油，分别精密称取20g干燥的香薷花、茎、叶粉碎60-80目，置于1000ml烧瓶内，加入没过粉末的蒸馏水，连接水蒸气蒸馏装置后开始提取2-4h，直至不再有油产生，收集馏出液，向馏出液中加入体积比1：2-3二氯甲烷萃取，静置分层，取下层液体，35-40℃旋转蒸发至有机溶剂全部回收，香薷挥发油挂壁时，收集挥发油，置于冰箱内备用。
实施例二香薷挥发油GC-MS分析
取香薷花、茎、叶三个部位挥发油各1 μl(乙酸乙酯溶解)，采用 GC-MS 仪进行分析。色谱条件:色谱柱:HP-5MS 5% Phenyl Methyl Siloxane (30 m×0.25 mm ，0.25 μm);载气:高纯 He，载气流速:1．0ml·min－1，分流比 20 ∶ 1；升温程序:柱起始温度45℃，保持 2 min，以 5℃·min－1升温至 300℃，保持2 min;进样口温度:250℃，进样量:1 μl。质谱条件：离子源 EI 源，电子能量 70 eV，离子源温度:280 ℃，四级杆温度：150 ℃，溶剂延迟：5.0 min，质量范围50～550 amu，扫描方式：全扫描。其中花成分相对含量较高的有BETA-去氢香薷酮占53.34%、茎中含量较高的为1,1'-[亚乙基双(氧基)]二丁烷69.36 %、叶中含量较高的为BETA-去氢香薷酮等物质约占8.11%，且在香薷的花、茎中均有4-蒈烯成分，花和叶中均含有BETA-去氢香薷酮物质。
表1香薷花挥发油GC-MS分析结果
表2香薷茎挥发油GC-MS分析结果
表3香薷叶挥发油GC-MS分析结果
实施例三香薷挥发油的抗微生物作用
配制相应菌种（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、酵母菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌）的培养基和相应培养基的琼脂培养溶液，包扎灭菌，拿出大板，洗干净用酒精擦拭，放在操作台用紫外灯照射30min，先倒入琼脂溶液，冷却后再倒入培养基与菌悬液的混合液，将样品纸片放上去，培养24h，观察抑菌效果，实验所用菌原液，配置相应斜面培养基，在无菌操作台用接种签蘸原菌，旋转接种签把原菌均匀涂抹在斜面培养基表面，包扎培养(酵母，白念29℃，其他菌种37℃)24小时。取出斜面培养基，在无菌操作台，用移液枪共吸取10ml无菌水冲洗斜面，即制成菌悬液，倒入无菌锥形瓶即可，得到香薷花挥发油对金黄色葡萄球菌有一定的抑制生长作用，香薷茎挥发油对枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和白色念珠菌均有一定的抑制生长作用，香薷叶挥发油对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和白色念珠菌均有一定的抑制生长作用。
表4香薷花、茎、叶挥发油的抗微生物效果结果
实施例四香薷地上部分挥发油的抗氧化作用
精密称取0.0039g DPPH于100mL容量瓶中，加入无水乙醇定容至100mL，将香薷挥发油用无水乙醇溶解稀释至1、1.5、2.5、3.5、4.5mg/mL5个浓度，取样品2mL+等体积的0.1mmol/LDPPH溶液，混匀避光反应30min，在517nm出测吸光度为A1，取2mL样液+2mL蒸馏水在在517nm出测吸光度为A2，取2mLDPPH溶液+2mL乙醇在517nm出测吸光度为A0，再取2mL无水乙醇+2mL蒸馏水进行空白调零，得出DPPH自由基清除率IC50为9.72mg/mL，DPPH自由基清除率（%）=。
本研究水蒸气蒸馏法提取北香薷的不同部位（花、茎、叶）挥发油，通过GC-MS对香薷挥发油进行定性定量分析，得到其中花成分相对含量较高的有BETA-去氢香薷酮占53.34%、茎中含量较高的为1,1'-[亚乙基双(氧基)]二丁烷69.36 %、叶中含量较高的为BETA-去氢香薷酮等物质约占8.11%，且在香薷的花、茎中均有4-蒈烯成分，花和叶中均含有BETA-去氢香薷酮物质，对香薷挥发油进行抑菌试验，得到香薷花挥发油对金黄色葡萄球菌有一定的抑制生长作用，香薷茎挥发油对枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和白色念珠菌均有一定的抑制生长作用，香薷叶挥发油对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和白色念珠菌均有一定的抑制生长作用，综上所述香薷花和叶均对金黄色葡萄球菌有抑制作用，且花只对金黄色葡萄球菌有抑制作用，说明BETA-去氢香薷酮物质具有抑制金黄色葡萄球菌的作用，对香薷地上部分挥发油进行抗氧化评价，其清除DPPH的IC50为9.72mg/mL。表明香薷挥发油具有一定的抑菌抗氧化效果，对未来进一步研究开发北香薷提供参考。