一种亚临界鱼复合保活方法
阅读说明：本技术 一种亚临界鱼复合保活方法 (Subcritical fish composite keep-alive method ) 是由 张崟 母运龙 彭海川 李慧 钱琴 张应杰 刘文龙 白婷 于 2021-07-14 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种亚临界鱼复合保活方法,运输前将活鱼暂养1-5d；将鱼放入程序控温保活装置中,在水体中加入MS-222麻醉剂20-40mg/L,运输前按1-5℃/h的降温速率将水温从18-25℃调节至亚临界储藏温度1-4℃；并在运输过程中持续保持1-4℃；到达目的地后将鱼放入1-4℃养殖水中,养殖水按1-5℃/h的升温速率升温至18-25℃,结束保活。为了解决低温对鲫鱼的镇定效果较慢而且不够稳定,麻醉保活法使用较高浓度的麻醉剂存在休药期过长和有残留的问题。本发明用临界休眠温度结合较低浓度麻醉剂的保活方法,不仅能有效解决鱼类在运输过程中的高应激反应以及高死亡率,同时还能有效降低鱼肉中的血清乳酸浓度、血糖浓度,并显著提高鱼肉质构、持水性、核苷酸含量等食用品质。(The invention discloses a subcritical fish composite keep-alive method, which comprises the steps of temporarily culturing live fish for 1-5 days before transportation; putting the fish into a programmed temperature control and living device, adding 20-40mg/L of MS-222 anesthetic into a water body, and adjusting the water temperature from 18-25 ℃ to the subcritical storage temperature of 1-4 ℃ according to the cooling rate of 1-5 ℃/h before transportation; and continuously keeping the temperature of 1-4 ℃ in the transportation process; after the fish arrives at the destination, the fish is put into the aquaculture water with the temperature of 1-4 ℃, the temperature of the aquaculture water is raised to 18-25 ℃ according to the temperature raising rate of 1-5 ℃/h, and the survival is finished. In order to solve the problems that the low temperature has slow and unstable calming effect on crucian carps, and the anesthesia survival method uses anesthetic with higher concentration and has overlong drug withdrawal period and residue. The invention uses the critical dormancy temperature in combination with the keep-alive method of the anesthetic with lower concentration, which not only can effectively solve the high stress reaction and high death rate of the fish in the transportation process, but also can effectively reduce the serum lactic acid concentration and the blood sugar concentration in the fish meat, and obviously improve the eating quality of the fish meat structure, the water retention property, the nucleotide content and the like.)
技术领域
本发明涉及水产品运输领域，尤其涉及一种亚临界的鱼复合保活方法。
背景技术
鲫鱼是我国最常见的淡水鱼类之一，鲫鱼主要是以植物为食的杂食性鱼，喜群集而行，择食而居。肉质细嫩，营养价值很高，每百克肉含蛋白质13克、脂肪11克，并含有大量的钙、磷、铁等矿物质。鲫鱼药用价值极高，其性平味甘，入胃、肾，具有和中补虚、除赢、温胃进食、补中生气之功效。因此，鲫鱼深得消费者青睐，具有较高的市场价值和消费需求。
我国是鱼类生产和消费大国，但是鱼类养殖业的区域分布不均衡，导致全国的鱼类资源需要通过长途运输来满足市场需求。鱼类在运输过程中，经销商们多采用高密度装载方式，以达到降低运输成本、提高运输量的效果。活鱼的高密度运输，如果运输条件控制不当，会引起近10%的活鱼到达目的地后死亡，严重影响鱼类贸易和成本控制。此外，鱼类的运输及贮藏条件对其食用品质也有重要影响，通常活鱼的食用品质优于死鱼。因此，鱼类运输过程中的保活及降低死亡率技术的研发，成为促进鱼类贸易发展的关键。目前用的最多的保活方法是低温保活法和麻醉保活法，但是低温对鲫鱼的镇定效果较慢而且不够稳定，麻醉保活法使用较高浓度的麻醉剂存在休药期过长和有残留的问题。因此，用临界休眠温度结合麻醉剂诱导鲫鱼休眠的方法来进行保活运输。
基于上述分析，为了解决低温对鲫鱼的镇定效果较慢而且不够稳定，麻醉保活法使用较高浓度的麻醉剂存在休药期过长和有残留的问题。因此，本发明用临界休眠温度结合较低浓度麻醉剂的保活方法，不仅能有效解决鱼类在运输过程中的高应激反应以及高死亡率，同时还能有效降低鱼肉中的血清乳酸浓度、血糖浓度，并显著提高鱼肉质构、持水性、核苷酸含量等食用品质。
发明内容
鉴于上述不足，本发明的目的是解决低温对鲫鱼的镇定效果较慢而且不够稳定，麻醉保活法使用较高浓度的麻醉剂存在休药期过长和有残留的问题，本发明研发了一种亚临界鱼复合保活方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种亚临界鱼复合保活方法，包括：
（1）暂养：运输前将鱼类暂养于专用暂养用水中；
（2）麻醉：向水体中加入麻醉剂，将鱼放入程序控温保活装置中；
（3）程序控温：运输前将水温逐渐下调至亚临界储藏温度，并亚临界储藏温度恒温运输；
（4）唤醒：到达目的地后，将鱼放入养殖水中，升温至18-25℃，结束保活。
进一步的，步骤（1）所述暂养时间为运输前1-5d。
进一步的，步骤（1）所述专用暂养用水由如下方法制得：
自来水经过滤、连续曝气处理，得预备用水；
向预备用水中加入浓度为20~30mg/L的维生素C，即得专用暂养用水。
进一步的，所述过滤采用颗粒活性炭过滤；所述连续曝气时间为24-48h。
进一步的，所述暂养用水水温为18-25℃，溶解氧量为4-6mg/L，pH值至7.2-7.8。
进一步的，所述pH值每隔3-6h测定一次。
进一步的，步骤（2）所述麻醉剂类型为MS-222麻醉剂，麻醉剂浓度为20-40mg/L。
进一步的，步骤（3）所述运输前水温为18-25℃，降温速率为1-5℃/h，亚临界储藏温度为1-4℃。
进一步的，步骤（4）所述养殖水水温1-4℃，升温速率为1-5℃/h。
本发明还公开了一种上述任一的亚临界鱼复合保活方法获得的鱼。
本发明的有益效果在于：
为了解决低温对鲫鱼的镇定效果较慢而且不够稳定，麻醉保活法使用较高浓度的麻醉剂存在休药期过长和有残留的问题。本发明在鱼类运输前先用专用暂养水对鱼类进行暂时喂养，同时以20-40mg/L的MS-222麻醉剂加入水中，结合临界休眠温度1-4℃进行复合保活处理，不仅能有效解决鱼类在运输过程中的高应激反应以及高死亡率，同时还能有效降低鱼肉中的血清乳酸浓度、血糖浓度，并显著提高鱼肉质构、持水性、核苷酸含量等食用品质。
附图说明
图1为不同温度下鲫鱼的呼吸频率及不同时间的呼吸频率；
图2为各组实施例与对比例下水中的pH值。
具体实施方式
为使本发明实现的操作流程与创作特征易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
实施例1
一种亚临界鱼复合保活方法，具体操作步骤为：
（1）暂养：运输前暂养2d，在暂养池中加入维生素C，浓度为25mg/L，水温为20℃，暂养用水：由经颗粒活性炭过滤后的自来水，连续曝气24h后用于实验；暂养水的水温20℃、溶解氧5mg/L、pH7.5；
（2）麻醉：在水体中加入MS-222麻醉剂30mg/L，将鱼放入程序控温保活装置中；
（3）程序控温保活装置的温度调节：运输前按先5℃/h后1℃/h的降温速率将活鱼程序控温保活装置的水温从20℃调节至亚临界储藏温度1.6℃；
（4）运输：将程序控温保活装置放置在冷链运输车上进行运输，运输过程中程序控温装置保持要求的温度1.6℃；
（5）唤醒：到达目的地后取出鱼，放入养殖水中，水温1.6℃；养殖水的升温速率为先1℃/h后5℃/h；养殖水升温至20℃结束。
实施例2
一种亚临界鱼复合保活方法，具体操作步骤为：
（1）暂养：运输前暂养2d，在暂养池中加入维生素C，浓度为25mg/L，水温为20℃，暂养用水：由经颗粒活性炭过滤后的自来水，连续曝气24h后用于实验；暂养水的水温20℃、溶解氧4mg/L、pH7.2；
（2）麻醉：在水体中加入MS-222麻醉剂30mg/L，将鱼放入程序控温保活装置中；
（3）程序控温保活装置的温度调节：运输前按先3℃/h后1℃/h的降温速率将活鱼程序控温保活装置的水温从20℃调节至亚临界储藏温度1.6℃；
（4）运输：将程序控温保活装置放置在冷链运输车上进行运输，运输过程中程序控温装置保持要求的温度1.6℃；
（5）唤醒：到达目的地后取出鱼，放入养殖水中，水温1.6℃；养殖水的升温速率为先1℃/h后3℃/h；养殖水升温至20℃结束。
实施例3
一种亚临界鱼复合保活方法，具体操作步骤为：
（1）暂养：运输前暂养2d，在暂养池中加入维生素C，浓度为25mg/L，水温为20℃，暂养用水：由经颗粒活性炭过滤后的自来水，连续曝气24h后用于实验；暂养水的水温20℃、溶解氧6mg/L、pH7.5；
（2）麻醉：在水体中加入MS-222麻醉剂30mg/L，将鱼放入程序控温保活装置中；
（3）程序控温保活装置的温度调节：运输前按先2℃/h后1℃/h的降温速率将活鱼程序控温保活装置的水温从20℃调节至亚临界储藏温度1.6℃；
（4）运输：将程序控温保活装置放置在冷链运输车上进行运输，运输过程中程序控温装置保持要求的温度1.6℃；
（5）唤醒：到达目的地后取出鱼，放入养殖水中，水温1.6℃；养殖水的升温速率为先1℃/h后2℃/h；养殖水升温至20℃结束。
实施例4
一种亚临界鱼复合保活方法，具体操作步骤为：
（1）暂养：运输前暂养2d，在暂养池中加入维生素C，浓度为25mg/L，水温为20℃，暂养用水：由经颗粒活性炭过滤后的自来水，连续曝气24h后用于实验；暂养水的水温20℃、溶解氧5mg/L、pH7.7；
（2）麻醉：在水体中加入MS-222麻醉剂20mg/L，将鱼放入程序控温保活装置中；
（3）程序控温保活装置的温度调节：运输前按先2℃/h后1℃/h的降温速率将活鱼程序控温保活装置的水温从20℃调节至亚临界储藏温度1.6℃；
（4）运输：将程序控温保活装置放置在冷链运输车上进行运输，运输过程中程序控温装置保持要求的温度1.6℃；
（5）唤醒：到达目的地后取出鱼，放入养殖水中，水温1.6℃；养殖水的升温速率为先1℃/h后2℃/h；养殖水升温至20℃结束。
实施例5
一种亚临界鱼复合保活方法，具体操作步骤为：
（1）暂养：运输前暂养2d，在暂养池中加入维生素C，浓度为25mg/L，水温为20℃，暂养用水：由经颗粒活性炭过滤后的自来水，连续曝气24h后用于实验；暂养水的水温20℃、溶解氧4.5mg/L、pH7.6；
（2）麻醉：在水体中加入MS-222麻醉剂40mg/L，将鱼放入程序控温保活装置中；
（3）程序控温保活装置的温度调节：运输前按先2℃/h后1℃/h的降温速率将活鱼程序控温保活装置的水温从20℃调节至亚临界储藏温度1.6℃；
（4）运输：将程序控温保活装置放置在冷链运输车上进行运输，运输过程中程序控温装置保持要求的温度1.6℃；
（5）唤醒：到达目的地后取出鱼，放入养殖水中，水温1.6℃；养殖水的升温速率为先1℃/h后2℃/h；养殖水升温至20℃结束。
对比例1
与实施例3相比，不对暂养水进行专业处理，其余操作与实施例3相同，具体如下：
（1）暂养：运输前暂养2d，暂养用水：由经颗粒活性炭过滤后的自来水，连续曝气24h后用于实验；暂养水的水温20℃、溶解氧6mg/L；
（2）麻醉：在水体中加入MS-222麻醉剂30mg/L，将鱼放入程序控温保活装置中；
（3）程序控温保活装置的温度调节：运输前按先2℃/h后1℃/h的降温速率将活鱼程序控温保活装置的水温从20℃调节至亚临界储藏温度1.6℃；
（4）运输：将程序控温保活装置放置在冷链运输车上进行运输，运输过程中程序控温装置保持要求的温度1.6℃；
（5）唤醒：到达目的地后取出鱼，放入养殖水中，水温1.6℃；养殖水的升温速率为先1℃/h后2℃/h；养殖水升温至20℃结束。
对比例2
与实施例3相比，不对鱼类进行麻醉处理，其余操作与实施例3相同，具体如下：
（1）暂养：运输前暂养2d，在暂养池中加入维生素C，浓度为25mg/L，水温为20℃，暂养用水：由经颗粒活性炭过滤后的自来水，连续曝气24h后用于实验；暂养水的水温20℃、溶解氧6mg/L、pH7.5；
（2）程序控温保活装置的温度调节：运输前按先2℃/h后1℃/h的降温速率将活鱼程序控温保活装置的水温从20℃调节至亚临界储藏温度1.6℃；
（3）运输：将程序控温保活装置放置在冷链运输车上进行运输，运输过程中程序控温装置保持要求的温度1.6℃；
（4）唤醒：到达目的地后取出鱼，放入养殖水中，水温1.6℃；养殖水的升温速率为先1℃/h后2℃/h；养殖水升温至20℃结束。
对比例3
与实施例3相比，不对鱼类进行程序控温保活调温处理，其余操作与实施例3相同，具体如下：
保活的亚临界储藏温度对保活的影响巨大。当鲫鱼的保活运输温度维持在亚临界储藏温度时，能够最大限度的延长保活时间、减少应激反应和改善鱼肉食用品质。为了确定鲫鱼在运输过程中的最适宜温度，我们监测了鲫鱼在1-20℃下的呼吸频率。如图1所示，在每个温度下记录鲫鱼在一个小时内的呼吸次数，每10min记录一次，可以得到在鲫鱼在每个温度下适应水温的时间。结论，鲫鱼适应水温的时间为40min。
由图1可以看出，当温度范围在1-2℃时，鲫鱼处于镇静状态且呼吸频率在20次/min以下。当温度达到1.6℃时鲫鱼呼吸频率最低，即亚临界储藏温度为1.6℃，故本对比例中设置的运输温度为1.6℃。
（1）亚临界储藏温度的确定：将放在程序控温保活装置的鱼按先5℃/h后1℃/h的降温速率进行降温，根据鱼的呼吸状态和生理状态确定鱼的亚临界储藏温度在1.6℃；
（2）暂养：运输前暂养2d，在暂养池中加入维生素C，浓度为25mg/L，水温为20℃，每隔3h测试一次pH值。暂养用水：由经颗粒活性炭过滤后的自来水，连续曝气24h后用于实验；暂养水的水温20℃、溶解氧6mg/L、pH7.5；
（3）麻醉：在水体中加入MS-222麻醉剂30mg/L，将鱼放入程序控温保活装置中；
（4）运输：在常温18-25℃条件下运输；
（5）唤醒：到达目的地后取出鱼，放入养殖水中。
试验例1
监测各组实施例与对比例暂养水中的pH值
维生素C的浓度决定了暂养水的pH，而pH值过高或者过低都会造成鱼体的不适应性，应激反应强烈。由图2可知，对比例1由于没有添加维生素C导致其pH值低于其他组，进一步印证了pH值＜7时不利于鱼类保活。因此根据pH的范围7.2-7.8调节暂养水中的维生素C的浓度为20-30mg/L。
试验例2
监测各组实施例与对比例鲫鱼的血液指标和组织指标
在复合保活运输过程中，鲫鱼血清的乳酸和血糖浓度能够反应出鲫鱼的应激反应程度。血糖在整个保活过程中含量会上升，由表1可知，使用本发明的保活工艺后血糖数值降低，有助于降低鲫鱼运输应激。乳酸是葡萄糖在无氧条件下发生酵解提供能量时的产物，肌肉产生的乳酸大部分会进入血液，而乳酸含量增加会对血液中血红蛋白运输氧的能力产生影响，导致血液最大氧结合量减少。使用本发明的保活工艺后乳酸含量显著降低，有利于保活运输。持水力是指肌肉受到外力作用时保持原有水分的能力，受肌原纤维蛋白质结构的变形与降解影响，持水性的高低会影响肉的嫩度、多汁性、营养成分、滋味等，是一种简单且方便的衡量鱼肉品质改变情况的指标。使用本发明的保活工艺后持水性得到提升。
表1 各组鲫鱼的血液指标与组织指标比较
。
试验例3
监测各组实施例与对比例鲫鱼的鱼肉质构
鱼肉质构是衡量鱼肉组织特性变化的一项重要指标，是体现鱼肉质量的重要指标。本试验主要考察的质构参数为硬度、胶着性、咀嚼性、弹性和粘聚性。由表2可知，未进行梯度降温处理的对比例3与其他组相比其鱼肉硬度、咀嚼性和弹性显著降低，未进行麻醉处理的对比例2与实施例相比其鱼肉硬度、咀嚼性和弹性显著降低。
表2 各组的鲫鱼鱼肉质构比较
。
试验例4
监测各组实施例与对比例鲫鱼的核苷酸指标
水产品中，5’-腺苷酸二钠（AMP）、5’-胞苷酸二钠（CMP）、5’-肌苷酸二钠（IMP）、5’-鸟苷酸二钠（GMP）和5’-尿苷酸二钠（UMP），这些核苷酸类化合物起到强烈的呈鲜味作用，也决定着肉制品的口感、风味及鲜度。呈味核苷酸类化合物质在水产品中含量丰富，不仅具有显著的增鲜作用，而且对于水产品的各种滋味具一定的增减作用。由表3可知，本试验方法可以使鲫鱼的主要成分核苷酸AMP和IMP含量保持较高的水平，并且能够较好的鱼肉持水性和改善鱼肉质构。
表3 各组鲫鱼的核苷酸比较
。
根据上述指标发现，从鲫鱼在运输五天后的血液指标，组织指标可以看出，降温速率和升温速率对于保活的影响很大，麻醉浓度相对影响比较小。因此，在保活过程中，应该注重降温速率的有效控制。降温速率和升温速率对于保活的影响巨大。降温速率越慢，升温速率越慢，鱼体的保活效果更好。但是过慢的降温速率和升温速率会使得保活运输时间过长，导致企业生产过程中的投入时间过大，因此合理选取合适的降温速率和升温速率就非常重要。选择降温速率为1-5℃/h，升温速率为先1-5℃/h，即在20-6℃温度段采用2-5℃/h的速率，在6-1.6℃温度段采用l℃/h的速率时，能够得到较好保活运输效果。麻醉剂的浓度也是有影响的，当麻醉剂浓度小于20mg/L时，麻醉效果很小，鱼体会受到较大的刺激，应激反应加剧，不利于保活。当麻醉剂浓度大于40mg/L时，麻醉效果过于强烈，鲫鱼会进入深度麻醉状态，不能进行正常的生理活动，导致保活率下降。经过试验发现麻醉剂MS-222适宜浓度为20-40mg/L时，麻醉效果最合适，鲫鱼能够进入较深镇静状态且能够保持正常的生理活动。
经本发明保活方法处理后，可以有效降低鲫鱼血糖和乳酸浓度，减少鲫鱼的应激反应，维持鲫鱼正常的生理状态，一定程度上可改善鲫鱼的鱼肉质构、持水性和核苷酸含量。本发明保活运输后成活率高，可以大幅降低运输成本。因此对于保活运输具有重要的意义。
上述实施例示例性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此,举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
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