一种胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体的制备方法
阅读说明：本技术 一种胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体的制备方法 (Preparation method of prodrug intermediate of thymidine phosphorylase inhibitor ) 是由 宋艳民 陈勇 张超 李静简 于 2020-12-29 设计创作，主要内容包括：本申请涉及胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体制备领域,公开了一种胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体的制备方法,其包括以下步骤：(1)在硫脲的混合醇碱溶液中加入氰乙酸乙酯,回流反应5～6小时,降温结晶,过滤,用乙醇/二氧六环混合液洗涤；(2)将吡啶和氨水混合,加入兰尼镍、ZnSO-4和步骤(1)的所得物,在65～75℃下加热反应7～8小时,趁热过滤,降温结晶,过滤,洗涤；(3)将步骤(2)的所得物加入混合碱溶液中,在45～55℃下缓慢加入2-溴乙醛,反应4～5小时,降温结晶,过滤,洗涤,干燥。根据本申请的制备方法提高了胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的总收率。(The application relates to the field of preparation of prodrug intermediates of thymidine phosphorylase inhibitors, and discloses a preparation method of a prodrug intermediate of a thymidine phosphorylase inhibitor, which comprises the following steps: (1) adding ethyl cyanoacetate into a mixed alcohol alkali solution of thiourea, carrying out reflux reaction for 5-6 hours, cooling, crystallizing, filtering, and washing with an ethanol/dioxane mixed solution; (2) mixing pyridine and ammonia water, adding Raney nickel and ZnSO 4 And (2) heating the obtained product in the step (1) at 65-75 ℃ for reaction for 7-8 hours, filtering while hot, cooling for crystallization, filtering, and washing; (3) and (3) adding the product obtained in the step (2) into a mixed alkali solution, slowly adding 2-bromoacetaldehyde at the temperature of 45-55 ℃, reacting for 4-5 hours, cooling, crystallizing, filtering, washing and drying. The preparation method improves the prodrug intermediate 4-hydroxypyrrolo [2,3-d ] of thymidine phosphorylase inhibitor]Overall yield of pyrimidine.)
技术领域
本申请涉及胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体的制备领域，更具体地，涉 及一种胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体的制备方法。
背景技术
胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase，TP)，是嘧啶核苷合成和分解过 程中的一个重要的酶，也是新发现的一种血管生成因子。TP在许多实体瘤组织 中都有所表达，其活性与肿瘤细胞对氟尿嘧啶类药物的敏感性密切相关，同时 其诱导血管形成和抗凋亡的作用与肿瘤生长、转移密切相关，特别是对胃癌、 大肠癌、乳腺癌、宫颈癌组织的血管生成有明显的促进作用。因此本领域技术 人员开发了胸苷磷酸化酶抑制药以用于治疗癌症。
4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶，是一种非常重要的黄嘌呤氧化酶激活的胸苷磷酸 化酶抑制剂的前药中间体，探索和优化其合成方法的医学意义和应用价值十分 巨大。4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶，英文名称：Pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ol，分 子式：C6H5N3O，分子量：135.1234，相对密度：1.62g/cm3，CAS号：3680-71-5。 其具有烯醇式和酮式两种互变异构体，如下所示：
中国专利申请CN101830904A公开了一种4-氯吡咯并嘧啶的制备方法，该 方法以氰乙酸乙酯、硫脲、2-氯乙醛等为原料，通过三步反应合成得到4-羟基 吡咯并嘧啶，之后通过POCl3氯代得到目标产物4-氯吡咯并嘧啶。其中，4-羟 基吡咯并嘧啶的合成过程操作简单，但是收率仍有进一步提升的空间。
因此，本领域技术人员希望能够开发出收率更高的制备胸苷磷酸化酶抑制 剂的前药中间体4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的方法。
发明内容
[技术问题]
针对现有技术存在的不足，本申请的一个目的在于提供一种胸苷磷酸化酶 抑制剂的前药中间体的制备方法，所述方法反应平稳，操作简便，特别是进一 步提高了4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的总收率，可达75％以上。
[技术方案]
为了实现上述目的，根据本申请的一个实施方式提供了一种胸苷磷酸化酶 抑制剂的前药中间体的制备方法，其包括以下步骤：
(1)2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将硫脲溶于混合醇碱溶液中，室温下缓慢加入氰乙酸乙酯，之后在75～85℃ 下回流反应5～6小时，反应完成后降温结晶，过滤，用乙醇/二氧六环混合液洗 涤，其中，所述混合醇碱溶液包含浓度为0.75～0.80mol/L的乙醇钾和浓度为 0.03～0.05mol/L的乙醇锂的溶质以及体积比为10:(1.0～1.2)的乙醇和二氧六环 的溶剂，以及所述硫脲、氰乙酸乙酯和乙醇钾的摩尔比可以为(1.25～1.5):1: (1.7～2.0)；
(2)4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将体积比为(0.2～0.3):10的吡啶和质量浓度为25％～28％的氨水混合，得 到混合胺溶剂，加入兰尼镍(Raney Ni)、ZnSO4和步骤(1)的所得物，在65～75℃ 下加热反应7～8小时，反应完成后趁热过滤，降温结晶，过滤，用水洗涤，其 中，所述混合胺溶剂、兰尼镍、ZnSO4和步骤(1)的所得物的重量比可以为 (15～20):(0.2～0.3):(0.06～0.08):1；
(3)4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成
将步骤(2)的所得物加入到混合碱溶液中，在45～55℃下缓慢加入2-溴乙 醛，之后反应4～5小时，反应完成后降温结晶，过滤，用水洗涤，干燥，其中， 所述混合碱溶液为包含浓度为1.35～1.50mol/L的KHCO3和浓度为0.40～0.50 mol/L的LiOH的水溶液，所述步骤(2)的所得物、2-溴乙醛和混合碱溶液的 重量比为1:(1.5～2.0):(10～12)。
在本申请中，通过进一步优化和调节各个步骤的反应条件和物料配比，提 高了反应物的利用率和转化率，同时降低了副反应的发生，并且中间步骤的产 物无需充分纯化即可投入下一步反应，综合使得本申请能够减少各个步骤的产 物损失，从而以非常高的总收率获得最终的目标产物胸苷磷酸化酶抑制剂的前 药中间体4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶。
所述步骤(1)为嘧啶关环反应，其中在碱的作用下，硫脲的两个氨基能够 分别进攻氰乙酸乙酯的羰基碳和氰基碳，发生亲核反应而键合形成嘧啶环。在 该反应中，采用乙醇钾和乙醇锂的混合碱来催化反应，并且还采用了乙醇和二 氧六环的混合溶剂，同时适应性地调整反应条件，由此能够促进反应的充分进 行，同时减少副产物的产生，并且在反应完成后，混合溶剂也有利于降温结晶 时析出更多的产物。此外，步骤(1)经过简单的结晶和洗涤即可投入下一步反 应，无需干燥和进一步的纯化，因而可进一步减少产物的损失。
优选地，所述步骤(1)的降温结晶为将反应体系冷却至-5～-10℃以析出晶 体。在上述温度下，能够尽量促使产物2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的结晶析出， 而残留的反应物硫脲和氰乙酸乙酯以及少量的副产物则仍旧能够保留在反应溶 液中。当温度较高时，母液中残留的产物也相应较高，而当温度进一步降低时， 则就无法保证上述杂质不会大量析出。
优选地，所述步骤(1)的洗涤采用体积比为10:1.5且温度为-5～-10℃的乙 醇和二氧六环混合液来进行。通过采用上述配比和温度的混合液来洗涤，能够 在最大化地洗去杂质的同时尽量降低产物2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的损失。
进一步优选地，所述洗涤为采用体积为所述混合醇碱溶液的1/10～1/8的所 述混合液洗涤2～3次。采用上述体积和用量的混合液能够有效地洗涤晶体中的 杂质。
所述步骤(2)为巯基的还原脱除反应，以兰尼镍为催化剂，氨为氢供体， 将巯基还原为硫化氢而脱除。在该反应中，为了进一步提高巯基的脱除效果， 同时降低对分子中羟基和胺基的影响，加入了吡啶和ZnSO4来调节氨的供氢能 力和催化剂的还原活性，从而达到了提高反应转化率和降低副反应的效果。此 外，步骤(2)经过简单的结晶和洗涤即可投入下一步反应，无需干燥和进一步 的纯化，因而也可以进一步减少产物的损失。
优选地，所述步骤(2)中趁热过滤后采用温度为65～75℃且体积为所述混 合胺溶剂的1/10～1/8的水洗涤滤渣1～2次，淋洗液与滤液合并。通过用热水洗 涤反应后的滤渣，从而能够尽量淋洗出附着在滤渣上的产物。
优选地，所述步骤(2)的降温结晶为将反应体系冷却至0～5℃以析出晶体。 在上述温度下，能够尽量促使产物4-氨基-6-羟基嘧啶结晶析出，而残留的反应 物2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶以及少量的副产物则仍旧能够保留在反应溶液中， 最终被过滤除去。当温度较高时，母液中残留的产物也相应较高，而当温度进 一步降低时，则就无法保证上述杂质不会大量析出，且体系有结冰的风险。
优选地，所述步骤(2)的洗涤为采用温度为0～5℃且体积为所述混合胺溶 剂的1/10～1/8的水洗涤2～3次。通过采用上述温度、体积和用量的水来洗涤， 能够在最大化地洗去杂质的同时尽量降低产物4-氨基-6-羟基嘧啶的损失。
所述步骤(3)为吡咯成环反应，在碱的作用下，4-氨基-6-羟基嘧啶的氨基 能够进攻2-溴乙醛的羰基，而2-溴乙醛的α-碳则进攻嘧啶环，从而键合形成吡 咯并嘧啶的稠合杂环。在该反应中，采用KHCO3和LiOH的混合碱来催化反应， 成环转化率很高，副反应少，并且在反应完成后，经过简单的处理即可有效除 去杂质，获得纯度较高的最终产物。
优选地，所述步骤(3)的降温结晶为将反应体系冷却至0～5℃以析出晶体。 在上述温度下，能够尽量促使产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶结晶析出，而残留 的反应物以及少量的副产物则仍旧能够保留在反应溶液中，最终被过滤除去。 当温度较高时，母液中残留的产物也相应较高，而当温度进一步降低时，则就 无法保证上述杂质不会大量析出，且体系有结冰的风险。
优选地，所述步骤(3)的洗涤为采用温度为0～5℃且体积为所述混合碱溶 液的1/8～1/6的水洗涤2～3次。通过采用上述温度、体积和用量的水来洗涤， 能够在最大化地洗去杂质的同时尽量降低产物的损失。
优选地，所述步骤(3)的干燥为在70～80℃下干燥4～5小时。在此干燥条 件下能够充分除去产物中的水分，同时避免晶体的热分解。
[有益效果]
综上所述，本申请具有以下有益效果：
根据本申请的胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体的制备方法对各个步骤的 条件和物料配比进行了充分的优化，提高了反应物的利用率和转化率，同时降 低了副反应的发生，同时操作简便，最终提高了目标产物4-羟基吡咯并[2,3-d] 嘧啶的总收率(可达75％以上)。
具体实施方式
为了使本领域技术人员能够更清楚地理解本申请，以下结合实施例对本申 请作进一步详细说明，但应当理解的是，以下实施例仅为本申请的优选实施方 式，而本申请要求保护的范围并不仅局限于此。
物料来源
硫脲，购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司，
氰乙酸乙酯、乙醇钾、乙醇锂(1M乙醇溶液)、2-溴乙醛，购自北京百灵 威科技有限公司，
兰尼镍，购自北京金瑞梅香科技有限公司，
ZnSO4、吡啶、氨水(25％～28％)、KHCO3、LiOH，购自国药集团。
<实施例>
实施例1
采用以下根据本申请的制备方法来制备胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体 4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶：
(1)2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将90.84g(1.1934mol)的硫脲溶于2.12L的混合醇碱溶液(包含浓度为 0.75mol/L的乙醇钾和浓度为0.04mol/L的乙醇锂的溶质以及体积比为10:1.2 的乙醇和二氧六环的溶剂)中，室温下缓慢加入100.00g(0.8840mol)的氰乙 酸乙酯，之后在80℃下回流反应5.5小时，反应完成后冷却至-5℃以析出晶体， 过滤，采用0.25L的体积比为10:1.5且温度为-5℃的乙醇/二氧六环混合液洗涤 2次，得到117.70g的产物；
(2)4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将体积比为0.25:10的吡啶和质量浓度为25％～28％的氨水混合，得到混合 胺溶剂，取2240g(2500mL)的混合胺溶剂，向其中加入23.54g的兰尼镍、 9.42g的ZnSO4和步骤(1)的所得物，在75℃下加热反应7.5小时，反应完成 后趁热过滤，采用温度为75℃且体积为250mL的水洗涤滤渣2次，淋洗液与 滤液合并，冷却至3℃以析出晶体，过滤，采用温度为3℃且体积为250mL的 水洗涤2次，得到84.18g的产物；
(3)4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成
将步骤(2)的所得物加入到842g(750mL)的混合碱溶液(包含浓度为 1.50mol/L的KHCO3和浓度为0.45mol/L的LiOH的水溶液)中，在45℃下缓 慢加入151.53g的2-溴乙醛，之后反应4.5小时，反应完成后冷却至0℃以析出 晶体，过滤，采用温度为0℃且体积为100mL的水洗涤2次，在75℃下干燥 4.5小时，由此获得96.68g的最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度99.23％， 总收率80.31％)。
实施例2
采用以下根据本申请的制备方法来制备胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体 4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶：
(1)2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将84.11g(1.1050mol)的硫脲溶于2.10L的混合醇碱溶液(包含浓度为 0.80mol/L的乙醇钾和浓度为0.03mol/L的乙醇锂的溶质以及体积比为10:1.1 的乙醇和二氧六环的溶剂)中，室温下缓慢加入100g(0.8840mol)的氰乙酸 乙酯，之后在75℃下回流反应6小时，反应完成后冷却至-10℃以析出晶体，过 滤，采用0.21L的体积比为10:1.5且温度为-10℃的乙醇/二氧六环混合液洗涤3 次，得到120.23g的产物；
(2)4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将体积比为0.2:10的吡啶和质量浓度为25％～28％的氨水混合，得到混合胺 溶剂，取2400g(2610mL)的混合胺溶剂，向其中加入36.07g的兰尼镍、8.42 g的ZnSO4和步骤(1)的所得物，在65℃下加热反应8小时，反应完成后趁 热过滤，采用温度为65℃且体积为270mL的水洗涤滤渣2次，淋洗液与滤液 合并，冷却至0℃以析出晶体，过滤，采用温度为2℃且体积为270mL的水洗 涤2次，得到84.14g的产物；
(3)4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成
将步骤(2)的所得物加入到1010g(880mL)的混合碱溶液(包含浓度 为1.35mol/L的KHCO3和浓度为0.50mol/L的LiOH的水溶液)中，在55℃下 缓慢加入159.87g的2-溴乙醛，之后反应4小时，反应完成后冷却至0℃以析 出晶体，过滤，采用温度为2℃且体积为120mL的水洗涤3次，在70℃下干 燥5小时，由此获得97.92g的最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度99.05％， 总收率81.19％)。
实施例3
采用以下根据本申请的制备方法来制备胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体 4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶：
(1)2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将100.94g(1.3260mol)的硫脲溶于1.88L的混合醇碱溶液(包含浓度为 0.80mol/L的乙醇钾和浓度为0.05mol/L的乙醇锂的溶质以及体积比为10:1.2 的乙醇和二氧六环的溶剂)中，室温下缓慢加入100.00g(0.8840mol)的氰乙 酸乙酯，之后在80℃下回流反应5.5小时，反应完成后冷却至-7℃以析出晶体， 过滤，采用0.20L的体积比为10:1.5且温度为-7℃的乙醇/二氧六环混合液洗涤 3次，得到118.96g的产物；
(2)4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将体积比为0.3:10的吡啶和质量浓度为25％～28％的氨水混合，得到混合胺 溶剂，取2141g(2330mL)的混合胺溶剂，向其中加入35.69g的兰尼镍、7.14 g的ZnSO4和步骤(1)的所得物，在70℃下加热反应7小时，反应完成后趁 热过滤，采用温度为70℃且体积为250mL的水洗涤滤渣1次，淋洗液与滤液 合并，冷却至2℃以析出晶体，过滤，采用温度为2℃且体积为240mL的水洗 涤2次，得到82.34g的产物；
(3)4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成
将步骤(2)的所得物加入到906g(790mL)的混合碱溶液(包含浓度为 1.40mol/L的KHCO3和浓度为0.40mol/L的LiOH的水溶液)中，在50℃下缓 慢加入139.98g的2-溴乙醛，之后反应5小时，反应完成后冷却至0℃以析出 晶体，过滤，采用温度为1℃且体积为100mL的水洗涤3次，在80℃下干燥4 小时，由此获得94.82g的最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度99.34％， 总收率78.86％)。
实施例4
采用以下根据本申请的制备方法来制备胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶：
(1)2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将94.21g(1.23mol)的硫脲溶于2.36L的混合醇碱溶液(包含浓度为0.75 mol/L的乙醇钾和浓度为0.05mol/L的乙醇锂的溶质以及体积比为10:1.1的乙 醇和二氧六环的溶剂)中，室温下缓慢加入100.00g(0.8840mol)的氰乙酸乙 酯，之后在75℃下回流反应5.5小时，反应完成后冷却至-10℃以析出晶体，过 滤，采用0.24L的体积比为10:1.5且温度为-10℃的乙醇/二氧六环混合液洗涤2 次，得到116.43g的产物；
(2)4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将体积比为0.3:10的吡啶和质量浓度为25％～28％的氨水混合，得到混合胺 溶剂，取1753g(1900mL)的混合胺溶剂，向其中加入23.29g的兰尼镍、9.31 g的ZnSO4和步骤(1)的所得物，在65℃下加热反应8小时，反应完成后趁 热过滤，采用温度为70℃且体积为200mL的水洗涤滤渣2次，淋洗液与滤液 合并，冷却至5℃以析出晶体，过滤，采用温度为5℃且体积为200mL的水洗 涤2次，得到79.69g的产物；
(3)4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成
将步骤(2)的所得物加入到956g(830mL)的混合碱溶液(包含浓度为 1.45mol/L的KHCO3和浓度为0.50mol/L的LiOH的水溶液)中，在55℃下缓 慢加入119.54g的2-溴乙醛，之后反应5小时，反应完成后冷却至0℃以析出 晶体，过滤，采用温度为1℃且体积为120mL的水洗涤2次，在75℃下干燥5 小时，由此获得91.78g的最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度99.15％， 总收率76.18％)。
实施例5
采用以下根据本申请的制备方法来制备胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体 4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶：
(1)2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将87.48g(1.1492mol)的硫脲溶于2.05L的混合醇碱溶液(包含浓度为 0.80mol/L的乙醇钾和浓度为0.03mol/L的乙醇锂的溶质以及体积比为10:1.0 的乙醇和二氧六环的溶剂)中，室温下缓慢加入100.00g(0.8840mol)的氰乙 酸乙酯，之后在75℃下回流反应6小时，反应完成后冷却至-8℃以析出晶体， 过滤，采用0.22L的体积比为10:1.5且温度为-8℃的乙醇/二氧六环混合液洗涤 3次，得到116.40g的产物；
(2)4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将体积比为0.3:10的吡啶和质量浓度为25％～28％的氨水混合，得到混合胺 溶剂，取1863g(2025mL)的混合胺溶剂，向其中加入23.30g的兰尼镍、6.99 g的ZnSO4和步骤(1)的所得物，在75℃下加热反应7小时，反应完成后趁 热过滤，采用温度为75℃且体积为210mL的水洗涤滤渣2次，淋洗液与滤液 合并，冷却至3℃以析出晶体，过滤，采用温度为3℃且体积为210mL的水洗 涤2次，得到82.38g的产物；
(3)4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成
将步骤(2)的所得物加入到824g(720mL)的混合碱溶液(包含浓度为 1.40mol/L的KHCO3和浓度为0.35mol/L的LiOH的水溶液)中，在50℃下缓 慢加入164.76g的2-溴乙醛，之后反应5小时，反应完成后冷却至2℃以析出 晶体，过滤，采用温度为2℃且体积为100mL的水洗涤2次，在70℃下干燥 4.5小时，由此获得93.71g的最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度99.27％， 总收率77.88％)。
实施例6
采用以下根据本申请的制备方法来制备胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体 4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶：
(1)2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将97.57g(1.2818mol)的硫脲溶于2.30L的混合醇碱溶液(包含浓度为 0.75mol/L的乙醇钾和浓度为0.04mol/L的乙醇锂的溶质以及体积比为10:1.2 的乙醇和二氧六环的溶剂)中，室温下缓慢加入100.00g(0.8840mol)的氰乙 酸乙酯，之后在85℃下回流反应5小时，反应完成后冷却至-10℃以析出晶体， 过滤，采用0.24L的体积比为10:1.5且温度为-10℃的乙醇/二氧六环混合液洗 涤3次，得到117.68g的产物；
(2)4-氨基-6-羟基嘧啶的合成
将体积比为0.3:10的吡啶和质量浓度为25％～28％的氨水混合，得到混合胺 溶剂，取2002g(2175mL)的混合胺溶剂，向其中加入35.31g的兰尼镍、8.24 g的ZnSO4和步骤(1)的所得物，在65℃下加热反应8小时，反应完成后趁 热过滤，采用温度为65℃且体积为230mL的水洗涤滤渣1次，淋洗液与滤液 合并，冷却至0℃以析出晶体，过滤，采用温度为2℃且体积为220mL的水洗 涤3次，得到82.37g的产物；
(3)4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成
将步骤(2)的所得物加入到906g(790mL)的混合碱溶液(包含浓度为 1.35mol/L的KHCO3和浓度为0.45mol/L的LiOH的水溶液)中，在45℃下缓 慢加入131.79g的2-溴乙醛，之后反应5小时，反应完成后冷却至0℃以析出 晶体，过滤，采用温度为1℃且体积为100mL的水洗涤3次，在70℃下干燥5 小时，由此获得92.71g的最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度99.19％， 总收率76.98％)。
对比实施例1
除了在步骤(1)中采用相同体积且浓度为0.80mol/L的乙醇钠的乙醇溶液 来代替混合醇碱溶液，且采用乙醇冲洗晶体之外，以与实施例1相同的方式制 得了80.74g的最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度99.20％，总收率67.05％)。
对比实施例2
除了在步骤(2)中采用相同体积且质量浓度为25％～28％的氨水来代替混 合胺溶剂，且不加入ZnSO4之外，以与实施例1相同的方式制得了83.17g的 最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度99.15％，总收率69.03％)。
对比实施例3
除了在步骤(3)中采用相同体积且浓度为2.00mol/L的乙酸钠水溶液来代 替混合碱溶液，且采用2-氯乙醛代替2-溴乙醛，并在70℃下反应之外，以与实 施例1相同的方式制得了78.98g的最终产物4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶(纯度 99.25％，总收率65.62％)。
通过上述实施例1至6和对比实施例1至3可以看出，本申请通过优化各 个步骤的反应和后处理条件，从而大大提高了胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间 体4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶的总收率；相比之下，对比实施例1至3分别在各 步骤替换掉本申请的技术方案之后，其总收率均有明显的下降。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域 技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的 修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。