阅读说明：本技术 一种Fish唾液自动分样检测盘及其检测方法 (Fish saliva automatic sample separation detection disc and detection method thereof ) 是由 任彪 周馨怡 田而慷 陈婧怡 任瑞阳 于晓彤 唐浩迪 余美琪 张思雨 周学东 于 2020-11-17 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种Fish唾液自动分样检测盘及其检测方法,解决了现有技术中唾液检测方式工序复杂、精确度不足、难以快速同时检测的问题。本发明设置基体、中央收集区、导流毛细管和玻片载台构成唾液放置、分样和放置载玻片的通道,为一体结构,其中载玻片可拆卸。将采集唾液,放入中央搜集区后,液体与毛细管壁通过毛细现象使唾液自动流入导流毛细管至玻片载台上的载玻片。拆卸载玻片后,根据Fish技术原理和检测微生物种类,判断微生物含量,指征疾病进程。多个玻片载台可以同时互不干扰检测多种微生物。实现了快速均匀的唾液自动分装,并与Fish荧光检测技术融合,特异性荧光探针与微生物核酸结合,定量检测微生物。简化唾液检测,提高唾液检测的精确度。(The invention relates to a Fish saliva automatic sample separation detection disc and a detection method thereof, and solves the problems that in the prior art, a saliva detection mode is complex in process, insufficient in accuracy and difficult to detect quickly and simultaneously. The device is provided with a substrate, a central collecting area, a diversion capillary tube and a slide glass carrier to form a channel for holding saliva, separating samples and holding a slide glass, and the channel is of an integrated structure, wherein the slide glass is detachable. After the collected saliva is placed in the central collection area, the liquid and the capillary wall automatically flow into the diversion capillary to the glass slide on the glass slide carrier through the capillary phenomenon. After the glass slide is disassembled, the content of the microorganisms is judged according to the Fish technical principle and the species of the detected microorganisms, and the disease process is indicated. Multiple slide stages can detect multiple microorganisms simultaneously without interfering with each other. The saliva is automatically subpackaged quickly and uniformly, and is fused with a Fish fluorescence detection technology, and a specific fluorescent probe is combined with the microbial nucleic acid to quantitatively detect the microbes. Simplify saliva detection, improve saliva detection's accuracy.)

一种Fish唾液自动分样检测盘及其检测方法

技术领域

本发明涉及医学技术诊断领域领域，尤其涉及一种Fish唾液自样分样检测盘及其检测方法。

背景技术

唾液是口腔唾液腺分泌的一种重要的体液，含有丰富生物分子，并且可随机体健康状况改变，其中相关的生物标志物可用于监测口腔及全身疾病。唾液检测具有无创、方便、快速、易被患者接受等优点，因而受到越来越多的重视。现如今，关于多种疾病如新冠肺炎、口腔疾病、心血管疾病、癌症等与相应致病菌和其分泌物的关系已研究得较为清晰，且研究已证明菌群种类及比例与疾病具有很好的相关性。因此将这些特定的微生物与一些临床指标结合可大幅提升疾病检测的灵敏度和准确性，并且通过检测其丰度或比例变化还可用于判断患病风险，帮助患者尽早采取治疗手段，避免延误带来的不必要痛苦和负担。

此外，近年来，Fish技术逐渐兴起，作为非放射性检测体系，具具有以下优点:1、荧光试剂和探针经济、安全；2、探针稳定，一次标记后可在两年内使用；3、实验周期短、能迅速得到结果、特异性好、定位准确、敏感度高；4、多色FISH通过在同一个核中显示不同的颜色可同时检测多种序列等。

现有技术以设计一种Fish唾液自动分样检测盘，通过将放入唾液自动分装入八个载玻片上，每个玻片可以应用于不同微生物检测，大大减少了所需要唾液提取次数，从而提高了检测效率。在可拆卸玻片经过处理并放入预先配置好的荧光探针后，放回装置同时进行荧光检测，便能够一次性获得多种疾病检测指标，高效全面地对疾病进行诊断。

发明内容

鉴于上述的分析，本发明旨在提供一种Fish唾液自动分样检测盘，用于解决现有技术中唾液检测方式工序复杂、精确度不足、难以快速以及同时检测的问题。

本发明的目的主要是通过以下技术方案实现的：

本发明技术方案中，一种Fish唾液自动分样检测盘装置包括：基体、中央收集区、导流毛细管和玻片载台。

本发明技术方案中，基体、中央搜集区、导流毛细管和玻片载台为一体结构，不可拆卸。

进一步地，中央搜集区、导流毛细管和玻片载台依次排列、嵌入机体上方，构成唾液放置、分样和放置载玻片的通道，为一体结构。

进一步地，玻片载台可供载玻片放置。

进一步地，载玻片可自由拆卸。

一种Fish唾液自动分样检测盘的使用方法，采用Fish唾液自动分样检测盘对唾液进行自动分样导入载玻片后，根据Fish技术步骤原理，对玻片经过一系列处理后插回玻片载台进行一次性荧光检测，用以判断微生物含量并指征疾病进程：包括以下步骤；

S1、采集适量唾液并装入中央搜集区；

S2、中央搜集区内唾液通过毛细现象自动沿导流毛细管流入玻片载台上方放置的载玻片；

S3、将载玻片拆卸下来，根据Fish技术步骤原理和检测微生物种类，对不同载玻片进行特征性处理，并放入特异性探针；

S4、将处理好的载玻片插回玻片载台一起放置在荧光显微镜下扫描，并分析结果。

本发明一方面可运用Fish唾液自动分样检测盘配套探针及试剂，对口腔多项常见疾病进行检测，也可单独应用Fish唾液自动分样检测盘，而选取其他微生物特异性探针和试剂进行检测。

本发明配套探针及试剂和运用方法为：

1号玻片载台槽：检测粪肠球菌，基因探针ENF191(序列： GAAAGCGCCTTCACTTATGC)5‘端标记异硫氰酸荧光素(绿色信号)。

2号玻片载台槽：检测变形链球菌，基因探针MUT590,5'- ACTCCAGAC TTTCCTGAC-3'。

3号玻片载台槽：检测幽门螺杆菌，LNA修饰的基因探针5’-CTGGAGAGACTAAGCCCTCC-3’，5’端Cy5标记(Abs/Em＝550—592/633 nm、红色)。

4号玻片载台槽：检测具核杆菌，基因探针FUS664，5’- CTTGTAGTTCCGCTTACCTA-3’，5’端Cy5标记(Abs/Em＝550—592/633 nm、红色)。

5号玻片载台槽：检测牙龈卟啉单胞菌，基因探针5′-3′： CACTGAACTCAAGCCCGGCAGTTTCAA并用ALEXA Fluor 488标记。

6号玻片载台槽:检测伴放线放线杆菌，基因探针，序列为5’-CACCAGGGCTAAACCCAAT-3’，以显蓝绿色的FITC标记。

7号和8号玻片载台槽为备用玻片载台槽或用于其他微生物检测。

配套试剂有：荧光媒介油、乙醇、多聚甲醛、十二烷基硫酸钠、 Tris缓冲液、福尔马林、甲酰胺/2x SSC变性液、Giemsa染色剂、 PI/antifade染液、DAPI/antifade染液、通用探针。

本发明技术方案至少能够实现以下效果之一：

1、本发明的Fish唾液自动分样检测盘，在原有唾液检测工艺的基础上，简化操作，并实现同时检测同一样本中的多类微生物，大幅提高唾液检测效率。

2、本发明装置的对称结构使样本均匀分装，且发明装置区域相互分离的设计，提高进行实验的可操作度，提供充分的变量实验条件，充分保障Fish技术检测条件特异性，提高唾液检测的精确度。

3、本发明装置设计结构灵巧简单，易于拆卸清洗，装置清洗效率高。

4、本发明装置与荧光素原位杂交技术(Fish)结合，采用特异性荧光探针与微生物核酸结合的方式，实现快速定量检测微生物。

本发明的其他特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分优点可从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点可通过说明书以及附图中所特别指出的内容中来实现和获得。

附图说明

附图仅用于示出具体实施例的目的，而并不认为是对本发明的限制，在整个附图中，相同的参考符号表示相同的部件。

图1为本发明的俯视示意图；

图2为本发明的等轴测图；

图3为本发明的右视图；

图4为本发明的玻片装配示意图。

附图标记：

1-基体；2-中央收集区；3-导流毛细管；4-玻片载台。

具体实施方式

下面结合附图来具体描述本发明的优选实施例，其中，附图构成本发明一部分，并与本发明的实施例一起用于阐释本发明的原理，并非用于限定本发明的范围。

在本发明实施例的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“相连”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接可以是机械连接，也可以是电连接可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

全文中描述使用的术语“顶部”、“底部”、“在……上方”、“下”和“在……上”是相对于装置的部件的相对位置，例如装置内部的顶部和底部衬底的相对位置。可以理解的是装置是多功能的，与它们在空间中的方位无关。

如图1至图4所示，本发明实施例提供了一种Fish唾液自动分样检测盘，包括：基体(1)中央收集区(2)导流毛细管(3)玻片载台 (4)；所述中央搜集区(2)、导流毛细管(3)和玻片载台(4)嵌入基体(1)上方；所述中央搜集区(2)、导流毛细管(3)和玻片载台 (4)依次相接排列，构成唾液放置、自动分样和载玻片放置通道，为一体结构；所述基体(1)中央收集区(2)导流毛细管(3)玻片载台(4)与所述基体(1)之间均不可拆卸；玻片载台(4)可供载玻片放置，且载玻片可自由拆卸。其中，中央收集区(2)为基体(1)内的凹陷，用于盛放待测唾液样本；导流毛细管(3)与中央收集区(2)相连，利用毛细现象将一部分待测唾液样本引流至玻片载台(4)；玻片载台 (4)与导流毛细管(3)相连，收集部分唾液样本后将其拆卸下来，根据Fish技术步骤原理和检测微生物种类，对不同载玻片进行不同处理，再插回玻片载台(4)一起放置在荧光显微镜下扫描，并分析结果。

本发明涉及Fish技术、自动分样技术，在传统唾液检测中往往因为唾液取样困难、取样量少而难以同时进行多项检查，且时间成本高。该装置将一份待测唾液样本自动分为平均八份，因此本发明新型唾液检测盒通过中央收集区(2)收集样本，导流毛细管(3)均匀分散样本，连续引流至玻片载台(4)进行后续操作。

在中央收集区滴下待测样本后，液体与毛细管壁接触发生毛细现象，使一部分液体移动至试纸检测区被干燥的试纸吸收从而连续将样本均匀分散至各玻片载台，拆卸玻片进行特征性处理后插回玻片载台进行扫描观察、结果分析。

本发明实施例的使用方法为：

步骤S1：采集适量唾液并装入中央搜集区(2)；

步骤S2：中央搜集区(2)内唾液通过毛细现象自动沿导流毛细管 (3)流入玻片载台(4)上方放置的载玻片；

步骤S3：将载玻片拆卸下来，根据Fish技术步骤原理和检测微生物种类，对不同载玻片进行特征性处理，并放入特异性探针；

步骤S4：将处理好的载玻片插回玻片载台(4)一起放置在荧光显微镜下扫描，并分析结果。

与现有检测方式相比，本发明实施例提供的一种Fish唾液自动分样检测盘至少具有以下有益效果之一：

1.传统唾液检测需要大量唾液样本，取样时被检查者可能会出现反胃等不适。本发明能将唾液样本均匀分散成八份，减少唾液提取次数，减少被检查者的痛苦。

2.一份样品同时检测八种疾病，提高检测效率，节约时间成本。

3.运用Fish技术，提高了检测的精确度，有助于及早诊断病情，从而做到早发现、早诊断、早治疗。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。