发明背景

成人中超过95％的癌症(cancer)是上皮恶性肿瘤(carcinomas)，这意味着它们起源于器官的上皮衬层。在许多情况下，这些上皮与周围体液直接接触，使上皮细胞不断地脱落到该周围体液中，作为上皮再生自然过程的一部分。实例是不断脱落到胰液中的胰腺导管细胞、不断脱落到痰中的肺细胞和不断脱落到尿液中的膀胱细胞。可以存在于受试者上皮中的发育异常细胞和癌细胞也与正常上皮细胞一起自然地脱落到周围流体中。在许多情况下，这些体液可通过无创或微创采样方法获得。然后，可以使用标准实验室技术浓缩在这些采样的流体中发现的片状剥脱的细胞，随后由细胞病理学家用于显微镜评价，从而在理论上实现发育异常和癌症的早期检测。虽然对片状剥脱到周围体液中的细胞进行细胞病理学检查通常具有高度特异性，但其对发育异常和癌症检测的敏感性通常受到以下事实的限制：上皮细胞自然片状剥脱到周围流体中的速度较慢，导致样品非常少，几乎没有细胞供病理学家检查。目前，这限制了以下部位中的发育异常和癌症的细胞病理学检测：纵隔、胸膜、心包膜、腹膜、肺、乳房、唾液腺、脑膜、胰腺导管、胰腺包囊、肾脏、肝脏、膀胱和卵巢等。

例如，胰腺由多种细胞类型组成，每种细胞都可能引起不同类型的癌症。胰腺导管腺癌(PDAC)是美国癌症相关死亡的第四大主要原因。这归因于其通常在转移阶段的较晚诊断、其侵略性生物学以及对已知化学疗法仅部分的应答。胰液的细胞学评价已显示具有高敏感性，在诊断胰腺癌中高于79％。

因为通常具有很少或没有早期症状，因此胰腺癌在发现时通常就已经是晚期的。出于这种原因，到2030年，胰腺癌预计将成为美国癌症死亡的第二大主要原因(1)。

对因其胰腺癌家族史、胰腺癌易感基因突变或偶然检测到胰腺囊肿而处于发展胰腺癌的升高的风险的患者进行胰腺筛查和监测。

当前的胰腺癌检查包括内窥镜超声检查(EUS)和内窥镜磁共振成像/磁共振胆管胰腺造影术(ERCP)。尽管这些检查对于检测胰腺囊肿是准确的(2,3,4)，但是它们不太适合用于检测小的实体胰腺癌，这可由尽管定期监测但仍发展为胰腺癌的患者人数证明。这反映错过了早期检测的机会(5)。

细胞病理学是诊断疾病的重要临床标准，已经过检验作为胰腺癌的诊断手段。例如，1974年，Yoshihiko Endo及其同事首次报道了用十二指肠镜收集胰液后对胰腺癌的细胞学诊断(6)。他们报道敏感性为79％。在随后的几十年中，许多研究人员尝试使用胰液的细胞学检查来确定胰腺恶性肿瘤，但敏感性范围仍然顽固地停留在70-80％左右(7,8)。多年来，多个内窥镜医师观察到的敏感性不足可能反映了典型的细胞收集和分析方法存在的缺陷。另外，获得用于进行生物测定中组织学分析的流体样品中的细胞或组织片段的水平低是多种生物测定类型存在的问题。

因此，需要增加从各种器官和组织类型片状剥脱的细胞的产率供收集和后续分析，以便增强这些诊断性检查的特异性。还需要诱导完整组织的片状剥脱，其可用于提供组织片段的前位视图。特别是关于胰腺癌，需要改善的细胞收集和组织片段收集技术，用于从胰腺的正常细胞背景中检测到稀少的细胞。