治疗伤口的吸收剂
阅读说明：本技术 治疗伤口的吸收剂 (Absorbent for treating wound ) 是由 瓦迪姆·瓦列耶维奇·克朗加兹 谢威 林忠建 于 2018-11-27 设计创作，主要内容包括：本发明提供包含止血组合物套装的治疗伤口的吸收剂试剂盒,所述止血组合物套装至少包括(1)第一止血组合物,所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖,和(2)第二止血组合物,所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖。在一些实施方案中,第一止血组合物具有第一交联度,并且第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度。本发明还提供通过从所公开的止血组合物套装中选择止血组合物,并向伤口部位施用所选择的止血组合物来治疗伤口的方法。(The present invention provides an absorbent kit for treating a wound comprising a hemostatic composition set comprising at least (1) a first hemostatic composition comprising a first cross-linked polysaccharide selected from the group consisting of a cyclodextrin and a dextran, and (2) a second hemostatic composition comprising a second cross-linked polysaccharide selected from the group consisting of a cyclodextrin and a dextran. In some embodiments, the first hemostatic composition has a first degree of cross-linking and the second hemostatic composition has a second degree of cross-linking that is higher than the first degree of cross-linking. The invention also provides methods of treating a wound by selecting a hemostatic composition from the disclosed hemostatic composition set and applying the selected hemostatic composition to the wound site.)
本申请要求2017年11月28日提交的美国临时申请号62/591,481的优先权，所述美国临时申请的全部内容并入本文。
背景技术
目前，止血剂和密封剂在外科手术期间被用作阻止流血，包括出血的助剂。FDA已经批准了如
明胶来源于如肌腱胶原和皮肤的动物产品。由于担心对牛类动物来源的材料过敏，非动物来源的某些止血组合物，如聚无水葡糖醛酸(polyanhydroglucuronic acid)受到关注。
本发明提供包含止血组合物套装的治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述止血组合物套装至少包括(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖。在一些实施方案中，第一止血组合物具有第一交联度，并且第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度。
目前，用于患者的许多止血组合物包含动物来源的起始物质(例如，明胶)用于制备止血基质。本发明的组合物使用非动物多糖/淀粉聚合物来制备止血基质。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以包括交联的β-环糊精。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以是粉末形式。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，所述治疗伤口的吸收剂试剂盒可以包括用于第一和第二止血组合物中任一种的重构的可药用稀释剂。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以包括选自下述的相应交联剂：二缩水甘油醚、环氧氯丙烷(epichlorohydrin)、二异氰酸酯、二羧酸氯化物、二羧酸、酸酐、聚(d，1-乳酸)、柠檬酸、甘油、二醛、二酰氯和环氧化物。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，第一和第二止血组合物可以在相应交联剂的量和类型中的至少一者上彼此不同。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以具有约38％至约1600％的膨胀能力。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，第二止血组合物可以被配置成比第一止血组合物吸收更少的流体。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，所述治疗伤口的吸收剂试剂盒可以包括至少一种选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的添加剂。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，第一和第二止血组合物中任一种可以与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。
本发明还提供一种治疗伤口的方法。所述方法包括从止血组合物套装中选择止血组合物，所述止血组合物套装至少包含(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖，其中所述第一止血组合物具有第一交联度，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖，其中所述第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度。将所选择的止血组合物施用到伤口部位。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，所述止血组合物可以根据期望的膨胀能力进行选择。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，所述止血组合物可以根据选自反应时间、反应温度及其组合的反应参数进行选择。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，所选择的止血组合物可以以粉末形式施用。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，在被施用到伤口部位之前，第一和第二止血组合物中任一种可以与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。
在每个或任何上述或下述的实施方案中，至少一种选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的添加剂可以与所选择的止血组合物一起施用。
因此，本发明的一个优点是提供具有止血组合物套装的治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述止血组合物具有高吸水程度并且能够快速膨胀用于填充流血伤口。
本发明的一个进一步的优点是提供一种其中可以通过改变交联度控制吸水和膨胀程度的方法。
所公开的试剂盒和方法的另外的特征和优点描述在以下详细说明和附图中，并从以下详细说明和附图变得清楚明显。本文所述的特征和优点不是包括一切的，并且特别地，鉴于附图和说明书，许多另外的特征和优点将对本领域普通技术人员是清楚明显的。此外，任何具体实施方案不是都必须具有本文所列的所有优点。而且，应当注意，在本说明书中使用的语言主要出于易读性和指导目的而被选择，而不是限制本发明主题的范围。
附图说明
图1为显示根据本发明的一个实施方案交联的β-环糊精聚合物的吸水动力学的图。
图2为显示根据本发明的实施方案FLOSEAL和G-25、G-50、G-75交联的葡聚糖基聚合物的吸水动力学的图。
图3为显示根据本发明的实施方案由亲水性聚合物的吸水引起的膨胀程度相对于其交联度的图。
详细说明
本发明提供包含止血组合物套装的治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述止血组合物套装至少包括(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖。所述止血组合物可以根据期望的膨胀能力进行选择。例如，可以通过交联度的变化来控制吸水和膨胀的程度。
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与如本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。以下参考文献提供在本发明中使用的许多术语的一般定义的一种技巧：Singleton等人，微生物学与分子生物学词典(DICTIONARY OFMICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY)(第2版，1994)；剑桥科技词典(THE CAMBRIDGEDICTIONARY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY)(Walker编著，1988)；遗传学词汇(THEGLOSSARY OF GENETICS)第5版，R.Rieger等人(编著)，Springer Verlag(1991)；和Hale&Marham，哈珀·柯林斯生物学词典(THE HARPER COLLINS DICTIONARY OF BIOLOGY)(1991)。
如在本发明和所属权利要求中使用的，除非上下文另有明确的规定，否则不带具体数量的指称物包括复数指称物以及单数指称物。
除非另有规定，否则如本文使用的以下术语具有赋予它们的含义。
术语“约”或“大约”指由本领域普通技术人员确定的具体值的可接受误差，其部分取决于如何测量或确定该值。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”指在1、2、3或4个标准偏差之内。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”指在给定值或范围的30％、25％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％之内。每当术语“约”或“大约”在一系列两个或多个数值中的第一个数值之前时，应当理解术语“约”或“大约”适用于该系列中的每个数值。
“止血组合物”指用于停止或减少由损伤或手术引起的出血和/或促进凝血级联的组合物。“可流动的”组合物或“水凝胶”指基本上液体的稍粘稠溶液、固体、半固体、假塑性或含有水性组分的塑性结构，以产生具有能够通过注射器或其它装置流动并施用到受试者的性质的凝胶状或胶冻状的团块或糊状溶液。所述可流动的水凝胶在室温和体温下是液体状、稍粘稠溶液或糊状溶液。在一些实施方案中，可流动的组合物是当通过注射器或其它装置挤出以施用到受试者时保持形状的组合物。
本发明的治疗伤口的吸收剂试剂盒包括止血组合物套装，所述止血组合物套装至少包括(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖。环糊精具有三种类型：α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精。α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精分别由六个、七个和八个α-(1，4)-连接的葡萄糖单体组成。就性质而言，环糊精具有亲水性外表面和亲脂性中央腔。在一些实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以包括交联的β-环糊精。在一些实施方案中，第一和第二止血组合物中至少一种包括交联的葡聚糖。葡聚糖具有3-2000千道尔顿的链长。
在一些实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以通过羧基交联形成凝胶分子，其容易能够伴随膨胀进行极性流体吸收。在一些实施方案中，交联剂选自：二缩水甘油醚、环氧氯丙烷、二异氰酸酯、二羧酸氯化物、二羧酸、酸酐、聚(d，1-乳酸)、柠檬酸、甘油、二醛、二酰氯和环氧化物。
在一些实施方案中，治疗伤口的吸收剂试剂盒可以包括至少一种选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的添加剂。在一些实施方案中，第一和第二止血组合物中任一种可以与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。
在一些实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以是粉末形式。在一些实施方案中，粉末止血组合物中包含的大部分颗粒(例如，多于50％w/w，多于80％w/w，或多于90％w/w)可以具有10至1000μm、50至800μm、50至700μm、150至700μm、200至700μm、300至550μm、或350至550μm的粒径。所述止血组合物以粉末形式可以甚至在高温(例如，超过20℃，超过30℃，或者甚至超过40℃)下长时间储存稳定。在一些实施方案中，所述止血组合物具有低于15％(w/w)、低于10％(w/w)、低于5％(w/w)、或低于1％(w/w)的含水量。
在一些实施方案中，所述治疗伤口的吸收剂试剂盒可以包括用于第一和第二止血组合物中任一种的重构的可药用稀释剂。根据本发明的粉末止血组合物在暴露于流体(即，可药用稀释剂)时可以快速膨胀，并且以该膨胀形式，能够有助于形成可施用到伤口部位的可流动的糊剂。在一些实施方案中，可药用稀释剂为水溶液，并且可含有选自NaCl、CaCl2、乙酸钠、乳酸钠、柠檬酸钠、癸酸钠和甘露醇的物质。例如，可药用稀释剂包含注射用水，和-各自独立地-50至200mM的NaCl(例如，150mM)、10至80mM CaCl2(例如，40mM)、1至50mM乙酸钠(例如，20mM)和至多10％w/w的甘露醇(例如，2％w/w)。在一些实施方案中，稀释剂也可以包括缓冲液或缓冲体系，以便将重构的干燥组合物的pH缓冲为例如3.0至10.0的pH、6.4至7.5的pH或6.9至7.1的pH。
在一些实施方案中，第一和第二止血组合物各自都是吸收液体的。例如，当与液体例如水溶液或悬浮液(特别是缓冲液或血液)接触时，止血组合物吸收液体，将根据水化程度显示膨胀度。根据特定止血组合物的使用要求或偏好，止血组合物可以具有按重量计约38％至约1600％、约300％至约1600％、约400％至约1300％、约500％至约1100％、或约600％至约900％的膨胀能力。这样的平衡膨胀可以例如通过改变交联度来控制，所述改变交联度进而通过改变交联条件例如交联剂的类型、交联剂的暴露持续时间、交联剂的浓度、交联温度等来实现。
具有不同平衡膨胀值的物质在不同的应用中表现不同。在一些实施方案中，止血组合物可以根据期望的膨胀能力进行选择。在一些实施方案中，可以根据选自反应时间、反应温度及其组合的反应参数进行选择止血组合物。控制交联和平衡膨胀的能力使本发明的组合物最佳地用于多种用途：虽然快速膨胀在某些应用(例如，神经手术应用)中可能不期望，但是在外伤/军事型(military-type)伤口中可能是期望的。
本发明进一步提供一种治疗伤口的方法。所述方法包括从止血组合物套装中选择止血组合物，所述止血组合物套装至少包含(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖，其中所述第一止血组合物具有第一交联度，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖，其中所述第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度。将所选择的止血组合物施用到伤口部位。
尽管在某些实施方案中，干燥的组合物可以直接施用于目标部位(和任选地，如有必要，在目标部位处与可药用稀释剂接触)，但设想了在施用到目标部位之前使干燥的止血组合物与可药用稀释剂接触，以便获得湿的形式(例如，水凝胶形式)的可流动的止血组合物。在一些实施方案中，在施用到伤口部位之前，可以将第一和第二止血组合物中任一种与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。在一些实施方案中，选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的至少一种添加剂可以与所选择的止血组合物一起施用。一旦施用于伤口，根据本发明的止血的交联多糖聚合物形成有效基质，所述有效基质可以形成血流屏障。特别地，止血聚合物的膨胀性质可以使其成为有效抑制出血和再出血过程的机械屏障。
以下是根据本发明的止血组合物的非限制性实例。本领域普通技术人员应当理解，在仅由权利要求书限定的本发明的范围之内，以下实施例的变化是可能的。
实施例1
将β-环糊精引入到不同交联密度的交联聚合物网络中。为了获得高交联度，将约10g的β-环糊精与约10ml的环氧氯丙烷混合，并加热至约90℃，同时在装有约20cm长反向冷凝器的200ml三颈烧瓶中搅拌。慢慢地滴加50％的氢氧化钠溶液，得到带白色的沉淀物。继续在强搅拌下加热约2小时。在冷却至室温之后，从烧瓶中用匙舀出胶凝的聚合物，首先在布氏漏斗上用蒸馏水反复洗涤，之后用丙酮洗涤，并在真空烘箱中在-30torr和50℃下干燥过夜。产率为按重量计80％。
使用β-环糊精与聚丙二醇二缩水甘油醚PEG-DGE交联剂(分子量＝380a.u.)获得了低交联度。将约8g的β-环糊精与20ml的50％氢氧化钠混合，并加热至约130℃，同时在装有约20cm-长反向冷凝器的200ml三颈烧瓶中搅拌。在达到130℃之后，在强搅拌下滴加20ml的PEG-DGE。在130℃下搅拌沉淀物约2小时以上，并加入约3ml的三乙胺。将混合物静置搅拌过夜。在冷却至室温之后，得到胶凝力强的凝胶(rubbery gel)。通过在布氏漏斗上反复洗涤除去浅褐色部分。产率为按重量计62％。
使用热机械分析(TMA)测量由于流体吸收引起的膨胀来监测流体吸收的动力学。通过TMA测量在限定的圆柱体积中树脂的膨胀作为在向树脂中加入水之后时间的函数，获得膨胀动力学。图1中显示的实验结果列出了在β-环糊精中膨胀水平和交联度之间的下述关系：高交联度的环氧氯丙烷引起的膨胀较少，而低交联度的二缩水甘油醚引起膨胀更大。这样的多种膨胀性质可以是期望的，能够使临床人员针对伤口深度和类型选择特定的吸收剂/密封剂。
实施例2
在具有一定范围的交联密度的一系列亲水性聚合物中检测吸水动力学和膨胀的程度。测试来自GE Healthcare的
表1：材料吸水后的膨胀
材料
膨胀(％)
G-10
40.94
G-25
744.9
G-50
1227
G-75
1650
FloSeal
216
交联的葡聚糖聚合物相对于FloSeal的吸水率增加是出人预料的和令人惊奇的。特别地，在G-50、G-75交联的葡聚糖基聚合物中，分别得到744.9％、1227％和1650％的膨胀。相反，当使用FloSeal时，膨胀显著减少-为216％。某些交联的葡聚糖聚合物的增加的吸水率可以是快速治疗出血伤口所期望的。
本文公开的具体实施方案可以在权利要求书中使用“由...组成”或“基本上由...组成”的语言进一步限制。当用于权利要求书中时，无论是按提交案提出还是按修正案提出，过渡术语“由...组成”排除了权利要求书中没有指定的任何要素、步骤或成分。过渡术语“基本上由...组成”将权利要求的范围限制于指定的材料或步骤，和不会本质上影响基本和新的特征的材料或步骤。如此要求保护的本发明的实施方案在本文中被固有地或明确地描述和启用。
应当理解，本文公开的本发明的实施方案说明了本发明的原理。可以使用在本发明的范围之内的其它修改。因此，举例来说，但不是限制性的，可以根据本文的教导使用本发明的替代性配置。因此，本发明不限于所精确显示和描述的内容。
虽然本发明已经在本文中通过参照各种具体材料、程序和实施例进行了描述和说明，但是应当理解本发明不限于为此目的选择的材料和程序的具体组合。如本领域那些技术人员应当了解的，可能暗含着这样的细节的许多变化。意图是说明书和实施例仅被视为示例性的，本发明的真实范围和精神由以下权利要求书指示。将本申请中提及的所有参考文献、专利和专利申请全文通过引用并入本文中。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述试剂盒包含：
止血组合物套装，所述止血组合物套装至少包括(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括包含葡聚糖的第一交联多糖，其中所述第一止血组合物具有第一交联度，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括包含葡聚糖的第二交联多糖，其中所述第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度。
2.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自为粉末形式。
3.根据权利要求3所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述试剂盒包含用于第一止血组合物和第二止血组合物中任一种的重构的可药用稀释剂。
4.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自包含选自下述的相应交联剂：二缩水甘油醚、环氧氯丙烷、二异氰酸酯、二羧酸氯化物、二羧酸、酸酐、聚(d，1-乳酸)、柠檬酸、甘油、二醛、二酰氯和环氧化物。
5.根据权利要求5所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物在相应交联剂的量和类型中的至少一者上彼此不同。
6.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自具有约38％至约1600％的膨胀能力。
7.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第二止血组合物被配置成比第一止血组合物吸收更少的流体。
8.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述试剂盒包含至少一种选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的添加剂。
9.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物中任一种与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。
10.一种治疗伤口的方法，所述方法包括：
从止血组合物套装中选择止血组合物，所述止血组合物套装至少包含(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括包含葡聚糖的第一交联多糖，其中所述第一止血组合物具有第一交联度，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括包含葡聚糖的第二交联多糖，其中所述第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度；和
将所选择的止血组合物施用到伤口部位。
11.根据权利要求11所述的方法，其中所述止血组合物根据期望的膨胀能力进行选择。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自包含选自下述的相应交联剂：二缩水甘油醚、环氧氯丙烷、二异氰酸酯、二羧酸氯化物、二羧酸、酸酐、聚(d，1-乳酸)、柠檬酸、甘油、二醛、二酰氯和环氧化物。
13.根据权利要求13所述的方法，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物在相应交联剂的量和类型中的至少一者上彼此不同。
14.根据权利要求11所述的方法，其中所述止血组合物根据选自反应时间、反应温度及其组合的反应参数进行选择。
15.根据权利要求11所述的方法，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自具有约38％至约1600％的膨胀能力。
16.根据权利要求11所述的方法，其中所述第二止血组合物被配置成比第一止血组合物吸收更少的流体。
17.根据权利要求11所述的方法，其中所选择的止血组合物以粉末形式施用。
18.根据权利要求11所述的方法，其中在被施用到伤口部位之前，所述第一止血组合物和第二止血组合物中任一种与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。
19.根据权利要求11所述的方法，其中至少一种选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的添加剂与所选择的止血组合物一起施用。
具体实施方式
图1为显示根据本发明的一个实施方案交联的β-环糊精聚合物的吸水动力学的图。
图2为显示根据本发明的实施方案FLOSEAL和G-25、G-50、G-75交联的葡聚糖基聚合物的吸水动力学的图。
图3为显示根据本发明的实施方案由亲水性聚合物的吸水引起的膨胀程度相对于其交联度的图。
详细说明
本发明提供包含止血组合物套装的治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述止血组合物套装至少包括(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖。所述止血组合物可以根据期望的膨胀能力进行选择。例如，可以通过交联度的变化来控制吸水和膨胀的程度。
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与如本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。以下参考文献提供在本发明中使用的许多术语的一般定义的一种技巧：Singleton等人，微生物学与分子生物学词典(DICTIONARY OFMICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY)(第2版，1994)；剑桥科技词典(THE CAMBRIDGEDICTIONARY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY)(Walker编著，1988)；遗传学词汇(THEGLOSSARY OF GENETICS)第5版，R.Rieger等人(编著)，Springer Verlag(1991)；和Hale&Marham，哈珀·柯林斯生物学词典(THE HARPER COLLINS DICTIONARY OF BIOLOGY)(1991)。
如在本发明和所属权利要求中使用的，除非上下文另有明确的规定，否则不带具体数量的指称物包括复数指称物以及单数指称物。
除非另有规定，否则如本文使用的以下术语具有赋予它们的含义。
术语“约”或“大约”指由本领域普通技术人员确定的具体值的可接受误差，其部分取决于如何测量或确定该值。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”指在1、2、3或4个标准偏差之内。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”指在给定值或范围的30％、25％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％之内。每当术语“约”或“大约”在一系列两个或多个数值中的第一个数值之前时，应当理解术语“约”或“大约”适用于该系列中的每个数值。
“止血组合物”指用于停止或减少由损伤或手术引起的出血和/或促进凝血级联的组合物。“可流动的”组合物或“水凝胶”指基本上液体的稍粘稠溶液、固体、半固体、假塑性或含有水性组分的塑性结构，以产生具有能够通过注射器或其它装置流动并施用到受试者的性质的凝胶状或胶冻状的团块或糊状溶液。所述可流动的水凝胶在室温和体温下是液体状、稍粘稠溶液或糊状溶液。在一些实施方案中，可流动的组合物是当通过注射器或其它装置挤出以施用到受试者时保持形状的组合物。
本发明的治疗伤口的吸收剂试剂盒包括止血组合物套装，所述止血组合物套装至少包括(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖。环糊精具有三种类型：α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精。α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精分别由六个、七个和八个α-(1，4)-连接的葡萄糖单体组成。就性质而言，环糊精具有亲水性外表面和亲脂性中央腔。在一些实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以包括交联的β-环糊精。在一些实施方案中，第一和第二止血组合物中至少一种包括交联的葡聚糖。葡聚糖具有3-2000千道尔顿的链长。
在一些实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以通过羧基交联形成凝胶分子，其容易能够伴随膨胀进行极性流体吸收。在一些实施方案中，交联剂选自：二缩水甘油醚、环氧氯丙烷、二异氰酸酯、二羧酸氯化物、二羧酸、酸酐、聚(d，1-乳酸)、柠檬酸、甘油、二醛、二酰氯和环氧化物。
在一些实施方案中，治疗伤口的吸收剂试剂盒可以包括至少一种选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的添加剂。在一些实施方案中，第一和第二止血组合物中任一种可以与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。
在一些实施方案中，第一和第二止血组合物各自可以是粉末形式。在一些实施方案中，粉末止血组合物中包含的大部分颗粒(例如，多于50％w/w，多于80％w/w，或多于90％w/w)可以具有10至1000μm、50至800μm、50至700μm、150至700μm、200至700μm、300至550μm、或350至550μm的粒径。所述止血组合物以粉末形式可以甚至在高温(例如，超过20℃，超过30℃，或者甚至超过40℃)下长时间储存稳定。在一些实施方案中，所述止血组合物具有低于15％(w/w)、低于10％(w/w)、低于5％(w/w)、或低于1％(w/w)的含水量。
在一些实施方案中，所述治疗伤口的吸收剂试剂盒可以包括用于第一和第二止血组合物中任一种的重构的可药用稀释剂。根据本发明的粉末止血组合物在暴露于流体(即，可药用稀释剂)时可以快速膨胀，并且以该膨胀形式，能够有助于形成可施用到伤口部位的可流动的糊剂。在一些实施方案中，可药用稀释剂为水溶液，并且可含有选自NaCl、CaCl2、乙酸钠、乳酸钠、柠檬酸钠、癸酸钠和甘露醇的物质。例如，可药用稀释剂包含注射用水，和-各自独立地-50至200mM的NaCl(例如，150mM)、10至80mM CaCl2(例如，40mM)、1至50mM乙酸钠(例如，20mM)和至多10％w/w的甘露醇(例如，2％w/w)。在一些实施方案中，稀释剂也可以包括缓冲液或缓冲体系，以便将重构的干燥组合物的pH缓冲为例如3.0至10.0的pH、6.4至7.5的pH或6.9至7.1的pH。
在一些实施方案中，第一和第二止血组合物各自都是吸收液体的。例如，当与液体例如水溶液或悬浮液(特别是缓冲液或血液)接触时，止血组合物吸收液体，将根据水化程度显示膨胀度。根据特定止血组合物的使用要求或偏好，止血组合物可以具有按重量计约38％至约1600％、约300％至约1600％、约400％至约1300％、约500％至约1100％、或约600％至约900％的膨胀能力。这样的平衡膨胀可以例如通过改变交联度来控制，所述改变交联度进而通过改变交联条件例如交联剂的类型、交联剂的暴露持续时间、交联剂的浓度、交联温度等来实现。
具有不同平衡膨胀值的物质在不同的应用中表现不同。在一些实施方案中，止血组合物可以根据期望的膨胀能力进行选择。在一些实施方案中，可以根据选自反应时间、反应温度及其组合的反应参数进行选择止血组合物。控制交联和平衡膨胀的能力使本发明的组合物最佳地用于多种用途：虽然快速膨胀在某些应用(例如，神经手术应用)中可能不期望，但是在外伤/军事型(military-type)伤口中可能是期望的。
本发明进一步提供一种治疗伤口的方法。所述方法包括从止血组合物套装中选择止血组合物，所述止血组合物套装至少包含(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第一交联多糖，其中所述第一止血组合物具有第一交联度，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括选自环糊精和葡聚糖的第二交联多糖，其中所述第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度。将所选择的止血组合物施用到伤口部位。
尽管在某些实施方案中，干燥的组合物可以直接施用于目标部位(和任选地，如有必要，在目标部位处与可药用稀释剂接触)，但设想了在施用到目标部位之前使干燥的止血组合物与可药用稀释剂接触，以便获得湿的形式(例如，水凝胶形式)的可流动的止血组合物。在一些实施方案中，在施用到伤口部位之前，可以将第一和第二止血组合物中任一种与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。在一些实施方案中，选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的至少一种添加剂可以与所选择的止血组合物一起施用。一旦施用于伤口，根据本发明的止血的交联多糖聚合物形成有效基质，所述有效基质可以形成血流屏障。特别地，止血聚合物的膨胀性质可以使其成为有效抑制出血和再出血过程的机械屏障。
以下是根据本发明的止血组合物的非限制性实例。本领域普通技术人员应当理解，在仅由权利要求书限定的本发明的范围之内，以下实施例的变化是可能的。
实施例1
将β-环糊精引入到不同交联密度的交联聚合物网络中。为了获得高交联度，将约10g的β-环糊精与约10ml的环氧氯丙烷混合，并加热至约90℃，同时在装有约20cm长反向冷凝器的200ml三颈烧瓶中搅拌。慢慢地滴加50％的氢氧化钠溶液，得到带白色的沉淀物。继续在强搅拌下加热约2小时。在冷却至室温之后，从烧瓶中用匙舀出胶凝的聚合物，首先在布氏漏斗上用蒸馏水反复洗涤，之后用丙酮洗涤，并在真空烘箱中在-30torr和50℃下干燥过夜。产率为按重量计80％。
使用β-环糊精与聚丙二醇二缩水甘油醚PEG-DGE交联剂(分子量＝380a.u.)获得了低交联度。将约8g的β-环糊精与20ml的50％氢氧化钠混合，并加热至约130℃，同时在装有约20cm-长反向冷凝器的200ml三颈烧瓶中搅拌。在达到130℃之后，在强搅拌下滴加20ml的PEG-DGE。在130℃下搅拌沉淀物约2小时以上，并加入约3ml的三乙胺。将混合物静置搅拌过夜。在冷却至室温之后，得到胶凝力强的凝胶(rubbery gel)。通过在布氏漏斗上反复洗涤除去浅褐色部分。产率为按重量计62％。
使用热机械分析(TMA)测量由于流体吸收引起的膨胀来监测流体吸收的动力学。通过TMA测量在限定的圆柱体积中树脂的膨胀作为在向树脂中加入水之后时间的函数，获得膨胀动力学。图1中显示的实验结果列出了在β-环糊精中膨胀水平和交联度之间的下述关系：高交联度的环氧氯丙烷引起的膨胀较少，而低交联度的二缩水甘油醚引起膨胀更大。这样的多种膨胀性质可以是期望的，能够使临床人员针对伤口深度和类型选择特定的吸收剂/密封剂。
实施例2
在具有一定范围的交联密度的一系列亲水性聚合物中检测吸水动力学和膨胀的程度。测试来自GE Healthcare的
表1：材料吸水后的膨胀
材料
膨胀(％)
G-10
40.94
G-25
744.9
G-50
1227
G-75
1650
FloSeal
216
交联的葡聚糖聚合物相对于FloSeal的吸水率增加是出人预料的和令人惊奇的。特别地，在G-50、G-75交联的葡聚糖基聚合物中，分别得到744.9％、1227％和1650％的膨胀。相反，当使用FloSeal时，膨胀显著减少-为216％。某些交联的葡聚糖聚合物的增加的吸水率可以是快速治疗出血伤口所期望的。
本文公开的具体实施方案可以在权利要求书中使用“由...组成”或“基本上由...组成”的语言进一步限制。当用于权利要求书中时，无论是按提交案提出还是按修正案提出，过渡术语“由...组成”排除了权利要求书中没有指定的任何要素、步骤或成分。过渡术语“基本上由...组成”将权利要求的范围限制于指定的材料或步骤，和不会本质上影响基本和新的特征的材料或步骤。如此要求保护的本发明的实施方案在本文中被固有地或明确地描述和启用。
应当理解，本文公开的本发明的实施方案说明了本发明的原理。可以使用在本发明的范围之内的其它修改。因此，举例来说，但不是限制性的，可以根据本文的教导使用本发明的替代性配置。因此，本发明不限于所精确显示和描述的内容。
虽然本发明已经在本文中通过参照各种具体材料、程序和实施例进行了描述和说明，但是应当理解本发明不限于为此目的选择的材料和程序的具体组合。如本领域那些技术人员应当了解的，可能暗含着这样的细节的许多变化。意图是说明书和实施例仅被视为示例性的，本发明的真实范围和精神由以下权利要求书指示。将本申请中提及的所有参考文献、专利和专利申请全文通过引用并入本文中。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述试剂盒包含：
止血组合物套装，所述止血组合物套装至少包括(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括包含葡聚糖的第一交联多糖，其中所述第一止血组合物具有第一交联度，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括包含葡聚糖的第二交联多糖，其中所述第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度。
2.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自为粉末形式。
3.根据权利要求3所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述试剂盒包含用于第一止血组合物和第二止血组合物中任一种的重构的可药用稀释剂。
4.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自包含选自下述的相应交联剂：二缩水甘油醚、环氧氯丙烷、二异氰酸酯、二羧酸氯化物、二羧酸、酸酐、聚(d，1-乳酸)、柠檬酸、甘油、二醛、二酰氯和环氧化物。
5.根据权利要求5所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物在相应交联剂的量和类型中的至少一者上彼此不同。
6.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自具有约38％至约1600％的膨胀能力。
7.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第二止血组合物被配置成比第一止血组合物吸收更少的流体。
8.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，所述试剂盒包含至少一种选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的添加剂。
9.根据权利要求1所述的治疗伤口的吸收剂试剂盒，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物中任一种与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。
10.一种治疗伤口的方法，所述方法包括：
从止血组合物套装中选择止血组合物，所述止血组合物套装至少包含(1)第一止血组合物，所述第一止血组合物包括包含葡聚糖的第一交联多糖，其中所述第一止血组合物具有第一交联度，和(2)第二止血组合物，所述第二止血组合物包括包含葡聚糖的第二交联多糖，其中所述第二止血组合物具有比第一交联度更高的第二交联度；和
将所选择的止血组合物施用到伤口部位。
11.根据权利要求11所述的方法，其中所述止血组合物根据期望的膨胀能力进行选择。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自包含选自下述的相应交联剂：二缩水甘油醚、环氧氯丙烷、二异氰酸酯、二羧酸氯化物、二羧酸、酸酐、聚(d，1-乳酸)、柠檬酸、甘油、二醛、二酰氯和环氧化物。
13.根据权利要求13所述的方法，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物在相应交联剂的量和类型中的至少一者上彼此不同。
14.根据权利要求11所述的方法，其中所述止血组合物根据选自反应时间、反应温度及其组合的反应参数进行选择。
15.根据权利要求11所述的方法，其中所述第一止血组合物和第二止血组合物各自具有约38％至约1600％的膨胀能力。
16.根据权利要求11所述的方法，其中所述第二止血组合物被配置成比第一止血组合物吸收更少的流体。
17.根据权利要求11所述的方法，其中所选择的止血组合物以粉末形式施用。
18.根据权利要求11所述的方法，其中在被施用到伤口部位之前，所述第一止血组合物和第二止血组合物中任一种与至少一种选自下述的试剂混合：凝血因子、纤维蛋白、防腐剂、抗微生物剂、维生素、微量营养素、抗生素剂和抗真菌剂。
19.根据权利要求11所述的方法，其中至少一种选自水溶性抗微生物药物、酶和生长因子试剂的添加剂与所选择的止血组合物一起施用。