一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物及其制备方法
阅读说明：本技术 一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物及其制备方法 (Blueberry active ingredient embedding substance capable of improving bioavailability and preparation method thereof ) 是由 吴元锋 孙娟 许子艺 关荣发 邹礼根 汪娟 马全民 于 2020-06-15 设计创作，主要内容包括：一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物及其制备方法,属于植物中天然成分提取和包埋技术领域。包括：(1)蓝莓粉碎,热回流浸提,收集第一次上清液和第一次滤渣；(2)第一次滤渣酸化乙醇溶液浸提,收集第二次上清液和第二次滤渣；(3)第二次滤渣乙酸乙酯浸提,收集第三次上清液；(4)第一、二和三次上清液分别真空浓缩；(5)第一次浓缩液真空冷冻干燥,得干燥粉末A,第二和三次浓缩液混合包埋后真空冷冻干燥,得干燥粉末B；(6)将干燥粉末A、干燥粉末B、微晶纤维素、甘露醇、柠檬酸和硬脂酸镁充分混合压片,得到高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物。本发明根据蓝莓活性物极性不同,分段提取,分段包埋,有效提高其生物利用度。(A blueberry active ingredient inclusion compound for improving bioavailability and a preparation method thereof belong to the technical field of natural ingredient extraction and embedding in plants. The method comprises the following steps: (1) crushing blueberries, extracting under hot reflux, and collecting primary supernatant and primary filter residue; (2) leaching the first filter residue by using an acidified ethanol solution, and collecting second supernatant and second filter residue; (3) leaching the second filter residue by ethyl acetate, and collecting the supernatant of the third time; (4) respectively vacuum concentrating the first, second and third supernatants; (5) vacuum freeze drying the first concentrated solution to obtain dry powder A, mixing and embedding the second concentrated solution and the third concentrated solution, and vacuum freeze drying to obtain dry powder B; (6) and fully mixing and tabletting the dry powder A, the dry powder B, the microcrystalline cellulose, the mannitol, the citric acid and the magnesium stearate to obtain the blueberry active ingredient embedded substance with high bioavailability. According to the invention, the blueberry active substances have different polarities, and are extracted in a segmented manner and embedded in a segmented manner, so that the bioavailability of the blueberry active substances is effectively improved.)
技术领域
本发明属于植物中天然成分提取和包埋技术领域，具体涉及一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物及其制备方法。
背景技术
蓝莓又名越橘，杜鹃花科越橘属植物。蓝莓具有良好的口感，还有显著的营养和健康促进作用，这是由于蓝莓的营养非常丰富，富含花色苷、原花青素、黄酮类、超氧化物歧化酶（SOD）、熊果酸、糖、酸、脂类、蛋白质、维生素和矿物质元素等营养及功能成分。到目前为止，已经从蓝莓中鉴定出 15种花色苷、20 种黄酮醇及其糖苷、19种酚酸、6种原花青素、5种糖类、12种有机酸、67种挥发性香气成分。蓝莓活性物的提取方法有浸提法、酶解法、超声波提取法、微波辅助萃取法等，常用的浸提溶剂有甲醇、乙醇、水等。这些活性物常用的包埋壁材有大豆分离蛋白、麦芽糊精、***胶、乙基纤维素等，但由于蓝莓活性物很多，极性差别很大，很难用一种溶剂将众多活性物提取出来，用一种包埋物来包埋的效果也不理想。
活性物质的生物利用度主要取决于3个因素：生物可及性、吸收率和生物转化率。生物可及性受到活性物质从食物基质中释放和在胃液中的溶解性的影响。蓝莓中的一些成分如花色苷、黄酮醇苷、酚酸等具有较好的溶解度，但是另外一些成分如矢车菊素等花青素、荭草素等黄酮醇、原花青素等水溶性都非常差，极大地限制了其生物利用度。目前蓝莓提取和工艺中，往往只考虑到通过一种提取工艺获得一种有效成分或营养物质，然后用一种包埋工艺进行包埋。而且在提取、包埋时一般只考虑抗氧化活性、稳定性等，但是很少考虑其生物利用度，因此提供一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物及其制备方法非常有必要。
发明内容
针对上述现有技术中存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物及其制备方法。本发明根据蓝莓活性物极性不同，分段提取，分段包埋，有效提高其生物利用度。
一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物，其特征在于通过以下步骤制备得到：
（1）将干燥蓝莓粉碎至30～60目，混匀，以蒸馏水为溶媒进行热回流浸提，浸提后冷却至室温，板框压滤，分别收集第一次上清液和第一次滤渣；
（2）将步骤（1）得到的第一次滤渣采用酸化乙醇溶液浸提，浸提完成后冷却至室温，板框压滤，分别收集第二次上清液和第二次滤渣；
（3）将步骤（2）得到的第二次滤渣用乙酸乙酯浸提，浸提完成后冷却至室温，板框压滤，分别收集第三次上清液；
（4）将步骤（1）得到的第一次上清液真空浓缩至比重为1.20～1.40 g/ml，得到第一次浓缩液，将步骤（2）得到的第二次上清液真空浓缩至比重为0.95～1.10 g/ml，得到第二次浓缩液，将步骤（3）得到的第三次上清液真空浓缩至比重为1.08～1.26 g/ml，得到第三次浓缩液，备用；
（5）在第一次浓缩液中以重量比1:0.6-0.8加入麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末A，将第二次浓缩液和第三次浓缩液混合，以重量比1:0.3-0.4称取羟丙基-β-环糊配制成饱和水溶液，搅拌混合，超声后室温下静置，板框压滤，收集滤液，再以重量比1:0.3-0.4加入麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末B；
（6）将干燥粉末A、干燥粉末B、微晶纤维素、甘露醇、柠檬酸和硬脂酸镁充分混合，压片，得到高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物。
所述的一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物，其特征在于所述步骤（1）中热回流浸提条件为：温度70～90℃，时间100～140min/次，浸提料液比1:8～1:10w/v。
所述的一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物，其特征在于所述步骤（2）中酸化乙醇溶液通过冰乙酸将50%-70%乙醇的pH调节至2.5～3.5制备得到，酸化乙醇溶液浸提条件为：浸提温度70～90℃，浸提时间100～140min/次，浸提料液比1:5～1:7w/v。
所述的一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物，其特征在于所述步骤（3）中乙酸乙酯浸提条件为：浸提温度70～90℃，浸提时间100～140min/次，浸提料液比1:3～1:5w/v。
一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）将干燥蓝莓粉碎至30～60目，混匀，以蒸馏水为溶媒进行热回流浸提，浸提后冷却至室温，板框压滤，分别收集第一次上清液和第一次滤渣；
（2）将步骤（1）得到的第一次滤渣采用酸化乙醇溶液浸提，浸提完成后冷却至室温，板框压滤，分别收集第二次上清液和第二次滤渣；
（3）将步骤（2）得到的第二次滤渣用乙酸乙酯浸提，浸提完成后冷却至室温，板框压滤，分别收集第三次上清液；
（4）将步骤（1）得到的第一次上清液真空浓缩至比重为1.20～1.40 g/ml，得到第一次浓缩液，将步骤（2）得到的第二次上清液真空浓缩至比重为0.95～1.10 g/ml，得到第二次浓缩液，将步骤（3）得到的第三次上清液真空浓缩至比重为1.08～1.26 g/ml，得到第三次浓缩液，备用；
（5）在第一次浓缩液中以重量比1:0.6-0.8加入麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末A，将第二次浓缩液和第三次浓缩液混合，以重量比1:0.3-0.4称取羟丙基-β-环糊配制成饱和水溶液，搅拌混合，超声后室温下静置，板框压滤，收集滤液，再以重量比1:0.3-0.4加入麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末B；
（6）将干燥粉末A、干燥粉末B、微晶纤维素、甘露醇、柠檬酸和硬脂酸镁充分混合，压片，得到高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物。
所述的一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物的制备方法，其特征在于所述步骤（1）中热回流浸提条件为：温度70～90℃，时间100～140min/次，浸提料液比1:8～1:10w/v。
所述的一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物的制备方法，其特征在于所述步骤（2）中酸化乙醇溶液通过冰乙酸将50%-70%乙醇的PH调节至2.5～3.5制备得到。
所述的一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物的制备方法，其特征在于所述步骤（2）中酸化乙醇溶液浸提条件为：浸提温度70～90℃，浸提时间100～140min/次，浸提料液比1:5～1:7w/v。
所述的一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物的制备方法，其特征在于所述步骤（3）中乙酸乙酯浸提条件为：浸提温度70～90℃，浸提时间100～140min/次，浸提料液比1:3～1:5w/v。
所述的一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物的制备方法，其特征在于所述步骤（5）中羟丙基-β-环糊精包合的方法具体包括以下步骤：
（a）取羟丙基-β-环糊精溶于水中，得到羟丙基-β-环糊精饱和溶液；
（b）将第一次浓缩液和第二次浓缩液混合后，缓慢加入到羟丙基-β-环糊精饱和溶液中，期间不断搅拌；
（c）超声20min，室温下静置24h后，板框压滤，收集滤液。
本发明具有的有益效果：本发明根据蓝莓活性物极性不同，分段提取，分段包埋，有效提高其生物利用度。
具体实施方式
以下将通过实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：
（1）1kg干燥的蓝莓原料粉碎至30～40目后，混匀，用9L蒸馏水做溶媒进行热回流浸提，浸提温度为80℃，浸提时间120 min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第一次上清液和第一次滤渣。
（2）取70%乙醇6L，用冰乙酸调pH至2.5，第一次滤渣用酸化乙醇溶液浸提，浸提温度为90℃，浸提时间120min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第二次上清液和第二次滤渣。
（3）第二次滤渣用4L乙酸乙酯浸提，浸提温度为80℃，浸提时间120min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第三次上清液。
（4）将第一次上清液真空浓缩至比重为1.40 g/ml，得到第一次浓缩液，将第二次上清液真空浓缩至比重为1.05g/ml，得到第二次浓缩液，将第三次上清液真空浓缩至比重为1.16 g/ml，得到第三次浓缩液，备用。
（5）在第一次浓缩液中加入200 g麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末A；70gHP-β-CD溶于水，得到饱和溶液，将第二次浓缩液和第三次浓缩液混合，缓慢加入到HP-β-CD饱和溶液中，期间不断搅拌，超声20min，室温下静置24h后，板框压滤，收集滤液，再加入100 g麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末B。
（6）将干燥粉末A、干燥粉末B、微晶纤维素、甘露醇、柠檬酸、和硬脂酸镁充分混合，压片，得到522 g高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物。
（7）与单独用水提取相比，分段提取、分段包埋后总酚和黄酮含量分别增加了21%、11%，DPPH自由基清除能力提高了30%；与单独用酸性乙醇提取相比，分段提取、分段包埋后总酚和黄酮含量分别增加了38%、18%，DPPH自由基清除能力提高了26%，提高了生物利用度。
实施例2：
（1）1kg干燥的蓝莓原料粉碎至50～60目后，混匀，用8L蒸馏水做溶媒进行热回流浸提，浸提温度为70℃，浸提时间140 min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第一次上清液和第一次滤渣。
（2）取50%乙醇6L，用冰乙酸调pH至3.5，第一次滤渣用酸化乙醇溶液浸提，浸提温度为70℃，浸提时间140min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第二次上清液和第二次滤渣。
（3）第二次滤渣用4L乙酸乙酯浸提，浸提温度为70℃，浸提时间100min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第三次上清液。
（4）将第一次上清液真空浓缩至比重为1.20 g/ml，得到第一次浓缩液，将第二次上清液真空浓缩至比重为0.95g/ml，得到第二次浓缩液，将第三次上清液真空浓缩至比重为1.08 g/ml，得到第三次浓缩液，备用。
（5）在第一次浓缩液中加入200 g麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末A；70gHP-β-CD溶于水，得到饱和溶液，将第二次浓缩液和第三次浓缩液混合，缓慢加入到HP-β-CD饱和溶液中，期间不断搅拌，超声20min，室温下静置24h后，板框压滤，收集滤液，再加入100 g麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末B。
（6）将干燥粉末A、干燥粉末B、微晶纤维素、甘露醇、柠檬酸、和硬脂酸镁充分混合，压片，得到543g高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物。
（7）与单独用水提取相比，分段提取、分段包埋后总酚和黄酮含量分别增加了24%、12%，DPPH自由基清除能力提高了21%；与单独用酸性乙醇提取相比，分段提取、分段包埋后总酚和黄酮含量分别增加了36%、19%，DPPH自由基清除能力提高了28%，提高了生物利用度。
实施例3：
（1）1kg干燥的蓝莓原料粉碎至40～50目后，混匀，用10L蒸馏水做溶媒进行热回流浸提，浸提温度为90℃，浸提时间100 min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第一次上清液和第一次滤渣。
（2）取60%乙醇6L，用冰乙酸调pH至3.0，第一次滤渣用酸化乙醇溶液浸提，浸提温度为80℃，浸提时间100min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第二次上清液和第二次滤渣。
（3）第二次滤渣用4L乙酸乙酯浸提，浸提温度为90℃，浸提时间140min，浸提后冷却至室温，板框压滤，收集第三次上清液。
（4）将第一次上清液真空浓缩至比重为1.30 g/ml，得到第一次浓缩液，将第二次上清液真空浓缩至比重为1.10g/ml，得到第二次浓缩液，将第三次上清液真空浓缩至比重为1.26 g/ml，得到第三次浓缩液，备用。
（5）在第一次浓缩液中加入200 g麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末A；70gHP-β-CD溶于水，得到饱和溶液，将第二次浓缩液和第三次浓缩液混合，缓慢加入到HP-β-CD饱和溶液中，期间不断搅拌，超声20min，室温下静置24h后，板框压滤，收集滤液，再加入100 g麦芽糊精，搅拌均匀后进行真空冷冻干燥，得到干燥粉末B。
（6）将干燥粉末A、干燥粉末B、微晶纤维素、甘露醇、柠檬酸、和硬脂酸镁充分混合，压片，得到558 g高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物。
（7）与单独用水提取相比，分段提取、分段包埋后总酚和黄酮含量分别增加了19%、12%，DPPH自由基清除能力提高了23%；与单独用酸性乙醇提取相比，分段提取、分段包埋后总酚和黄酮含量分别增加了35%、21%，DPPH自由基清除能力提高了22%，提高了生物利用度。