一种沉香属植物结香促进剂及其制备方法与应用
阅读说明：本技术 一种沉香属植物结香促进剂及其制备方法与应用 (Aquilaria plant edgeworthia chrysantha promoter as well as preparation method and application thereof ) 是由 戚怡 于丰彦 杨懋勋 童玉珍 郑桂泉 于 2021-07-19 设计创作，主要内容包括：本发明属于沉香结香技术领域,公开了一种沉香属植物结香促进剂及其制备方法与应用。该沉香属植物结香促进剂包括以下组分：沉香水溶性提取物,植物乳杆菌菌液,糖类和有机酸。本发明将沉香水溶性提取物及植物乳杆菌种作为沉香属植物结香促进剂主要原料,既有较好的生物相容性,又避免了沉香中重金属或其它有毒害化学药剂的残留以及沉香属植物正常生长代谢严重受阻现象,该结香促进剂绿色环保、安全可靠。(The invention belongs to the technical field of aquilaria resinifera and discloses an aquilaria resinifera growth promoter, and a preparation method and application thereof. The agarwood plant edgeworthia chrysantha promoter comprises the following components: agilawood water-soluble extract, lactobacillus plantarum bacterial liquid, saccharides and organic acid. The agilawood accelerator disclosed by the invention takes the agilawood water-soluble extract and the plant lactobacillus species as the main raw materials of the agilawood plant edgeworthia gargaritifera promoter, so that the biocompatibility is better, the residues of heavy metals or other toxic chemical agents in agilawood and the phenomenon that the normal growth and metabolism of the agilawood plant are seriously hindered are avoided, and the agilawood accelerator is green, environment-friendly, safe and reliable.)
技术领域
本发明属于沉香结香技术领域，具体涉及一种沉香属植物结香促进剂及其制备方法与应用。
背景技术
沉香是享誉世界的名贵香药，多种沉香属植物为获得沉香药材的原植物，在我国主要的沉香药材来源植物主要是白木香(Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg)。沉香属植物自然结香周期长，结香机率低，多采用人工结香法获得沉香。输液法促进沉香属植物结香是目前沉香行业的主流技术手段，而结香促进剂是直接影响输液法获得沉香属植物结香的主要因素，沉香行业现有的结香促进剂存在重金属或其它有毒害化学药剂残留、结香促进剂输入导致沉香属植物正常生长代谢严重受阻、促进结香获得的沉香醇溶性浸出物、沉香四醇等国家药典规定的检测指标不高等问题。
沉香精油(挥发油)是沉香挥发性药效的主要成分，是当前沉香药材深加工行业的一个重要的产品形态。当前，沉香精油的制备既有传统的水蒸气蒸馏等方法，也有目前应用广泛的超临界萃取等新型技术方法，但均存在一个问题，即提取完精油后的提取物很多时候直接丢弃，该提取物主要是沉香药材里的非挥发性成分，不进行进一步利用而直接丢弃造成资源浪费。
国内外许多学者研究发现天然沉香的形成与真菌的诱导有密切联系，研究发现，某些真菌能够诱导沉香属植物产生沉香。植物乳杆菌是乳酸菌的一种，是发酵食品常用的发酵菌种之一，目前未见将植物乳杆菌用于沉香结香的报道。
发明内容
本发明第一方面的目的，在于提供一种沉香属植物结香促进剂。
本发明第二方面的目的，在于提供第一方面的沉香属植物结香促进剂的制备方法。
本发明第三方面的目的，在于提供第一方面的沉香属植物结香促进剂在沉香属植物结香中的应用。
本发明第四方面的目的，在于提供一种沉香结香方法。
本发明第五方面的目的，在于提供一种沉香。
本发明第六方面的目的，在于提供第五方面的沉香在制备产品中的应用。
本发明第七方面的目的，在于提供一种沉香精油。
为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：
本发明的第一个方面，提供一种沉香属植物结香促进剂，包括以下组分：沉香水溶性提取物，植物乳杆菌菌液，糖类和有机酸。
优选地，所述沉香属植物结香促进剂，以重量百分比计，包括：沉香水溶性提取物5％-30％，植物乳杆菌菌液5％-15％，糖类2％-8％和有机酸0.5％-3％。
进一步优选地，所述沉香属植物结香促进剂，以重量百分比计，包括：沉香水溶性提取物10％-30％，植物乳杆菌菌液5％-10％，糖类2％-5％和有机酸1％-3％。
更进一步优选地，所述沉香属植物结香促进剂，以重量百分比计，包括：沉香水溶性提取物20％-30％，植物乳杆菌菌液5％-8％，糖类3％-5％和有机酸1％-1.5％。
优选地，所述沉香水溶性提取物的制备方法为：将提取精油后的沉香与水混合，浸提，即得到沉香水溶性提取物。
优选地，所述沉香与水的质量体积比(g/mL)为1：(10-20)。
进一步优选地，所述沉香与水的质量体积比(g/mL)为1：(10-15)。
优选地，所述浸提的温度为90-100℃。
优选地，所述浸提的时间为8-10h。
优选地，所述植物乳杆菌菌液的制备方法为：将植物乳杆菌接种至培养基中，培养，得到植物乳杆菌菌液。
进一步优选地，所述培养基为MRS培养基。
进一步优选地，所述培养的温度为30-40℃。
更进一步优选地，所述培养的温度为35-37℃。
进一步优选地，所述培养的时间为15-25h。
进一步优选地，所述植物乳杆菌菌液培养至菌液浓度为2×108-6×108CFU/mL。
优选地，所述糖类为白砂糖、葡萄糖和蔗糖中的一种或多种。
优选地，所述有机酸为柠檬酸、酒石酸、乙酸、丁二酸和草酸中的一种或多种。
优选地，所述沉香属植物结香促进剂还包括水，水的含量为余量。
本发明第二方面，提供本发明第一方面的沉香属植物结香促进剂的制备方法，包括以下步骤：将沉香水溶性提取物、糖类、植物乳杆菌菌液、有机酸和水混合，即得到结香促进剂。
优选地，所述沉香水溶性提取物混合前进行干燥。
进一步优选地，所述沉香水溶性提取物干燥的条件为：60-80℃条件下进行烘干。
本发明第三方面，提供本发明第一方面的沉香属植物结香促进剂在沉香属植物结香中的应用。
优选地，所述沉香属植物选自白木香、云南沉香和毛沉香中的一种。
进一步优选地，所述沉香属植物为白木香。
本发明第四方面，提供一种沉香结香方法，将本发明第一方面所述的沉香属植物结香促进剂添加至沉香属植物内。
优选地，采用输液法将本发明第一方面的沉香属植物结香促进剂输入沉香属植物内。
优选地，采用瓶注法或瓶插法将本发明第一方面的沉香属植物结香促进剂注入到沉香属植物内。
本发明第五方面，提供一种沉香，通过本发明第四方面所述的沉香结香方法得到。
优选地，所述沉香的乙醇提取物含量为50.0％-60％。
进一步优选地，所述沉香的乙醇提取物含量为57.76-60％。
优选地，所述沉香的沉香四醇含量为1.0％-2.0％。
进一步优选地，所述沉香的沉香四醇含量为1.13％-2.0％。
本发明第六方面，提供第五方面所述的沉香在制备产品中的应用。
优选地，所述产品包括药品、精油、食品、化妆品、日化品和工艺品。
进一步优选地，所述工艺品为笔筒、串珠和木头雕刻摆件等行业常规工艺品。
本发明第七方面，提供一种沉香精油，由第五方面所述的沉香提炼而成。
优选地，所述沉香精油的沉香螺旋醇含量为1％-5％。
进一步优选地，所述沉香精油的沉香螺旋醇含量为2.16％-5％。
优选地，所述沉香精油的苄基丙酮含量为0.1％-0.5％。
进一步优选地，所述沉香精油的苄基丙酮含量为0.29％-0.5％。
优选地，所述沉香精油的白木香醛含量为7％-10％。
进一步优选地，所述沉香精油的白木香醛含量为8.35％-10％。
优选地，所述沉香精油的绒白乳菇醛含量为11％-15％。
进一步优选地，所述沉香精油的绒白乳菇醛含量为12.11％-15％。
优选地，所述沉香精油的烯类含量为10％-13.5％。
进一步优选地，所述沉香精油的烯类含量为12％-13.5％。
优选地，所述沉香精油的油酸含量为10％-13％。
进一步优选地，所述沉香精油的油酸含量为10.62％-13％。
本发明的有益效果是：1、本发明将沉香水溶性提取物及植物乳杆菌作为沉香属植物结香促进剂主要原料，既有较好的生物相容性，又避免了沉香中重金属或其它有毒害化学药剂的残留以及沉香属植物正常生长代谢严重受阻现象，该沉香属结香促进剂绿色环保、安全可靠；2、本发明提供的沉香属植物结香促进剂，可以有效增加沉香树结香化学成分的生物量，提高结香成功率以及沉香的产量与品质；3、本发明提供的沉香属植物结香促进剂可以增加沉香精油中挥发性香气物质生物量，进而提高沉香精油品质。
附图说明
图1为将沉香属植物结香促进剂输入白木香的现场图。
图2为沉香属植物结香促进剂所产生沉香的宏观图。
具体实施方式
现结合具体实施例对本发明进行详细说明，但不限制本发明的范围。
本实施例中所使用的材料、试剂等，如无特别说明，为从商业途径得到的材料和试剂。其中，植物乳杆菌购买自中国微生物菌种查询网，平台编号：bio-60181，http://www.biobw.org/China-strain/bio-60181.html。
实施例1
一种沉香属植物结香促进剂，以重量百分比计，包括沉香水溶性提取物20％，植物乳杆菌菌液8％，白砂糖3％，食醋1.5％，纯净水67.5％；
沉香水溶性提取物的制备方法为：取25g提取精油后晒干的沉香粉末(沉香精油提取方法参考专利文献“沉香精油的蒸馏生产方法及设备”申请号CN201610212220.X实施例1，步骤2蒸馏锅内残留的沉香碎片为本发明所用的沉香粉末)与蒸馏水(料液质量体积比为1:10)混合，95-100℃浸提8h，采用三层纱布过滤，即得沉香水溶性提取物；
植物乳杆菌菌液的制备方法为：将植物乳杆菌接种于MRS培养基中，在37℃厌氧培养箱中恒温培养18h，得到菌液浓度为3×108CFU/mL的植物乳杆菌菌液。
MRS培养基为：酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween 80 1.0g、K2HPO4 2.0g、MgSO4.7H2O 0.2g、MnSO4.H2O 0.05g、CaCO3 20.0g和琼脂15.0g，定容至1.0L，调节pH为6.8。
沉香属植物结香促进剂的制备方法，具体步骤如下：
将沉香水溶性提取物利用旋转蒸发仪(YRE-301型)蒸除水分后在60℃下进行烘干，加入白砂糖混合后粉碎至全部过100目，加入植物乳杆菌菌液、食醋和纯净水，充分混合得到沉香属植物结香促进剂。
实施例2
一种沉香属植物结香促进剂，以重量百分比计，包括沉香水溶性提取物30％，植物乳杆菌菌液10％，白砂糖5％，食醋3％，纯净水52％；
沉香水溶性提取物的制备方法为：取25g提取精油后晒干的沉香粉末(沉香精油提取方法参考专利文献“沉香精油的蒸馏生产方法及设备”申请号CN201610212220.X实施例1，步骤2蒸馏锅内残留的沉香碎片为本发明所用的沉香粉末)与蒸馏水(料液质量体积比为1:10)混合，95-100℃浸提8h，采用三层纱布过滤，即得沉香水溶性提取物；
植物乳杆菌菌液的制备方法为：将植物乳杆菌接种于MRS培养基中，在37℃厌氧培养箱中恒温培养21h，得到菌液浓度为4×108CFU/mL的植物乳杆菌菌液；
MRS培养基为：酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween 80 1.0g、K2HPO4 2.0g、MgSO4.7H2O 0.2g、MnSO4.H2O 0.05g、CaCO3 20.0g和琼脂15.0g，定容至1.0L，调节pH为6.8。
沉香属植物结香促进剂的制备方法，具体步骤如下：
将沉香水溶性提取物利用旋转蒸发仪(YRE-301型)蒸除水分后在60℃进行烘干，加入白砂糖混合后粉碎至全部过100目，加入植物乳杆菌菌液、食醋和纯净水，充分混合得到沉香属植物结香促进剂。
实施例3
一种沉香属植物结香促进剂，以重量百分比计，包括沉香水溶性提取物10％，植物乳杆菌菌液5％，白砂糖2％，食醋1％，纯净水82％；
沉香水溶性提取物的制备方法为：取25g提取精油后晒干的沉香粉末(沉香精油提取方法参考专利文献“沉香精油的蒸馏生产方法及设备”申请号CN201610212220.X实施例1，步骤2蒸馏锅内残留的沉香碎片为本发明所用的沉香粉末)与蒸馏水(料液质量体积比为1:10)混合，95-100℃浸提8h，采用三层纱布过滤，即得沉香水溶性提取物；
植物乳杆菌菌液的制备方法为：将植物乳杆菌接种于MRS培养基中，在37℃厌氧培养箱中恒温培养24h，得到菌液浓度为5×108CFU/mL的植物乳杆菌菌液；
MRS培养基为：酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween 80 1.0g、K2HPO4 2.0g、MgSO4.7H2O 0.2g、MnSO4.H2O 0.05g、CaCO3 20.0g和琼脂15.0g，定容至1.0L，调节pH为6.8。
沉香属植物结香促进剂的制备方法，具体步骤如下：
将沉香水溶性提取物利用旋转蒸发仪(YRE-301型)蒸除水分后在60℃下进行烘干，加入白砂糖混合后粉碎至全部过100目，加入植物乳杆菌菌液、食醋和纯净水，充分混合得到沉香属植物结香促进剂。
效果实施例
1.接种沉香属植物结香促进剂(输液法)
(1)选用在原地种植、树冠大、叶片茂盛、树皮完好且光照充的8年生的树干胸径12cm的白木香树(共2棵白木香树，其中1棵接种沉香结香促进剂，1棵不接种沉香属植物结香促进剂)。清理白木香树周围的遮光物、除草施肥(禽畜人粪便、花生麸等)一段时间，使白木香树生长旺盛并储存足够养分。
(2)开孔：在白木香的自根部到地上40cm处开孔，使用钻头为0.6mm规格的冲击钻，在树干中根据胸径不同钻出直径为0.7cm，深8cm的接种孔的钻孔，各打2个孔。
(3)输液：将实施例1制得的沉香属植物结香促进剂转入输液袋，悬挂于较高的树干上，再将输液针头插进在树上开好的孔中，使沉香属植物结香促进剂从输液袋经导管流进针头源源不断输入白木香树，并用保鲜膜包扎封口(如图1)，防止杂菌感染和昆虫、蚂蚁危害以及沉香剂流出和雨水冲刷。输液完成后，将针头从孔中拔出来，输液结束后十天内未观察到树叶掉落和树干死亡情况。
(4)护理：开孔一个月后利用禽畜人粪便、花生麸等对白木香进行施肥、半年后追肥，同时注意防虫。
(5)采收沉香：人工促进结香处理后12个月可以采收沉香。采收沉香前，在采收的树干或树枝上一处或多处，部分截断或完全截断韧皮部筛管通道，从而减少营养物质向根系输送，使营养物质积累在采收部位，显著提高沉香的品质；采收时选取带有芳香性树脂的树干，用利刀砍去和剔除白木部分和腐朽部分，阴干即得沉香。
2.沉香精油提炼方法
以上述采收的沉香为原料(以天然沉香即不接种沉香属植物结香剂的沉香为对比例)，按《中国药典》(2020版)中记载的挥发油提取(水蒸气蒸馏法)方法提炼沉香精油。
3.沉香和沉香精油各检测指标的检测方法
根据国家林业行业标准LY/T2904-2017《沉香》中记载的乙醇提取物含量、显色反应、薄层色谱和高效液相特征色谱等方法对沉香进行检验和判定；
根据《中国药典》(2020版)中记载的方法检测沉香中沉香四醇的含量；
根据《中国药典》(2020版)记载的方法进行沉香精油(挥发油)组成成分及含量的测定。
4.结果分析
通过对白木香树输入实施例1所制得的沉香属植物结香促进剂，输液结束后十天内未观察到树叶掉落和树干死亡的情况，表明本实施例提供的沉香属植物结香促进剂不会对白木香树正常生长代谢带来影响。采收人工促进结香处理后12个月的沉香，如图2所示，接种沉香属植物结香促进剂的白木香树中形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，即白木香所结的沉香，而未接种沉香属植物结香促进剂的白木香树未结香。
通过检测沉香中乙醇提取物、沉香四醇等含量，结果见表1，实施例1所得的沉香中乙醇提取物含量为57.76％，沉香四醇含量为1.13％，远大于国家林业行业标准LY/T2904-2017及中国药典相关标准(乙醇提取物≥10.0％，沉香四醇≥0.10％)，通过显色反应、薄层色谱、高效液相特征图谱分析，所制得沉香呈樱红色，在与沉香对照样色谱相应的位置上，显示相同颜色的荧光斑点，与对照样高相液相特征图谱上显示相同的6个特征峰。对比授权发明专利“一种天然沉香诱导剂以及生产沉香的方法”(专利号：ZL 201610373562.X)，所得到沉香的乙醇提取物18.58％、沉香四醇0.19％，明显低于实施例1所得到沉香的乙醇提取物和沉香四醇含量，表明通过将实施例1制得的沉香结香促进剂输入白木香树进行结香，可以有效提高白木香的结香成功率与结香效率，提高沉香的产量与品质。
通过对比实施例1与天然沉香(不经人工处理，天然形成的沉香)得到沉香所提炼的沉香精油中各主要成分及含量，结果如表2所示，实施例1得到的沉香所提炼的沉香精油中沉香螺旋醇、白木香醛、绒白乳菇醛、烯类和油酸的含量明显高于天然沉香所提炼的沉香精油，表明实施例1制得的沉香属植物结香促进剂可以增加沉香中挥发性香气物质生物量，进而提高沉香精油品质。
表1实施例1所得沉香各检测指标检测结果
表2天然沉香与实施例1所得沉香制得的沉香精油各指标检测结果
上面结合附图对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
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