本发明公开了一种半抗原碘代甲状腺素马来酰亚胺活性偶联试剂的制备方法,包括将碘代甲状腺素加入到反应溶剂中；将碱性溶液与碘代甲状腺素的有机悬浮液混合,制备得到碘代甲状腺素的弱碱性溶液；将6-(马来酰亚胺基)己酸琥珀酰亚胺酯溶于所述反应溶剂中并与所述碘代甲状腺素的弱碱性溶液反应,合成产品。本发明具有原料价格低廉易得、合成步骤少、操作简单、提取纯化方便、收率高的优点,提出了一种全新的合成半抗原碘代甲状腺素马来酰亚胺活性偶联试剂的解决方案,有利于解决小分子半抗原在制备单克隆抗体中合成人工抗原关键原料以及在开发临床检测甲功项目试剂盒中关键原料的问题。