本申请涉及生物技术领域,尤其涉及抗人SEMA4D抗体及其制备方法和应用。所述抗人SEMA4D抗体能特异性地识别SEMA4D蛋白;所述抗人SEMA4D抗体包括第一抗体或第二抗体;所述第一抗体包括SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:37所示氨基酸序列中的任意一种,所述第二抗体序列满足如下至少一条:重链氨基酸序列包括SEQ ID NO:38-SEQ ID NO:42所示氨基酸序列中的任意一种,轻链氨基酸序列包括SEQ ID NO:43-SEQ ID NO:47所示氨基酸序列中的任意一种,得到多株亲和力较高的抗人SEMA4D抗体,提供了早期检测诊断标志物及治疗靶点,为联合抗体用药和控制肿瘤提供基础。