本发明涉及具有抗真菌和清除自由基活性的环色-缬-丝-异亮-亮肽(Trp-Ser-Val-Ile-Leu环肽)及制备方法,属于生物制品的提取制备技术领域。所述环色-缬-丝-异亮-亮肽是由色氨酸、缬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸和亮氨酸,以酰胺键连接而成的十五元环状五肽。这是一个新型化合物,尚无文献报道。本发明化合物可通过培养蛙粪霉,然后提取分离得到。环色-缬-丝-异亮-亮肽纯品为白色粉末,对DPPH自由基的半数清除浓度DC-(50)为:1.32 mg/mL,在200μg/mL的浓度下对白色链珠菌的抑菌圈直径为13.25 mm。该化合物具有制备抗菌药物和抗氧化抗衰老保健品的潜力。