阅读说明：本技术 用于治疗和/或改善睡眠和情绪障碍的组合物 (Compositions for treating and/or improving sleep and mood disorders ) 是由 M·帕内 A·阿莫鲁索 M·菲奥里奥 A·马罗塔 G·菲利斯 A·德尔·卡塞莱 于 2018-12-19 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种用于治疗睡眠障碍、特别是用于改善睡眠质量的组合物。此外,本发明涉及用于治疗情绪调节的组合物。(The present invention relates to a composition for the treatment of sleep disorders, in particular for improving sleep quality. Furthermore, the present invention relates to a composition for use in the treatment of mood disorders.)

用于治疗和/或改善睡眠和情绪障碍的组合物

本发明涉及一种包含细菌菌株混合物的组合物，其用于治疗和/或改善睡眠障碍的方法、特别是用于治疗和/或改善睡眠质量障碍和/或失眠症。

此外，本发明涉及用于在治疗情绪调节的方法中使用的包含所述细菌菌株混合物的所述组合物。

睡眠被定义为与清醒相反的睡眠状态，是身体和精神的休息状况，其特征在于意识和意愿的暂时脱离、植物神经系统功能的减慢、以及主体与环境的感觉运动关系的部分中断，其对于生物体的休息是必不可少的。适当的睡眠在生物学上是维持生命所必需的。人的身体和精神健康状况取决于睡眠的质量和持续时间。

睡眠障碍的国际分类(ICSD 2005)收集了90多种睡眠障碍。最常见的睡眠疾病可以分为睡眠异常、异态睡眠和呼吸相关睡眠障碍，这是主要睡眠障碍类别的一部分。

睡眠异常是阻止人入睡或使其过早醒来的病症，其特征是睡眠质量、睡眠量和睡眠时间的功能性失调。在睡眠异常中，失眠症特别有名，其特征是无法入睡。失眠症与白天的功能运行不佳有关，并伴有诸如疲倦、烦躁、学习困难、缺乏记忆力巩固和对进行日常事务的兴趣明显丧失等症状。超过连续几个晚上的持续失眠可能会变成“慢性病”并导致睡眠不足，这对失眠症患者的健康极为有害。

睡眠异常通常发生在非快速眼动睡眠阶段，主要与心理性睡眠和梦障碍有关。

睡眠障碍可以影响受其困扰的人的身体和精神健康，从而危害其生活质量。

在精神病学和心理学中，术语“情绪障碍”或“情绪失调”用于表示包括人的情绪状态改变或异常的一大类精神病理性病症和症状，其严重程度可导致人的持续的或反复出现的功能障碍问题或明显不适以及对生活环境条件的适应不良。情绪失调可以影响受其困扰的人的身体和精神健康状况，从而危害其生活质量。

情绪障碍和睡眠障碍密切相关，因为一个常常导致另一个，且反之亦然。事实上，情绪变化能够引起睡眠障碍，特别是能够影响人的睡眠质量或引起失眠。反之，睡眠障碍，特别是如果随着时间推移而变长的话，会导致人的觉醒-睡眠比率失衡，从而导致其情绪状态或多或少地严重改变。

尽管没有针对睡眠障碍的独特解决方案，但存在多种可能的解决方案，其中一些源于大众传统，而另一些源于药物研究。健康的生活方式、心理治疗和冥想、草药治疗剂和褪黑激素是一些最广为人知的“大众”疗法。而巴比妥类、苯二氮

类、精神安定药、非苯二氮

类催眠药和吡唑并嘧啶类则是用来治疗睡眠障碍的精神科药物。

科学研究表明，迄今为止提出的睡眠障碍治疗方法，特别是针对睡眠质量障碍和失眠症的治疗方法，存在例如以下缺点：

i)有效性差；

ii)随时间推移的免疫耐受性、习惯化(即身体对药物的响应丧失)，例如在苯二氮类和非苯二氮

类催眠药的情况中；

iii)成瘾，例如在苯二氮

类药物和非苯二氮

类催眠药的情况中；和

iv)轻度到重度的不良作用，例如在巴比妥类药物的情况中(例如中毒、心肺抑制)。

类似地，甚至对于情绪失调病症，目前也存在多种来自药物和非药物研究的潜在疗法，例如：心理治疗，作用于单胺能系统的药理抗抑郁药，锂盐，小剂量抗癫痫药，精神安定药(抗精神病药)，抗焦虑药(例如苯二氮

类)或精神兴奋药，以及非类固醇类抗炎药。

即使在这种情况下，科学研究也证明了迄今为止提出的旨在促进情绪调节的治疗方法存在缺点，例如：

i)有效性差且对治疗完全没有响应；

ii)轻度到重度的不良作用。

因此，该行业的从业者仍有很高的兴趣找到一种有效的解决方案来治疗受到a)睡眠障碍(特别是睡眠质量障碍和/或失眠症)和/或b)情绪障碍或情绪失调(特别是随着时间推移的情绪不稳定)影响的健康和患病的受试者，该方案为当前的自然和药物治疗提供了一种有价值的替代方案，特别是在以下具体方面：增加该治疗对其有效的受试者的百分比、消除随时间的推移对治疗的习惯化、以及减少不良作用。

特别地，需要能够提供能减少和/或减轻健康和患病受试者的源自以下病症的症状或与之相关的症状的产品、组合物、制剂、医疗装置、食品补充剂或食品：a)睡眠障碍，特别是睡眠质量障碍和/或失眠症，和/或b)情绪障碍或情绪失调，特别是随时间推移的情绪不稳定，从而可以改善生活质量并改善或维持受这些病症影响的受试者的身体和精神状况，增加该治疗对其有效的受试者的百分比，并减少不良作用。

本发明的目的是对现有技术产品中仍然可以看到的局限性以及上述技术问题提供适当的对策。

发明内容

申请人发现，研究和加深肠道菌群在治疗睡眠障碍(特别是睡眠质量障碍或失眠症)和情绪失调障碍中的治疗潜力很有用。

免疫系统与大脑之间有关睡眠障碍和情绪障碍的相互作用主要集中在通过宏基因组分析来评估肠道生态系统的组成方面的结构修饰，以利于选择通过肠-脑通讯轴参与正信号交换的微生物群。

在进行了深入且广泛的研究和开发活动后，申请人开发了一种基于组合物的治疗疗法，所述组合物包含至少一种要施用给以下受试者的细菌菌株或细菌菌株混合物：a)患有睡眠障碍、特别是睡眠质量障碍或失眠症的受试者，和/或b)患有情绪障碍或情绪失调、特别是随时间推移而延长的情绪不稳定的受试者，其能够克服现有技术中存在的局限性和缺点，并为上述技术问题提供有效的解决方案。

另外，本申请人开发了包含所述细菌菌株混合物的所述组合物的非治疗目的的用途，其用于：a)调节和/或改善睡眠障碍，优选睡眠质量障碍或失眠症(失眠症不作为疾病)，和/或b)促进情绪调节，其能够克服现有技术中存在的局限性和缺点，并为上述技术问题提供有效的解决方案。

本发明的目的是一种包含至少一种细菌菌株或细菌菌株混合物以及可选的技术添加剂和/或药物或食品级赋形剂的组合物，其用于治疗睡眠障碍、特别是睡眠质量障碍和/或失眠症和/或情绪障碍或情绪失调、特别是随时间推移而延长的情绪不稳定的方法中，其特征如所附独立权利要求所述。

本发明的另一目的是包含所述细菌菌株混合物的所述组合物的非治疗目的的用途，其用于：a)调节和/或改善睡眠障碍，优选睡眠质量障碍和/或失眠症(失眠症不作为疾病)，和/或b)促进情绪调节，其特征如所附独立权利要求所述。

本发明的优选实施方式如所附的从属权利要求所示。

在以下说明书中描述的本发明的优选实施方式在本文中仅通过本发明的广泛应用领域的非限制性示例的方式来示出，这对于本领域技术人员将是清楚可见的。

附图说明

图1指评估阶段(治疗6周+随访3周)。

图2指两个组的睡眠质量评估(PSQI平均得分，作为时间T0、T1、T2和T3的函数)：实验组G1和对照组G2。

图3A、3B、3C、3D和3E是对两个组的应对压力事件/情况的能力的评估(COPE：社会支持、回避策略、积极态度、对问题的导向、对卓越的导向，作为时间T0、T1、T2和T3的函数)：实验组G1和对照组G2。

图4A、4B、4C、4D、4E和4F是对两个组的认知反应性的评估(LEIDS-R：绝望度、接受度、攻击性、沉思性(Rumination)、控制力和风险厌恶度，作为时间T0、T1、T2和T3的函数)：实验组G1和对照组G2。

图5A、5B、5C、5D、5E、5F和5G是对两个组的人格评估(TCI：寻求新奇、避免伤害、奖励依赖性、坚持性、自我引导、合作性、自我超越，作为时间T0、T1、T2和T3的函数)：实验组G1和对照组G2。

图6A、6B、6C和6D是对两个组的对行为抑制系统(BIS)和对行为方法或激活系统(BAS)的处置敏感性的评估(BIS-BAS：BAS指导、BAS寻求乐趣、BAS奖励反应性和BIS，作为时间T0、T1、T2和T3的函数)：实验组G1和对照组G2。

图7是对两个组的悲观和乐观倾向的评估(LOT-R平均得分，作为时间T0、T1、T2和T3的函数)：实验组G1和对照组G2。

图8A、8B、8C、8D、8E和8F是对两个组的一般情绪状态的评估(POMS：紧张-焦虑、抑郁-沮丧、攻击性-发怒、活力-活动、疲倦-怠惰和错乱-困惑，作为时间T0、T1、T2和T3的函数)：实验组G1和对照组G2。

定义

在本申请中，表述“睡眠障碍”用于表示宽范围的多种障碍，例如：睡眠异常，例如原发性失眠症、原发性睡眠过度、发作性睡病、呼吸相关的睡眠障碍(阻塞性睡眠呼吸暂停综合征)、昼夜节律性睡眠障碍和未另外指明的睡眠异常；异态睡眠，例如梦魇、夜惊症、梦游症和未另外指明的异态睡眠；与其他精神障碍有关的睡眠障碍，例如与其他精神障碍有关的失眠症和与其他精神障碍有关的睡眠过度；由一般医疗状况引起的睡眠障碍，特别是与疾病有关的睡眠障碍，例如神经系统疾病、神经性疼痛、心肺疾病；睡眠运动障碍，例如不宁腿综合征和磨牙症；和时差综合征。

在本申请中，表述“睡眠质量障碍”用于表示睡眠障碍的子类别，其使受试者感知到的睡眠是不能完全使受试者的身体和精神状况恢复的睡眠。睡眠质量障碍例如是被归类为异态睡眠的原发性睡眠障碍，例如：梦魇、夜惊症、梦游症、睡眠运动障碍(例如不宁腿综合症(RLS)、周期性四肢运动(PLM)、磨牙症、睡眠期间的暴力行为以及R.E.M.阶段的病症，其中人移动自己的身体以跟随其梦到的东西)。

在本申请中，表述“失眠症”用于表示睡眠障碍的子类别，其特征是尽管生物体实际有生理需要睡眠但仍无法入睡。从症状的角度来看，失眠症有三种类型：初期失眠症，即难以入睡；间歇性或中期或空隙性失眠症，其特征是夜间频繁觉醒；终期失眠症，其特征是过早觉醒而无法入睡。在本发明的上下文中，上述表述“夜间频繁觉醒”还包括在新生儿(0至12个月)和1至12岁、优选1至6岁、更优选1至4岁的儿童中发现的常见病症。

在本申请中，对于患有情绪失调、特别是随时间推移的情绪不稳定的受试者，表述“情绪调节”用于表示受试者的情绪状态随时间稳定在能够使人进行正常的社交生活、学习和工作日常事务的状态。特别地，其用于表示情绪状态随时间而稳定在积极/乐观的状态。

情绪或情绪状态的概念表示我们的精神活动的深度情绪关联(例如一般情绪状态、焦虑状态、悲伤状态、偏执状态、恐惧状态、害羞状态和乐观倾向)。这可以被认为是受试者的特征，例如性格习惯和人格气质的一部分。

本专利申请中描述和/或要求保护的所有菌株均根据《布达佩斯条约》提交如下：

-嗜热链球菌ST10，于2011年9月19日由Probiotical SpA保藏在德国的DSMZ保藏机构，保藏号为DSM 25246；

-发酵乳杆菌LF16，于2013年3月1日由Probiotical SpA保藏在德国的DSMZ保藏机构，保藏号为DSM 26956；

-植物乳杆菌LP01，于2001年10月16日由Mofin Srl保藏在比利时的BCCMLMG保藏机构，保藏号为LMG P-21021；

-植物乳杆菌LP02，于2001年10月16日由Mofin Srl保藏在比利时的BCCMLMG保藏机构，保藏号为LMG P-21020；

-鼠李糖乳杆菌LR06，于2008年11月14日由Probiotical SpA保藏在德国的DSMZ保藏机构，保藏号为DSM 21981；

-长双歧杆菌BL04，于2010年1月12日由Probiotical SpA保藏在德国的DSMZ保藏机构，保藏号为DSM 23233。

具体实施方式

本发明涉及如下定义的组合物(C)，其用于治愈性和/或预防性治疗和/或改善睡眠障碍症状或疾病、优选失眠症和/或睡眠质量障碍和/或情绪调节或情绪失调障碍、特别是随时间推移的情绪不稳定的方法中。

此外，本发明涉及如下定义的所述组合物(C)在调节和/或改善受试者的睡眠障碍、优选失眠症(失眠症不作为疾病)和/或睡眠质量障碍和/或促进受试者情绪调节中的用途，其中所述用途不是用于治疗目的。

有利地，在本发明中，用于治疗睡眠障碍、优选失眠症和/或睡眠质量障碍或者情绪调节或情绪失调障碍的方法对于健康受试者和被诊断患有病症的患病受试者(患者)都是有效的。

在一个实施方式中，本发明的组合物(C)包含以下或由以下组成：

-(a)如下定义的细菌菌株混合物(M)，和可选的

-(b)至少一种技术添加剂和/或至少一种药物或食品级赋形剂。

在一个实施方式中，本发明的(a)细菌菌株混合物(M)包含至少一种细菌菌株或由至少一种细菌菌株组成，所述至少一种细菌菌株选自包含以下的组或由以下组成的组：

-(a-i)被鉴定为发酵乳杆菌LF16 DSM 26956细菌菌株的发酵乳杆菌物种的细菌菌株，

-(a-ii)被鉴定为植物乳杆菌LP01 LMG P-21021细菌菌株的植物乳杆菌物种的细菌菌株，

-(a-iii)被鉴定为植物乳杆菌LP02 LMG P-21020细菌菌株的植物乳杆菌物种的细菌菌株，

-(a-iv)被鉴定为鼠李糖乳杆菌LR06 DSM 21981细菌菌株的鼠李糖乳杆菌物种的细菌菌株；和

-(a-v)被鉴定为长双歧杆菌BL04 DSM 23233细菌菌株的长双歧杆菌物种的细菌菌株。

优选地，所述细菌菌株混合物(M)包含如上定义的菌株(a-i)和(a-ii)和/或(a-iii)和(a-iv)和(a-v)，或由它们组成。

换言之，所述细菌菌株混合物(M)包含如上定义的(a-i)和(a-ii)和(a-iii)和(a-iv)和(a-v)或由它们组成，或者包含(a-i)和(a-ii)和(a-iv)和(a-v)或由它们组成，或者包含(a-i)和(a-iii)和(a-iv)和(a-v)或由它们组成。

优选地，所述细菌菌株混合物(M)包含以下或由以下组成：

-(a-i)发酵乳杆菌LF16 DSM 26956细菌菌株，和

-(a-ii)植物乳杆菌LP01 LMG P-21021细菌菌株，和/或

-(a-iii)植物乳杆菌LP02 LMG P-21020细菌菌株，和

-(a-iv)鼠李糖乳杆菌LR06 DSM 21981细菌菌株，和

-(a-v)长双歧杆菌BL04 DSM 23233细菌菌株。

有利地，(b)技术添加剂或药物或食品级赋形剂可以选自药物或食品制备技术领域的技术人员已知的所有物质，例如(非限制性实例)：防腐剂、增稠剂、甜味剂、食用色素、天然和人工香料、抗氧化剂、稳定剂、填充剂及其混合物。

优选地，(b)是麦芽糖糊精。

优选地，细菌菌株混合物(M)的细菌菌株(a-i)和(a-ii)和/或(a-iii)和(a-iv)和(a-v)彼此的重量比等于1:1:1:1或等于1:1:1:1:1。

优选地，对于每日摄入量，混合物(M)中存在的每种单一细菌菌株的存在浓度为1×10⁸CFU/AFU至1×10¹²CFU/AFU，优选1×10⁹CFU/AFU至1×10¹¹CFU/AFU；优选地，对于每日摄入量，每种单一菌株的存在浓度为1×10⁹CFU/AFU。

优选地，所述组合物(C)包含以下或由以下组成：

-(a-i)浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量的发酵乳杆菌LF16 DSM 26956细菌菌株

(CFU：菌落形成单位；AFU：活性荧光单位)，和

-(a-ii)浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量的植物乳杆菌LP01细菌菌株，和/或

-(a-iii)浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量的植物乳杆菌LP02细菌菌株，和

-(a-iv)浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量的鼠李糖乳杆菌LR06细菌菌株，和

-(a-v)浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量的长双歧杆菌BL04细菌菌株，和可选的

(b)，优选麦芽糖糊精。

例如，所述组合物(C)是3.0g(每日摄入量)的组合物，其中4或5种细菌菌株(a-i)和(a-ii)和/或(a-iii)和(a-iv)和(a-v)中的每一种的存在量为0.4g，浓度为1×10⁹CFU/AFU(4×0.1g＝0.4g混合物M)，而2.6g是(b)麦芽糖糊精。

在一个实施方式中，除了

(a)细菌菌株混合物(M)，其包含至少一种细菌菌株或由至少一种细菌菌株组成，所述至少一种细菌菌株选自包含如上定义的(a-i)、(a-ii)、(a-iii)、(a-iv)和(a-v)的组或由它们组成的组，以及可选的

(b)之外，

本发明的组合物(C)还包含：

(c)至少一个胶-细菌菌株组合组(胶-细菌菌株组合的第一组)中的胶-细菌菌株组合，和/或

(d)至少一种维生素，其选自维生素的第二组，和/或

(e)至少一种盐，其选自有机和/或无机盐的第三组，和/或

(f)至少一种物质，其选自抗氧化物质的第四组。

有利地，所述胶-细菌菌株组合的第一组包含以下或由以下组成：

(c-i)至少一种天然植物胶，例如塔拉胶，和

(c-ii)嗜热链球菌ST10 DSM 25246细菌菌株；对于每日摄入量，优选该嗜热链球菌ST10 DSM 25246细菌菌株的存在浓度为1×10⁸CFU/AFU至1×10¹²CFU/AFU，优选1×10⁹CFU/AFU至1×10¹¹CFU/AFU。

塔拉胶(天然植物胶)与嗜热链球菌ST 10DSM 25246细菌菌株(PCT国际专利公开号WO 2014/020408A1，Probiotical SpA)组合存在以获得粘膜粘附性胶凝复合物，所述胶凝复合物除所述塔拉胶外还包含由嗜热链球菌DSM 25246ST10细菌菌株在胃肠道中在所述塔拉胶的存在下原位产生的细菌来源的胶(胞外多糖-EPS)。

第一种作用是塔拉胶产生的胶凝作用，其在胃中最大(最大保护)而在结肠中最小，这是因为降解并随后失去保护发炎的肠粘膜的功效。

第二种作用是由细菌来源的胶产生的保护作用，特别是由嗜热链球菌DSM25246ST10细菌菌株在胃肠道中原位产生的胞外多糖(EPS)所产生的保护作用。第二种作用在胃中最小而在结肠中最大，其中细菌以高浓度到达结肠并保持存活和活跃，并原位产生EPS。由嗜热链球菌ST10 DSM 25246细菌菌株直接产生的细菌胶与塔拉胶一起能够维持和保护肠道粘膜，从而避免、减少或至少抵抗致病细菌对粘膜的有害作用。

这些作用相互补充，组合在一起，保证了对胃(由于塔拉胶)和胃肠道(由于细菌来源的胶)的全面保护以抗击细菌感染。

有利地，所述组合物(C)包含以下或由以下组成：

-(a)细菌菌株混合物(M)，其包含至少一种细菌菌株或由至少一种细菌菌株组成，所述至少一种细菌菌株选自包含如上定义的(a-i)、(a-ii)、(a-iii)、(a-iv)和(a-v)的组或由它们组成的组，和

-(c)选自胶-细菌菌株组合的第一组的至少一种胶-细菌菌株组合，其包含如上定义的(c-i)(优选塔拉胶)和(c-ii)或由它们组成，和可选的-(b)，优选麦芽糖糊精。

有利地，所述组合物(C)包含以下或由以下组成：

(a-i)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(a-ii)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和/或

(a-iii)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(a-iv)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(a-v)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(c-ii)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(c-i)，塔拉胶，和可选的

(b)，优选麦芽糖糊精。

有利地，所述维生素的第二组包括以下或由以下组成：(d-i)维生素C族，(d-ii)维生素E族，(d-iii)维生素B族，优选维生素B9，和(d-iv)维生素D族，优选维生素D3；优选每种单一维生素的存在量等价于100％RDA(推荐的膳食许可量)。

有利地，所述有机和/或无机盐的第三组包括以下或由以下组成：(e-i)有机和/或无机镁盐，优选甘氨酸镁，(e-ii)有机和/或无机硒盐，优选甲硫氨酸硒，和(e-iii)有机和/或无机锌盐，优选葡萄糖酸锌；优选每种单一盐的存在量等价于100％RDA。

有利地，所述有机和/或无机盐的第三组由(f-i)甘氨酸镁、(f-ii)甲硫氨酸硒和(f-iii)葡萄糖酸锌组成；优选每种单一盐的存在量等价于100％RDA。

有利地，所述抗氧化物质的第四组包括以下或由以下组成：(f-i)N-乙酰半胱氨酸(NAC)，(f-ii)辅酶Q10(CoQ10)，和(f-iii)乙酰-L-肉碱(ALC)；优选每种单一抗氧化物质的存在量等价于100mg/天。

本发明的组合物(C)中抗氧化物质的存在有助于调节施用所述组合物(C)的人的睡眠和情绪状态。

例如，CoQ10减少氧化应激，甚至在神经元水平上也促进了正确的线粒体工作，进而影响了血清素的调节。血清素是一种在中枢神经系统中起关键作用的物质，其多种功能包括调节情绪状态、睡眠。

有利地，所述组合物(C)包含以下或由以下组成：

-(a)细菌菌株混合物(M)，其包含以下或由以下组成：

(a-i)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(a-ii)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和/或(a-iii)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(a-iv)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(a-v)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量；和/或

-(c)胶-细菌菌株组合，其包含以下或由以下组成：

(c-ii)，浓度为1×10⁹CFU/AFU剂量，和

(c-i)，优选塔拉胶；和/或

-(d)选自维生素组的至少一种维生素，所述维生素组包括以下或由以下组成：

(d-i)，量等价于100％RDA，

(d-ii)，量等价于100％RDA，

(d-iii)，优选维生素B9，量等价于100％RDA，和

(d-iv)，优选维生素D3，量等价于100％RDA；和/或

-(e)选自有机和/或无机盐的第三组的至少一种盐，所述第三组包含以下或由以下组成：

(e-i)甘氨酸镁，量等价于100％RDA，

(e-ii)甲硫氨酸硒，量等价于100％RDA，和

(e-iii)葡萄糖酸锌，量等价于100％RDA；和/或

-(f)选自抗氧化物质的第四组的至少一种物质，所述第四组包含以下或由以下组成：

(f-i)N-乙酰半胱氨酸(NAC)，量等价于100mg/天，

(f-ii)辅酶Q10(CoQ10)，量等价于100mg/天，和

(f-iii)乙酰-L-肉碱(ALC)，量等价于100mg/天，和可选的

(b)，优选麦芽糖糊精。

有利地，所述细菌菌株混合物(M)的细菌菌株和嗜热链球菌ST10 DSM 25246细菌菌株，如果可选地存在的话，在本发明的组合物(C)中的存在量为所述混合物的1重量％至60重量％，优选5重量％至40重量％，更优选10重量％至30重量％。但是，所述百分比取决于旨在获得的药物或食品形式的类型。

有利地，组合物(C)的每日摄入量可以为0.2g至10g。

混合物(M)的细菌菌株可以固体形式存在于组合物(C)中，例如粉末、干燥粉末或冻干粉末的形式。

组合物(C)可以是适合于向受试者施用并且对于本领域技术人员而言已知的任何形式，例如，作为非限制性实例，为固体、颗粒、粉末、胶囊、片剂、凝胶、软凝胶、液体、滑液悬浮液和乳液形式。

组合物(C)可以口服或胃肠外施用给受试者。

此外，本发明提供了包含上述组合物(C)的药物制剂或医疗装置或食品补充剂或食品，所述组合物(C)包含：(a)细菌菌株混合物(M)，混合物(M)包含至少一种细菌菌株或由至少一种细菌菌株组成，所述至少一种细菌菌株选自包含如上定义的(a-i)、(a-ii)、(a-iii)、(a-iv)和(a-v)的组或由它们组成的组；和可选的如上定义的(b)和/或(c)和/或(d)和/或(e)和/或(f)，其用于治疗和/或改善睡眠障碍(优选失眠症)和/或睡眠质量障碍或者情绪调节障碍或情绪失调障碍、特别是随时间推移的情绪不稳定的方法中，所述方法针对健康受试者(非治疗目的用途)和已被诊断出患有上述病症之一的患病受试者(治疗目的)。

用于本发明所述的治疗有需要的受试者的方法中的本发明的组合物(C)可以单独施用给所述受试者，也可以作为有效治疗疾病或病症或症状的其他化合物、药物制剂、医疗装置、食品补充剂或食品的助剂施用给所述受试者。

本发明的组合物(C)可以用于治疗本发明所述的人类受试者的方法中或用于兽医用途，作为非限制性实例，用于宠物(例如狗或猫)或用于其他哺乳动物。优选地，本发明的组合物用于人类。

最后，本发明提供了一种治疗患有睡眠障碍、优选失眠症和/或睡眠质量障碍或者情绪失调、特别是随时间推移的情绪不稳定的受试者的方法，其中所述治疗方法提供了向所述受试者施用如上定义的本发明的所述组合物(C)。

有利地，包含本发明的细菌菌株混合物(M)的组合物(C)的服用在服用其后的受试者中显示出显著的变化(有效性)。特别地，连续服用组合物(C)改善了受治疗的人(患病或健康的人)所感受到的睡眠质量。

此外，连续服用组合物(C)调节受治疗的人(患病或健康的人)的睡眠，使其随时间稳定在一种趋于能够克服心境恶劣和悲观状态的乐观状态(例如，在存在挑战性/压力的情况下的积极态度，采取更乐观的行为克服心境恶劣状态，对中度心境恶劣情绪状态的认知反应性，采取对新奇事务开放、坚持和合作的人格)。此外，连续服用组合物(C)未显示出不良作用。

实验部分

申请人进行了一项体内研究，研究期间，通过一些标志(例如对乐观的倾向和认知反应性)，申请人评估了施用益生菌在改善睡眠质量和心理状况(尤其是情绪状态)方面对健康受试者的影响。

1.方法与材料

1.1研究人群

病例对照型的双盲随机研究(实验者和参与者)。

受试样本由两组18至35岁的健康受试者组成：

-实验组(G1)：该组的受试者(19名参与者)服用本发明的主题组合物(组合物C，参见第2点)六周。

-对照组(G2)：该组的受试者(19名参与者)服用安慰剂六周。

具体而言，共有33人完成了这项研究。在总组中，18名参与者参加了用包含益生菌的组合物(C)治疗的实验组(11名男性和7名女性，平均年龄：21.61±2.20)，15名参与者参加了未经治疗的对照组(10名男性和5名女性，平均年龄：21.65±2.16)。参加研究的受试者未接受使用抗生素的连续药理治疗或近期治疗，并且没有例如胃肠道病症、食物不耐受、过敏、慢性病等疾病。

1.2所施用的组合物C或安慰剂

实验组(G1)中施用的是用于口服溶液的颗粒形式的组合物C(3.0克/囊剂)，其包含益生菌菌株混合物M，浓度为4×10⁹CFU/AFU囊剂-每日摄入量(CFU：菌落形成单位；AFU：活性荧光单位)。

该组合物(C)包含以下冻干益生菌菌株的细菌菌株混合物(M)：

-0.1g的发酵乳杆菌LF16 DSM 26956细菌菌株，浓度为1×10⁹CFU/AFU；和

-0.1g的植物乳杆菌LP01 LMG P-21021细菌菌株，浓度为1×10⁹CFU/AFU；和

-0.1g的鼠李糖乳杆菌LR06 DSM 21981细菌菌株，浓度为1×10⁹CFU/AFU；和

-0.1g的长双歧杆菌BL04 DSM 23233细菌菌株，存在浓度为1×10⁹CFU/AFU，和2.6g麦芽糖糊精，作为填充剂添加到益生菌菌株中以获得组合物。

还测试了用于口服溶液的颗粒形式的组合物C(2.5克/囊剂)，其包含益生菌菌株混合物M，浓度为4×10⁹CFU/AFU囊剂-每日摄入量(CFU：菌落形成单位；AFU：活性荧光单位)。

该组合物(C)包含以下冻干益生菌菌株的细菌菌株混合物(M)：

-0.1g的发酵乳杆菌LF16 DSM 26956细菌菌株，浓度为1×10⁹CFU/AFU；和

-0.1g的植物乳杆菌LP01 LMG P-21021细菌菌株，浓度为1×10⁹CFU/AFU；和

-0.1g的鼠李糖乳杆菌LR06 DSM 21981细菌菌株，浓度为1×10⁹CFU/AFU；和

-0.1g的长双歧杆菌BL04 DSM 23233细菌菌株，浓度为1×10⁹CFU/AFU，和2.1g麦芽糖糊精，作为填充剂添加到益生菌菌株中以获得组合物。

对照组(G2)中施用安慰剂，安慰剂含有麦芽糖糊精(2.5g，每日摄入量)，为用于口服溶液的颗粒的单一成分。

1.3研究设计

实验测试持续9周，分为多个评估阶段(T0、T1、T2、T3-见图1)。在每个评估阶段，学生填写评估/心理调查表(见第2点的调查表说明)并提交粪便样本。

益生菌或安慰剂产品的每日服用从首次评估(T0)的次日开始，持续6周(直至阶段T2)，中间评估从开始服用产品之日起三周(T1)进行(图1)。在服用产品(益生菌或安慰剂)六周完成后，学生停止服用任何产品三周，并在该三周结束时填写评估T4(图1)。

1.4数据统计学分析

-在时间T0、T1、T2、T3进行问卷分析的软件->SPSS Statistics 19(IBM Corp.,NY,美国)。

-置信区间95％，显著性水平p<0.05。

-每个阶段的组之间比较(实验与对照)->Mann-Whitney U检验。

-每个组在阶段之间的比较->Friedman检验。

-事后比较：Wilcoxon Signed Rank检验(Bonferroni校正p<0.012)。

2.评估问卷及相关结果

下面描述的是每个认知测试的结果。

在图2至8中图示了上述结果，如果在组之间存在的统计学显著差异，则以星号表示显著性水平；如果每个组在各阶段之间存在统计学显著差异，则以星号和删除线表示显著性水平。在坐标轴上示出了关于实验组(用益生菌混合物治疗-G1，浅灰色)和对照组(用安慰剂治疗-G2，深灰色)的问卷平均得分。

表1至3中用数字示出了图2至8中所示的结果，括号中显示了标准偏差。

2.1匹兹堡睡眠质量指数(PSQI，Buysse等，1989；Curcio等，2013)(图2)

-对受试者感知到的睡眠质量的评估。

-与研究的参数主题成反比的分数：分配的分数越低，感知的睡眠质量越高。

-在实验组(G1)中，阶段T2和T0之间的得分差异显著(p＝0.005)，且在T3维持(T0-T3 p＝0.017)(Bonferroni校正p<0.012)。

2.2应对遇到的问题的导向(COPE-NVI，Sica C.等，2008)(图3A、3B、3C、3D和3E)

-评估面临压力事件或情况的人的反应；五个分量：社会支持、回避策略、积极态度、对问题的导向、对卓越的导向。

-分量总得分越高，在解决此分量的描述主题时采用积极策略的频率就越高。

-回避策略分量，两个组G1和G2在T2时(p＝0.010)和T3(p＝0.006)有显著影响。

-积极态度分量，两个组G1和G2在T1时有显著影响(p＝0.016)。

2.3抑郁敏感性指数-修订测试(LEIDS-R，van der Dids W.等，2003)(图4A、4B、4C、4D、4E和4F)

-评估对轻度心境恶劣情绪状态的认知反应性；六个分量：绝望度、接受度、攻击性、沉思性、风险控制力和厌恶度。

-分量得分越高，就评估的量值主题而言，脆弱性越大。

-接受度分量，实验组(G1)与对照组(G2)在T2时有显著差异(p＝0.031)。

2.4气质和性格量表测试(TCI，Cloninger CR等，1994)(图5A、5B、5C、5D、5E、5F和5G)

-根据性格评估个人差异；七个分量：寻求新奇、避免伤害、奖励依赖性、坚持性、自我引导、合作性、自我超越。

-总分越高，量所描述的性格的量值水平越高。

-寻求新奇分量，实验组(G1)与对照组(G2)在T3时有显著差异(p＝0.027)。

-坚持性分量，实验组(G1)与对照组(G2)之间在所有4个时间都具有显著差异(T0，p＝0.002；T1 p＝0.004；T2 p＝0.003；T3 p＝0.005)。

-自我引导分量，实验组(G1)与对照组(G2)在T3时有显著差异(p＝0.013)。

-合作性分量，实验组(G1)与对照组(G2)在T2时有显著差异(p＝0.023-0.026)。

2.5行为抑制和行为激活量表(BIS-BAS，Leone L.等，1994)(图6A、6B、6C和6D)

-评估对行为抑制系统(BIS)的处置敏感性。

-评估对行为方式或激活系统(BAS)的处置敏感性；三个分量：BAS指导、BAS寻求乐趣、BAS奖励反应性。

-无显著数据；这表示益生菌混合物对与高冲动水平相关的行动趋势(BIS)以及对与高焦虑水平相关的回避趋势(BAS)没有活性作用。

2.6生命取向测试-再访(LOT-R，Scheier等，1994)(图7)

-评估悲观倾向和乐观倾向。

-总分越高，乐观程度越高(高乐观度为19-24，中度乐观度为14-18，低乐观度为0-13)。

-在实验组中，由于乐观评分的提高，在T2和T0之间(p＝0.014)和在T3和T0之间(p＝0.003)效果趋于显著。

2.7情绪状态特征(POMS，McNair等，1964)(图8A、8B、8C、8D、8E和8F)

-情绪状态的评估；六个分量：紧张-焦虑、抑郁-沮丧、攻击性-发怒、活力-活动、疲倦-怠惰和错乱-困惑。

-量表的总得分越高，相关情绪的水平越高。

-抑郁-沮丧分量，在实验组中，在T2和T0之间具有显著效果(p＝0.009)，T3(p＝0.014)相对于T0具有显著性趋势。

-攻击性-发怒分量，在实验组中，在T1和T0之间具有显著效果(p＝0.007)，T2(p＝0.016)和T3(p＝0.003)相对于T0具有显著性趋势。

-疲倦-怠惰分量(p＝0.008)，在实验组中，T2和T0之间(p＝0.005)和T3和T0之间(p＝0.011)具有显著效果。

3.结果

这项研究的目的是研究服用含有益生菌的本发明的组合物(组合物C)时对与情绪、认知功能和睡眠感知有关的一些方面的影响。特别地，通过特殊的问卷调查评估了在上述方面中实验组(G1，施用益生菌)与对照组(G2，施用安慰剂)之间的差异。结果显示，持续服用组合物(C)改善了感知的睡眠质量(PSQI测试)，并随时间推移使情绪稳定在能够克服心境恶劣和悲观状态的趋于乐观的状态下。事实上，关于评估服用益生菌对情绪的影响，观察到了组合物(C)在以下方面具有积极影响：在面对挑战/压力情况(COPE测试)时采取积极态度，在克服心境恶劣状态时采取更乐观的行为(LOT-R测试)，对轻度心境恶劣情绪状态的认知反应(LEIDS-R测试)，采取对新奇事务开放、坚持和合作的性格(TCI测试)，以及显著降低焦虑状态和显著改善受试者的一般情绪状态(减少抑郁/沮丧，减少攻击性/发怒，减少疲倦-怠惰，以及减少与压力有关的错乱状态；POMS测试)。此外，在BIS-BAS测试中没有显著影响，表明组合物(C)对与高冲动水平相关的行动趋势(BIS)以及对与高焦虑水平相关的行动趋势(BAS)没有活性作用。

实验组(G1)中未观察到不良作用。

表1

表2

表3