阅读说明：本技术 一种预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂及其制备方法和用途 (Traditional Chinese medicine compound preparation for preventing and treating alcoholic liver injury and preparation method and application thereof ) 是由 陈丽 信学雷 阿吉艾克拜尔·艾萨 于 2020-08-24 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂及其制备方法和用途,该制剂是由组分一枝蒿,茵陈,毛菊苣,玫瑰花,大黄,甘草,辅料为乳糖、糊精、淀粉、蔗糖或微晶纤维,采用粉碎,混合,加入水回流提取,过滤,浓缩至相对密度为1.0-1.2的浸膏,真空干燥,得干浸膏,粉碎得浸膏粉,加入辅料,按常规方法制成颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂。该制剂具有服用方便、疗效显著的优点。经动物模型试验表明：该中药复方制剂在酒精性肝损伤疾病的预防和治疗中能发挥显著的效果。可显著降低血清肝损伤指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平,对酒精性肝损伤有显著的预防和保护作用。(The invention relates to a Chinese medicinal compound preparation for preventing and treating alcoholic liver injury and its preparation method and use, the preparation is made from herba Achillea Wilsonianae, herba Artemisiae Scopariae, herba Cichorii, flos Rosae Rugosae, radix et rhizoma Rhei, licorice, and adjuvants such as lactose, dextrin, starch, sucrose or microcrystalline cellulose by pulverizing, mixing, adding water for reflux extraction, filtering, concentrating to obtain extract with relative density of 1.0-1.2, vacuum drying to obtain dry extract, pulverizing to obtain extract powder, adding adjuvants, and making into granule, capsule, tablet or pill by conventional method. The preparation has the advantages of convenient administration and good therapeutic effect. The animal model test shows that: the Chinese medicinal compound preparation can play a remarkable role in preventing and treating alcoholic liver injury diseases. Can obviously reduce the level of glutamic-pyruvic transaminase and glutamic-oxalacetic transaminase which are indexes of clear liver injury, and has obvious prevention and protection effects on alcoholic liver injury.)

一种预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂及其制备方法 和用途

技术领域

本发明属于中药复方制剂技术领域，具体涉及一种预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂及其制备方法和用途。

背景技术

随着我国经济的飞速增长和社会的日益开放，人们生活水平大幅提高，生活方式和膳食结构发生改变，高热量高脂肪的大量摄入，酒精的大幅消耗，导致脂肪性肝病正在成为我国肝病的主要原因。根据不同的病因，脂肪性肝病分为非酒精性肝病(NALD)和酒精性肝病(ALD)。非酒精性肝病与不健康的生活方式和不健康的饮食有很大关系，心血管疾病是非酒精性脂肪肝的主要死亡原因。酒精性肝病(ALD)主要是由于长期过度饮酒诱发的多种肝脏疾病，初期没有临床表现，从简单的脂肪变性到脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌(HCC)。在长期大量饮酒的人群中，酒精性脂肪肝者约为90％-100％，酒精性肝炎者约为10％-35％，最终发展为酒精性肝硬化者为8％-20％。1990年，全球有373,200人死于酒精性肝硬化；2010年，有493,300人死于酒精性肝硬化，占所有肝硬化死亡率的47.9％，337,400死于肝癌，占癌症死亡人数的4.2％。在过去的二十年中酒精性肝脏疾病致死率的增长速度惊人，对人们的身体健康构成了严重的危害。在世界范围内，酒精性肝病成为肝病的一个主要原因。

开发研制用于预防和治疗酒精性肝病的药物迫在眉睫，中药中许多有效成分如黄酮类、多糖类、苷类等都可以起到保肝护肝的作用。中药与西药相比具有毒副作用小，药物依赖性低的优点。中药可通过多种机制预防和治疗酒精性肝损伤，如抑制氧自由基、提高抗氧化蛋白酶生物活性、保护肝脏功能、提高乙醇代谢等。

发明内容

本发明的目的是，提供一种预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂及其制备方法和用途，该制剂是由组分一枝蒿，茵陈，毛菊苣，玫瑰花，大黄，甘草，辅料为乳糖、糊精、淀粉、蔗糖或微晶纤维，采用粉碎，混合，加入水回流提取，过滤，浓缩至相对密度为1.1的浸膏，真空干燥，得干浸膏，粉碎得浸膏粉，加入辅料，按常规方法制成颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂。该制剂具有服用方便、疗效显著的优点。经动物模型试验表明：该中药复方制剂在酒精性肝损伤疾病的预防和治疗中能发挥显著的保肝护肝的效果。可显著降低血清肝损伤指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平，对酒精性肝损伤有显著的预防和保护作用。

本发明所述的一种预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂，该制剂是由组分重量比以1000g为基数，一枝蒿5-60份，茵陈5-50份，毛菊苣5-50份，玫瑰花5-50份，大黄5-30份，甘草5-30份，辅料为乳糖、糊精、淀粉、蔗糖或微晶纤维4-60份，按常规方法制成颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂。

所述一种预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂的制备方法，按下列步骤进行：

a、将原料组分重量比以1000g为基数，一枝蒿5-60份，茵陈5-50份，毛菊苣5-50份，玫瑰花5-50份，大黄5-30份，甘草5-30份，分别粉碎至20-40目的粗粉，混合，加入原料药体积15-18倍量的水，回流提取2-3次，每次2-3小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1，得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按重量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为乳糖、糊精、淀粉、蔗糖或微晶纤维4-60份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的20％-50％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，制成颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂的中药复方制剂。

所述的中药复方制剂在制备预防酒精性肝损伤的保健食品中的用途。

本发明所述的一种预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂及其制备方法和用途，其优点在于：采用传统水提工艺提取以总黄酮、酚酸等为主要有效成分的中药复合制剂，经动物模型试验表明：该中药复方制剂在酒精性肝损伤的预防和治疗中能发挥显著的保肝护肝的效果。

附图说明

图1为本发明对小鼠血清生化指标的影响；

图2-图4为本发明对肝脏功能的影响；

图5为本发明对肝脏脂质水平的影响。

具体实施方式

：

以下结合实施例对本发明进一步说明。

实施例1

以1000g为基数制备颗粒剂：

a、将原料组分重量比，一枝蒿20份，茵陈50份，毛菊苣50份，玫瑰花10份，大黄10份，甘草10份，分别粉碎至20目的粗粉，混合，加入原料药体积15倍量的水，回流提取2次，每次2小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1，得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按重量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为乳糖20份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的20％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方颗粒剂。

实施例2

以1000g为基数制备颗粒剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿60份，茵陈20份，毛菊苣20份，玫瑰花5份，大黄5份，甘草5份，分别粉碎至40目的粗粉，混合，加入原料药体积16倍量的水，回流提取3次，每次2.5小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1，得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按重量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为淀粉30份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的35％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方颗粒剂。

实施例3

以1000g为基数制备颗粒剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿10份，茵陈30份，毛菊苣30份，玫瑰花10份，大黄5份，甘草5份，分别粉碎至30目的粗粉，混合，加入原料药体积18倍量的水，回流提取2次，每次3小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按重量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为糊精15份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的25％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方颗粒剂。

实施例4

以1000g为基数制备胶囊剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿30份，茵陈20份，毛菊苣10份，玫瑰花10份，大黄5份，甘草5份，分别粉碎至30目的粗粉，混合，加入原料药体积16倍量的水，回流提取2次，每次2小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按重量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为蔗糖40份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的30％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方胶囊剂。

实施例5

以1000g为基数制备胶囊剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿10份，茵陈20份，毛菊苣50份，玫瑰花20份，大黄10份，甘草10份，分别粉碎至40目的粗粉，混合，加入原料药体积17倍量的水，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按重量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为微晶纤维30份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的40％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方胶囊剂。

实施例6

以1000g为基数制备胶囊剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿5份，茵陈40份，毛菊苣30份，玫瑰花10份，大黄10份，甘草5份，分别粉碎至20目的粗粉，混合，加入原料药体积18倍量的水，回流提取2次，每次3小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为乳糖30份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的45％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方胶囊剂。

实施例7

以1000g为基数制备片剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿60份，茵陈5份，毛菊苣30份，玫瑰花5份，大黄10份，甘草10份，分别粉碎至20目的粗粉，混合，加入原料药体积15倍量的水，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为糊精40份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的25％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方片剂。

实施例8

以1000g为基数制备片剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿20份，茵陈20份，毛菊苣50份，玫瑰花20份，大黄10份，甘草10份，分别粉碎至30目的粗粉，混合，加入原料药体积16倍量的水，回流提取3次，每次3小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为淀粉30份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的30％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方片剂。

实施例9

以1000g为基数制备片剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿35份，茵陈40份，毛菊苣10份，玫瑰花20份，大黄10份，甘草10份，分别粉碎至40目的粗粉，混合，加入原料药体积18倍量的水，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为微晶纤维35份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的20％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方片剂。

实施例10

以1000g为基数制备丸剂：

a、将原料组分重量一枝蒿5份，茵陈50份，毛菊苣30份，玫瑰花10份，大黄5份，甘草5份，分别粉碎至40目的粗粉，混合，加入原料药体积15倍量的水，回流提取2次，每次3小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为乳糖40份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的40％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方丸剂。

实施例11

以1000g为基数制备丸剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿40份，茵陈40份，毛菊苣10份，玫瑰花5份，大黄20份，甘草20份，分别粉碎至20目的粗粉，混合，加入原料药体积17倍量的水，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为糊精30份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的45％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方丸剂。

实施例12

以1000g为基数制备丸剂：

a、将原料组分重量比一枝蒿60份，茵陈5份，毛菊苣5份，玫瑰花10份，大黄50份，甘草50份，分别粉碎至30目的粗粉，混合，加入原料药体积18倍量的水，回流提取3次，每次3小时，合并提取液，过滤，将滤液在温度60℃进行减压浓缩至相对密度为1.1得到浸膏；

b、将步骤a得到浸膏真空干燥，得干浸膏，再将干浸膏粉碎过80目筛，得到浸膏粉；

c、按量比1:2将步骤b得到的浸膏粉加入辅料为蔗糖30份，充分混合拌匀，以浓度为65％乙醇为粘合剂，加入乙醇，其中乙醇是浸膏粉的30％，混合均匀，过10目筛网，温度60℃烘干，按常规方法制成中药复方丸剂。

实施例13

将实施例1-12任意一种中药复方制剂对酒精诱导的小鼠肝损伤模型试验：

实验动物：ICR小鼠，体重13-15g，购于新疆医科大学动物中心；

试剂盒：DPPH、ABTS、Tris-base、DMSO和蛋白酶抑制剂(PMSF)购自美国Sigma公司；谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、过氧化氢酶(CAT)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒、总超氧化物歧化酶(T-SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)购自南京建成生物工程研究所；一氧化氮(NO)检测试剂盒购自碧云天生物技术有限公司；白介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β(TGF-β)购自联科生物技术股份有限公司；一抗COX-2,iNOS,p-NF-κB,NF-κB,p-ERK1/2,ERK1/2,p-P38MAPK,P38MAPK和β-actin购自美国Cell Signal Technology公司；一抗Nrf2和HO-1抗体购自英国Abcam公司；CYP2E1抗体购自美国Millipore公司；二抗兔抗辣根过氧化物酶HRP购自上海博世德公司；5×Loading buffer和脱脂奶粉购自上海博世德公司；吐温20购自天津百世化工；30％ACR-BASE购自北京博奥拓公司；ECL发光液试剂盒购自美国Thermo Scientific公司；

实验样品：中药复方制剂；

实验方案：实验前小鼠适应性喂养7天，取13-15g ICR小鼠48只，随机分为6组，每组8只:对照组、酒精性肝损伤模型组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组；在对照组和模型组，给小鼠等量的稀释液，在阳性对照组，小鼠口服水飞蓟宾(79.1mg/kg)，三组小鼠分别口服低剂量1.5g/Kg、中剂量3g/Kg、高剂量6g/Kg的中药复方制剂4周，给药后1小时，对照组腹腔注射等量生理盐水，其余各组腹腔注射56％乙醇5ml/kg，诱导肝损伤；

(1)本发明中药复方制剂对小鼠血清生化指标的影响：

与对照组(Cont)相比，酒精性肝损伤模型(EtOH)组血清AST、ALT、ALP活性明显升高(p<0.05)，提示EtOH组存在肝功能障碍；阳性对照组(SILY组)、中剂量组(XM组)、高剂量组(XH组)ALP水平明显下降(p<0.05)；SILY组(p<0.05)和XH组(p<0.05)ALT和AST活性均下降；提示本发明中药复方制剂对小鼠酒精性肝损伤有一定的改善作用见图1；

(2)本发明中药复方制剂在肝脏中的抗氧化作用：

以多种抗氧化酶作为评价小鼠肝脏氧化应激水平的参数；谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性在酒精组肝脏中显著降低(p<0.05)；酒精组氧化产物丙二醛(MDA)明显高于对照组(p<0.05)；这些改变通过中药复方制剂而得以纠正，中药复方制剂的三个剂量组均能显著提高酒精性肝损伤小鼠T-SOD和CAT活性(p<0.05)，与酒精组相比，XL、XH组GSH-PX活性明显升高(p<0.05)，中药复方制剂各剂量组均能降低MDA水平(p<0.05)，这些数据说明中药复方提取物在体内具有良好的抗氧化能力见表1；

表1

(3)中药复方制剂对肝脏功能的影响：

研究了中药复方制剂对肝脏功能的影响，包括谷丙转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、羟脯氨酸、一氧化氮(NO)和乳酸脱氢酶(LDH)，酒精性肝损伤模型(EtOH)组AST和ALT活性明显升高(p<0.05)，中药复方制剂在XL、XM、XH三种剂量组均能显著降低AST(p<0.05)，SILY组亦能显著降低AST(p<0.05)，XH组和SILY组ALT降低(p<0.05)见图2；

模型组与对照组相比，羟脯氨酸水平显著升高(p<0.05)见图3，补充中药复方制剂和水飞蓟素可降低羟脯氨酸的升高，尤其是在XH组(p<0.05)见图4，与Cont组相比，EtOH组NO和LDH水平升高，中药复方制剂可使XM组和XH组NO水平下降(p<0.05)，XH组LDH含量也降低(p<0.05)；

(4)中药复方制剂对肝脏脂质水平的影响：

以总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)为常用的血脂生化指标，测定小鼠肝脏的血脂水平见图5，EtOH组与Cont组相比，TC、TG含量增加，但差异不显著，经中药复方制剂处理的小鼠中，XM组和XH组TC含量显著降低(p<0.05)，XM组甘油三酯含量降低(p<0.05)，其他给药组有降低作用的趋势，结果表明：中药复方制剂具有改善肝脏脂质水平的作用；

(5)中药复方制剂对肝脏细胞因子水平的影响：

肿瘤坏死factor-α(TNF-α)和转化生长因子β(TGF-β)在酒精性肝损伤模型(EtOH)组明显(p<0.05)升高。然而，TNF-αTGF-β显著(p<0.05)降低肝脏的XM和XH组；EtOH组肝脏白细胞介素-6(IL-6)含量高于Cont组，但差异无统计学意义；水飞蓟素和中药复方制剂可抑制酒精性肝损伤小鼠IL-6的增加；

结论：由上述可明确本发明中药复方制剂对酒精性肝损伤小鼠血清中AST、ALT、ALP含量有明显降低的作用，也能降低小鼠肝脏中AST、ALT、羟脯氨酸、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量；说明本发明中药复方制剂能改善酒精性肝损伤小鼠的肝功能，同时，在酒精性肝损伤模型小鼠中，三种酶CAT、GSH-PX和T-SOD的含量活性均明显降低，给予中药复方制剂处理后，显著提高了CAT、GSH-PX和T-SOD活性，丙二醛(MDA)是脂质过氧化的标志，给药后，丙二醛含量明显降低，结果表明：中药复方制剂可以通过抗氧化活性减轻氧化应激诱导的肝脏损伤。