阅读说明：本技术 石笔木提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物中的应用 (Application of Shiwo kaki extract in preparation of alpha-glucosidase inhibitor composition ) 是由 史丽颖 王柳 于大永 于 2020-07-21 设计创作，主要内容包括：本发明涉及石笔木提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物中的应用,属于医药技术领域。主要技术方案为：石笔木提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物中的应用,所述的石笔木提取物为选自石笔木花、果皮、种子的一种或一种以上的提取物。本发明提供了一种石笔木不同部位的提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物的应用,石笔木提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性强于阿卡波糖,可制成各种固体或液体口服制剂,或者加入其它成份和辅料制成复方药物或保健品用于治疗和预防糖尿病。(The invention relates to an application of a shiitake extract in preparation of an alpha-glucosidase inhibitor composition, belonging to the technical field of medicines. The main technical scheme is as follows: the application of the crassula argentea extract in preparing the alpha-glucosidase inhibitor composition is characterized in that the crassula argentea extract is one or more than one extract selected from crassula argentea flower, pericarp and seed. The invention provides application of extracts of different parts of crassula argentea in preparing alpha-glucosidase inhibitor composition, wherein the crassula argentea extract has stronger alpha-glucosidase inhibition activity than acarbose, and can be prepared into various solid or liquid oral preparations, or can be added with other components and auxiliary materials to prepare compound medicines or health products for treating and preventing diabetes.)

石笔木提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及石笔木不同部位提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用。

背景技术

目前中国成人糖尿病患病率约11％，估算糖尿病患者数量1.14亿。尽管目前已有多种不同作用机制的降糖药物，但是63％的Ⅱ型糖尿病患者仍然得不到有效的治疗。高血糖是糖尿病的主要特征，也是导致糖尿病并发症的重要原因。糖尿病发病率的逐年上升，给人们的健康及日常生活带来了很大的影响。

α-葡萄糖苷酶抑制剂可竞争性抑制小肠内各种α-葡萄糖苷酶，减慢淀粉类分解为葡萄糖的速度，从而减缓肠道内葡萄糖的吸收，降低餐后血糖。目前已广泛应用于糖尿病及其并发症的防治。目前已上市并在临床上应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂类降糖药主要有：阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇。我国天然植物资源丰富，其成本低，是天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的主要来源之一，具有一定的开发价值。

石笔木的幼芽嫩叶常被作为茶饮，不仅具备提神醒脑作用，而且具有很高的药用价值，可用于治疗感冒、肠炎、痢疾或食用油腻食物而引起的腹泻等。

发明内容

为弥补现有技术的不足，本发明提供石笔木提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物中的应用。本发明的技术方案如下：石笔木提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物中的应用，所述的石笔木提取物为选自石笔木花、果皮、种子的一种或一种以上的提取物。

进一步的，所述的石笔木提取物以乙醇或水为提取剂进行回流提取，浓缩制备得到。

进一步的，所述的提取物是按照如下方法提取得到：将采集到的石笔木花、果皮、种子粉碎，用95％乙醇或水加热回流提取，料液比为1g:3ml，提取2次，每次60min，合并提取液，用旋转蒸发仪浓缩回收乙醇或水，得石笔木花、果皮、种子的乙醇提取物或水提取物。

进一步的，所述的α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物为治疗和预防糖尿病的药物。

进一步的，所述的α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物为固体或液体口服制剂。

进一步的，所述的α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物为治疗和预防糖尿病的保健品。

将上述提取物进行α-葡萄糖苷酶活性测定，测定结果发现石笔木花、果皮、种子的乙醇提物和水提物均可以抑制α-葡萄糖苷酶活性，其半数抑制浓度(IC₅₀)为2.49～40.77μg/mL，均强于阿卡波糖的活性(IC₅₀＝484.9μg/mL)。

本发明的有益效果如下：本发明提供了一种石笔木不同部位的提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂组合物的应用，石笔木提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性强于阿卡波糖，可制成各种固体或液体口服制剂，或者加入其它成份和辅料制成复方药物或保健品用于治疗和预防糖尿病。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明和解释，但本发明并不限于这些具体实施例。实施例中所使用方法如无特殊说明，均为本领域的常规技术方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到的试剂盒材料。作为优选，石笔木花、果实于2019年6月采自广东揭阳白塔镇，经暨南大学药学院曹晖教授鉴定为山茶科核果茶属植物大果核果茶Pyrenaria spectabilis(Champ.)C.Y.Wu et S.X.Yang ex S.X.Yang，别名华南石笔木Tutcheria austro-sinica Chang，标本现存于大连大学生命科学与技术学院(标本号2019062001，2019062002，2019062003)。α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)购自Sigma公司；4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside，PNPG)购自百灵威科技有限公司；阿卡波糖(acarbose)购自上海源叶生物科技有限公司。其余试剂均为分析纯。

实施例1石笔木提取物的制备(乙醇提取)

将采集到的石笔木花、果皮、种子粉碎，称取粉碎后的石笔木花、果皮、种子各100g，分别用300mL 95％乙醇加热回流提取60min，2次，合并提取液，用旋转蒸发仪回收乙醇，分别得石笔木花、果皮、种子的乙醇提取物。将三者的提取物分别用二甲基亚砜(DMSO)溶解，配制成10mg/mL样品母液备用。

实施例2石笔木提取物的制备(水提取)

将采集到的石笔木花、果皮、种子粉碎，称取粉碎后的石笔木花、果皮、种子各100g，分别用300mL水加热回流提取60min，2次，合并提取液，用旋转蒸发仪回收乙醇，分别得石笔木花、果皮、种子的乙醇提取物。将三者的提取物分别用二甲基亚砜(DMSO)溶解，配制成10mg/mL样品母液备用。

实施例3石笔木不同部位提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

于96孔板中分别加入112μL PBS(pH 6.8)，样品组为实施例1，2提取得到的不同部位(石笔木花、果皮、种子)提取物，按每孔8μL加入到96孔板，每组设5个浓度，每个浓度设3个平行。另设样品空白组、阴性对照组和空白对照组。样品组和阴性对照组加入20μL 0.2U/mLα-葡萄糖苷酶，样品空白组和空白对照组加入20μL pH 6.8的磷酸缓冲液，混匀后37℃孵育15min，加入20μL 2.5mmol/L PNPG，37℃下孵育15min，加入80μL 0.2mol/L Na₂CO₃终止反应，酶标仪405nm处测定OD值，以阿卡波糖作为阳性对照药。采用GraphPad Prism软件，以抑制率对浓度作图并进行回归方程拟合，求出半数抑制浓度(IC₅₀值)。

本发明酶活性抑制率按如下公式计算：

实施例4抑制作用结果

石笔木花、果皮、种子乙醇提取物和水提取物的α-葡萄糖糖苷酶抑制活性见表1。石笔木花、果皮、种子乙醇提取物和水提取物均表现出不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性，其半数抑制浓度(IC₅₀)为2.49～40.77μg/mL，均高于阳性对照阿卡波糖的抑制活性(IC₅₀＝484.9μg/mL)。

表1石笔木不同部位提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性

上述实施例只是用于对本发明的举例和说明，而非意在将本发明限制于所描述的实施例范围内。此外本领域技术人员可以理解的是，本发明不局限于上述实施例，根据本发明的教导还可以做出更多种的变型和修改，这些变型和修改均落在本发明所要求保护的范围内。