阅读说明：本技术 嘧啶二酮并吲哚和吡啶酮并吲哚类化合物的制备及用途 (Preparation and application of pyrimidinedione indole and pyridone indole compounds ) 是由 孙海鹰 马宗辉 傅源涛 方坤森 郭天玥 袁易南 于 2019-04-03 设计创作，主要内容包括：本发明涉及含有嘧啶-2,4-二酮并[5,4-b]吲哚骨架或吡啶-2-酮并[3,2-d]吲哚骨架的化合物的制备方法,本发明进一步涉及其作为BET Bromo结构域抑制剂的医疗用途。<Image he="251" wi="700" file="DSA0000181449190000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The invention relates to compositions containing pyrimidine-2, 4-diketo [5, 4-b ]]Indole skeleton or pyridine-2-one [3, 2-d ]]The invention further relates to the medical use thereof as BET Bromo domain inhibitors.)

嘧啶二酮并吲哚和吡啶酮并吲哚类化合物的制备及用途

技术领域

本发明涉及含有嘧啶-2，4-二酮并[5，4-b]吲哚骨架或吡啶-2-酮并[3，2-d]吲哚骨架的化合物的制备方法，本发明进一步涉及其作为BET Bromo结构域抑制剂的医疗用途。

背景技术

组蛋白乙酰化是一种重要的组蛋白转录后修饰，也是表观遗传学的重要研究内容。BRD(Bromodomain)是一类能够特异性识别乙酰化赖氨酸的保守蛋白结构域，含有BRD的蛋白可以通过与乙酰化赖氨酸结合促使染色质重塑因子和转录因子等相关蛋白富集于特定的基因转录位点，调节基因的转录表达。目前，人体内已发现61种BRD，存在于46种蛋白中，根据其功能的不同，这些蛋白被划分为8大家族。BET(Bromodomain and extra-terminal)蛋白家族是BRD蛋白家族的第2类，包括4个成员，分别是BRDT、BRD2、BRD3及BRD4。BET家族蛋白能够与组蛋白H3和H4中乙酰化赖氨酸结合，并通过招募不同的转录复合物调节与细胞周期和细胞生长相关的基因的转录。BET蛋白的功能失调与多种人类疾病的产生有关，因此小分子BET抑制剂有可能被发展成为治疗人类疾病，如癌症、炎症、病毒感染等的药物(J.Med.Chem.2017，60，4533-4558；Future Med.Chem.2016，8，1655-1680.)。

本发明涉及与BET家族蛋白的Bromo结构域结合并抑制Bromo结构域与乙酰化赖氨酸结合的化合物。

发明内容

在一个实施方案中，本发明公开了如式I所示的化合物或其药学上可接受的盐，所述式I化合物具有如下结构：

其中：

A¹为-N＝或-C(R⁵)-；

A²为-N＝或-C(R⁶)-；

A³为-N-或-CH-；

A⁴为-N-或-CH-；

X¹为O＝或S＝；

X²为O＝或S＝；

R¹为任选取代的五元芳杂环，取代基为氢、卤素、烷基、环烷基、卤代烷基、烷氧基；

R²为氢、羟基、烷基、环烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、烷氨基和卤素；

R³为烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂环芳基、芳烷基、杂环芳烷基；

R⁴为氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、羟烷基、烷氧基、烷氧基烷基、杂烷基、(杂环基)烷基、(氨基)烷基、任选取代的杂环基和甲酰胺基；

R⁵为氢、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、氨基和卤素；

R⁶为氢、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、氨基和氟。

本发明优选的式I化合物如下：

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-2，4(3H)-二酮(I-1)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-1-((3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-2，4(3H)-二酮(I-2)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-3)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-苄基-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-4)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(3-氟苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-5)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(4-氟苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-6)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(3-氯苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-7)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(4-氯苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-8)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(3-甲基苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-9)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(4-甲基苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-10)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-((3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-11)。

本发明也提供了如式I所示的化合物的制备方法，如下反应式：

具体包括以下步骤：

(1)步骤a为化合物1与乙酸酐反应制得化合物2；

(2)步骤b为化合物2与2-溴乙酸乙酯制得化合物3；

(3)步骤c为化合物3脱乙酰化制得化合物4；

(4)步骤d为化合物4先与异氰酸乙酯反应，再与甲醇钠反应制得化合物5；

(5)步骤e为化合物5先与二碳酸二叔丁酯反应制得化合物6；

(6)步骤f为化合物6与不同的卤代烃制得化合物7；

(7)步骤g为化合物7与3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸反应制得化合物I-1 to 11。

在另一个实施方案中，本发明公开了如式II所示的化合物或其药学上可接受的盐，所述式II化合物具有如下结构：

其中：

B¹为-N＝或-C(R¹⁰)-；

B²为-N＝或-C(R¹¹)-；

B³为-N-或-CH-；

Y为O＝或S＝；

R⁷为任选取代的五元芳杂基；

R⁸为氢、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、氨基和卤素；

R⁹为任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、芳烷基、(杂芳基)烷基；

R¹⁰为氢、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、氨基和卤素；

R¹¹为氢、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、氨基和氟；

本发明优选的式II化合物如下：

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-1-苯基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(II-1)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-1-苄基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(II-2)；

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(II-3)。

本发明也提供了如式II所示的化合物的制备方法，如下反应式：

具体包括以下步骤：

(1)步骤h为化合物7与四氯化锡和氯化银反应制得化合物8；

(2)步骤i为化合物8与4-甲氧基氯苄反应制得化合物9；

(3)步骤j为化合物9与盐酸羟胺和乙醇钠反应制得化合物10；

(4)步骤k为化合物10与三氯化铝反应制得化合物11；

(5)步骤l为化合物11与不同的卤代烃反应制得化合物12；

(6)步骤m为化合物12与三氯氧磷和N，N-二甲基甲酰胺反应关环制得化合物13；

(7)步骤n为化合物13与3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸反应制得化合物14；

(8)步骤o为化合物14与三氟乙酸反应制得化合物II-1 to 3。

本发明的另一个目的是提供式I化合物或其药学上可接受的盐与式II化合物或其药学上可接受的盐作为BET bromodomain抑制剂在治疗癌症方面的用途。

具体实施方式

下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好的阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。

实施例1

N-(5-溴-2-氰基苯基)乙酰胺(2-A)的制备

室温条件下，将2-氨基-4-溴苄腈(15.6g，79.3mmol)溶于乙酸酐(75.0mL，793mmol)中，升温至100℃，加热搅拌反应40min。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，加入100mL水，搅拌30min，抽滤，干燥滤饼，得到粗品。通过硅胶柱层析进行纯化，得到白色固体14.2g，收率75％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ10.27(s，1H)，7.92(m，1H)，7.76(m，1H)，7.53(m，1H)，2.13(s，3H).

实施例2

1-乙酰基-3-氨基-6-溴-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(3-A)的制备

室温条件下，将N-(5-溴-2-氰基苯基)乙酰胺(2-A)(13.1g，54.6mmol)溶于无水四氢呋喃(150mL)中，降温至0℃，分批加入叔丁醇钾(9.2g，81.9mmol)，加完以后，0℃搅拌30min。滴加溴乙酸乙酯(13.7g，81.9mmol)，加完以后，移至室温搅拌反应2h。TLC监测，反应完成以后，加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，搅拌10min。分出有机相，用乙酸乙酯萃取水相(100mL*2)，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压浓缩溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到黄色固体13.3g，收率75％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.93(d，J＝1.6Hz，1H)，7.70-7.59(m，2H)，4.98(m，1H)，4.22(q，J＝7.2Hz，2H)，3.82(m，1H)，1.96(s，3H)，1.29(t，J＝7.2Hz，3H).

实施例3

3-氨基-6-溴-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(4-A)的制备

室温条件下，将1-乙酰基-3-氨基-6-溴-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(3-A)(11.9g，36.6mmol)溶于乙醇(75mL)和水(75mL)的混合溶剂中，加入碳酸钾(25.3g，183mmol)，加热搅拌回流反应4h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，加入水(100mL)，搅拌30min。抽滤，用水(20mL)洗涤滤饼，干燥滤饼，得到灰色固体8.3g，收率54％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ10.55(s，1H)，7.73(d，J＝8.6Hz，1H)，7.38(d，J＝1.5Hz，1H)，7.03(dd，J＝8.6，1.7Hz，1H)，5.79(s，2H)，4.30(q，J＝7.1Hz，2H)，1.33(t，J＝7.1Hz，3H).

实施例4

7-溴-3-乙基-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-2，4(3H)-二酮(5-A)的制备

室温条件下，将3-氨基-6-溴-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(4-A)(5.2g，18.5mmol)溶于无水甲苯(60mL)中，加入乙基异氰酸酯(4.4mL，55.6mmol)和N，N-二异丙基乙胺(3.1mL，18.5mmol)，升温至80℃，加热反应12h。降温至室温，抽滤，用甲苯(20mL)洗涤滤饼，干燥滤饼，得灰白色固体。将得到的固体溶于甲醇(60mL)中，分批加入甲醇钠(3.0g，55.6mmol)，室温搅拌反应1h。TLC监测，反应完成以后，加入水(30mL)，搅拌30min，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥滤饼，用***(30mL)打浆，得到灰白色固体4.6g，收率80％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.97(s，2H)，7.88(d，J＝8.6Hz，1H)，7.57(s，1H)，7.27(d，J＝8.6Hz，1H)，3.97(q，J＝6.9Hz，2H)，1.17(t，J＝6.9Hz，3H).

实施例5

7-溴-3-乙基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-A)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-2，4(3H)-二酮(5-A)(4.6g，14.8mmol)溶于无水四氢呋喃(40mL)中，加入二碳酸二叔丁酯(3.4mL，14.8mmol)和4-二甲氨基吡啶(0.18g，1.48mmol)，搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，加入水，搅拌30min，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥滤饼，用***(30mL)打浆，抽滤，干燥滤饼，得到白色固体4.4g，收率73％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.30(s，1H)，8.18(s，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，1H)，7.58(d，J＝8.3Hz，1H)，3.95(q，J＝7.0Hz，2H)，1.59(s，9H)，1.16(t，J＝6.9Hz，3H).

实施例6

7-溴-3-乙基-2，4-二氧代-1-(1-苯基乙基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-A-1)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-A)(94mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和(1-溴乙基)苯(85.1mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到化合物白色固体70.7mg，收率60％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.37(s，1H)，7.42-7.18(m，7H)，6.42(m，1H)，4.12(q，J＝7.0Hz，2H)，2.04(q，J＝7.7Hz，3H)，1.68(s，9H)，1.26(t，J＝7.0Hz，3H).

实施例7

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-2，4(3H)-二酮(I-1)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-2，4-二氧代-1-(1-苯基乙基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-A-1)(56.7mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体19.0mg，收率40％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ10.60(s，1H)，7.45-7.23(m，7H)，6.88(m，1H)，6.53(m，1H)，4.23(m，2H)，2.43(s，3H)，2.30(s，3H)，2.09(d，J＝7.0Hz，3H)，1.33(t，J＝7.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：427.9[M+H]⁺

实施例8

7-溴-3-乙基-2，4-二氧代-1-((3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-A-2)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-A)(94mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和5-(氯甲基)-3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑(78.5mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到化合物白色固体78.6mg，收率63％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.42-8.35(m，1H)，7.48-7.41(m，1H)，7.39-7.32(m，1H)，5.60(s，1H)，5.44(s，2H)，4.13(q，J＝7.3Hz，2H)，3.98(s，3H)，1.80-1.72(m，1H)，1.68(s，9H)，1.29(t，J＝7.3Hz，3H)，0.83-0.74(m，2H)，0.61-0.53(m，2H).

实施例9

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-1-((3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-2，4(3H)-二酮(I-2)

室温条件下，将7-溴-3-乙基-2，4-二氧代-1-((3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-A-2)(60.0mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体19.4mg，收率38％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ11.20(s，1H)，7.74(d，J＝8.5Hz，1H)，7.52(s，1H)，7.08(d，J＝8.3Hz，1H)，5.70(s，1H)，5.54(s，2H)，4.27(q，J＝6.7Hz，2H)，4.03(s，3H)，2.49(s，3H)，2.36(s，3H)，1.85-1.70(m，1H)，1.37(t，J＝6.7Hz，3H)，0.85-0.72(m，2H)，0.64-0.51(m，2H).MS(ESI)m/z：458.1[M+H]⁺

实施例10

N-(5-溴-2-氰基-4-甲氧基苯基)乙酰胺(2-B)的制备

室温条件下，将2-氨基-4-溴-5-甲氧基苄腈(18.0g，79.3mmol)溶于乙酸酐(75.0mL，793mmol)中，升温至100℃，加热搅拌反应40min。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，加入100mL水，搅拌30min，抽滤，干燥滤饼，得到粗品。通过硅胶柱层析进行纯化，得到白色固体16.2g，收率76％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ10.07(s，1H)，7.81(s，1H)，7.55(s，1H)，3.90(s，3H)，2.08(s，3H).

实施例11

1-乙酰基-3-氨基-6-溴-5-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(3-B)的制备

室温条件下，将N-(5-溴-2-氰基-4-甲氧基苯基)乙酰胺(2-B)(14.7g，54.6mmol)溶于无水四氢呋喃(150mL)中，降温至0℃，分批加入叔丁醇钾(9.2g，81.9mmol)，加完以后，0℃搅拌30min。滴加溴乙酸乙酯(13.7g，81.9mmol)，加完以后，移至室温搅拌反应2h。TLC监测，反应完成以后，加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，搅拌10min。分出有机相，用乙酸乙酯萃取水相(100mL*2)，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压浓缩溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到黄色固体14.2g，收率73％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.87(s，1H)，7.17(s，1H)，4.87(m，1H)，4.21-4.06(m，2H)，3.93(s，3H)，3.74(m，1H)，1.88(s，3H)，1.27-1.19(m，3H).

实施例12

3-氨基-6-溴-5-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(4-B)的制备

室温条件下，将1-乙酰基-3-氨基-6-溴-5-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(3-B)(13.0g，36.6mmol)溶于乙醇(75mL)和水(75mL)的混合溶剂中，加入碳酸钾(25.3g，183mmol)，加热搅拌回流反应4h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，加入水(100mL)，搅拌30min。抽滤，用水(20mL)洗涤滤饼，干燥滤饼，得到灰色固体6.0g，收率52％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ10.17(s，1H)，7.48-7.40(m，2H)，5.56(s，2H)，4.29(d，J＝6.9Hz，2H)，3.82(s，3H)，1.33(t，J＝6.9Hz，3H).

实施例13

7-溴-3-乙基-8-甲氧基-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-2，4(3H)-二酮(5-B)的制备

室温条件下，将3-氨基-6-溴-5-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(4-B)(5.8g，18.5mmol)溶于无水甲苯(60mL)中，加入乙基异氰酸酯(4.4mL，55.6mmol)和N，N-二异丙基乙胺(3.1mL，18.5mmol)，升温至80℃，加热反应12h。降温至室温，抽滤，用甲苯(20mL)洗涤滤饼，干燥滤饼，得灰白色固体。将得到的固体溶于甲醇(60mL)中，分批加入甲醇钠(3.0g，55.6mmol)，室温搅拌反应1h。TLC监测，反应完成以后，加入水(30mL)，搅拌30min，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥滤饼，用***(30mL)打浆，得到灰白色固体5.3g，收率85％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.86-11.58(m，2H)，7.68-7.55(m，2H)，3.97(q，J＝7.2Hz，2H)，3.86(s，3H)，1.17(t，J＝7.2Hz，3H).

实施例14

7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-2，4(3H)-二酮(5-B)(5.0g，14.8mmol)溶于无水四氢呋喃(40mL)中，加入二碳酸二叔丁酯(3.4mL，14.8mmol)和4-二甲氨基吡啶(0.18g，1.48mmol)，搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，加入水，搅拌30min，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥滤饼，用***(30mL)打浆，抽滤，干燥滤饼，得到白色固体4.9g，收率75％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.17(s，1H)，8.20(s，1H)，7.76(s，1H)，4.00-3.84(m，5H)，1.58(s，9H)，1.16(t，J＝6.8Hz，3H).

实施例15

7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1-(1-苯基乙基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-1)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和(1-溴乙基)苯(85.1mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体78.6mg，收率63％。

实施例16

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-3)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1-(1-苯基乙基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-1)(110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体，收率38％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ10.89(s，1H)，7.49-7.27(m，5H)，6.78(s，1H)，6.52(s，1H)，4.31(d，J＝6.0Hz，2H)，4.14(q，J＝6.0Hz，1H)，3.40(s，3H)，2.32(s，3H)，2.17(s，3H)，2.08(d，J＝3.0Hz，3H)，1.39(t，J＝6.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：458.1[M+H]⁺

实施例17

7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1-苄基-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(7-B-2)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和溴苄(78.7mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体80.2mg，收率66％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.39(s，1H)，7.38-7.32(m，2H)，7.30-7.22(m，3H)，6.88(s，1H)，5.63(s，2H)，4.21(q，J＝7.0Hz，2H)，3.57(s，3H)，1.67(s，9H)，1.33(t，J＝7.0Hz，3H).

实施例18

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-苄基-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-4)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1-苄基-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(7-B-2)(58.5mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体16.2mg，收率33％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.92(s，1H)，7.39-7.25(m，6H)，7.00(s，1H)，5.68(s，2H)，4.31(q，J＝7.0Hz，2H)，3.57(s，3H)，2.31(s，3H)，2.16(s，3H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：444.1[M+H]⁺

实施例19

7-溴-3-乙基-1-(3-氟苄基)-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-3)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和3-氟溴苄(87mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体80.4mg，收率64％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.21(s，1H)，7.47-7.37(m，1H)，7.34-7.18(m，2H)，7.16-7.03(m，2H)，5.67(s，2H)，4.04(q，J＝6.9Hz，2H)，3.64(s，3H)，1.60(s，9H)，1.22(t，J＝6.9Hz，3H).

实施例20

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(3-氟苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-5)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-1-(3-氟苄基)-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-3)(60.4mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体18.0mg，收率35％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.84(s，1H)，7.38-7.31(m，2H)，7.17-7.13(m，1H)，7.04-6.94(m，3H)，5.67(s，2H)，4.30(q，J＝7.0Hz，2H)，3.58(s，3H)，2.31(s，3H)，2.17(s，3H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：462.1[M+H]⁺

实施例21

7-溴-3-乙基-1-(4-氟苄基)-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-4)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和4-氟溴苄(87mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体82.9mg，收率66％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.21(s，1H)，7.46-7.37(m，2H)，7.24-7.16(m，2H)，7.10(s，1H)，5.64(s，2H)，4.05(q，J＝6.6Hz，2H)，3.66(s，3H)，1.59(s，9H)，1.22(t，J＝6.9Hz，3H).

实施例22

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(4-氟苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-6)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-1-(4-氟苄基)-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-4)(60.4mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体19.0mg，收率37％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.90(s，1H)，7.36-7.29(m，3H)，7.09-7.03(m，2H)，7.00(s，1H)，5.63(s，2H)，4.29(q，J＝7.0Hz，2H)，3.61(s，3H)，2.32(s，3H)，2.17(s，3H)，1.38(t，J＝7.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：462.1[M+H]⁺

实施例23

7-溴-3-乙基-1-(3-氯苄基)-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-5)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和3-氯溴苄(94.5mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体81.6mg，收率63％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.26(s，1H)，7.22-7.13(m，3H)，7.07-7.01(m，1H)，6.71(s，1H)，5.48(s，2H)，4.11(q，J＝6.8Hz，2H)，3.52(s，3H)，1.59(s，9H)，1.25(t，J＝6.8Hz，3H).

实施例24

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(3-氯苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-7)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-1-(3-氯苄基)-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-5)(62.2mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体19.0mg，收率36％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.99(s，1H)，7.36-7.21(m，5H)，6.97(s，1H)，5.65(s，2H)，4.31(q，J＝7.0Hz，2H)，3.61(s，3H)，2.32(s，3H)，2.17(s，3H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：478.1[M+H]⁺

实施例25

7-溴-3-乙基-1-(4-氯苄基)-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-6)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和4-氯溴苄(94.5mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体84.1mg，收率65％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.37(s，1H)，7.32(d，J＝8.4Hz，2H)，7.20(d，J＝8.4Hz，2H)，6.81(s，1H)，5.57(s，2H)，4.19(q，J＝6.9Hz，2H)，3.61(s，3H)，1.67(s，9H)，1.32(t，J＝6.8Hz，3H).

实施例26

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(4-氯苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-8)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-1-(4-氯苄基)-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-6)(62.2mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体18.6mg，收率35％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ11.04(s，1H)，7.36-7.26(m，5H)，6.97(s，1H)，5.63(s，2H)，4.30(q，J＝7.0Hz，2H)，3.61(s，3H)，2.32(s，3H)，2.18(s，3H)，1.38(t，J＝7.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：478.1[M+H]⁺

实施例27

7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1-(3-甲基苄基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-7)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和3-甲基溴苄(85.1mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体77.4mg，收率62％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.36(s，1H)，7.15-7.10(m，4H)，6.90(s，1H)，5.57(s，2H)，4.20(q，J＝7.0Hz，2H)，3.60(s，3H)，2.30(s，3H)，1.67(s，9H)，1.33(t，J＝7.0Hz，3H).

实施例28

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(3-甲基苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-9)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1-(3-甲基苄基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-7)(60.0mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体16.2mg，收率32％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.53(s，1H)，7.28-7.21(m，2H)，7.16-7.06(m，3H)，7.04(s，1H)，5.63(s，2H)，4.29(q，J＝7.0Hz，2H)，3.58(s，3H)，2.34-2.27(m，6H)，2.15(s，3H)，1.38(t，J＝7.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：458.2[M+H]⁺

实施例29

7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1-(3-甲基苄基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-8)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和4-甲基溴苄(85.1mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体79.8mg，收率64％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.81(s，1H)，7.41(s，1H)，7.21(d，J＝8.4，2H)，7.09(d，J＝8.4，2H)，5.15(s，2H)，4.28(q，J＝7.2Hz，2H)，3.70(s，3H)，2.32(s，3H)，1.53(s，9H)，1.22(t，J＝7.2Hz，3H).

实施例30

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-(4-甲基苄基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-10)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1-(3-甲基苄基)-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚叔丁酯-5-羧酸乙酯(7-B-8)(60.0mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体15.4mg，收率30％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.33(s，1H)，7.27-7.20(m，3H)，7.16(d，J＝8.0Hz，2H)，7.05(s，1H)，5.62(s，2H)，4.28(q，J＝7.0Hz，2H)，3.60(s，3H)，2.34-2.28(m，6H)，2.16(s，3H)，1.37(t，J＝7.0Hz，3H).MS(ESI)m/z：458.2[M+H]⁺

实施例31

7-溴-1-((3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3-叔丁基，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸乙酯(7-B-9)的制备

室温条件下，将7-溴-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸叔丁酯(6-B)(100mg，0.23mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(148.7mg，0.46mmol)和5-(氯甲基)-3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑(78.5mg，0.46mmol)，升温至82℃，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱层析纯化，得到白色固体82.9mg，收率63％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.39(s，1H)，6.79(s，1H)，5.64(s，1H)，5.44(s，2H)，4.14(q，J＝6.9Hz，2H)，3.98(s，3H)，3.71(s，3H)，1.81-1.72(m，1H)，1.67(s，9H)，1.29(t，J＝6.9Hz，3H)，0.83-0.74(m，2H)，0.59-0.50(m，2H).

实施例32

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-乙基-8-甲氧基-1-((3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-1，5-二氢-2H-嘧啶并[5，4-b]吲哚2，4(3H)-二酮(I-11)的制备

室温条件下，将7-溴-1-((3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-3-乙基-8-甲氧基-2，4-二氧代-1，2，3-叔丁基，4-四氢-5H-嘧啶并[5，4-b]吲哚-5-羧酸乙酯(7-B-9)(63.9mg，110.6μmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.4mg，165.9μmol)，碳酸铯(72.1mg，221.2μmol)和四三苯基膦钯(12.8mg，11.1μmol)溶于乙二醇二甲醚(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中(VDME∶VH2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到灰白色固体20.9mg，收率38％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ11.30(s，1H)，8.39(s，1H)，6.79(s，1H)，5.64(s，1H)，5.44(s，2H)，4.14(q，J＝6.9Hz，2H)，3.98(s，3H)，3.67(s，3H)，2.19(s，3H)，2.35(s，3H)，1.81-1.72(m，1H)，1.29(t，J＝6.9Hz，3H)，0.83-0.74(m，2H)，0.59-0.50(m，2H).MS(ESI)m/z：488.2[M+H]⁺

实施例33

1-(6-溴-1H-吲哚-3-基)乙-1-酮(8)的制备

室温条件下，将6-溴吲哚(7)(15.0g，76.5mmol)溶于无水甲苯(150mL)中，降温至0℃，加入乙酰氯(10.9mL，153.0mmol)，0℃搅拌15min。然后加入四氯化锡(17.9ml，153.0mmol)的甲苯(75mL)溶液，0℃搅拌反应2h。TLC监测，反应完成以后，滴加8％的碳酸氢钠溶液(75mL)，然后加入乙酸乙酯(150mL)，室温搅拌10min。分出有机层，用乙酸乙酯萃取水层(150mL*2)，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压浓缩蒸除溶剂，得到褐色固体。用丙酮进行重结晶，得到灰色固体11.3g，收率为62％。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ12.02(s，1H)，8.33(d，J＝3.1Hz，1H)，8.11(d，J＝8.5Hz，1H)，7.66(d，J＝1.6Hz，1H)，7.32(dd，J＝8.5，1.8Hz，1H)，2.46(s，3H).

实施例34

1-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)乙-1-酮(9)的制备

室温条件下，将1-(6-溴-1H-吲哚-3-基)乙-1-酮(8)(10.0g，42.0mmol)溶于干燥的DMF(100mL)中，加入60％的氢化钠(1.85g，46.2mmol)，室温搅拌30min，滴加4-甲氧基氯苄(8.5mL，63.0mmol)，加完以后，继续搅拌反应2h。TLC监测，反应完成以后，加入水，有固体析出，搅拌30min。抽滤，干燥滤饼，得到灰白色固体9.6g，收率为64％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.26(m，1H)，7.65(s，1H)，7.47(m，1H)，7.38(m，1H)，7.11(d，J＝6.0Hz，2H)，6.89(d，J＝6.0Hz，2H)，5.21(s，2H)，3.80(s，3H)，2.48(s，3H).

实施例35

1-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)乙-1-酮肟(10)的制备

室温条件下，将1-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)乙-1-酮(9)(5.7g，15.1mmol)溶于乙醇(20mL)和水(15mL)的混合溶剂中，加入乙酸钠(3.3g，47.7mmol)和盐酸羟胺(3.3g，39.8mmol)，加热搅拌回流反应2.5h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，将反应液缓慢倒入冰水中，搅拌30min，抽滤，用水洗涤滤饼，干燥滤饼，得到白色固体5.5g，收率为92.6％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ10.64(s，1H)，8.09(d，J＝6.0Hz，1H)，7.86(s，1H)，7.72(s，1H)，7.22(d，J＝7.1Hz，3H)，6.88(d，J＝7.1Hz，2H)，5.34(s，2H)，3.70(s，3H)，2.17(s，3H).

实施例36

N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)乙酰胺(11)的制备

室温条件下，将1-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)乙-1-酮肟(10)(5.0g，13.4mmol)溶于乙腈(30mL)中，滴加三氯化铝(0.36g，2.7mmol)的乙腈(10mL)溶液，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，加入水(50mL)，然后用乙酸乙酯萃取(50ml*3)，合并有机相。饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压浓缩溶剂，通过柱层析进行纯化，得到淡黄色固体4.3g，收率86％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.80(s，1H)，7.64(s，1H)，7.38(m，2H)，7.14(s，1H)，7.01(d，J＝8.3Hz，2H)，6.79(d，J＝8.3Hz，2H)，5.05(s，2H)，3.75(s，3H)，2.18(s，3H).

实施例37

N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)-N-苯基乙酰胺(12-A)的制备

室温条件下，N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)乙酰胺(11)(0.2g，0.54mmol)溶于甲苯(4mL)中，加入碘代苯(0.13g，0.64mmol)，溴化酮(12mg，53.6μmol)，碳酸铯(0.35g，1.1mmol)和N，N，-二甲基乙二胺(0.012μL，0.11mmol)，氮气保护，升温至130℃，加热搅拌反应24h。TLC监测，反应完成以后，抽滤，减压浓缩滤液，通过柱层析进行纯化，得到白色固体0.12g，收率50％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.39(s，1H)，7.30-7.20(m，5H)，7.18-7.08(m，2H)，7.04(s，1H)，6.97(d，J＝8.6Hz，2H)，6.76(d，J＝8.6Hz，2H)，5.07(s，2H)，3.69(s，3H)，2.00(s，3H).

实施例38

7-溴-5-(4-甲氧基苄基)-1-苯基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(13-A)的制备

室温条件下，将化合物N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)-N-苯基乙酰胺(12-A)(0.1g，0.22mmol)溶于DMF(2.0mL)中，降温至0℃，滴加冷却的POCl3(0.1mL，1.1mmol)的DMF(1.0mL)溶液，加完以后，0℃搅拌反应3h。降温至室温，将反应也倒入冰水(10.0mL)中，然后，加热搅拌回流反应12h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，有黄色固体析出，抽滤，用水(10.0mL)洗涤滤饼，干燥滤饼，通过柱层析进行纯化，得到黄色固体64.0mg，收率63％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.71-7.62(m，4H)，7.56-7.45(m，3H)，7.11-7.05(d，J＝8.7Hz，2H)，6.96-6.84(m，3H)，6.79-6.73(m，1H)，6.02-5.97(m，1H)，5.40(s，2H)，3.81(s，3H).

实施例39

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-5-(4-甲氧基苄基)-1-苯基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(14-A)的制备

室温条件下，将7-溴-5-(4-甲氧基苄基)-1-苯基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(13-A)(50.0mg，0.11mmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.0mg，0.16mmol)，碳酸铯(71.0mg，0.22mmol)和四三苯基膦钯(12.6mg，10.9μmol)溶于乙二醇二甲醚(4.0mL)和水(1.0mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到黄色固体32.0mg，收率63％。

实施例40

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-1-苯基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(II-1)的制备

室温条件下，将7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-5-(4-甲氧基苄基)-1-苯基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(14-A)(100mg，0.21mmol)溶于三氟乙酸(2mL)中，加入催化量的苯甲醚(2.3mg，0.02μmol)，氮气保护下，加热搅拌回流反应12h。TLC监测，反应完成以后，减压浓缩蒸除三氟乙酸。通过柱层析纯化，得到淡黄色固体36.0mg，收率48％。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.06-8.00(m，1H)，7.75-7.67(m，3H)，7.53-7.45(m，2H)，7.42-7.37(m，1H)，6.79-6.69(m，2H)，6.19-6.14(m，1H)，2.38(s，3H)，2.22(s，3H).MS(ESI)m/z：355.1[M+H]⁺

实施例41

N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)-N-苄基乙酰胺(12-B)的制备

室温条件下，将N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)乙酰胺(11)(0.2g，0.54mmol)溶于乙腈(5.0mL)中，加入碳酸铯(0.35g，1.1mmol)，然后加入溴苄(0.13mL，1.1mmol)，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，抽滤，真空减压浓缩蒸除溶剂，通过柱层析进行纯化，得到白色固体0.15g，收率为62％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ7.74(s，1H)，7.39(s，1H)，7.27-7.20(m，4H)，7.20-7.11(m，3H)，7.04(d，J＝8.6Hz，2H)，6.85(d，J＝8.6Hz，2H)，5.28(s，2H)，4.82(s，2H)，3.71(s，3H)，1.84(s，3H).

实施例42

7-溴-5-(4-甲氧基苄基)-1-苄基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(13-B)的制备

室温条件下，将化合物N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)-N-苄基乙酰胺(12-B)(0.1g，0.22mmol)溶于DMF(2.0mL)中，降温至0℃，滴加冷却的POCl3(0.1mL，1.1mmol)的DMF(1.0mL)溶液，加完以后，0℃搅拌反应3h。降温至室温，将反应也倒入冰水(10.0mL)中，然后，加热搅拌回流反应12h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，有黄色固体析出，抽滤，用水(10.0mL)洗涤滤饼，干燥滤饼，通过柱层析进行纯化，得到黄色固体69mg，收率66％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.17(d，J＝9.6Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.67(d，J＝8.6Hz，1H)，7.29(d，J＝7.1Hz，2H)，7.24-7.07(m，6H)，6.87(d，J＝8.1Hz，1H)，6.67(d，J＝9.5Hz，2H)，5.73(s，2H)，5.61(s，2H)，3.69(s，3H).

实施例43

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-5-(4-甲氧基苄基)-1-苄基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(14-B)的制备

室温条件下，将7-溴-5-(4-甲氧基苄基)-1-苄基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(13-B)(52.0mg，0.11mmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.0mg，0.16mmol)，碳酸铯(71.0mg，0.22mmol)和四三苯基膦钯(12.6mg，10.9μmol)溶于乙二醇二甲醚(4.0mL)和水(1.0mL)的混合溶剂中(VDME∶VH2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到黄色固体35.0mg，收率65％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.83-7.77(m，1H)，7.75-7.70(m，1H)，7.35-7.23(m，5H)，7.20-7.15(m，1H)，7.09-7.03(m，2H)，6.96-6.90(m，1H)，6.87-6.76(m，3H)，5.86(s，2H)，5.42(s，2H)，3.77(s，3H)，2.33(s，3H)，2.19(s，3H).

实施例44

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-1-苄基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(II-2)的制备

室温条件下，将7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-5-(4-甲氧基苄基)-1-苄基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(14-B)(103mg，0.21mmol)溶于三氟乙酸(2mL)中，加入催化量的苯甲醚(2.3mg，0.02μmol)，氮气保护下，加热搅拌回流反应12h。TLC监测，反应完成以后，减压浓缩蒸除三氟乙酸。通过柱层析纯化，得到淡黄色固体36.0mg，收率46％。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.87(d，J＝9.3Hz，1H)，7.71(d，J＝8.6Hz，1H)，7.31(s，1H)，7.23-7.02(m，5H)，6.86(dd，J＝8.6，1.3Hz，1H)，6.65(d，J＝9.3Hz，1H)，5.79(s，2H)，2.29(s，3H)，2.14(s，3H).MS(ESI)m/z：369.1[M+H]⁺

实施例45

N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)-N-(1-苯乙基)乙酰胺(12-C)的制备

室温条件下，将N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)乙酰胺(11)(0.2g，0.54mmol)溶于乙腈(5.0mL)中，加入碳酸铯(0.35g，1.1mmol)，然后加入(1-溴乙基)苯(0.15mL，1.1mmol)，加热搅拌回流反应2h。TLC监测，反应完成以后，抽滤，真空减压浓缩蒸除溶剂，通过柱层析进行纯化，得到白色固体0.15g，收率58％。

实施例46

7-溴-5-(4-甲氧基苄基)-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(13-C)的制备

室温条件下，将化合物N-(6-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲哚-3-基)-N-(1-苯乙基)乙酰胺(12-C)(0.1g，0.22mmol)溶于DMF(2.0mL)中，降温至0℃，滴加冷却的POCl3(0.1mL，1.1mmol)的DMF(1.0mL)溶液，加完以后，0℃搅拌反应3h。降温至室温，将反应也倒入冰水(10.0mL)中，然后，加热搅拌回流反应12h。TLC监测，反应完成以后，降温至室温，有黄色固体析出，抽滤，用水(10.0mL)洗涤滤饼，干燥滤饼，通过柱层析进行纯化，得到得到黄色固体64mg，收率60％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.66-7.60(m，1H)，7.55-7.50(m，1H)，7.37-7.18(m，7H)，7.10-7.00(m，3H)，6.92-6.83(m，2H)，6.78-6.68(m，1H)，5.39(s，2H)，3.80(s，3H)，2.08(d，J＝6.7Hz，3H).

实施例47

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-5-(4-甲氧基苄基)-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(14-C)的制备

室温条件下，将7-溴-5-(4-甲氧基苄基)-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(13-C)(52.0mg，0.11mmol)，3，5-二甲基异噁唑-4-硼酸(23.0mg，0.16mmol)，碳酸铯(71.0mg，0.22mmol)和四三苯基膦钯(12.6mg，10.9μmol)溶于乙二醇二甲醚(4.0mL)和水(1.0mL)的混合溶剂中(V_DME∶V_H2O＝4∶1)，氮气保护，升温至80℃，加热搅拌反应12h。TLC监测，反应完成以后，将温度降至室温，减压浓缩蒸除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化，得到黄色固体36.0mg，收率67％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.75-7.66(m，2H)，7.38-7.31(m，4H)，7.29-7.27(m，2H)，7.22-7.16(m，1H)，7.12-7.06(m，2H)，6.90-6.83(m，3H)，6.80-6.70(m，1H)，5.44(s，2H)，3.80(s，3H)，2.35(s，3H)，2.22(s，3H)，2.13(d，J＝6.8Hz，3H).

实施例48

7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-1-(1-苯乙基)-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(II-3)的制备

室温条件下，将7-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-5-(4-甲氧基苄基)-1-苄基-1，5-二氢-2H-吡啶并[3，2-b]吲哚-2-酮(14-B)(1010.mg，0.21mmol)溶于三氟乙酸(2mL)中，加入催化量的苯甲醚(2.3mg，0.02μmol)，氮气保护下，加热搅拌回流反应12h。TLC监测，反应完成以后，减压浓缩蒸除三氟乙酸。通过柱层析纯化，得到淡黄色固体33.0mg，收率43％。¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ9.56(s，1H)，7.67-7.61(m，1H)，7.42-7.06(m，8H)，6.90-6.60(m，2H)，2.38(s，3H)，2.25(s，3H)，2.16-2.06(m，3H).MS(ESI)m/z：383.1[M+H]⁺

实施例49

式I化合物与式II化学物作为BET bromodomain抑制剂与BRD4-BD1结合的Ki及抑制MV4；11细胞生长的活性参照文献方法进行测定(J.Med.Chem.2017，60，3887-3901；J.Med.Chem.2015，58，4927-4939；J.Med.Chem.2018，61，6110-6120.)。