一种环保长效免洗灭菌消毒液及其制备与使用方法

文档序号:1132704 发布日期:2020-10-09 浏览:11次 >En<

阅读说明:本技术 一种环保长效免洗灭菌消毒液及其制备与使用方法 (Environment-friendly long-acting washing-free sterilizing disinfectant and preparation and use methods thereof ) 是由 宋海兵 黄伯强 钟维邦 于 2020-07-03 设计创作,主要内容包括:本发明提供一种环保长效免洗灭菌消毒液及其制备与使用方法。灭菌消毒液包括如下质量百分比的原料组分:ACS:1~50%;壳聚糖:30~95%;低气味快挥发促进剂:0.1~5%;水:余量。其中:ACS以三种不同质量百分浓度的ACS水溶液加入,具体由浓度由高到低的第一浓度、第二浓度、第三浓度的ACS水溶液组成;壳聚糖由脱乙酰度为80~85%的中脱乙酰度壳聚糖和脱乙酰度为90~95%的高脱乙酰度的壳聚糖组成。本发明提供的灭菌消毒液外观透明、无色无味,其100倍水稀释液,可持久灭杀各类细菌和灭活冠状病毒;产品不含乙醇和活性氯、游离氯等,经检测其LD&lt;Sub&gt;50&lt;/Sub&gt;值≥5000mg/kg,产品安全环保无毒害;使用时能直接喷洒于室内、衣服、皮肤、禽畜舍等。(The invention provides an environment-friendly long-acting no-clean sterilizing disinfectant and a preparation method and a use method thereof. The sterilizing disinfectant comprises the following raw material components in percentage by mass: ACS: 1-50%; and (3) chitosan: 30-95%; low odor fast volatilization accelerator: 0.1-5%; water: and (4) the balance. Wherein: the ACS is added in three ACS aqueous solutions with different mass percentage concentrations, and specifically comprises ACS aqueous solutions with the concentrations from high to low, namely a first concentration, a second concentration and a third concentration; the chitosan consists of chitosan with a medium deacetylation degree of 80-85% and chitosan with a high deacetylation degree of 90-95%. The sterilization disinfectant provided by the invention is transparent in appearance, colorless and tasteless, and can kill various bacteria and inactivate coronavirus for a long time by 100 times of water diluent; the product does not contain ethanol, active chlorine, free chlorine and the like, and the LD of the product is detected 50 The value is more than or equal to 5000mg/kg, and the product is safe, environment-friendly and non-toxic; when in use, the product can be directly sprayed into indoor, clothes, skin, livestock and poultry houses, etc.)

一种环保长效免洗灭菌消毒液及其制备与使用方法

技术领域

本发明涉及消毒液技术领域,具体涉及一种环保免洗灭菌消毒液。

背景技术

使用灭菌消毒液已成为人们生活中必备的防护手段之一。目前常用消毒液主要有:75%的医用酒精、>0.05%的次氯酸钠溶液(84消毒液主要成分)、过氧化氢/过氧乙酸消毒液等9类,这9类消毒液均可有效灭杀冠状病毒。但存在安全隐患和环境破坏性。75%的医用酒精属易燃易爆危险品,当空气中乙醇含量达到19%且温度大于13℃时,此时空气遇火星就会发生爆燃,因此,含酒精类消毒液只能对皮肤或器具进行擦拭性消毒;84消毒液具有强烈的刺激性和腐蚀性,其释放的游离氯具有毒性,生物体吸入或摄入有害;过氧化物消毒液对皮肤具有强刺激性,并且遇碱剧烈反应,存在安全风险。

酸性硫酸钙(Acidic calcium sulfate,以下简称ACS)是一类新型的杀菌防腐产品,由氢氧化钙、硫酸钙和硫酸为原料制备而成,具有无色无味、易溶于水、非挥发性、稳定、低腐蚀性的特性。其化学本质是一种微溶性ⅡA族络合物的酸性溶液,酸当量浓度与98%硫酸(36N)相当,利用ACS的强酸性,可使病毒外部包膜脂肪膜表面的糖蛋白的氢键断裂,破坏蛋白质的二级结构和三级结构,导致糖蛋白的结晶性破坏和生物学活性丧失。ACS能非常有效的创造一个抑制有害微生物的低腐蚀性的极低pH值环境,进而达到延长杀菌、消毒的功效。ACS的杀菌效果与其酸性溶剂的酸性以及浓度等有较大关系,一般情况下酸性溶剂浓度越大,ACS的杀菌率越高,但是酸性越大,其刺激性、腐蚀性也越大同时,经甲壳素脱乙酰化得到的产物—壳聚糖,是抗菌谱较广的天然抗菌物质,壳聚糖灭菌、抗病毒的机理体现在三个方面:(1)由于壳聚糖具备多聚阳离子结构,易与病原菌细胞或病毒表面带负电荷的基团结合,从而阻断了病原菌细胞膜或病毒表面包膜的流动性和通透性;(2)干扰DNA的复制和转录;阻止RNA的逆转录和翻译(3)阻断病原菌和病毒的正常代谢。但是单独使用壳聚糖灭菌消毒所需时间长,效率低。

针对上述酸性硫酸钙和壳聚糖单一消毒液存在的缺陷,本发明拟提供一种ACS和壳聚糖协同作用的灭菌消毒液,以能进一步降低ACS的潜在低腐蚀性,同时还能提高消毒液整体的安全性、消杀效果、环保性,降低其刺激性和腐蚀性。现有技术中还未见有采用ACS和壳聚糖协同作用的灭菌消毒液。

发明内容

本发明要解决的技术问题是:提供一种长效环保免洗灭菌消毒液,其具有安全环保、可免洗且灭菌率高且灭菌可持续时间长等特点。

为解决本发明的技术问题,本发明所采用的技术方案如下:

一方面,本发明提供一种环保长效免洗灭菌消毒液,包括如下质量百分比的原料组分:

ACS:1~50%;

壳聚糖:30~95%;

低气味快挥发促进剂:0.1~5%;

水:余量;

其中:

ACS以三种不同质量百分浓度的ACS水溶液加入,具体由第一浓度的ACS水溶液、第二浓度的ACS水溶液、第三浓度的ACS水溶液组成;且第一浓度的ACS水溶液的浓度最低,第三浓度的ACS水溶液的浓度最高;

壳聚糖由脱乙酰度为80~85%的中脱乙酰度壳聚糖和脱乙酰度为90~95%的高脱乙酰度的壳聚糖组成。

本发明中,ACS本质是一种微溶性ⅡA族络合物(AGIIS)的酸性溶液,为硫酸、硫酸钙、氢氧化钙和有机酸制备而成,其酸性强度pH值最低可以达到-3;其核心价值体现在其保持强酸性的时候拥有极低腐蚀性的特点。ACS中的ⅡA族络合物AGIIS,其元素排列结构与Ca(OH)2类似。这种特殊的排列结构使ACS具有强酸性,同时具备极低腐蚀性和缓蚀性。

优选地,

第一浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为4~6%;第二浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为8~10%;第三浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为25~35%。

更优选地,

第一浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为5%;第二浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为10%;第三浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为30%。

进一步地,

所述80~85%的中脱乙酰度壳聚糖:90~95%的高脱乙酰度壳聚糖的质量比为(1~5):1。

进一步地,

所述低气味快挥发促进剂为AMP-95、AMP-96中的一种或两种的混合。优选的,低气味快挥发促进剂为AMP-95与AMP-96两种的混合。

另一方面,本发明提供上述环保长效免洗灭菌消毒液的制备方法,具体包括如下步骤:

S1、将计量的ACS稀释成三种浓度由低到高的ACS水溶液:第一浓度的ACS水溶液、第二浓度的ACS水溶液、第三浓度的ACS水溶液;

S2、将计量的第一浓度的ACS水溶液与90~95%的高脱乙酰度壳聚糖混合搅拌均匀,得到第一混合液,然后升温至50℃;

S3、将计量的80~85%的中脱乙酰度壳聚糖加入升温后的第一混合液并搅拌均匀后开始滴加第二浓度的ACS水溶液,于10分钟内滴加完,得到第二混合液,升温至80℃;

S4、加入计量的低气味快挥发促进剂并搅拌均匀后开始滴加第三浓度的ACS水溶液,于30分钟内滴加完,70~90℃反应2~8小时;

S5、加入余量的水,搅拌降温冷却,即得。

本发明制得的消毒液外观透明、无色无味。

进一步地,步骤S1中先将计量的ACS先分成等体积的三份,之后再分别稀释成三种不同浓度的ACS水溶液,待用。

进一步地,所述方法中,各计量原料的质量百分比为:

ACS:1~50%;且ACS以稀释后的质量百分浓度为4~6%的第一浓度的ACS水溶液、质量百分浓度为8~10%的第二浓度的ACS水溶液、质量百分浓度为25~35%的第三浓度的ACS水溶液分次加入;更优选地,第一浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为5%;第二浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为10%;第三浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为30%。

中脱乙酰度壳聚糖和高脱乙酰度的壳聚糖总计:30~95%;且中脱乙酰度壳聚糖与高脱乙酰度壳聚糖的质量比为(1~5):1。

低气味快挥发促进剂:0.1~5%;优选地,低气味快挥发促进剂为AMP-95(一种多功能胺助剂,化学名称:2-氨基-2-甲基-1-丙醇;结构式:(CH3)2C(NH2)CH2OH)、AMP-96(一种有机醇胺类化合物)中的一种或两种的混合。更优选为,低气味快挥发促进剂为AMP-95与AMP-96两种的混合。

水:余量。

本发明还提供上述环保长效免洗灭菌消毒液或上述制备方法制得的环保长效免洗灭菌消毒液的使用方法,具体是将所述环保长效免洗灭菌消毒液加水稀释100倍,用于消杀金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和/或冠状病毒。

本发明消毒液的灭菌原理:

由于壳聚糖可溶于酸性介质,而ACS的强酸性能使得壳聚糖能够溶解在ACS水溶液中,在酸性条件下,由于壳聚糖缩醛结构的存在,其β-1,4-糖苷键会缓慢水解,生成带正电荷的低相对分子质量的壳聚糖,进一步增强其与带负电荷的蛋白质和核酸的结合力,并同时渗透进膜结构与细菌或病毒中的DNA或RNA结合,因而能够抑制和阻碍RNA的翻译、逆转录和蛋白质合成,达到灭菌和灭杀病毒的作用。壳聚糖尤其是本发明中采用的中脱乙酰度壳聚糖极易成膜并起到保水的作用,在壳聚糖的保护下,使得ACS的潜在低腐蚀性进一步降低。因此,ACS和壳聚糖协同作用的灭菌消毒液可持久灭杀有效灭杀具有代表性的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,并且能有效灭活冠状病毒,同时又具有安全无害、无刺激性、环保的特性。

本发明中同时采用脱乙酰度为80~85%的中脱乙酰度壳聚糖和90~95%的高脱乙酰度壳聚糖:1)由于壳聚糖的脱乙酰度越高,游离氨基就越多,其与类脂多糖类物质结合力越强,因而抑菌作用越强,因此,高脱乙酰度的壳聚糖的氨基和磷壁酸的结合位点更多,结合力更强。以金黄色葡萄球菌为例,高脱乙酰度壳聚糖更容易与金黄色葡萄球菌的细胞壁中丰富的磷壁酸结合,从而影响其生理功能并最终抑制其繁殖,从而实现灭杀效果。2)同时,壳聚糖的脱乙酰度越高,水溶性也越好。而中脱乙酰度的壳聚糖的成膜性更好,分子量较大,分解的时间更长,同时具有也具有抑菌能力,稍弱于高脱乙酰度。因此中脱乙酰度壳聚糖在本发明消毒液中的主要作用是保证消毒效果的持久性。

由于壳聚糖不溶于纯水,而在弱酸性溶液中,壳聚糖的溶解性更好,在本发明的制备方法中,所以先用酸性较弱的较低浓度的第一浓度的ACS水溶液(如质量百分比浓度为5%的ACS水溶液)溶解,而较高浓度的第三浓度的ACS水溶液(如质量百分比浓度为30%的ACS水溶液)的pH值相对较低,酸性较强,最后添加,并且需要先用低气味快挥发促进剂先调节pH值再加,帮助混合溶解。

在本发明的制备方法中,各个步骤的反应时间和温度的控制会印象产品的透明度和部分壳聚糖进一步水解成氨基葡萄糖、壳二糖、壳三糖等物质,并影响产品最终的相容性和持久性效果,反应时间不够,会导致物质的析出;时间过长,制备时间过程,加大生产成本,在本发明提供方案的反应和时间和温度下,能同时较好地保证生产成本和产品质量。

与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:

1、灭杀效果快速且长效。本发明将无机的ACS和天然原料壳聚糖协同使用用于灭菌消毒,利用ACS的强酸性、低腐蚀性和壳聚糖的生物相容性、抗菌抑菌的特性,制备出的消毒液产品具有快速而强效的灭菌消毒力,可有效灭杀具有代表性的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,同时对冠状病毒也有较好的灭活效果。

2、安全环保。1)由于本发明采用壳聚糖为载体,能进一步降低ACS的腐蚀性;产品中的壳聚糖会缓慢水解并最终溶于水,对皮肤无刺激,不慎进入人体内的壳聚糖会逐步分解为葡萄糖胺并被正常代谢,更安全。2)相比含次氯酸钠的消毒液,本发明提供的灭菌消毒液不含游离氯和活性氯,对环境和人体无害。3)本发明的灭菌消毒液不含有乙醇,无易燃易爆危险性。4)本发明的灭菌消毒液外观透明、无色无味,无刺激性气味、无腐蚀性。

3、无毒免洗。本发明的灭菌消毒液的LD50(半数致死量,median lethal dose,简称LD50)表示在规定时间内,通过指定感染途径,使一定体重或年龄的某种动物半数死亡所需最小细菌数或毒素量)≥5000mg/kg,属于实际无毒级产品。本发明的灭菌消毒液既可采用擦拭使用,也可以采用浸渍或喷雾使用,且使用后不需要另外清洗,属于免洗型消毒液。

4、广谱适用性。本发明提供的灭菌消毒液可直接作用于人体、衣物、口罩、室内家居、汽车器具等的灭菌消毒也可以用于教室、电梯、医院、酒店、飞机内部、食品生产线、厨房用具、餐厅、大众使用设施以及畜舍、禽舍等的灭菌消毒。

具体实施方式

本发明提供一种环保长效免洗灭菌消毒液及其制备方法与使用方法。其中:

本发明提供的环保长效免洗灭菌消毒液包括如下质量百分比的原料组分:

ACS:1~50%;

壳聚糖:30~95%;

低气味快挥发促进剂:0.1~5%;

水:余量。

其中:

ACS以三种不同质量百分浓度的ACS水溶液加入,具体由第一浓度的ACS水溶液、第二浓度的ACS水溶液、第三浓度的ACS水溶液组成;且第一浓度的ACS水溶液的浓度最低,第三浓度的ACS水溶液的浓度最高;作为优选实施方案,所述第一浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为4~6%;第二浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为8~10%;第三浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为25~35%。更优选地,第一浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为5%;第二浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为10%;第三浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为30%。

壳聚糖由脱乙酰度为80~85%的中脱乙酰度壳聚糖和脱乙酰度为90~95%的高脱乙酰度的壳聚糖组成。作为优选实施方案,所述80~85%的中脱乙酰度壳聚糖:90~95%的高脱乙酰度壳聚糖的质量比为(1~5):1。

作为优选实施方案,所述低气味快挥发促进剂为AMP-95、AMP-96中的一种或两种的混合。

本发明提供的环保长效免洗灭菌消毒液的制备方法,具体包括如下步骤:

S1、将计量的ACS稀释成三种浓度由低到高的ACS水溶液:第一浓度的ACS水溶液、第二浓度的ACS水溶液、第三浓度的ACS水溶液;

作为优选实施方式,步骤S1中先将计量的ACS先分成等体积的三份,之后再分别稀释成三种不同浓度的ACS水溶液,待用。所述第一浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为4~6%;第二浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为8~10%;第三浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为25~35%。更优选地,第一浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为5%;第二浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为10%;第三浓度的ACS水溶液的质量百分浓度为30%。

S2、将计量的第一浓度的ACS水溶液与90~95%的高脱乙酰度壳聚糖混合搅拌均匀,得到第一混合液,然后升温至50℃;

S3、将计量的80~85%的中脱乙酰度壳聚糖加入升温后的第一混合液并搅拌均匀后开始滴加第二浓度的ACS水溶液,于10分钟内滴加完,得到第二混合液,升温至80℃;

S4、加入计量的低气味快挥发促进剂并搅拌均匀后开始滴加第三浓度的ACS水溶液,于30分钟内滴加完,70~90℃反应2~8小时;

S5、加入余量的水,搅拌降温冷却,即得。制得的消毒液外观透明、无色无味。

作为优选实施方式,各计量原料的质量百分比为:ACS:1~50%;中脱乙酰度壳聚糖和高脱乙酰度的壳聚糖总计:30~95%;低气味快挥发促进剂:0.1~5%;水:余量。

作为优选实施例方式,中脱乙酰度壳聚糖与高脱乙酰度壳聚糖的质量比为(1~5):1。

作为优选实施方式,低气味快挥发促进剂为AMP-95、AMP-96中的一种或两种的混合。

本发明提供的环保长效免洗灭菌消毒液的使用方法,是将环保长效免洗灭菌消毒液加水稀释至100倍,可以用于消杀金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和/或冠状病毒。

本发明提供的灭菌消毒液同时采用脱乙酰度为80~85%的中脱乙酰度壳聚糖和90~95%的高脱乙酰度壳聚糖,其中高脱乙酰度的抑菌效果更强,主要起灭杀效果,中脱乙酰度的壳聚糖的成膜性更好,同时具有也具有抑菌能力,在保证产品灭菌效果的同时还能保证消毒效果的持久性。

本发明的灭菌消毒液在制备过程中,ACS稀释成三种不同浓度高低的水溶液分三次加入,先用酸性较弱的较低浓度的第一浓度的ACS水溶液帮助壳聚糖溶解,因为壳聚糖在弱酸性溶液中的溶解性更好,而较高浓度的第三浓度的ACS水溶液的pH值相对较低,酸性较强,最后添加,并且需要先用低气味快挥发促进剂先调节pH值再加,帮助混合溶解。

在本发明的制备方法中,通过控制各个步骤的反应时间和温度,能同时较好地保证生产成本和产品质量。

为了更好地阐述该发明的内容,下面通过具体实施例和对比例对本发明进一步的验证。特在此说明,实施例只是为更直接地描述本发明,它们只是本发明的一部分,不能对本发明构成任何限制。

一、各实施例和对比例的组分构成及制备

1、各实施例和对比例的组分构成如下表1:

本实施例和对比例中采用的各原料组分均采用市售成品。但对于本发明而言,各原料的组分的获得包括但不限于市售或通过现有技术提供的方法制得。

表1:新型环保灭菌消毒液各原料组分的质量百分比

2、将上表1中计量的各组分按照如下方法制备灭菌消毒液

S1、将计量的ACS先分成等体积的三份,之后再分别稀释成三种浓度由低到高的ACS水溶液:第一浓度的ACS水溶液,浓度为5%;第二浓度的ACS水溶液,浓度为10%;第三浓度的ACS水溶液,浓度为30%;

S2、将浓度为5%的ACS水溶液与计量的90~95%的高脱乙酰度壳聚糖混合搅拌均匀,得到第一混合液,然后升温至50℃;

S3、将计量的80~85%的中脱乙酰度壳聚糖加入升温后的第一混合液并搅拌均匀后开始滴加浓度为10%的ACS水溶液,于10分钟内滴加完,得到第二混合液,升温至80℃;

S4、加入计量的AMP-95和AMP-96并搅拌均匀后,开始滴加浓度为30%的ACS水溶液,于30分钟内滴加完,70~90℃反应2~8小时;

S5、加入余量的水,搅拌降温冷却,即得。制得的消毒液外观透明、无色无味。

S6、稀释待用:将步骤S5得到的灭菌消毒液按消毒液:水=1:99加水稀释成灭菌消毒液100倍稀释液,待用。

在此想说明的是,本发明的制备方法想要强调的是ACS应当分三次,分别以由低到高的浓度加入,低浓度弱酸性的ACS更利于壳聚糖的溶解,之后依次加入较高和高浓度的ACS,且高浓度的ACS应当在加入低气味快挥发促进剂先调节pH值再加,帮助混合溶解。因此本发明仅提供将ACS三等份后分别稀释成5%、10%、30%三种浓度的上述实施例,但本发明并不局限于上述三种浓度。

二、各实施例和对比例制得的灭菌消毒液的灭菌性能试验

1、杀灭细菌的性能测试

测试方法参照《消毒技术规范》[s]-2002:取无菌试管,加入试验用菌悬浮液,加入0.5mL的3%牛血清白蛋白溶液,充分混匀并20℃水浴保温5min。吸取实施例1~5和对比例1~2制备的灭菌消毒液100倍稀释液4mL注入,并分别作用2min和10min,移取0.5mL混合液到4.5mL中和剂的试管中吹打均匀并作用10min后,吸取1mL混合液接种于培养皿,置于恒温细胞培养箱培养48h,并对活菌计数。阳性对照组为用常规PBS缓冲溶液代替灭菌消毒液产品作用,阴性对照组为灭菌消毒液作用于未接种细菌的培养基。结果取6次结果的平均值。测试结果如下表2。

表2各实施例和对比例的灭菌性能测试结果

Figure BDA0002568942720000091

杀灭对数值越高,细菌的灭杀效果越好。上述检测结果表明:本发明提供的灭菌消毒液100倍稀释液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有非常好的杀灭效果。对比例2单独使用ACS的单从灭菌效果来看,相较于实施例1~5更强,但由于ACS具备一定的腐蚀性,因此不能直接用于皮肤,医疗器械等表面的灭菌处理。将ACS和壳聚糖协同作用,能起到较好灭菌效果,同时又能具备无刺激、免洗、环保等特点。

2、杀灭冠状病毒的性能测试

取实施例1、实施例4和实施例5制备的灭菌消毒液产品稀释100倍后备用,灭活病毒效果委托第三方检测机构检测,检测病毒模型为猫冠状病毒FCV-WSU79.1683,细胞模型为Hep-G2细胞。采用免疫荧光灶试验法,所用试剂为市售Feline Coronavirus(FCoV)猫科研荧光PCR试剂盒、人血清白蛋白、胎牛血清、含有卵磷脂的硫代硫酸钠磷酸盐的缓冲溶液(PBS缓冲溶液)。所用仪器为LW-200荧光显微镜、CO2恒温培养箱,按照《消毒技术规范》[S]-2002的规定进行接种,病毒滴度(TCID50)采用96孔板常规法测定,阳性对照组为PBS缓冲溶液代替灭菌消毒液产品作用,阴性对照组用不含病毒的细胞维持液直接加入到细胞培养板。检测时取各组培养48h的感染病毒的实验板,吸出培养液并用PBS缓冲溶液冲洗3次后加入80%的丙酮溶液,-20℃处理20min,吸出丙酮溶液,将荧光试剂盒试剂完全解冻后离心处理并用配套稀释液稀释100倍,加入100ul稀释后的试剂溶液,置于37℃水浴1h,吸出试剂溶液并用PBS冲洗三次,随后在LW-200荧光显微镜下观察,实验结果均取六组实验的结果的平均值,测试结果如下表4和表5所示。

病毒滴度(TCID50)的计算公式为:

Figure BDA0002568942720000101

其中:A是大于50%细胞死亡率的稀释度,B是大于50%的细胞死亡率,C是小于50%的细胞死亡率。

灭活对数值的计算公式为:平均灭活对数值=logD1-LogD0

其中:D1为阳性对照组的TCID50,D0为实验组的TCID50

试验结果如下表3~5所示:

表3实施例1灭活病毒荧光检测试验结果

Figure BDA0002568942720000102

表4实施例4灭活病毒荧光检测试验结果

表5实施例5灭活病毒荧光检测试验结果

根据阳性对照组和实验组的结果表明:本发明实施例1、4、5的灭菌消毒液产品能有效灭活猫冠状病毒,且以实施例5的消毒液的灭活病毒效果最佳。

三、急性经口毒性试验

测试方法:标准采用GB15193.3-2014。取实施例1、实施例4、实施例5制备的灭菌消毒液稀释100倍后,取62.5mL稀释液定容到250mL容量瓶中。选用8w的ICR小鼠(湖南斯莱克景达实验动物有限公司),雌雄各10只。体重为18~20g。受试物设计量取5000mg/kg。灌胃前小鼠禁食16h,保持自由进水。每只小鼠间隔6h各灌胃一次,共计两次。灌胃后3h恢复自由进食,连续14天观察并记录小鼠的表现和死亡情况。实验结果如下表6所示。

表6 ICR小鼠急性毒性经口实验结果

Figure BDA0002568942720000111

结果表明:本发明灭菌消毒液的100倍稀释液的LD50值>5000mg/kg,根据急性毒性分级,属于实际无毒物质。

上述实施例仅例示性的说明本发明的原理及功效,而非用于限制本发明。任何熟悉本技术的人员皆可以在不违背本发明的精神及范畴下,对上述实施例进行改变或修饰。因此,凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变,仍然应由本发明的权利要求所涵盖。

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