阅读说明：本技术 一种复方银杏通脉有效部位、提取物及其制备方法和其应用 (Compound gingko effective part and extract for promoting blood circulation as well as preparation method and application thereof ) 是由 侯凤飞 戴鑫汶 邹奇 戴甲木 张豪 唐心文 邓声菊 于 2020-06-15 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种复方银杏通脉有效部位、复方银杏通脉提取物的醇提工艺及其制备条件,采用酸化乙醇溶液提取复方银杏通脉有效部位,并将其用于制备复方银杏通脉提取物或药物组合物,显著提高有效部位中总黄酮醇苷的含量和提取率,进而显著提高药品的质量和疗效,并显著提高资源利用率且显著降低成本。(The invention relates to an alcohol extraction process and preparation conditions of a compound gingko effective part for promoting blood circulation, a compound gingko effective part for promoting blood circulation extract, wherein the compound gingko effective part is extracted by adopting an acidified ethanol solution and is used for preparing the compound gingko effective part for promoting blood circulation or a pharmaceutical composition, so that the content and extraction rate of total flavonol glycosides in the effective part are obviously improved, the quality and curative effect of the medicine are further obviously improved, the resource utilization rate is obviously improved, and the cost is obviously reduced.)

一种复方银杏通脉有效部位、提取物及其制备方法和其应用

技术领域

本发明涉及属于药物技术领域，具体涉及一种复方银杏通脉有效部位、提取物及其制备方法和其应用。

背景技术

复方银杏通脉口服液由银杏叶、制何首乌、女贞子、丹参、杜仲、川牛膝和钩藤七味中药组成。该药物具有滋阴补肾、舒肝通脉等功效，临床广泛将其用于治疗中老年人轻度脑动脉硬化所致的头晕头痛、耳鸣耳聋、视物模糊、记忆力减退、腰膝酸软、肢体麻木等症。

已有研究表明，复方银杏通脉口服液的主要活性成分包括总黄酮醇苷和萜类内酯等。总黄酮醇苷具有活血化瘀、通络止痛、敛肺平喘、化浊调脂等功效，其有效成分主要包括槲皮素、山柰素和异鼠李素等。

CN1596960A公开了复方银杏通脉口服液的处方组成及组方成分的功效，包括君药银杏叶、臣药制何首乌及其他成分的功效和其相互作用，并验证了复方银杏通脉口服液在降血脂、软化脑血管、增加脑组织的血液供应、改善脑组织的缺血状况、改善并缓解脑动脉硬化症(AS)病人的临床症状、提高生存质量等方面的临床价值，并采用醇提、水煎、醇沉等制备步骤制得复方银杏通脉提取物。但该方法存在总黄酮醇苷提取率低和大黄素提取率低等缺陷。

CN104027428B公开了复方银杏通脉提取物的改进制备方法，该方法制得的复方银杏通脉提取物显著提高了对于脑动脉硬化所致各种病症的治疗效果，并对老年痴呆症具有防治作用。但该方法存在总黄酮醇苷提取率低和大黄素提取率低等缺陷。

文献1(张耕等，高效液相色谱法测定复方银杏通脉口服液中总黄酮醇苷含量，《中国药业》第27卷第20期，2018年10月20日)建立了测定复方银杏通脉口服液中总黄酮醇苷含量的高效液相色谱(HPLC)法。该方法具有操作简便、结果准确、数据重复性和精密度良好，方法专属性较强等优点，适用于复方银杏通脉口服液的质量控制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种复方银杏通脉有效部位，所述有效部位由下述重量份的组份制备得到，银杏叶180份、制何首乌180份、女贞子90份、丹参90份和钩藤60份，所述有效部位的制备方法包括下述步骤：称取所需量的银杏叶、制何首乌、女贞子、丹参和钩藤，将其粉碎成粗粉，加入浓度为30-95％的酸化乙醇水溶液，所述酸化乙醇水溶液的加入量为药材重量的3-18倍(体积重量比)，加热回流提取1-4次，每次回流提取0.5-5小时，过滤，收集酸化乙醇提取液后，浓缩、干燥收集的酸化乙醇提取液，即得。

本发明的优选技术方案中，在加热回流提取前，药材中加入酸化乙醇水溶液后浸泡，优选浸泡1-12h，更优选浸泡2-10h。

本发明的优选技术方案中，所述酸化乙醇水溶液的浓度为40-90％，优选酸化乙醇水溶液的浓度为50-80％。

本发明的优选技术方案中，所述酸化乙醇溶液的pH为1-6，优选酸化乙醇水溶液的pH为2-5，更优选酸化乙醇水溶液的pH为3-4。

本发明的优选技术方案中，调节酸化乙醇水溶液pH所用的酸选自盐酸、硫酸、氯酸、硝酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、磺酸、苹果酸、富马酸、枸橼酸、羧酸、羟基酸、酮酸、醋酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、丁二酸、丙酮酸、谷氨酸、酒石酸、乳酸、衣康酸、抗坏血酸、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸的任一种或其组合。

本发明的优选方案中，调节酸化乙醇水溶液pH所用的酸浓度为0.5-8mol/L，优选为0.8-6mol/L，更优选为1-5mol/L。

本发明的优选技术方案中，药材中加入酸化乙醇水溶液加热回流提取有效部位2-3次。

本发明的优选技术方案中，药材中加入酸化乙醇水溶液加热回流提取时间为1.0-4小时，优选为1.0-3小时。

本发明的优选技术方案中，药材中酸化乙醇水溶液的加入量为药材重量的4-15倍，优选为5-12倍。

本发明的优选技术方案中，将收集的酸化乙醇提取液或者合并收集的酸化乙醇提取液冷却至4-35℃，静置6-56h，过滤，取上清液,浓缩，将其制成相对密度为1.0-1.4(60℃测定)的浸膏，优选浸膏的相对密度为1.10-1.35(60℃测定)，优选将制得的浸膏干燥。

本发明的优选技术方案中，所述的浓缩选自减压浓缩、薄膜浓缩、真空浓缩的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述干燥选自减压干燥、真空干燥、喷雾干燥、常压干燥、沸腾干燥的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，将制得的干燥浸膏粉碎，优选所述的粉碎方法选自气流粉碎法、流体研磨法、胶体研磨法、喷射研磨法、共同研磨法、球磨法的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述有效部位中总黄酮醇苷含量不低于0.2％，优选不低于0.25％。

本发明的优选技术方案中，所述有效部位中大黄素含量不低于0.015％，优选不低于0.02％。

本发明的目的在于提供一种高总黄酮醇苷含量的有效部位的制备方法，所述有效部位由下述质量份的组份制备得到，所述有效部位由下述质量份的组份制备得到，银杏叶180份、制何首乌180份、女贞子90份、丹参90份和钩藤60份，所述有效部位的制备方法包括下述步骤：称取所需量的银杏叶、制何首乌、女贞子、丹参和钩藤，将其粉碎成粗粉，加入浓度为30-95％的酸化乙醇水溶液，所述酸化乙醇水溶液的加入量为药材重量的3-18倍(体积重量比)，加热回流提取1-4次，每次回流提取0.5-5小时，过滤，收集酸化乙醇提取液后，浓缩、干燥收集的酸化乙醇提取液，即得。

本发明的优选技术方案中，在加热回流提取前，药材中加入酸化乙醇水溶液后浸泡，优选浸泡1-12h，更优选浸泡2-10h。

本发明的优选技术方案中，所述酸化乙醇水溶液的浓度为40-90％，优选酸化乙醇水溶液的浓度为50-80％。

本发明的优选技术方案中，所述酸化乙醇溶液的pH为1-6，优选酸化乙醇水溶液的pH为2-5，更优选酸化乙醇水溶液的pH为3-4。

本发明的优选技术方案中，调节酸化乙醇水溶液pH所用的酸选自盐酸、硫酸、氯酸、硝酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、磺酸、苹果酸、富马酸、枸橼酸、羧酸、羟基酸、酮酸、醋酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、丁二酸、丙酮酸、谷氨酸、酒石酸、乳酸、衣康酸、抗坏血酸、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸的任一种或其组合。

本发明的优选方案中，调节酸化乙醇水溶液pH所用的酸浓度为0.5-8mo l/L，优选为0.8-6mo l/L，更优选为1-5mo l/L。

本发明的优选技术方案中，药材中加入酸化乙醇水溶液加热回流提取有效部位2-3次。

本发明的优选技术方案中，药材中加入酸化乙醇水溶液加热回流提取时间为1.0-4小时，优选为1.0-3小时。

本发明的优选技术方案中，药材中酸化乙醇水溶液的加入量为药材重量的4-15倍，优选为5-12倍。

本发明的优选技术方案中，将收集的酸化乙醇提取液或者合并收集的酸化乙醇提取液冷却至4-35℃，静置6-56h，过滤，取上清液,浓缩，将其制成相对密度为1.0-1.4(60℃测定)的浸膏，优选浸膏的相对密度为1.10-1.35(60℃测定)，优选将制得的浸膏干燥。

本发明的优选技术方案中，所述的浓缩选自减压浓缩、薄膜浓缩、真空浓缩的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述干燥选自减压干燥、真空干燥、喷雾干燥、常压干燥、沸腾干燥的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，将制得的干燥浸膏粉碎，优选所述的粉碎方法选自气流粉碎法、流体研磨法、胶体研磨法、喷射研磨法、共同研磨法、球磨法的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述有效部位中总黄酮醇苷含量不低于0.2％，优选不低于0.25％。

本发明的优选技术方案中，所述有效部位中大黄素含量不低于0.015％，优选不低于0.02％。

本发明的另一目的在于将本发明复方银杏通脉有效部位用于制备复方银杏通脉提取物、复方银杏通脉药物组合物的任一种的应用。

本发明的优选技术方案中，所述的药物组合物为复方银杏通脉口服制剂，优选为复方银杏通脉口服液、复方银杏通脉颗粒剂、复方银杏通脉胶囊剂、复方银杏通脉片剂、复方银杏通脉散剂、复方银杏通脉软胶囊剂的任一种。

本发明的目的在于提供一种高总黄酮醇苷含量的复方银杏通脉提取物，所述提取物由下述重量份的组份制备得到，银杏叶180份、制何首乌180份、女贞子90份、丹参90份、杜仲90份、川牛膝90份和钩藤60份，所述提取物的制备方法包括下述步骤：

1)称取所需量的银杏叶、制何首乌、女贞子、丹参和钩藤，将其粉碎成粗粉，加入浓度为30-95％的酸化乙醇水溶液，所述酸化乙醇水溶液的加入量为药材重量的3-18倍(体积重量比)，加热回流提取1-4次，每次回流提取0.5-5小时，过滤，收集酸化乙醇提取液后，浓缩酸化乙醇提取液，制得浸膏一；

2)称取处方量的杜仲和川牛膝，将其粉碎成粗粉，加入药材总量3-20倍(体积重量比)的水，煎煮提取1-4次，每次提取0.5-4小时，过滤，将煎煮液浓缩后加乙醇至含醇量达30-90％，将其冷却至4-35℃，静置6-56h，过滤，取上清液浓缩回收乙醇，制得浸膏二；

(3)将制得的浸膏一和浸膏二混合后干燥，或者将制得的浸膏一和浸膏二分别干燥后混合，即得。

本发明的优选技术方案中，在步骤1)加热回流提取前，药材中加入酸化乙醇水溶液后浸泡，优选浸泡1-12h，更优选浸泡2-10h。

本发明的优选技术方案中，所述酸化乙醇水溶液的浓度为40-90％，优选酸化乙醇水溶液的浓度为50-80％。

本发明的优选技术方案中，所述酸化乙醇溶液的pH为1-6，优选酸化乙醇水溶液的pH为2-5，更优选酸化乙醇水溶液的pH为3-4。

本发明的优选技术方案中，调节酸化乙醇水溶液pH所用的酸选自盐酸、硫酸、氯酸、硝酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、磺酸、苹果酸、富马酸、枸橼酸、羧酸、羟基酸、酮酸、醋酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、丁二酸、丙酮酸、谷氨酸、酒石酸、乳酸、衣康酸、抗坏血酸、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸的任一种或其组合。

本发明的优选方案中，调节酸化乙醇水溶液pH所用的酸浓度为0.5-8mol/L，优选为0.8-6mol/L，更优选为1-5mol/L。

本发明的优选技术方案中，步骤1)药材中加入酸化乙醇水溶液加热回流提取有效部位2-3次。

本发明的优选技术方案中，步骤1)药材中加入酸化乙醇水溶液加热回流提取时间为1.0-4小时，优选为1.0-3小时。

本发明的优选技术方案中，步骤1)药材中酸化乙醇水溶液的加入量为药材重量的4-15倍，优选为5-12倍。

本发明的优选技术方案中，将步骤1)收集的酸化乙醇提取液或者合并收集的酸化乙醇提取液冷却至4-35℃，静置4-56h，过滤，取上清液,浓缩，将其制成相对密度为1.0-1.4(60℃测定)的浸膏，优选浸膏的相对密度为1.10-1.35(60℃测定)。

本发明的优选技术方案中，步骤2)在加热煎煮提取前，在药材中加入水浸泡，优选浸泡1-12h，更优选浸泡2-10h。

本发明的优选技术方案中，步骤2)中药材加入水煎煮提取2-3次。

本发明的优选技术方案中，步骤2)煎煮提取药材的时间为1-3.5小时，优选为1.5-3小时。

本发明的优选技术方案中，将收集的水提取液或者合并收集的水提取液冷却至4-35℃，静置4-56h，过滤，取上清液,浓缩，将其制成相对密度为1.0-1.4(60℃测定)的浸膏，优选浸膏的相对密度为1.10-1.35(60℃测定)。

本发明的优选技术方案，浸膏一和浸膏二的相对密度为1.0-1.4(60℃测定)，优选相对密度为1.1-1.35(60℃测定)。

本发明的优选技术方案中，所述的浓缩选自减压浓缩、薄膜浓缩、真空浓缩的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述干燥选自减压干燥、真空干燥、喷雾干燥、常压干燥、沸腾干燥的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，将制得的干燥浸膏粉碎，优选所述的粉碎方法选自气流粉碎法、流体研磨法、胶体研磨法、喷射研磨法、共同研磨法、球磨法的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述提取物中总黄酮醇苷含量不低于0.15％，优选不低于0.2％。

本发明的优选技术方案中，所述提取物中大黄素含量不低于0.01％，优选不低于0.015％。

本发明的另一目的在于提供一种含总黄酮醇苷有效部位的复方银杏通脉提取物的制备方法，所述提取物由下述质量份的组份制备得到，银杏叶180份、制何首乌180份、女贞子90份、丹参90份、杜仲90份、川牛膝90份和钩藤60份，所述提取物的制备方法包括下述步骤：

1)称取所需量的银杏叶、制何首乌、女贞子、丹参和钩藤，将其粉碎成粗粉，加入浓度为30-95％的酸化乙醇水溶液，所述酸化乙醇水溶液的加入量为药材重量的3-18倍(体积重量比)，加热回流提取1-4次，每次回流提取0.5-5小时，过滤，收集酸化乙醇提取液后，浓缩酸化乙醇提取液，制得浸膏一；

2)称取处方量的杜仲和川牛膝，将其粉碎成粗粉，加入药材总量3-20倍(体积重量比)的水，煎煮提取1-4次，每次提取0.5-4小时，过滤，将煎煮液浓缩后加乙醇至含醇量达30-90％，将其冷却至4-35℃，静置6-56h，过滤，取上清液浓缩回收乙醇，制得浸膏二；

(3)将制得的浸膏一和浸膏二混合后干燥，或者将制得的浸膏一和浸膏二分别干燥后混合，即得。

本发明的优选技术方案中，在步骤1)加热回流提取前，药材中加入酸化乙醇水溶液后浸泡，优选浸泡1-12h，更优选浸泡2-10h。

本发明的优选技术方案中，所述酸化乙醇水溶液的浓度为40-90％，优选酸化乙醇水溶液的浓度为50-80％。

本发明的优选技术方案中，所述酸化乙醇溶液的pH为1-6，优选酸化乙醇水溶液的pH为2-5，更优选酸化乙醇水溶液的pH为3-4。

本发明的优选技术方案中，调节酸化乙醇水溶液pH所用的酸选自盐酸、硫酸、氯酸、硝酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、磺酸、苹果酸、富马酸、枸橼酸、羧酸、羟基酸、酮酸、醋酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、丁二酸、丙酮酸、谷氨酸、酒石酸、乳酸、衣康酸、抗坏血酸、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸的任一种或其组合。

本发明的优选方案中，调节酸化乙醇水溶液pH所用的酸浓度为0.5-8mol/L，优选为0.8-6mol/L，更优选为1-5mol/L。

本发明的优选技术方案中，步骤1)药材中加入酸化乙醇水溶液加热回流提取有效部位2-3次。

本发明的优选技术方案中，步骤1)药材中加入酸化乙醇水溶液加热回流提取时间为1.0-4小时，优选为1.0-3小时。

本发明的优选技术方案中，步骤1)药材中酸化乙醇水溶液的加入量为药材重量的4-15倍，优选为5-12倍。

本发明的优选技术方案中，将步骤1)收集的酸化乙醇提取液或者合并收集的酸化乙醇提取液冷却至4-35℃，静置4-56h，过滤，取上清液,浓缩，将其制成相对密度为1.0-1.4(60℃测定)的浸膏，优选浸膏的相对密度为1.10-1.35(60℃测定)。

本发明的优选技术方案中，步骤2)在加热煎煮提取前，在药材中加入水浸泡，优选浸泡1-12h，更优选浸泡2-10h。

本发明的优选技术方案中，步骤2)中药材加入水煎煮提取2-3次。

本发明的优选技术方案中，步骤2)煎煮提取药材的时间为1-3.5小时，优选为1.5-3小时。

本发明的优选技术方案中，将收集的水提取液或者合并收集的水提取液冷却至4-35℃，静置4-56h，过滤，取上清液,浓缩，将其制成相对密度为1.0-1.4(60℃测定)的浸膏，优选浸膏的相对密度为1.10-1.35(60℃测定)。

本发明的优选技术方案，浸膏一和浸膏二的相对密度为1.0-1.4(60℃测定)，优选相对密度为1.1-1.35(60℃测定)。

本发明的优选技术方案中，所述的浓缩选自减压浓缩、薄膜浓缩、真空浓缩的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述干燥选自减压干燥、真空干燥、喷雾干燥、常压干燥、沸腾干燥的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，将制得的干燥浸膏粉碎，优选所述的粉碎方法选自气流粉碎法、流体研磨法、胶体研磨法、喷射研磨法、共同研磨法、球磨法的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述提取物中总黄酮醇苷含量不低于0.15％，优选不低于0.2％。

本发明的优选技术方案中，所述提取物中大黄素含量不低于0.01％，优选不低于0.015％。

本发明的另一目的在于提供一种复方银杏通脉药物组合物，所述药物组合物由复方银杏通脉提取物和药学上可接受的载体组成。

本发明的药物组合物可为本领域熟知的各种剂型，并可采用本领域常规的制剂技术制备得到。适合于本发明的制剂选自口服制剂或外用制剂，优选为口服制剂。

本发明的优选技术方案中，所述的口服制剂选自口服液体制剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、糖浆剂、散剂、露剂、泡腾剂、喷雾剂、混悬液、丸剂、滴丸、合剂、糊剂、乳剂、茶剂的任一种。

本发明的优选技术方案中，所述的外用制剂选自凝胶剂、膏剂、贴膏剂、霜剂、软膏剂、搽剂、洗剂、栓剂、涂抹剂、凝膏剂、软膏剂、雾化剂的任一种。

本发明的优选技术方案中，所述的药学上可接受的载体为本领域熟知用于制备所需制剂的常用赋形剂或辅料。本发明所述的口服制剂或外用制剂常用的赋形剂或辅料包括但不仅限于填充剂(又称稀释剂)、润滑剂(又称助流剂或抗粘着剂)、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、矫味剂、赋香剂等。粘合剂，例如糖浆、***胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素或其衍生物、明胶浆、淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮等，优选纤维素衍生物选自微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素等，优选淀粉衍生物选自羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉的任一种或其组合。填充剂，例如乳糖、糖粉、糊精、淀粉或其衍生物、纤维素或其衍生物、无机钙盐、山梨醇、甘氨酸等，优选无机钙盐选自氯化钙、硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙等，优选纤维素衍生物选自微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素的任一种，优选淀粉衍生物选自羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉的任一种或其组合；润滑剂，例如微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、胶态二氧化硅、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇等；崩解剂，例如淀粉或其衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、交联聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素等，优选淀粉衍生物选自羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉的任一种或其组合；湿润剂，例如十二烷基硫酸钠、水或醇等。抗氧剂，例如亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸等。抑菌剂(杀菌剂)，例如0.5％苯酚、0.3％甲酚、0.5％三氯叔丁醇等。酸碱调节剂(pH调节剂)，例如盐酸、枸橼酸、氢氧化钠(钾)、枸橼酸钠(钾)、柠檬酸钠(钾)、苹果酸钠(钾)、磷酸二氢钠(钾)、磷酸氢二钠(钾)等。乳化剂，例如聚山梨酯-80、没酸山梨坦、普流罗尼克F-68，卵磷酯、豆磷脂等。增溶剂，例如吐温-80、胆汁、甘油等。调味剂，例如蜂蜜、糖浆等。

本发明的优选技术方案中，将本发明的复方银杏通脉提取物与药学上可接受的缓释制剂载体或控释制剂载体按其制备要求加以混合，再按照本领域熟知的缓释制剂或控释制剂的制备方法，如加入阻滞剂包衣或将本发明的复方银杏通脉提取物微囊化后，将其制成微丸，如缓释微丸或控释微丸等。本发明所述的缓释制剂载体或控释制剂载体包括但不仅限于油脂性掺入剂、亲水胶体或包衣阻滞剂等，所述的油脂性掺入剂选自单硬脂酸甘油酯、氢化蓖麻油、矿油、聚硅氧烷或二甲基硅氧烷等；所述的亲水胶体选自羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、***胶、西黄耆胶或卡波普的任一种或其组合；所述的包衣阻滞剂选自乙基纤维素(EC)、羟丙甲基纤维素(HMPC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、邻苯二甲酸醋酸纤维素(CAP)、丙烯酸类树脂等。

本发明的优选技术方案中，所述药物组合物中的药学上可接受载体的用量或其种类根据药物组合物中有效成分的理化性质和含量、制剂类型、制剂的溶出及生物利用度等因素而定。

本发明的另一目的在于提供本发明的复方银杏通脉提取物或其药物组合物用于制备治疗中老年人轻度脑动脉硬化或其所致的头晕头痛、耳鸣耳聋、视物模糊、记忆力减退、腰膝酸软、肢体麻木的任一种病症或其并发病症的药物中的应用。

本发明的另一目的在于提供本发明的复方银杏通脉提取物或其药物组合物用于制备治疗脑动脉硬化所致病症、心脑血管疾病的任一种或其并发病症的药物中的应用。

本发明的另一目的在于提供本发明的复方银杏通脉提取物或其药物组合物用于制备防治老年痴呆症或其并发病症的药物中的应用。

本发明通过高效液相色谱法检测复方银杏通脉有效部位或复方银杏通脉提取物或复方银杏通脉药物组合物中的总黄酮醇苷、大黄素的含量，以控制其质量和疗效。

除非另有说明，本发明按照文献1公开的高效液相色谱(HPLC)法检测待测品(如复方银杏通脉有效部位、复方银杏通脉提取物或复方银杏通脉制剂等)中总黄酮醇苷的含量。色谱柱为Shimadzu C₁₈柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4％磷酸溶液(55:45)，流速为1.0mL/min,柱温为25℃，进样量为10μl，检测波长为360nm，外标法定量。理论板数按槲皮素峰计应不低于2500，分离度按山柰素与异鼠李素峰计算应大于1.5。待测品在100℃水浴中加热回流90min进行酸水解。

1.1仪器

LC-20AT型高效液相色谱仪(包括LC-20AT四元泵，SPD-M20A紫外检测器，SIL-20A自动进样器，LCsolution色谱工作站，日本岛津公司)；HH-6型数显恒温水浴锅(温度控制范围0.0-100.0℃，常州智博瑞仪器制造有限公司)；XSE105DU型十万分之一电子分析天平(梅特勒-托利多公司)；Direct-Q3型纯水机(美国密理博公司)。

1.2试药

槲皮素对照品(纯度为98.1％)，山柰素对照品(纯度为93.2％)，异鼠李素对照品(纯度为100.0％)，均由中国食品药品检定研究院提供，供含量测定用；复方银杏通脉口服液(规格1ml/瓶)；阴性样品(规格1ml/瓶)；甲醇(色谱纯，MerckKgaA公司)；磷酸(色谱纯，天津赛孚瑞科技有限公司)；盐酸(优级纯，国药集团化学试剂有限公司)；水为MilliporeDirect-Q3型纯水机制备的超纯水，其他试剂均为分析纯。

1.3样品含量测定

按外标法计算峰面积分别计算槲皮素、山柰素、异鼠李素的含量，以下式换算成总黄酮醇苷的含量：总黄酮醇苷含量＝(槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量)×2.51。

除非另有说明，本发明按照文献CN1596960A中记载的大黄素检测方法检测待测品(如复方银杏通脉有效部位、复方银杏通脉提取物或复方银杏通脉制剂等)中大黄素的含量。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

1、本发明科学筛选复方银杏通脉有效部位、复方银杏通脉提取物的醇提工艺及其制备条件，采用酸化乙醇溶液提取复方银杏通脉有效部位，并将其用于制备复方银杏通脉提取物或药物组合物，显著提高有效部位中总黄酮醇苷、大黄素的含量和提取率，进而显著提高药品的质量和疗效，并显著提高资源利用率且显著降低成本。

2、本发明进一步优化醇提、水提、醇沉中的工艺参数和条件，显著提高有效部位中总黄酮醇苷、大黄素的含量和提取率，进而显著提高药品的质量和疗效，并显著提高资源利用率且显著降低成本。

3、本发明的制备方法具有操作简便，利于资源综合利用，且利于工业化生产等优点。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明技术方案作进一步的说明。

对比例1复方银杏通脉有效部位的制备

对比例1复方银杏通脉有效部位的制备包括下述步骤：

1)称取银杏叶18g、制何首乌18g、女贞子9g、丹参9g和钩藤6g，将其粉碎成粗粉，加入浓度为70％的乙醇水溶液(pH＝6.8)，加热，回流提取1小时，过滤，收集提取液，其中，乙醇水溶液的加入量为药材总量的10倍(体积重量比)；

2)将步骤1)收集的提取液冷却至25℃，静置12小时，过滤，取上清液，减压浓缩上清液回收乙醇至无醇味后，喷雾干燥，即得浸膏。

对比例2复方银杏通脉有效部位的制备

对比例2复方银杏通脉有效部位的制备包括下述步骤：

1)称取银杏叶18g、制何首乌18g、女贞子9g、丹参9g和钩藤6g，将其粉碎成粗粉，加入浓度为70％的碱化乙醇水溶液(pH＝8)，加热，回流提取1小时，过滤，收集提取液，其中，碱化乙醇水溶液(pH＝8)的加入量为药材总量的10倍(体积重量比)，其中，所述碱化乙醇水溶液(pH＝8)由浓度为0.5mol/L的氢氧化钠调节；

2)将步骤1)收集的提取液冷却至25℃，静置12小时，过滤，取上清液，减压浓缩上清液回收乙醇至无醇味后，喷雾干燥，即得浸膏。

实施例1-6本发明复方银杏通脉有效部位的制备

实施例1-6复方银杏通脉有效部位的制备方法，包括下述步骤：

1)称取银杏叶18g、制何首乌18g、女贞子9g、丹参9g和钩藤6g，将其粉碎成粗粉，加入浓度为70％的酸化乙醇水溶液(见表1)，加热，回流提取1小时，过滤，收集提取液，其中，酸化乙醇水溶液的加入量为药材总量的10倍(体积重量比)，其中，所述酸化乙醇水溶液由浓度为0.5mol/L的盐酸调节；

2)将步骤1)收集的提取液冷却至25℃，静置12小时，过滤，取上清液，减压浓缩上清液回收乙醇至无醇味后，喷雾干燥，即得浸膏。

按照本发明所述的检测方法检测对比例1-2和实施例1-6制得有效部位中的总黄酮醇苷含量和大黄素含量。结果见表1。

表1

实施例7复方银杏通脉提取物的制备

实施例7复方银杏通脉提取物的组成：银杏叶18g、制何首乌18g、女贞子9g、丹参9g和钩藤6g、杜仲9g、川牛膝9g。

实施例7复方银杏通脉提取物的制备方法，包括下述步骤：

1)称取所需量的银杏叶、制何首乌、女贞子、丹参和钩藤，将其粉碎成粗粉，加入浓度为70％的酸化乙醇水溶液(pH＝2.5)后，加热，回流提取1小时，过滤，收集提取液，浓缩酸化乙醇提取液，制得浸膏一，其中，酸化乙醇水溶液的加入量为药材总量的10倍(体积重量比)，所述酸化乙醇水溶液由浓度为0.5mol/L的盐酸调节；

2)称取处方量的杜仲和川牛膝，将其粉碎成粗粉，加入药材总量6倍(体积重量比)的水，煎煮提取1次，每次提取1小时，过滤，将煎煮液浓缩后加乙醇至含醇量达70％，将其冷却至35℃，静置10h，过滤，取上清液浓缩回收乙醇，制得浸膏二；

(3)将制得的浸膏一和浸膏二混合后，喷雾干燥，即得。

对比例3

对比例3复方银杏通脉提取物的组成：银杏叶18g、制何首乌18g、女贞子9g、丹参9g和钩藤6g、杜仲9g、川牛膝9Kg。

对比例3复方银杏通脉提取物的制备方法，包括下述步骤：

1)称取所需量的银杏叶、制何首乌、女贞子、丹参和钩藤，将其粉碎成粗粉，加入浓度为70％的乙醇水溶液(Ph＝6.8)后，加热，回流提取1小时，过滤，收集提取液，浓缩，制得浸膏一，其中，乙醇水溶液的加入量为药材总量的10倍(体积重量比)；

2)称取处方量的杜仲和川牛膝，将其粉碎成粗粉，加入药材总量6倍(体积重量比)的水，煎煮提取1次，每次提取1小时，过滤，将煎煮液浓缩后加乙醇至含醇量达70％，将其冷却至35℃，静置10h，过滤，取上清液浓缩回收乙醇，制得浸膏二；

(3)将制得的浸膏一和浸膏二混合后，喷雾干燥，即得。

按照本发明所述的检测方法检测对比例3和实施例7制得浸膏中的总黄酮醇苷含量和大黄素含量。结果见表2。

表2

试验例1治疗动脉硬化症的药效学比较研究

1临床资料

1.1一般资料

共验证观察120例。其中1:1对照观察120例。两组性别、年龄、职业、病例来源、病程经统计学分析，无显著性差异(P＜0.05)，说明两组间均衡性好，具有可比性。

1.2诊断标准

参照1981年全国第三届神经精神科学术会议修订的脑动脉硬化症诊断标准拟定。

西医诊断标准：年龄一般在45岁以上；初发高级神经活动不稳定的症状及/或脑弥漫性损害症状；有全身动脉硬化的旁证，如眼底动脉硬化II级以上，或主动脉弓增宽、颈动脉或桡动脉触之较硬，冠心病等；神经系统阳性体征：深反射不对称，掌颏反射阳性及/或吸吮反射阳性；血清胆固醇增高；排除其它脑部疾病。

中医诊断标准：腰膝酸软，五心烦热，头痛头胀，眩晕，耳鸣耳聋，齿松发脱，失眠健忘，口燥咽干，潮热盗汗，遗精，早泄，舌质红，少津，少苔或无苔，脉细数。

2治疗方法

2.1治疗组口服实施例7药物的口服液制剂，10ml/次，3次/天。

2.2对照组口服对比例3药物的口服液制剂，10ml/次，3次/天。

两组治疗前1周如已服用抗脑动脉硬化药物者，须停服1周后方可纳入观察。治疗期间不用与治疗脑动脉硬化症的中西药物，两药均以30天为1个疗程，治疗一个疗程后观察疗效。

3疗效观察

3.1观察指标治疗前后两组均于清晨抽血化验血脂。

3.2统计方法数据以均数±标准差(X±S)表示，计数资料采用X2检验，等级资料采用Ridit分析，计量资料采用t检验。

3.3治疗结果

表3对异常血脂的改善作用及其比较(mmol/L)

注：组间比较均P>0.05。

以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明权利要求保护的范围。