阅读说明：本技术 药用沙棘果汁生产方法 (Production method of medicinal sea-buckthorn fruit juice ) 是由 田志杰 李彭帅 于海泉 于 2020-06-12 设计创作，主要内容包括：本公开涉及医药领域,尤其涉及一种药用沙棘果汁生产方法,包括以下步骤：(1)压榨沙棘果,分取沙棘原汁和果渣；(2)分离所述沙棘原汁,分取果泥、果油和清果汁；(3)将在步骤(1)中分取的所述果渣与在步骤(2)中分取的所述果油、果泥混合,形成果渣类混合物；用溶剂提取所述果渣类混合物中的黄酮类有效成分,并过滤提取液；然后除去滤液中的溶剂,获得含有黄酮类物质的浓缩液；(4)将在步骤(3)中获得的浓缩液与在步骤(2)中获得的清果汁依次进行充分混合、静置和精细分离,然后取分离出的沙棘汁清液进行浓缩,获得富含黄酮类物质的药用沙棘果汁。采用本公开方法制备的药用沙棘果汁载药量高且稳定性良好。(The invention relates to the field of medicines, in particular to a production method of medicinal sea-buckthorn juice, which comprises the following steps: (1) squeezing fructus Hippophae, and separating fructus Hippophae juice and fruit residue; (2) separating the raw juice of the sea buckthorn, and separating fruit paste, fruit oil and clear fruit juice; (3) mixing the pomace separated in step (1) with the fruit oil and fruit paste separated in step (2) to form a pomace mixture; extracting effective components of flavonoids in the pomace mixture with a solvent, and filtering the extract; then removing the solvent in the filtrate to obtain a concentrated solution containing flavonoids; (4) and (3) fully mixing the concentrated solution obtained in the step (3) and the clear juice obtained in the step (2) in sequence, standing, finely separating, and concentrating the separated clear sea-buckthorn juice to obtain the medicinal sea-buckthorn juice rich in flavonoids. The medicinal seabuckthorn fruit juice prepared by the method has high drug loading and good stability.)

药用沙棘果汁生产方法

技术领域

本公开涉及医药领域，尤其涉及一种药用沙棘果汁生产方法。

背景技术

沙棘属于胡颓子科，为药食同源的植物。沙棘的成熟果实为沙棘果。沙棘果营养价值极高，含多种维生素、有机酸、氨基酸、糖类、微量元素、蛋白质、尤其富含维C，被称为“人类的第三水果”、“维C之王”，在保健品、食品等开发研究方面得到广泛应用。

沙棘果(在《中国药典》中收载的名称为沙棘干果)系蒙古族、藏族习用药材，作为蒙药、藏药等民族传统药材历史悠久，具有祛痰利肺，养胃健脾，活血散瘀的药理功效。药用沙棘果汁具有保肝、增强免疫力、促进生长发育、抗癌防癌、抗氧化和抗衰老的作用。沙棘糖浆具有药品批准文号，其功能主治是止咳祛痰、消食化滞、散血化瘀，用于咳嗽痰多、慢性支气管炎、胸满、消化不良、缓解心绞痛。

现有的沙棘果加工工艺大多以获得沙棘果汁饮料为目的，得到的沙棘果汁饮料中含有药用有效成分的量显著地低，不能满足制药需求。使用沙棘果作为制药原料，由其中获取含有足够量药用有效成分且稳定性良好的药用沙棘果汁，目前尚无较好的方法。

目前国内企业制取沙棘原浆的方法有以下三种：(1)常温酶解制汁。沙棘果实采后清洗、破碎，用管式换热器加热果浆至65℃，维持15分钟；然后降温至45℃，再加入果胶分解酶，保温、酶解2-3小时；然后降至常温并压榨取汁。(2)热制汁。沙棘果经清洗、破碎，加热至85℃并保持10-15分钟；趁热压榨出果汁。(3)冷制汁。果实清洗后入冷库进行冻结，解冻后直接压榨或打浆取汁，果汁原浆的加工工艺主要包括沙棘果的选择、清洗、破碎、取汁、粗滤等工艺。为了进一步获得沙棘清汁，通常加入淀粉酶、果胶酶和梨汁酶对沙棘汁原浆进行澄清，并对得到的清汁进行减压浓缩，得到糖度为60％左右的浓缩清汁。

总体而言，目前的加工方法不能够从沙棘果中高效地获取药用有效成分；以及为了提高药用沙棘果汁的稳定性，通常向其中加入稳定剂，这些稳定剂通常并非药用有效成分，在随着沙棘果汁进入药品后可能会对生物体产生不良影响。

发明内容

本公开提供了一种药用沙棘果汁生产方法，该方法解决了现有工艺制备的沙棘果汁的药用价值不高的问题。

本公开提供的药用沙棘果汁生产方法，包括以下步骤：

(1)压榨沙棘果，分取沙棘原汁和果渣；

(2)分离所述沙棘原汁，分取果泥、果油和清果汁；

(3)将在步骤(1)中分取的所述果渣与在步骤(2)中分取的所述果油、果泥混合，形成果渣类混合物；用溶剂提取所述果渣类混合物中的黄酮类有效成分，并过滤提取液；然后除去滤液中的溶剂，获得含有黄酮类物质的浓缩液；

(4)将在步骤(3)中获得的浓缩液与在步骤(2)中获得的清果汁依次进行充分混合、静置和精细分离，然后取分离出的沙棘果汁清液进行浓缩，获得富含黄酮类物质的药用沙棘果汁。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(1)中，所述沙棘果可以选自冷冻沙棘果或新鲜沙棘果。优选使用冷冻沙棘果进行压榨，从而最终获得的沙棘果汁不但含有较高含量的黄酮类有效成分，同时维生素C的保存率较高，对人体健康更加有利。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(1)中，沙棘果的冷冻温度为-5℃以下。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(1)中，沙棘果在存在纯化水的条件下进行压榨，所述沙棘果与所述纯化水的质量比为，例如2:1。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(2)中，分离操作可以采取本领域用于实现该目的的任何方式进行，例如，可以采取离心分离法。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(2)中，离心分离操作进行的次数可以是1次或1次以上，条件是能够充分分离出沙棘原汁中的果泥和果油。

在本公开方法的一个实施方案中，在步骤(2)中，分离操作进行1次，同时分离出全部果泥和全部果油。

在本公开方法的另一个实施方案中，在步骤(2)中，分离操作进行2次，先主要分离出果泥，再主要分离出果油。先主要分离出果泥是指第一次分离以分离果肉类物质形成的果泥为主，但是同时也附加分离了部分果油，因为本公开中的所述沙棘原汁为混悬液，果泥中可能包裹有部分果油；再主要分离出果油是指第二次分离以分离果油为主，但是同时也附加分离了在第一次没有彻底分离残留的果泥。由此，通过分步骤分重点地进行2次分离操作，从而将果泥、果肉充分地与清果汁分离开，提高目标产物在后续的例如制药用途中的稳定性。

在本公开方法的进一步的实施方案中，在步骤(2)中，在分离果泥和部分果油之后且在分离剩余果油之前，将沙棘原汁在2℃-10℃的温度下静置12小时以上，以使果油在沙棘原汁中充分分层。静置在2℃-10℃的温度下进行，有利于保持沙棘原汁中的维生素C不流失。

在本公开方法的再进一步的实施方案中，在步骤(2)中，将分离出剩余果油之后获得的清果汁保存在2℃-10℃的温度下，待用。在2℃-10℃的温度下保存可以保持或尽量减少清果汁中的维生素C不流失。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(2)中，1次同时分离出全部果泥和全部果油可以使用本领域能够实现此目的的任何装置进行，例如，蝶式离心机(型号：A213；厂家：南京中船绿洲机器有限公司)或卧式离心机(型号：LW355；厂家：南京中船绿洲机器有限公司)；果油的分离可以使用本领域能够实现此目的的任何装置进行，例如，碟式离心机。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(3)中，所述溶剂可以选自乙醇，以便能够从所述果渣类混合物中高效提取黄酮类有效成分而不影响黄酮类有效成分的药用性能和对后续制药造成不良影响，以及便于从提取液中去除。

在本公开方法的进一步的实施方案中，在步骤(3)中，使用的乙醇的体积浓度为60v％-95v％，例如70v％-95v％，例如70v％或95v％。

在本公开方法的进一步的实施方案中，在步骤(3)中，使用的乙醇的质量为所述果渣类混合物的质量的1-4倍，例如2-3倍，例如2倍，以便充分提取果渣类混合物中的黄酮类有效成分。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(3)中，所述提取操作可以为，例如回流提取，所述回流提取以本领域用于此目的的常规操作方式进行。

在本公开方法的进一步的实施方案中，在步骤(3)中，溶剂提取的次数为2次或2次以上，每次所使用的溶剂的浓度相同或不同。

在本公开方法的再进一步的实施方案中，在步骤(3)中，用乙醇提取2次或2次以上。在用乙醇提取2次的情况下，所使用的乙醇的浓度可以不同，例如第一次使用较高浓度的乙醇，第二次使用较低浓度的乙醇，从而有利于醇提进行的更加彻底。例如第一次使用浓度为90v％-95v％的乙醇，第二次使用浓度为60v％-70v％的乙醇。在本公开方法的实施方案中，每次的提取时间为1.5h-3h，例如1.5h。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(3)中，合并各次的提取液，然后可以采取例如减压浓缩的方式除去其中的溶剂，例如乙醇，直至浓缩液在70-80℃下的相对密度ρ＝1.00-1.30g/ml，例如ρ＝1.00-1.10g/ml，认为溶剂，例如乙醇基本被全部回收除去。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(4)中，所述混合可以使用本领域用于此目的的常规装置进行，条件是能够将浓缩液与清果汁充分混合均匀，例如使用搅拌机。

在本公开的方法中，在步骤(3)中，通过浓缩过程，溶剂提取液，例如乙醇提取液中含有的乙醇的浓度降低，导致易溶于乙醇而难溶于水的物质会析出出来。浓缩液中析出物浓度较高，因此需要进行稀释处理以方便将其分离出来。例如，可以选择加入水来实现稀释效果，然后与清果汁混合并浓缩，但是这样会增加操作步骤。

在本公开的方法中，在步骤(4)中，将在步骤(3)中获得的浓缩液直接与在步骤(2)中获得的清果汁混合，这样既起到了稀释浓缩液的作用，同时又减少操作步骤并且节约能源，工艺较佳。

在本公开的方法中，在步骤(4)中，将在步骤(3)中获得的含有从果渣类混合物中提取的黄酮类物质的浓缩液与在步骤(2)中获得的含有黄酮类物质的量未达制药要求的清果汁混合，混合液中的黄酮类物质含量显著提高，即从沙棘果中获得了尽可能多的目标物质——黄酮类物质；此外，上述混合液中不含果油、果泥这些容易导致混合液不稳定的物质，即，所述混合液的稳定性良好。

在本公开方法步骤(4)的进一步的实施方案中，所述混合是将浓缩液与上述冷藏保存的清果汁进行混合，从而混合液中除富含黄酮类物质、稳定性良好之外，维生素C的保存率也较高。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(4)中，将浓缩液与清果汁充分混合之后，进行静置，以便使二者混合所产生的沉淀充分地析出出来。静置温度可以为室温(18-26℃)，静置时间为1h-14h。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(4)中，在静置之后进行精细分离，进一步分离出果汁清液，换言之，进一步除去可能导致混合液在后续用途(例如药用用途)中不稳定的物质，例如沉淀类物质、泡沫状物质等。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(4)中，所述精细分离可以采取任何方式进行，条件是能够实现上述目的。例如，可以采取机械分离方式、膜分离方式或化学分离方式，或者它们的组合，例如联合采取机械分离方式和膜分离方式，或者联合采取机械分离方式和化学分离方式，但不限于此。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(4)中，所述浓缩可以采取减压浓缩的方式进行。

在本公开方法的实施方案中，在步骤(4)中，浓缩使用的装置可以为，例如浓缩罐，但不限于此。

在本公开方法步骤(4)的实施方案中，所述浓缩进行至液体在70-80℃下的相对密度ρ＝1.18-1.31g/ml，以便得到定量的药用沙棘果汁，以提高药用沙棘果汁的药效。

本公开还提供由上述方法获得的药用沙棘果汁用于制备沙棘糖浆的用途。在该用途中，所述药用沙棘果汁完全由沙棘果中获取，其中含有的黄酮类成分的浓度为0.8-1.4mg/ml。

采用本公开方法生产药用沙棘果汁可以获得以下效果：

1)本公开方法以沙棘果为原料，设计特定的操作步骤和步骤次序等，实现了沙棘果的充分利用，从沙棘原汁和果渣中均充分获得了药用有效成分，最终制备的药用沙棘果汁的载药量显著增加。

2)本公开方法设计在适当的步骤中利用特定的分离方式和/或特定的组合分离方式，实现了果油、果渣及果泥的充分分离，大幅提高了高载药量沙棘果汁的稳定性。

3)在本公开方法的实施过程中，基本未向药用沙棘果汁中引入非药用成分，减少了使用沙棘果汁制成的产品例如药物(如沙棘糖浆)中的非药用成分残留，进而可以减轻通过本公开方法制备的沙棘果汁用于医药用途时对生物体的副作用。

4)本公开方法还最大限度的保留了药用沙棘果汁中维生素C的保存率，进一步提高了药用沙棘果汁的综合药用价值。

附图说明

附图示出了根据本公开的方法的一种示例性实施方式，该附图用于进一步理解本公开。附图包括在本说明书中并构成本说明书的一部分。

图1是根据本公开的生产药用沙棘果汁方法的一个实施例的流程图。

具体实施方式

下面结合附图和实施方式对本公开作进一步的详细说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于解释相关内容，而非对本公开的限定。另外还需要说明的是，为了便于描述，附图中仅示出了与本公开相关的部分。下面将参考附图并结合实施方式来详细说明本公开。

实施例1

称取沙棘冷冻果1800g，解冻，用凉水快速冲洗至干净。待清洗结束后，加900g纯化水，进行压榨，得到沙棘原汁(压榨液)和果渣(沙棘渣)。

将压榨后的沙棘原汁(压榨液)进行卧式离心，获得离心液和果泥。将离心液在6℃下静置12小时，使果油充分地分层。然后采用蝶式离心法分离上层果油，将获得的沙棘清果汁保存在6℃下，待用。

将由分离出的果渣(沙棘渣)、果泥和果油所组成的果渣类混合物与乙醇混合，进行乙醇提取(醇提)。首先向果渣类混合物中加入2倍质量的95v％浓度的乙醇，回流提取1.5h，过滤获得提取滤液1。然后向过滤得到的滤渣中加入2倍质量的70v％浓度的乙醇，再次回流提取1.5h，过滤获得提取滤液2。弃去滤渣，合并提取滤液1和提取滤液2，减压浓缩至浓缩液相对密度ρ＝1.20g/ml(80℃测定)，回收除去乙醇。

将上述浓缩液与保存待用的沙棘清果汁混匀，室温静置1小时，然后进行管式离心，除去滤渣，得到离心液。然后将离心液转移至浓缩灌中，浓缩至相对密度ρ＝1.2g/ml(80℃测定)，得到目标产物药用沙棘果汁，药用沙棘果汁中黄酮类成分的浓度为1.2mg/ml。

实施例2

称取沙棘鲜果1800g，加900g纯化水，压榨获得沙棘原汁和果渣。

将沙棘原汁进行蝶式离心分离(7000r/min，10min)，将分离出的果油和果泥转移至果渣中，得到果渣类物质；将清果汁在6℃下保存待用。

取上述果渣类物质转移至2000ml圆底烧瓶中，并向其加入2倍质量的95％v的乙醇，回流提取1.5h，过滤得提取滤液1；然后向滤渣中加入2倍质量的70v％的乙醇，回流提取1.5小时，过滤得提取滤液2。合并提取滤液1和提取滤液2，减压浓缩至浓缩液相对密度ρ＝1.20g/ml(80℃测定)，回收除去乙醇。

将浓缩液与保存待用的清果汁充分混合，向其中加入混合液质量0.05重量％-0.1重量％的壳聚糖，充分搅拌1h，之后在室温下静置14h。壳聚糖在呈酸性的沙棘果汁中溶解后形成粘稠的絮状物，具有很强的选择吸附性，从而澄清沙棘果汁。在静置后，离心过滤取上层清液，浓缩至相对密度为1.2g/ml，得药用沙棘果汁，药用沙棘果汁中黄酮类成分的浓度为1.3mg/ml。

相对密度的测试方法(比重计测试法)

取适量浓缩液至100mL量筒中，将经校准过的比重计缓慢放入量筒中，水平读取数值，同时测定此时的温度。

药用沙棘果汁中黄酮类成分的测定方法

按照《中国药典》2015年版四部通则0512高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4％磷酸溶液(53︰47)作为流动相；检测波长为365nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备：分别称取槲皮素对照品、山柰素对照品、异鼠李素对照品适量，精密称定，加乙醇制成每lml含槲皮素30μg、山柰素8μg、异鼠李素60μg的混合对照品溶液，即得。

供试品溶液的制备：取本发明方法制备的药用沙棘果汁5.00g，精密称定，加水150ml，摇匀，通过AB-8型大孔吸附树脂柱(内径为2.0cm，柱高为15cm)，以水200ml洗脱，弃去水液，再用无水乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣精密加乙醇-盐酸(25:3.5，v/v)溶液50ml溶解，称定重量，在75℃水浴中加热水解1小时，立即冷却，再称定重量，用乙醇-盐酸(25:3.5，v/v)溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

黄酮类成分的测定：分别精密吸取对照品与供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

药用沙棘果汁稳定性测试

将在实施例1和2中获得的目标产物药用沙棘果汁在常温下放置，肉眼观察，测试药用沙棘果汁的稳定性。测试结果如下表1所示。

表1

表1数据表明，通过本公开方法制备的药用沙棘果汁，在24个月的较长时间内较为稳定。本公开方法在制备药用沙棘果汁的过程中未引入稳定剂，由此获得的药用沙棘果汁中基本不含有非药用有效成分，但是产品稳定性仍然较好，能够满足药用需求。

本领域的技术人员应当理解，上述实施方式仅仅是为了清楚地说明本公开，而并非是对本公开的范围进行限定。需要说明的是，在不冲突的情况下，本公开中的实施方式及实施方式中的特征可以相互组合。对于所属领域的技术人员而言，在上述公开的基础上还可以做出其它变化或变型，并且这些变化或变型仍处于本公开的范围内。