具体实施方式

本领域的普通技术人员可以理解，上述各实施方式是实现本发明的具体实施例，而在实际应用中，可以在形式上和细节上对其作各种改变，而不偏离本发明的精神和范围。

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面将详细叙述清楚说明本发明所揭示内容的精神，任何所属技术领域技术人员在了解本发明内容的实施例后，当可由本发明内容所教示的技术，加以改变及修饰，其并不脱离本发明内容的精神与范围。

本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，但并不作为对本发明的限定。

通过如下方式验证本发明的有益效果：

实施例1

本实施例的一种火山冷泉青龙衣Pickering乳液的制备方法，是按照以下步骤进行的：

一、青龙衣超微粉的制备：采集新鲜的青龙衣，在-195℃的环境下进行液氮低温粉碎，粉碎速度为15000r/min，粉碎至粒度为0.5～1μm的微粉，粉碎后的物料经-80℃冷冻干燥，得青龙衣超微粉；

二、五大连池天然冷泉水的处理：采自五大连池翻花泉的五大连池天然苏打水，过0.22微米微孔滤膜后，得五大连池天然冷泉水；

三、乳液水相的制备：将80g的五大连池天然冷泉水和10g青龙衣超微粉混匀，在4℃条件下，浸泡24h，过滤去除沉淀，取上清液，得乳液水相；

四、乳液油相的制备，将10g山核桃油与10g青龙衣超微粉粉混匀，在20℃条件下，浸泡48h，过滤去除沉淀，取上清油液，得乳液油相；

五、冷泉青龙衣乳液的制备：将10g青龙衣超微粉，乳液水相和乳液油相混合后超高压均质，均质压力500MPa，均质温度30℃，均质时间20min，即得冷泉青龙衣乳液。

针对本实施例制备的青龙衣Pickering乳液进行抑菌试验、稳定性试验和皮肤刺激性试验。

1、抑菌试验：

材料：分别取100g五大连池翻花泉天然冷泉水、100g去离子水、100g山核桃油、100g 大豆油。分别加入青龙衣超微粉10g，混匀后浸泡24h，得4种抑菌上清液，分别为五大连池翻花泉天然冷泉水抑菌上清液；去离子水抑菌上清液；山核桃油抑菌上清液；大豆油抑菌上清液。

1)、抑菌圈直径的测定

分别取表皮葡萄球菌，大肠杆菌，白色念珠菌悬液，各150μL，分别用涂布棒均匀涂于平板中，用无菌镊子夹取滤纸片于培养基表面，采取4个试验组和1个阴性对照组，使得各滤纸片间距离相等。然后在每个试验组滤纸片上加上5μL抑菌上清液，阴性对照组加入5μL无菌生理盐水，缓慢盖住平皿，白色念珠菌28℃培养48h，其余细菌放在37℃恒温培养24h，用游标卡尺测以上精油对上述病原菌的抑菌圈直径。

2)、抑菌圈测定结果

表1 4种抑菌液抑菌圈直径

注：***表示最敏感；**表示中度敏感；*表示低度敏感；-表示无抑制作用。

从表1可知，五大连池冷泉水和山核桃油浸提青龙衣超微粉的抑菌上清液抑菌能力明显优于去离子水浸提液和大豆油抑菌上清液，可以证明五大连池翻花泉冷泉水和山核桃油可以更好的使青龙衣中抑菌有效物质溶出。由此可以证明，实施例1制备的乳液能够显著使青龙衣中抑菌有效物质溶出，具有天然抑菌作用。

2、乳液的稳定性试验

为验证实施例1制备的火山冷泉青龙衣Pickering乳液与其他类型乳化剂的稳定性差别，设计对比试验进行验证。

实施例1制备的火山冷泉青龙衣Pickering乳液稳定性研究如下：

材料：实施例1制备的乳液；按照实施例方法制备水相和油相，然后将水相和油相与吐温-80和司盘-80混合物混合制备成乳液，作为含人工合成乳化剂乳液；按照实施例方法制备水相和油相，然后将水相和油相混合，作为不含乳化剂乳液；

将实施例1制备的乳液，在不同pH值及不同NaCl浓度环境下用4000转离心稳定时间测定稳定性。稳定时间梯度分别为(5min、10min、15min、20min、25min、大于30min) 每组样品做三次平行试验结果取平均值，试验结果见表2。

表2火山冷泉青龙衣Pickering乳液稳定性试验

由以上结果可以看出，在同等制备工艺条件下，实施例1火山冷泉青龙衣Pickering 乳液组制备的乳液在4000转离心稳定时间在不同pH值和NaCl浓度环境下均大于30min，稳定性明显优于不含乳化剂乳液组和含人工合成乳化剂乳液组。其中不含乳化剂乳液组的稳定性最差，可以证明，本实施例依靠青龙衣超微粉制备的乳液有优秀的稳定性。

3、皮肤测试验证试验

对实施例1制备的火山冷泉青龙衣Pickering乳液进行多次皮肤刺激性和腐蚀性检测。

1)、受试物质

实施例1制备的火山冷泉青龙衣Pickering乳液

2)、检测对象

新西兰兔，来自广东花都区花东信华实验动物饲养场。

3)、检测方法参见《消毒技术规范》2002版，第二部分，2.3.3。

实验步骤

实验前将动物脊柱两侧被毛剪去或去除。不可损伤表皮，去毛范围左右各3cm×3cm，涂抹面积2.5cm×2.5cm，取实施例1乳液0.5g直接涂抹在一侧皮肤上，另一侧皮肤作自身对照。每天涂抹一次，涂抹后4h用水清洗，去除残留。连续涂抹14天，每次涂抹前应剪毛。

4)、结果评价：

每次涂抹后24h观察结果，按皮肤刺激反应评分表进行皮肤反应评价。按下列公式计算每天每只动物平均积分，按皮肤刺激强度分级标准判定皮肤刺激强度。

5)、实验结果

表3火山冷泉青龙衣Pickering乳液皮肤刺激试验

由上述结果可知，实施例1制得的火山冷泉青龙衣Pickering乳液对新西兰兔多次刺激实验结果为无刺激性。

实施例2

人体测试

1)对象：招募80名志愿者，年龄25～40岁之间，保证女性志愿者占比为50％以上；志愿者通过检测均需满足Fitzpatrick皮肤I型至IV，且属于皮肤敏感型。志愿者在测试前无任何皮肤有关的疾病或者异常情况。将上述志愿者分为4组，每组20人，其中组一、组二和组三使用实施例1制备的乳液，进行重复试验。组四使用市面购买的含有化学品的补水保湿乳液。

2)方法：组一至组四的志愿者，测试前一周停止使用任何护肤品。清洗面部，在室温、通风环境下暴露测试部位至少30min；取实施例1的乳液滴加在滤纸上，使乳液布满滤纸，然后贴于组一至组三志愿者的脸部一侧，另一侧贴滴加有纯水的滤纸。组四向与组一相同尺寸的滤纸上滴加市面购买的补水保湿乳液，并贴于组四志愿者的脸部一侧，另一侧贴滴加有纯水的滤纸。期间观察、询问每组志愿者的皮肤红肿情况、皮肤刺痛、瘙痒情况。

皮肤红肿按照有、无标准划分。皮肤刺痛、瘙痒按照轻度、中度和强烈划分。

3)结果：

由上表可知，采用本实施例1的乳液对志愿者并没有明显刺激作用，优于市面含有化学的补水保湿乳液。