阅读说明：本技术 治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分的制造方法及产品成品 (Method for preparing product component for treating and preventing gastric ulcer, gastritis and other gastropathy and product ) 是由 王晓 于 2020-05-26 设计创作，主要内容包括：本发明公开了治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分的制造方法,包括分别从番薯中获取三个组分,分别记为GP、SM、PS,将三个组分混合并得到对胃溃疡、胃炎和其它胃病有治疗和预防作用的产品组分；GP组分为番薯中可与胃粘液和胃粘膜结合的物质,SM组分为番薯中去除淀粉和细胞的结构性成分后得到的可溶性部分,PS组分为番薯中的包括淀粉在内的多糖中,与GP以及SM混合后,能够帮助改善胃粘液和胃粘膜功能的组分。本发明提供了一种全新的胃病治疗和预防选项,并较好地解决了现有技术中治疗胃病的产品在效果和副作用方面的诸多问题。(The invention discloses a method for preparing product components for treating and preventing gastric ulcer, gastritis and other stomach diseases, which comprises the steps of respectively obtaining three components, namely GP, SM and PS from sweet potatoes, mixing the three components and obtaining the product components with the functions of treating and preventing gastric ulcer, gastritis and other stomach diseases; the GP component is a substance capable of binding with gastric mucus and gastric mucosa in sweet potato, the SM component is a soluble part obtained by removing starch and structural components of cells in sweet potato, and the PS component is a polysaccharide including starch in sweet potato, and can help improve the function of gastric mucus and gastric mucosa after being mixed with GP and SM. The invention provides a brand-new option for treating and preventing the stomach illness, and better solves a plurality of problems in the aspects of effect and side effect of the product for treating the stomach illness in the prior art.)

治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分的制造方法 及产品成品

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分和产品成品，及其制造方法。

背景技术

胃病是多发病和常见病。现在有多种药物用于治疗胃病，主要包括抑制胃酸分泌的药物、中和胃酸的弱碱药物、针对幽门螺杆菌的抗生素。抑制胃酸分泌的药用于治疗包括胃溃疡在内的胃病具有较好的疗效，一般需要长期服用，但是胃酸为消化系统正常防御和消化功能所需，故长期抑制胃酸分泌有其缺陷。中和胃酸的弱碱药物，优势是只短暂降低胃的酸度，但是疗效偏低。抗生素只是胃病的辅助性药物，不能独立治疗，亦可能扰乱肠道细菌生态。因此有必要研发不通过抑制胃酸分泌而达到治疗目的的新手段，为治疗或调理及预防胃病提供更多更好的选择。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术的不足，提供一种治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分的制造方法及产品成品。

本发明解决上述技术问题采用的技术方案是：

治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分的制造方法，包括分别从番薯中获取三个组分，分别记为GP、SM、PS，将三个组分混合并得到对胃溃疡、胃炎和其它胃病有治疗和预防作用的产品组分；GP组分为番薯中可与胃粘液和胃粘膜结合的物质，SM组分为番薯中去除淀粉和细胞的结构性成分后得到的可溶性部分，PS组分为番薯中的包括淀粉在内的多糖中，与GP以及SM混合后，能够帮助改善胃粘液和胃粘膜功能的组分。

作为优选，获取GP组分的方法包括以下步骤：

S1、将番薯匀浆并煮沸，然后与伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶混合，将由此结合到伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶上的结合物洗脱后得到的组分记为GPT；

S2、获取大鼠胃粘液和胃粘膜，分别记为S和I，然后分别制备针对S和I的一组单克隆抗体AS-1和一组单克隆抗体AI-1，再从中各筛选3个单克隆抗体，筛选方法包括以下步骤：在检测AS-1及AI-1的抗体反应时用组分GPT进行封闭，当一个呈现阳性反应的AS-1或AI-1因GPT封闭而出现抗体阳性反应减弱时，这个AS-1或AI-1就是所筛选的单克隆抗体，由此分别从AS-1及AI-1组中各得到3个单克隆抗体，分别记为AS-1a、AS-1b、AS-1c、AI-1a、AI-1b、AI-1c；

S3、用普通小鼠抗体IgG的Fc段，不加佐剂，对小鼠进行致耐受操作，并用这些小鼠分别制备针对AS-1a、AS-1b、AS-1c、AI-1a、AI-1b、AI-1c的6个单克隆抗特型抗体，分别记为AS-2a、AS-2b、AS-2c、AI-2a、AI-2b、AI-2c。

S4、将AS-2a、AS-2b、AS-2c、AI-2a、AI-2b、AI-2c分别用蛋白A琼脂糖凝胶交联，并分别制备得到6种亲和层析介质；再取番薯匀浆并煮沸，分别用6种亲和层析介质从所述的匀浆中分离得到番薯组分G1、G2、G3、G4、G5、G6，将G1、G2、G3、G4、G5、G6混合后得组分GP。

作为优选，获取SM组分的方法包括将番薯匀浆离心后回收上清液，将上清液煮沸浓缩得到组分SM。

作为优选，获取PS组分的方法包括以下步骤：

A1、取若干个大鼠回肠段，将大鼠回肠段的一端结扎，并将大鼠回肠进行针刺穿孔；并取番薯淀粉加水搅拌并煮沸，再进行超声击打并进行离心处理，然后获取上清液进行分子筛层析；

A2、将步骤A1中经过分子筛层析得到的组分逐个收入若干个收集管内，分别从每个收集管中取样并在样品中加入GP-SM混合物以及染料，然后将由此所得新混合物分别注入至若干个A1中所制备的大鼠回肠段内；

A3、观察染料透过大鼠回肠段穿孔的时间和量，找到染料穿透时间相对较长、量较少的回肠样本所对应的步骤A2中的若干收集管，然后将该收集管内的组分分别与GP-SM混合物混合并得到若干个试验例；

A4、用大鼠胃溃疡模型依次检测步骤A3中的试验例对胃溃疡的治疗和预防活性，并确定对胃溃疡具有治疗和预防活性的试验例，从而确定步骤A2中经过分子筛层析得到的各个组分中，与GP-SM混合物混合后对胃溃疡具有治疗和预防活性的组分，将此组分记为PS。

本发明还公开了一种治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品成品，通过本发明的治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分的制造方法制得，包括以下重量百分比含量的营养成分：46％到47％的碳水化合物、4.5％到5.5％的蛋白质、26％到27％的脂肪、0.005％到0.05％的钠

本发明具有的有益效果是：

本发明公开了一种治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分及成品，提供了一种全新的胃病治疗和预防选项，并较好地解决了现有技术中治疗胃病的产品在效果和副作用方面的诸多问题。

具体实施方式

以下通过实施方式对本发明作进一步的说明。

本实施例的治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品组分的制造方法，分别从番薯中获取三个组分，分别记为GP、SM、PS，将三个组分混合并得到对胃溃疡、胃炎和其它胃病有治疗和预防作用的产品组分；GP组分为番薯中可与胃粘液和胃粘膜结合的物质，SM组分为番薯中去除淀粉和细胞的结构性成分后得到的可溶性部分，PS组分为番薯中的包括淀粉在内的多糖中，与GP以及SM混合后，能够帮助改善胃粘液和胃粘膜功能的组分。

实施例一(GP组分的获取方法)：

本实施例中，获取GP组分的方法包括以下步骤：

S1、将番薯匀浆并煮沸，然后与伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶混合，将由此结合到伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶上的结合物洗脱后得到的组分记为GPT；

S2、获取大鼠胃粘液和胃粘膜，分别记为S和I，然后分别制备针对S和I的一组单克隆抗体AS-1和一组单克隆抗体AI-1，再从中各筛选3个单克隆抗体，筛选方法包括以下步骤：在检测AS-1及AI-1的抗体反应时用组分GPT进行封闭，当一个呈现阳性反应的AS-1或AI-1因GPT封闭而出现抗体阳性反应减弱时，这个AS-1或AI-1就是所筛选的单克隆抗体，由此分别从AS-1及AI-1组中各得到3个单克隆抗体，分别记为AS-1a、AS-1b、AS-1c、AI-1a、AI-1b、AI-1c；

S3、用普通小鼠抗体IgG的Fc段，不加佐剂，对小鼠进行致耐受操作，并用这些小鼠分别制备针对AS-1a、AS-1b、AS-1c、AI-1a、AI-1b、AI-1c的6个单克隆抗特型抗体，分别记为AS-2a、AS-2b、AS-2c、AI-2a、AI-2b、AI-2c。

S4、将AS-2a、AS-2b、AS-2c、AI-2a、AI-2b、AI-2c分别用蛋白A琼脂糖凝胶交联，并分别制备得到6种亲和层析介质；再取番薯匀浆并煮沸，分别用6种亲和层析介质从所述的匀浆中分离得到番薯组分G1、G2、G3、G4、G5、G6，将G1、G2、G3、G4、G5、G6混合后得组分GP。

具体地，取100克番薯，在500毫升Tris-盐酸缓冲液(内含10毫摩Tris-HCl、10毫摩NaCl、1毫摩KCl，pH值7.4)中制备匀浆，将匀浆煮沸10秒钟，再进行超声击打1分钟之后进行10分钟的1000g离心，然后回收上清液，在回收的上清液中加NaCl并将其浓度调至200毫摩，然后加CaCl₂调至1毫摩，然后加MnCl₂调至1毫摩，再与5毫升伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶混合搅拌20分钟后装柱，用25毫升Tris-盐酸缓冲液洗柱，用10毫升含有0.2摩尔α-D-甲基葡萄糖苷的Tris-盐酸缓冲液洗脱，收集洗脱液，对Tris-盐酸缓冲液透析，从而得到GPT。

取大鼠胃30只，在平皿中剪开，用磷酸盐缓冲液(内含10毫摩NaH₂PO₄-Na₂HPO₄、10毫摩NaCl、1毫摩KCl，pH值7.4)漂洗后，用载玻片刮下胃粘液，记为胃粘液S；将含有2％聚山梨醇酯(polysorbate)-20(或聚山梨醇酯-40或聚山梨醇酯-60或聚山梨醇酯-80)的磷酸盐缓冲液滴在刮去胃粘液的胃粘膜上，用载玻片用力刮下胃粘膜，记为胃粘膜I。

采用标准的单克隆抗体制备技术，制备针对胃粘液S的单克隆抗体，鉴定阳性反应时，用番薯组分GPT做封闭，选取其阳性反应可被GPT封闭减弱的3个单克隆抗体，分别记为AS-1a，AS-1b，AS-1c；采用标准的单克隆抗体制备技术，制备针对胃粘膜I的单克隆抗体，鉴定阳性反应时，用番薯组分GPT做封闭，选取其阳性反应可被GPT封闭减弱的3个单克隆抗体，分别记为AI-1a，AI-1b，AI-1c。

用普通小鼠抗体IgG的Fc段，不加佐剂，对小鼠做致耐受操作(tolerization)。用由此获得的耐受性小鼠，再用这些小鼠制备针对AS-1a、AS-1b、AS-1c的单克隆抗特型抗体(anti-idiotypic antibody)，并各选择一个抗体，分别相对应地记为AS-2a、AS-2b、AS-2c；另用耐受性小鼠，制备针对AI-1a，AI-1b，AI-1c的单克隆抗特型抗体，并各选择一个抗体，分别记为AI-2a、AI-2b、AI-2c。

各取100毫克AS-2a、AS-2b、AS-2c、AI-2a、AI-2b、AI-2c，分别用5毫升蛋白A琼脂糖凝胶交联，制备亲和层析介质。取2000克番薯，在6000毫升磷酸盐缓冲液中制备匀浆，煮沸10秒钟，超声击打1分钟，进行1000g离心10分钟，回收上清液，依次用上述的6种亲和层析介质从此上清液中分离得到番薯组分，分别记为G1、G2、G3、G4、G5、G6，将G1、G2、G3、G4、G5、G6混合后得组分GP，用磷酸盐缓冲液将体积调至10毫升。

实施例二(SM组分的获取方法)：

本实施例中，获取SM组分的方法包括将番薯匀浆离心后回收上清液，将上清液煮沸浓缩得到组分SM。

进一步具体地，取200克番薯，在600毫升蒸馏水中制备匀浆，进行1000g离心10分钟，回收上清液，煮沸浓缩至20毫升，在9000g离心20分钟，再回收上清液，然后加蒸馏水将体积调至20毫升，得到SM水溶液。

实施例三(PS组分的获取方法)：

本实施例中，获取PS组分的方法包括以下步骤：

A1、取若干个大鼠回肠段，将大鼠回肠段的一端结扎，并将大鼠回肠段进行针刺穿孔；并取番薯淀粉加水搅拌并煮沸，再进行超声击打并进行离心处理，然后获取上清液进行分子筛层析；

A2、将步骤A1中经过分子筛层析得到的组分逐个收入若干个收集管内，分别从每个收集管中取样并在样品中加入GP-SM混合物以及染料，然后将由此所得新混合物分别注入至若干个A1中所制备的大鼠回肠段内；

A3、观察染料透过大鼠回肠段穿孔的时间和量，找到染料穿透时间相对较长、量较少的回肠样本所对应的步骤A2中的若干收集管，然后将该收集管内的组分分别与GP-SM混合物混合并得到若干个试验例；

A4、用大鼠胃溃疡模型依次检测步骤A3中的试验例对胃溃疡的治疗和预防活性，并确定对胃溃疡具有治疗和预防活性的试验例，从而确定步骤A2中经过分子筛层析得到的各个组分中，与GP-SM混合物混合后对胃溃疡具有治疗和预防活性的组分，将此组分记为PS。

进一步具体地，取100克番薯淀粉，加200毫升蒸馏水搅拌，煮沸10秒钟，超声击打1分钟，进行5000g离心20分钟，回收上清液，煮沸浓缩至10毫升，做葡聚糖凝胶G-100分子筛层析，采用直径3厘米、柱长55厘米的层析柱，用蒸馏水洗脱层析柱，洗脱速度为1毫升/分钟，用若干个收集管收集洗脱液，每管收集5毫升，将这些收集管里的组分记为PPS1。

分别在收集管内取0.9毫升的PPS1，加0.1毫升GP以及0.01毫升SM，得到GP-SM-PPS1混合物，再加0.1毫升碳素墨水。

取大鼠回肠段，分剪成2厘米长的小段，结扎一端，在靠近结扎端肠体处用4号注射针头穿孔，向肠体中加含有碳素墨水的GP-SM-PPS1混合物，使液面高于穿孔处高度为1厘米。然后将肠体悬挂在试管内的蒸馏水中，观察黑色液体透过肠体穿孔的时间和量，确定若干穿透时间相对较长、量较少的回肠段相对应的GP-SM-PPS1混合物及其相对应的PPS1收集管，将这些收集管内的PPS1组分另记为PPS2。

分别在每个收集管内取0.9毫升的PPS2，加0.1毫升GP以及0.01毫升SM，得到GP-SM-PPS2混合物，用大鼠水浸拘束法胃溃疡模型检测其对胃溃疡的治疗和预防活性，确定是哪个收集管的PPS2与GP-SM混合物混合后得到的GP-SM-PPS2混合物，具有对胃溃疡的治疗和预防活性，将此PPS2组分记为PS。

实施例四(对胃溃疡有治疗活性的番薯组分的获取方法)：

本实施例中，对胃溃疡有治疗活性的番薯组分的获取方法包括在实施例1、2、3所制备的组分中，取0.1毫升GP、0.01毫升SM、0.9毫升PS，混合即得到对胃溃疡有治疗和预防作用的番薯组分。

实施例五：

本实施例的一种治疗和预防胃溃疡、胃炎和其它胃病的产品成品包括以下重量百分比含量的营养成分：46％到47％的碳水化合物、4.5％到5.5％的蛋白质、26％到27％的脂肪、0.005％到0.05％的钠。

在不改变本发明的创造内容下进行简单的置换均视为相同的创造。说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其它实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。