阅读说明：本技术 一种泽漆的质量控制方法 (Quality control method of euphorbia helioscopia ) 是由 潘洁 刘春花 陆苑 孙佳 李勇军 王爱民 王永林 于 2019-10-15 设计创作，主要内容包括：本发明公开一种泽漆的质量控制方法,本发明在评价该药材的薄层鉴别、检查和浸出物检测的基础上,为规范泽漆药材质量提供了科学依据,本发明方法精密度好、测量结果准确,提高了泽漆药材的质量控制标准,有效的控制产品质量,保证泽漆药材质量的稳定、均一,确保其临床疗效。(The invention discloses a method for controlling the quality of euphorbia helioscopia, which provides a scientific basis for standardizing the quality of euphorbia helioscopia medicinal materials on the basis of evaluating the thin-layer identification, inspection and extract detection of the medicinal materials.)

一种泽漆的质量控制方法

技术领域

本发明涉及药品质量控制技术领域，具体为一种泽漆的质量控制方法。

背景技术

泽漆为大戟科植物泽漆Euphorbia helioscopia L.的干燥全草；4～5月开花时采收，除去泥沙，晒干，本品亦为我省少数民族用药；泽漆首载于《神农本草经》，《名医别录》、《救荒本草》、《本草经集注》、《日华子》、《本草图经》中均有记载；其性微寒，味苦，有毒；入大、小肠、脾经；《名医别录》、《日华子》皆言是大戟苗，《救荒本草》名泽茎，《本草纲目》名猫儿眼睛草，李时珍云“江湖源泽多有之，掐茎有白汁粘人”，故名泽漆；《中国植物志》、《全国中草药汇编》亦名泽漆；《神农本草经》记载其主皮肤热、大腹水气、四肢面目浮肿、丈夫阴气不足；《本草纲目》记载其具利水消肿、化痰止咳、散结、杀虫等功效，气血虚者慎用；《金匮要略》中泽漆汤，方用泽漆、半夏、紫参、白前、甘草、人参、桂心、生姜，以治肺咳上气脉沉；《大明》言止疟疾，消痰退热；《肘后》、《圣惠》、《易简》伏瘕水肿脚气皆用之；经考察统计，除新疆、西藏外，全国大部分地区均有分布，生于山沟、路边、荒野、湿地；二年生草本，气酸而特异，味淡；以干燥、色黄绿、无根者为佳；现代研究表明泽漆具有抑菌、杀虫、解热、降低毛细血管通透性、抗肿瘤等药理作用；临床用于治疗腹水、水肿、肺结核、颈***核、痰多喘咳、癣疮、痈疮肿毒、痢疾、湿疹、外伤出血等，民间还用于治疗***、食道癌等，并具有一定疗效，因此泽漆是一味很有研究开发价值的药材。

目前，泽漆记载于《贵州省中药、民族药质量标准》2003年版，目前该标准“泽漆”品种项下仅收录了显微鉴别与理化定性鉴别，为提升泽漆药材质量控制标准，采用专属性强的薄层色谱鉴别方法，对泽漆进行鉴别，同时对泽漆药材的水分、灰分、重金属及有害元素检查，以及浸出物的测定进行了研究。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种泽漆的质量控制方法，包括：薄层色谱鉴别、检查和浸出物检测；

所述薄层色谱鉴别，包括以下步骤：取泽漆粉末0.5g，加甲醇5ml，超声处理20min，滤过，取滤液作为供试品溶液，另取泽漆对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，利用展开剂展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；

所述检查，包括水分测定、总灰分测定、重金属及有害金属的测定；

所述浸出物检测，包括以下步骤：取泽漆粉末2g，置100ml的锥形瓶中，加蒸馏水50ml，密塞，称定重量，静置1h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1h，放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用蒸馏水补足减失重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25ml置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷却30min，迅速称定重量，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量。

所述硅胶G薄层板为青岛海洋硅胶G板、青岛鼎康硅胶G板和烟台江友硅胶HSG板一种或多种。

所述展开湿度分别为32％、62％或72％。

所述展开温度分别为20℃、30℃或40℃。

所述展开剂中乙酸乙酯、甲酸、水质量比为(10:0.5:0.5)。

所述水分测定、总灰分测定、重金属及有害金属的测定，具体包括以下步骤：

(1)水分测定包括以下步骤：精密称定本品粉末1g，平铺于干燥恒重的扁形称量瓶中，厚度≤5mm，精密称定，开启瓶盖在105℃干燥5h，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30min，精密称定，再在上述温度干燥1h，放冷，称重，至连续两次干燥的差异不超过2mg为止，根据减失重量，计算含水量；

(2)总灰分测定包括以下步骤：取本品粉末2g，置炽灼至恒重的坩埚中，缓缓炽灼，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至550℃，使完全炭化并恒重，根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量；

(3)采用原子吸收石墨炉、火焰法和氢化物发生法对泽漆药材中铅、镉、铜、砷和汞含量进行测定。

上述步骤(3)铅、镉、铜、砷和汞含量的测定，包括以下步骤：

(1)铅测定：包括以下步骤：采用石墨炉法测定，Pb空心阴极灯，波长283.3nm，狭缝：0.7L，电流：10mA，氩气作为保护气；原子化温度1600℃，持续时间5秒；干燥温度110/130℃，各持续30秒；灰化温度850℃，持续时间20秒，采用塞曼效应背景校正；

(2)镉测定：采用石墨炉法测定，Cd空心阴极灯，波长228.8nm；狭缝：0.7L，电流：4mA，氩气作为保护气；干燥温度110/130℃，各持续时间30秒；原子化温度1500℃，持续时间5秒；灰化温度500℃，持续时间20秒，采用塞曼效应背景校正；

(3)铜测定：采用火焰法测定，Cu空心阴极灯，波长324.7nm；狭缝：0.7H，电流：15mA，乙炔：2.5L/min，空气：10L/min；

(4)砷测定：采用流动注射-火焰加热或电加热氢化物发生器法测定，波长193.7nm，氩气作载气，流量100；

(5)汞测定：采用冷原子蒸气吸收法测定，波长253.6nm，氩气作载气，流量150。

有益效果

本发明在评价该药材的薄层鉴别、检查和浸出物检测的基础上，为规范泽漆药材质量提供了科学依据。

本发明方法精密度好、测量结果准确，提高了泽漆的质量控制标准，有效的控制产品质量，保证泽漆药材质量的稳定、均一，确保其临床疗效。

本发明中泽漆药材薄层色谱的展开系统，是在尝试了各种展开溶剂，包括石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲酸、丙酮、水等溶剂，进行深入研究，不断组合筛选，而后确定了较理想的展开体系即乙酸乙酯-甲酸-水，通过调整三者间的相互比例，最终研究确定了最为合理的展开系统：乙酸乙酯-甲酸-水(10:0.5:0.5)。

附图说明

图1为泽漆的专属性色谱图。

图2为不同品牌薄层色谱硅胶G板展开色谱图。

图3为不同展开湿度色谱图。

图4为不同展开温度色谱图。

图5为供试品溶液稳定性考察色谱图。

图6为8批次泽漆药材的薄层色谱图。

具体实施方式

实施例1

一种泽漆的质量控制方法，包括：薄层色谱鉴别、检查和浸出物检测；

所述薄层色谱鉴别，包括以下步骤：取泽漆粉末0.5g，加甲醇5ml，超声处理20min，滤过，取滤液作为供试品溶液，另取泽漆对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，利用展开剂展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；所述硅胶G薄层板为青岛海洋硅胶G板、青岛鼎康硅胶G板和烟台江友硅胶HSG板一种或多种；所述展开湿度分别为32％、62％或72％；所述展开温度分别为20℃、30℃或40℃；所述展开剂中乙酸乙酯、甲酸、水质量比为(10:0.5:0.5)；

所述检查，包括水分测定、总灰分测定、重金属及有害金属的测定；

其中，水分测定包括以下步骤：精密称定本品粉末1g，平铺于干燥恒重的扁形称量瓶中，厚度≤5mm，精密称定，开启瓶盖在105℃干燥5h，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30min，精密称定，再在上述温度干燥1h，放冷，称重，至连续两次干燥的差异不超过2mg为止，根据减失重量，计算含水量；

其中，总灰分测定包括以下步骤：取本品粉末2g，置炽灼至恒重的坩埚中，缓缓炽灼，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至550℃，使完全炭化并恒重，根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量；

其中，采用原子吸收石墨炉、火焰法和氢化物发生法对泽漆药材中铅、镉、铜、砷和汞含量进行测定，具体包括以下步骤

(1)铅测定：包括以下步骤：采用石墨炉法测定，Pb空心阴极灯，波长283.3nm，狭缝：0.7L，电流：10mA，氩气作为保护气；原子化温度1600℃，持续时间5秒；干燥温度110/130℃，各持续30秒；灰化温度850℃，持续时间20秒，采用塞曼效应背景校正；

(2)镉测定：采用石墨炉法测定，Cd空心阴极灯，波长228.8nm；狭缝：0.7L，电流：4mA，氩气作为保护气；干燥温度110/130℃，各持续时间30秒；原子化温度1500℃，持续时间5秒；灰化温度500℃，持续时间20秒，采用塞曼效应背景校正；

(3)铜测定：采用火焰法测定，Cu空心阴极灯，波长324.7nm；狭缝：0.7H，电流：15mA，乙炔：2.5L/min，空气：10L/min；

(4)砷测定：采用流动注射-火焰加热或电加热氢化物发生器法测定，波长193.7nm，氩气作载气，流量100；

(5)汞测定：采用冷原子蒸气吸收法测定，波长253.6nm，氩气作载气，流量150。

所述浸出物检测，包括以下步骤：取泽漆粉末2g，置100ml的锥形瓶中，加蒸馏水50ml，密塞，称定重量，静置1h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1h，放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用蒸馏水补足减失重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25ml置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷却30min，迅速称定重量，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量。

试验例1

以产地为贵州六盘水(批号：20170220)泽漆样品为对照药材；泽漆药材收集自贵州省贵阳市、六盘水市、黔西南州等，见表1；

表1

按照实施例1泽漆薄层色谱鉴别，对上述批号为1、2、3的泽漆药材进行测定，结果见图1，图中1、2、3分别表示批号1、2、3的泽漆药材，4为对照药材；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

试验例2

2.1本发明分别考擦了青岛海洋硅胶G板、青岛鼎康硅胶G板和烟台江友硅胶HSG板的展开效果，结果见图2，图中1、2、3分别表示批号1、2、3的泽漆药材，4为对照药材；结果显示，三个品牌的硅胶G板均可用于鉴别泽漆，斑点更清晰、分离度良好。

2.2不同展开湿度考察，分别以不同浓度硫酸调节的展开环境相对湿度为32％、62％、72％，分别考察不同相对湿度展开的效果，结果如图3所示，结果见图3，图中1、2、3分别表示批号1、2、3的泽漆药材，4为对照药材；结果显示，不同湿度下色谱图的斑点信息一致，斑点清晰，分离度良好。

2.3不同展开温度考察，分别在20℃，30℃，40℃，相对湿度为62％下展开，考察不同温度对展开的影响，结果见图4；图中1、2、3分别表示批号1、2、3的泽漆药材，4为对照药材；结果显示，不同温度下色谱图的斑点信息一致，斑点清晰，分离度良好。

2.4溶液稳定性试验，将同一批次的本品粉末于3天前、2天前、1天前、当天按拟定的方法制备供试品溶液，分别点于同一硅胶G板上，展开，显色，结果见图5，图中，1.当天；2.放置1天；3.放置2天；4.放置3天；5.对照药材；结果显示，放置1～3天的供试品溶液展开后的色谱图基本一致，表明供试品溶液在3天内稳定性良好。

2.5按照上述泽漆薄层色谱鉴别，分别对表1中8批泽漆样品进行测定，结果见图6；图中1表示对照药材，2-9依次表示1-8泽漆样品，结果显示，各批样品均符合规定。

试验例3

3.1按照实施例1方案中的水分测定方法，对表1中8批泽漆样品进行测定，结果见表2；结果显示，8批泽漆水分在12.55％～17.08％，平均为14.90％，规定本品水分不得过18.0％。

表2

3.2按照实施例1方案中的灰分测定方法，对表1中8批泽漆样品进行测定，结果见表3；结果显示，8批泽漆药材中总灰分为8.048％～11.54％，平均值为9.756％，规定本品总灰分不得过12.0％；

表3

3.3按照实施例1方案中的重金属及有害元素测定方法，对表1中8批泽漆样品进行测定，结果见表4，依据《中华人民共和国外经贸行业标准药用植物及制剂进出口绿色行业标准》中铅(Pb)≤5.0mg·kg-1；镉(Cd)≤0.3mg·kg-1；汞(Hg)≤0.2mg·kg-1；铜(Cu)≤20.0mg·kg-1；砷(As)＜2.0mg·kg-1进行评价，8批泽漆药材均符合要求。

表4泽漆药材重金属及有害元素测定结果(mg/kg)

*：低于定量限(方法定量限：As:0.05mg/kg；Hg:0.025mg/kg；Pb:0.5mg/kg；Cd:0.05mg/kg；Cu:5mg/kg；)

试验例4

按照实施例1方案中的浸出物检测方法，对表1中8批泽漆样品进行测定，结果见表5；结果显示，8批次泽漆水溶性浸出物为23.83％～32.51％，平均值27.90％，规定本品以干燥品计算水溶性浸出物不得少于22.0％。

表5泽漆的水溶性浸出物测结果(％)

由于在《贵州省中药、民族药质量标准》2003年版未收录泽漆的浸出物测定，而根据泽漆含的主要化学成分溶解性及使用习惯，因此选择以水溶性浸出物做为本品质量控制指标之一。

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。