阅读说明：本技术 一种通过微生物转化作用制备适口性佳的母猪用阴离子盐的方法 (Method for preparing anion salt with good palatability for sow through microbial transformation ) 是由 王志博 邹新华 卢秋咏 于 2019-12-13 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种通过微生物将铵盐中导致适口性差的氨根的氨氮转化为菌体蛋白来制备适口性佳的母猪用阴离子盐的方法。制备适口性佳的母猪阴离子盐的方法包括：1、筛选铵盐利用能力较高的芽孢杆菌菌；2、将筛选的芽孢杆菌进行铵盐利用能力的驯化；3、利用驯化后的芽孢杆菌生产适口性佳的母猪用阴离子盐。本发明在不影响妊娠后期和哺乳期母猪采食量的情况下,解决现有技术中存在的母猪用阴离子盐生产成本高和适口性差的问题。(The invention relates to a method for preparing anion salt for sows, which has good palatability and is prepared by converting ammonia nitrogen of ammonia root causing poor palatability in ammonium salt into mycoprotein through microorganisms. The method for preparing the sow anion salt with good palatability comprises the following steps: 1. screening bacillus bacteria with high ammonium salt utilization capacity; 2. domesticating the ammonium salt utilization capacity of the screened bacillus; 3. the domesticated bacillus is used for producing the anion salt for the sow with good palatability. The invention solves the problems of high production cost and poor palatability of anion salts for sows in the prior art under the condition of not influencing the feed intake of sows in the later gestation period and the lactation period.)

一种通过微生物转化作用制备适口性佳的母猪用阴离子盐的 方法

技术领域

本发明涉及饲料技术领域，具体为一种通过微生物将铵盐中导致适口性差的铵盐的氨氮转化为菌体蛋白来制备适口性佳的母猪用阴离子盐的方法。

背景技术

改变电解质平衡（dEB）会对奶牛和蛋鸡的代谢产生正效果，例如降低产褥热的发病率和改善蛋壳质量。电解质平衡对母猪的生理状况也具有深远的影响，在以玉米和豆粕为基础日粮的条件下，降低dEB值（500、350、200、100、0 mEq/kg）可以降低母猪尿液的细菌数和增加仔猪的存活率，尤其是dEB值为0时效果更为显著。此外，降低母猪饲料的dEB值还可以提高血浆、初乳和常乳中的免疫球蛋白含量。但是，降低母猪饲料dEB值的缺点是会大幅降低母猪采食量，降幅可达30%。而在妊娠后期和泌乳期，保证母猪的采食量是非常重要的。因此营养学家们采取折中的方式，推荐妊娠后期和哺乳期母猪日粮的dEB值为125–200mEq/kg。但是基于上面的研究结果，dEB值接近0 mEq/kg时，母猪的生产性能最佳。若能改善阴离子盐的适口性，则能通过添加阴离子盐使饲料的dEB值接近0 mEq/kg。

目前，改善阴离子盐适口性的方法主要包括两种：1）将阴离子盐进行包被；2）使用载体来掩盖阴离子盐的不良气味。虽然包被的方式可以很好的改善阴离子盐的适口性，但是成本较高，进而会增加母猪饲料成本。虽然采用载体的方式成本较低，但是适口性仍未得到很大的改善。

而本发明是通过微生物 “固氮”的方式，即利用微生物将铵盐（氯化铵或硫酸铵）中氨根的氨氮转化为菌体蛋白，如此就剩***离子Cl^-或SO₄ ^2-，去除了导致适口性不好的铵盐中的氨根的阴离子盐，适口性就会得到最大的提高。此外，益生菌在发酵时产生的一些代谢产物，如有机酸等也会改善阴离子盐的适口性。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种通过微生物将铵盐中导致适口性差的氨根中的氨氮转化为菌体蛋白来制备适口性佳的母猪用阴离子盐的方法，以解决阴离子盐适口性差和成本高的问题。

为解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

一种通过微生物将铵盐中导致适口性差的氨根中的氨氮转化为菌体蛋白来制备适口性佳的母猪用阴离子盐的方法，其中所用的铵盐由氯化铵和或硫酸铵组成，所用微生物为芽孢杆菌。

在上述的一种适口性佳的母猪用阴离子盐的制备方法，两种铵盐（氯化铵和或硫酸铵）的比例为5%-35%。

在上述的一种适口性佳的母猪用阴离子盐的制备方法，对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌共15个菌株进行铵盐利用能力的筛选。

在上述的芽孢杆菌的铵盐利用能力的筛选，将筛选的铵盐利用能力较强的1株或几种菌株进行铵盐利用能力的驯化。

在上述的对芽孢杆菌进行铵盐利用能力的驯化，调节培养基中铵盐比例从5%至35%，如从5%逐步增加到10%，既而增加到15%，直至增加到35%进行逐步驯化。

在上述的一种适口性佳的母猪用阴离子盐的制备方法，芽孢杆菌的培养基包括麸皮5-30份、米糠5-30份、木薯粉5-20份、玉米芯粉5-15份、稻壳粉5-15份。

在上述的对芽孢杆菌进行铵盐利用能力的驯化，在适宜条件下将驯化后的芽孢杆菌与培养基进行培养，以制备适口性佳的母猪用阴离子盐。

在上述的在适宜条件下将驯化后的芽孢杆菌与培养基进行培养，发酵条件为：温度30-50℃， pH值5.5-7.5，培养时间为1天-7天。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1.最大程度上改善了阴离子盐的适口性。本发明通过微生物将铵盐中氨根中的氨氮转化为菌体蛋白，即利用微生物将氨根“吃掉”，从而消除了导致适口性差的氨根，最终提高了阴离子盐的适口性。此外相对于无机氮（铵盐），菌体蛋白对于母猪的营养价值更高。而载体掩盖阴离子盐适口性差的方式，其只能掩盖阴离子盐的部分不良气味，而且母猪在采食饲料时会通过味觉立刻尝出阴离子盐的不良味道。

2.补充益生菌。在利用芽孢杆菌转化铵盐的过程中，芽孢杆菌也在不断增殖，本发明的阴离子盐中含有数量丰富的益生菌（芽孢杆菌），此益生菌的补充有益于母猪肠道的健康。

3.补充有益的微生物代谢产物。在利用芽孢杆菌转化铵盐的过程中，芽孢杆菌为了生长繁殖，分泌多种酶，如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等；代谢的产物包括B族维生素、小肽和有机酸等。

4.本发明的阴离子盐成本较低。包被阴离子盐的工艺较为复杂，包材较贵，成本较高。而本发明采用的培养基为价格较低的副产物，如米糠、玉米芯、稻壳粉等，以此次本发明的阴离子盐成本较低。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌，每个芽孢杆菌5个菌株，共15个菌株进行铵盐利用能力的筛选。采用的3%、5%、10%的3个氯化铵或硫酸铵水平培养上述15个菌株，筛选出的菌株如下：

表1芽孢杆菌耐受的铵盐水平

结果表明，本试验的所有菌株对铵盐中的氯化铵的耐受力（以芽孢杆菌的生长状况衡量）更强，三种芽孢菌的1-2个菌株都可耐受5%的氯化铵。其中有2株枯草芽孢杆菌可以耐受5%浓度的氯化铵，而地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌分别有一株可以耐受5%浓度的氯化铵。

实施例2

在实施例1的基础上，将筛选得到的2株枯草芽孢杆菌、1株地衣芽孢杆菌和1株凝结芽孢杆菌进行耐受铵盐能力的驯化试验。以5%、10%、15%、20%、35%的氯化铵水平逐步进行驯化，4个菌株耐受氯化氨的水平如下：

表2 驯化后的4株菌株耐受氯化铵的水平

菌株	菌株耐受的铵盐比例*
		枯草芽孢杆菌1	35%
枯草芽孢杆菌2	30%
		地衣芽孢杆菌	30%
凝结芽孢杆菌	25%

*耐受指的是可以在此氯化铵水平下生长，但并不是指其生长的最适氯化铵水平。

可以看出，经驯化后的枯草芽孢杆菌1对氯化铵的耐受力最强，可以耐受35%的氯化铵。经驯化后的凝结芽孢杆菌耐受氯化铵的水平最差，可以耐受25%的氯化铵。而枯草芽孢杆菌2和地衣芽孢杆菌可以耐受30%的氯化铵。

实施例3

经过实施例1的筛选和实施例2的驯化，得到了耐受氯化铵水平最高的一株枯草芽孢杆菌。但是为了更好的制备适口性佳的阴离子盐，还需要优化培养条件，如培养温度、pH、培养基水分、各培养基比例。

枯草芽孢杆菌培养温度设置4个水平，分别为30℃、32℃、35℃、37℃；培养pH设置4个水平，分别为6.8、7.0、7.2、7.5；培养时间设置4个水平，分别为1天、3天、5天、7天；培养基水分设置4个水平，分别为30%、35%、40%、45%。设置麸皮10份、15份、20份、25份和30份5个水平；设置米糠10份、15份、20份、25份、30份5个水平；设置木薯粉5份、10份、15份、20份4个水平；设置玉米芯粉5份、7.5份、10份、12.5份、15份5个水平；设置稻壳粉5份、7.5份、10份、12.5份、15份5个水平。氯化铵的比例固定为35%。经过试验得出枯草芽孢杆菌的适宜培养条件为：温度32-35℃、pH7.0-7.2、培养时间为5-7天、水份35%-40%。适宜培养基比例为：麸皮15-20份、米糠15-20份、木薯粉15-20份、玉米芯粉10-12.5份、稻壳粉5-7.5份。培养后，烘干、粉碎得到本产品。

实施例4

按照实施例3确定的培养条件生产阴离子盐，进行母猪饲养试验，以评估本发明制备的阴离子盐的适口性和对母猪生产性能的效果。设置4个处理组，分别为对照组（未经处理的阴离子盐）、试验组1（包被型阴离子盐）、试验组2（载体型阴离子盐）和试验组3（本发明阴离子盐）。所有处理组饲粮的营养成分相同，并且饲粮的dEB值都为0 mEq/kg。在母猪妊娠天数为109天开始试验直至母猪哺乳结束，哺乳天数为21天。

表3 不同阴离子盐类型对母猪生产性能的影响

^a断奶30天内，母猪发情的比例；^b断奶30天内，母猪发情所需天数。

由表3可以看出，在母猪哺乳第10天，试验组1和试验组3的采食量高于对照组和试验组2（P<0.05），而对照组和试验组2间差异不显著（P>0.05）。与对照组相比，所有试验组母猪在哺乳第10天的体重变化更小（P<0.05）。而在哺乳第21天，试验组1和试验组3的采食量高于对照组和试验组2（P<0.05），而对照组和试验组2间差异不显著（P>0.05）。试验组1和试验组3的更高采食量，使得这两个试验组的断奶窝重和窝增重更高（P<0.05），同时体重变化也更小（P<0.05）。试验持续观察到下一胎次，发现与对照组相比，试验组1和试验组3的产仔数更高（P<0.05）。总之，本发明的阴离子盐适口性更好，效果与包被型阴离子盐没有差异，并且本发明的阴离子盐的成本比包被型阴离子盐的成本低。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。