阅读说明：本技术 羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法 (Sterilization method of endophytic fungi in fescue seeds ) 是由 费有贵 于 2018-08-14 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法,将羊茅草种子按照90-160颗一份放入培养皿中,向培养皿中倒入质量分数为50％的硫酸溶液进行种子处理25-42min后清洗,向培养皿中倒入盐酸溶液进行种子处理4-16min后清洗,将种子取出放入信封中,置于50摄氏度水浴锅中处理7-13h,获得无内生真菌的羊茅草种子。相比现有技术,本发明具有对羊茅草种子中内生真菌进行有效灭活、灭活速率快、对种子无损伤的特点。(The invention discloses a method for sterilizing endophytic fungi in fescue seeds, which comprises the steps of putting 90-160 parts of fescue seeds into a culture dish, pouring 50% sulfuric acid solution into the culture dish for seed treatment for 25-42min, then cleaning, pouring hydrochloric acid solution into the culture dish for seed treatment for 4-16min, then cleaning, taking out the seeds, putting the seeds into an envelope, and treating the seeds in a 50 ℃ water bath kettle for 7-13h to obtain the fescue seeds without endophytic fungi. Compared with the prior art, the method has the characteristics of effective inactivation of endophytic fungi in the fescue seeds, high inactivation speed and no damage to the seeds.)

羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法

技术领域

本发明涉及种子处理领域，尤其涉及一种羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法。

背景技术

羊茅草为禾本科下的一个种，是一种常见的草本植物。

羊茅草主要依靠种子繁殖。种子成熟比较一致，利于一次收获，产种量高。种子发芽率高，一般均在90％以上；分蘖力比较强，据对生长2年以上的植株进行统计，一般每丛可分蘖15～25枝，最多有达36枝；每年收割2茬，最多不能超过3茬，每次收割的间隔时间为60天左右。

目前的研究发现，羊茅草种子内含有内生真菌，植物体内普遍存在着内生菌，由于其生活在没有外在感染症状的健康植物组织内部，因此植物内生菌的存在和作用长期以来未被发现。直到20世纪30年代，由于牲畜食了感染内生真菌的牧草，给畜牧业造成重大损失。

目前，还没有对羊茅草种子中内生真菌进行有效灭菌的方法。

发明内容

发明目的：针对现有技术的不足与缺陷，本发明提供一种对羊茅草种子中内生真菌进行有效灭活、灭活速率快、对种子无损伤的羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法。

技术方案：本发明所述的羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法，其特征在于：将羊茅草种子按照90-160颗一份放入培养皿中，向培养皿中倒入质量分数为50％的硫酸溶液进行种子处理25-42min后清洗，向培养皿中倒入盐酸溶液进行种子处理4-16min后清洗，将种子取出放入信封中，置于50摄氏度水浴锅中处理7-13h，获得无内生真菌的羊茅草种子。

其中，羊茅草种子在进行灭菌处理前，放置于4摄氏度恒温箱中处理10h以上。

其中，培养皿为直径9.5cm的透明玻璃培养皿。

其中，羊茅草种子通过无菌水进行清洗，清洗数次为3次。

其中，盐酸溶液的质量分数为35％。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下显著优点：本发明的羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法，对羊茅草种子中内生真菌进行有效灭活，灭活速率快，对种子无损伤。而且，处理后的羊茅草种子发芽率高，幼苗内生真菌检出率低于1％。

具体实施方式

实施例1：

本实施例的羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法，将羊茅草种子放置于4摄氏度恒温箱中处理10h，按照100颗一份放入直径9.5cm的透明玻璃培养皿中，向培养皿中倒入质量分数为50％的硫酸溶液进行种子处理30min后通过无菌水进行3次清洗，向培养皿中倒入质量分数为35％的盐酸溶液进行种子处理5min后清洗，将种子取出放入信封中，置于50摄氏度水浴锅中处理8h，获得无内生真菌的羊茅草种子。

实施例2：

本实施例的羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法，将羊茅草种子放置于4摄氏度恒温箱中处理15h，按照120颗一份放入直径9.5cm的透明玻璃培养皿中，向培养皿中倒入质量分数为50％的硫酸溶液进行种子处理40min后通过无菌水进行3次清洗，向培养皿中倒入质量分数为35％的盐酸溶液进行种子处理10min后清洗，将种子取出放入信封中，置于50摄氏度水浴锅中处理10h，获得无内生真菌的羊茅草种子。

实施例3：

本实施例的羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法，将羊茅草种子放置于4摄氏度恒温箱中处理20h，按照150颗一份放入直径9.5cm的透明玻璃培养皿中，向培养皿中倒入质量分数为50％的硫酸溶液进行种子处理35min后通过无菌水进行3次清洗，向培养皿中倒入质量分数为35％的盐酸溶液进行种子处理6min后清洗，将种子取出放入信封中，置于50摄氏度水浴锅中处理10h，获得无内生真菌的羊茅草种子。

实施例4：

本实施例的羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法，将羊茅草种子放置于4摄氏度恒温箱中处理16h，按照140颗一份放入直径9.5cm的透明玻璃培养皿中，向培养皿中倒入质量分数为50％的硫酸溶液进行种子处理32min后通过无菌水进行3次清洗，向培养皿中倒入质量分数为35％的盐酸溶液进行种子处理7min后清洗，将种子取出放入信封中，置于50摄氏度水浴锅中处理11h，获得无内生真菌的羊茅草种子。

实施例5：

本实施例的羊茅草种子中内生真菌的灭菌方法，将羊茅草种子放置于4摄氏度恒温箱中处理24h，按照110颗一份放入直径9.5cm的透明玻璃培养皿中，向培养皿中倒入质量分数为50％的硫酸溶液进行种子处理32min后通过无菌水进行3次清洗，向培养皿中倒入质量分数为35％的盐酸溶液进行种子处理12min后清洗，将种子取出放入信封中，置于50摄氏度水浴锅中处理9h，获得无内生真菌的羊茅草种子。