阅读说明：本技术 一种沙葱专用菌肥及其制备方法 (Special bacterial fertilizer for allium mongolicum regel and preparation method thereof ) 是由 姚拓 兰晓君 金艳丽 于 2019-09-16 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种沙葱专用菌肥及其制备方法,属于微生物技术领域。所述沙葱专用菌肥包括：苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438和载体。本发明中通过该沙葱专用菌肥具有的固氮、解磷和分泌植物激素等能力,使得该沙葱专用菌肥可以在盐碱地使用,既可以减少化肥用量,提高土壤有机质含量,又可以改善了土壤结构,促进植物生长。(The invention discloses a special bacterial fertilizer for allium mongolicum regel and a preparation method thereof, and belongs to the technical field of microorganisms. The special bacterial fertilizer for allium mongolicum regel comprises: medicago sativa (Ensifer meliloti) GAU-00438 and a vector. According to the invention, the special bacterial fertilizer for allium mongolicum regel has the capabilities of fixing nitrogen, dissolving phosphorus, secreting phytohormone and the like, so that the special bacterial fertilizer for allium mongolicum regel can be used in saline-alkali soil, the using amount of a chemical fertilizer can be reduced, the organic matter content of the soil can be increased, the soil structure can be improved, and the plant growth can be promoted.)

一种沙葱专用菌肥及其制备方法

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种沙葱专用菌肥及其制备方法。

背景技术

沙葱，属被子植物门百合科葱属，学名蒙古韭，又名野葱、山葱、胡穆利等，主要生长在我国内蒙古、辽宁、甘肃、新疆和陕西等海拔800～2800米的荒漠沙地、草原沙地和干旱沙坡上。研究表明沙葱含有较多的蛋白质、脂肪、氨基酸、维生素和矿物质等营养成分，具有极高营养价值，并且含有黄酮、硫化物、挥发油、多糖等活性成分，能够降血压、降血脂、抗肿瘤、抗菌消炎、抗氧化、延衰老和提高机体免疫力等特殊功效，具有极佳的药用价值。此外，沙葱为各种家畜所喜食，马、羊和骆驼采食后可减少鼻腔、眼腔受寄生虫感染；绵羊采食沙葱抓膘快而持久，肉不膻不腻；马因采食小花棘豆中毒后，可将它们放牧在有沙葱的草地上解毒。因此沙葱是一种极具高营养价值且药食饲兼用的绿色沙生草本植物，被誉为“沙原佳蔬”和“菜中灵芝”。此外沙葱在防风固沙和水土保持等生态学中的作用也不容忽视。

现有技术中，有文献报道化肥对人工种植沙葱无明显增产作用，且市场上也无针对沙葱的微生物肥料。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了一种沙葱专用菌肥及其制备方法。所述技术方案如下：

一方面，提供了一种沙葱专用菌肥，所述沙葱专用菌肥包括：苜蓿剑菌 (Ensifermeliloti)GAU-00438和载体。

进一步地，所述载体包括：木炭粉和腐殖酸。

进一步地，所述苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438，2019年保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2019565。

另一方面，提供了一种沙葱专用菌肥的制备方法，所述制备方法包括：

步骤(1)、制备载体：将木炭粉和腐殖酸混合均匀，得到所述载体，然后对所述载体进行灭菌处理；

步骤(2)、选取菌株：选取所述苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438；

步骤(3)、制备菌株培养液：将所述苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438 进行液体培养，得到所述菌株培养液；

步骤(4)、制备沙葱专用菌肥：将所述菌株培养液与所述灭菌处理后的载体混匀，静置培养，得到所述沙葱专用菌肥。

进一步地，所述步骤(1)包括：将所述木炭粉和所述腐殖酸的质量按照1： 1的比例混合均匀，得到所述载体，混合均匀后的所述载体pH＝7.0±0.2，然后对混合均匀后的所述载体进行高压蒸汽灭菌(103.4KPa，121℃，30分钟)或γ-射线灭菌处理。

进一步地，所述步骤(2)包括：从野生沙葱的根系获得17株植物根际促生菌，通过使用PKO与Menkina培养基结合钼锑抗比色法筛选优良溶磷菌，通过CCM-色氨酸培养基及使用Goudjal描述的方法筛选并定量检测植物生长激素 (IAA)的能力，选择出1株苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438。

进一步地，所述步骤(3)包括：将所述苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438 接入YMA培养基中培养，28℃，180r/min培养48-72h，待培养液中活的促生菌含量达到1×10⁹cfu/ml，得到所述菌株培养液。

进一步地，所述步骤(4)包括：将所述菌株培养液与所述灭菌处理后的所述载体按照体积质量为1:4的比例混匀，然后28℃静置培养1周。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本沙葱专用菌肥具有成本低、使用安全、持续效果好、非再生能源消耗少、经济效益高、无环境和食品污染等优点；同时，本沙葱专用菌肥还可以在盐碱地使用，提高土壤有机质含量，从而减少化肥用量，改善土壤结构，促进植物生长。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明实施例提供的一种制备沙葱专用菌肥方法的流程图；

图2是本发明实施例提供的另一种制备沙葱专用菌肥方法的流程图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。

植物根际促生菌(plant growth promoting rhizobaceria,简称PGPR)是指生活在植物根周、根表和根内，在其生命周期中分泌特殊的代谢产物从而促进植物的生长的细菌。研究表明这类菌一般具有固氮、解磷、分泌植物激素和抗生素等能力。此外PGPR菌株还可以改善土壤结构，提高土壤有机质含量，改良盐碱地和修复重金属污染土地的能力。

目前沙葱根际促生菌的研究在国内外还没有引起关注，因此筛选沙葱根际促生菌，获得具有促生特性的优良菌株，并将其制成菌肥运用于沙葱人工种植以提高其产量和品质，不仅对促进沙葱的种植业发展具有积极意义，而且对改良荒漠土壤结构、修复土壤生态系统具有重要作用。

实施例一

为详细说明本发明的技术内容、所实现的目的及效果，以下结合实施方式予以说明。

一种沙葱专用菌肥，包括：苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438和载体。

需要说明的是，苜蓿剑菌具有固氮、解磷、分泌植物激素和抗生素等能力，如此，使用该沙葱专用菌肥可以减少化肥使用量，提高土壤有机质含量。

进一步地，载体包括：木炭粉和腐殖酸。

需要说明的是，木炭粉不仅可以蓄留植物根部所需水分，还可以改善土壤的透气性和排水性，为有益于植物的微生物提供良好的生存空间；腐殖酸是动植物遗骸，主要是植物的遗骸，经过微生物的分解和转化，以及一系列的化学过程和积累起来的一类有机物质，它是由芳香族及其多种官能团构成的高分子有机酸，具有良好的生理活性和吸收、络合、交换等功能。

进一步地，苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438，2019年保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2019565。

需要说明的是，苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438，2019年7月19 日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为武汉大学。

实施例二

一种沙葱专用菌肥的制备方法，参见图1，该方法包括以下步骤：

步骤(1)、制备载体：将木炭粉和腐殖酸混合均匀，得到载体，然后对载体进行灭菌处理。

步骤(2)、选取菌株：选取苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438。

步骤(3)、制备菌株培养液：将苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438 进行液体培养，得到菌株培养液。

步骤(4)、制备沙葱专用菌肥：将菌株培养液与灭菌处理后的载体混匀，静置培养，得到沙葱专用菌肥。

实施例三

一种沙葱专用菌肥的制备方法，结合图2，对上述图1所示的沙葱专用菌肥的制备方法进行详细论述：

步骤(101)：将木炭粉和腐殖酸的质量按照1：1的比例混合均匀，得到载体，混合均匀后的载体pH＝7.0±0.2，然后对混合均匀后的载体进行高压蒸汽灭菌(103.4KPa，121℃，30分钟)或γ-射线灭菌处理。

需要说明的是，高压蒸汽灭菌，用高温加高压灭菌，可以杀死一般的细菌、真菌等微生物，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。γ-射线灭菌是一种利用射线的特性破坏细菌结构来杀菌的方法。本发明实施例中，以对载体进行高压蒸汽灭菌(103.4KPa，121℃，30分钟)或γ-射线灭菌为例进行说明，在实际实现时还可通过其他方法进行灭菌。

步骤(102)：从野生沙葱的根系获得17株植物根际促生菌。

需要说明的是，植物根际促生菌可以从任何地方的野生沙葱的根系上获得，例如，本发明实施例中，植物根际促生菌是从距离民勤县红沙岗镇东40千米的戈壁滩上生长的野生沙葱的根系上获得的。

步骤(103)：通过使用PKO与Menkina培养基结合钼锑抗比色法筛选优良溶磷菌。

步骤(104)：通过CCM-色氨酸培养基及使用Goudjal描述的方法筛选并定量检测植物生长激素(IAA)的能力，选择出1株苜蓿剑菌(Ensifer meliloti) GAU-00438。

需要说明的是，步骤(103)中筛选出的优良溶磷菌，就是备选的苜蓿剑菌。从而，可以通过CCM-色氨酸培养基及使用Goudjal描述的方法筛选并定量检测植物生长激素(IAA)的能力，从而从优良溶磷菌中选择出1株苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438。

步骤(105)：将苜蓿剑菌(Ensifer meliloti)GAU-00438接入YMA培养基中培养，28℃，180r/min培养48-72h，待培养液中活的促生菌含量达到 1×10⁹cfu/ml，得到菌株培养液。

步骤(106)：将菌株培养液与灭菌处理后的载体按照体积质量为1:4的比例混匀，然后28℃静置培养1周。

需要说明的是，本沙葱专用菌肥在室温下贮藏，菌剂有效期超过6个月。

实施例四

该沙葱专用菌肥的小区试验(试验地甘肃省兰州市)：取四组相同数量的种子，第一组全部使用化肥播种，第二组使用该沙葱专用菌肥+60％化肥进行播种，第三组使用该沙葱专用菌肥+70％化肥进行播种，第四组使用该沙葱专用菌肥+80％化肥进行播种，使用该沙葱专用菌肥的种子在播种前将沙葱种子放在塑料布上，喷洒适量的无菌水于种子上，使种子湿润，然后取该沙葱专用菌肥撒在种子上，边撒边搅拌直至拌均匀为止，阴干后即可播种。对四组沙葱进行比较，具体的结果参见下表一：

表1：不同处理沙葱种子萌发率与产量(每茬)

表一的结果表明，使用了该沙葱专用菌肥拌种处理的沙葱，种子萌发率均提高12.8％左右；使用该沙葱专用菌肥+80％化肥播种的沙葱产量较全量化肥提高9％(每茬)，可见，使用本沙葱专用菌肥既可以减少化肥的使用量，又可以促进沙葱的生长。

值得说明的是，本沙葱专用菌肥具有成本低、使用安全、持续效果好、非再生能源消耗少、经济效益高、无环境和食品污染等优点；同时，本沙葱专用菌肥还可以在盐碱地使用，提高土壤有机质含量，从而减少化肥用量，改善土壤结构，促进植物生长。

上述本发明实施例序号仅仅为了描述，不代表实施例的优劣。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。